Pathogen Free (SPF)
ANIMAIS DE LABORATÓRIO
A utilização de animais na pesquisa já era conhecida há mais de 400 anos a.C., quando cientistas da época realizavam dissecções e necropsias em animais com a finalidade de constatar semelhanças e diferenças de formação e funcionamento de sistemas6.
Diversos modelos animais são utilizados em pesquisa biomédica, e as espécies mais utilizadas são classificadas como convencionais. São os roedores: camundongo (Mus musculus), ratos (Rattus norvegicus), cobaia (Cavia porcellus), hamster (Mesocrisetus auratus) e o lagomorfo: coelho (Oryctolagus cuniculus).
Características gerais de camundongos e ratos
Camundongos – têm sido utilizados pelo homem em pesquisa científica desde 1600,
importantes animais de experimentação. Atualmente, são os animais de laboratório mais utilizados na pesquisa biomédica e em ensaios biológicos.
São modelos animais muito dóceis, de fácil manipulação, facilidade reprodutiva, curto ciclo de vida, pequenos e de fácil manutenção. Apresentam o fundo genético mais conhecido, tendo contribuído como ferramenta fundamental da manipulação genética7 e possibilitado os
estudos em diversas áreas da Ciência, como Nutrição, Genética, Imunologia, Farmacologia, Embriologia, entre outras.
A utilização de animais por tantos anos possibilitou o aparecimento de milhares de linhagens específicas para estudo de diversas doenças.
Ratos – o Rattus norvegicus foi o primeiro mamífero a ser domesticado para pesquisa,
e a primeira colônia de criação de ratos foi estabelecida em 1856. Por ser maior que os
camundongos, essa espécie é utilizada como modelo em estudos como transplante de
órgãos e ósseo, diabetes, distúrbios psiquiátricos, estudos comportamentais, doenças cardiovasculares e cirurgia. Inteligentes e dóceis, são animais de fácil criação, manipulação e adaptação, sendo agressivos somente na defesa de seus filhotes8.
Parâmetros biológicos, fisiológicos e reprodutivos e consumo de alimentos
As principais características e os parâmetros biológicos, fisiológicos e de consumo de alimento de ratos e camundongos estão descritos nas Tabelas 1, 2 e 3.
O perfil do desenvolvimento de ratos e camundongos está presente na Tabela 4 e nas Figuras 2 e 3. A identificação do sexo de ratos e camundongos, neonatos e recém- desmamados está apresentada nas Figuras 4 e 5.
Tabela 1. Taxonomia de ratos e camundongos
Rato Camundongo
Classe Mamífera Mamífera
Ordem Rodentia Rodentia
Família Muridae Muridae
Gênero Rattus Mus
Tabela 2. Parâmetros biológicos, fisiológicos e reprodutivos8,9
Parâmetros Rato Camundongo
Número de cromossomos 42 (diploides) 40 (diploides) Temperatura corporal 36-37,5 °C 35,2-37,9 °C Fórmula dentária 2 (1/1 I, 0/0 C, 0/0 PM) e 3/3 M)=16 2 (1/1 I, 0/0 C, 0/0 PM) e 3/3 M)=16 Início do consumo de alimento sólido 14 dias 12 dias
Peso ao nascer 6-7 g 1-2 g
Peso ao desmame 45-60 g 10-15 g
Peso adulto (macho) 350-500 g 25-50 g
Peso adulto (fêmea) 250-350 g 25-45 g
Adulto jovem (idade) 8 semanas 6 semanas
Idade reprodutiva 8-10 semanas 6-8 semanas
Final da idade reprodutiva 10-12 meses 8-10 meses
Ciclo estral 4-5 dias 4-5 dias
Duração do estro 12 horas 10-20 horas
Mecanismo de ovulação Espontânea Espontânea
Período de gestação 20-22 dias 19-21 dias
Idade do desmame 21 dias 19-28 dias
Mamas 6 pares 5 pares
Tabela 3. Consumo de ração e água
Rato adulto Camundongo adulto Água ingerida (mL) 10 a 20 mL/dia 3 a 7 mL/dia Ração ingerida (g) 10 a 20 g/dia 4 a 5 g/dia
Tabela 4. Desenvolvimento de filhotes de camundongos e ratos*
Idade (dias) Camundongos Ratos
Nascimento
Olhos fechados, cor vermelho--sangue, presença de leite no estômago, vibrissas, orelhas fechadas. Para animais black, a coloração é escura, e os machos apresentam ponto escuro entre o ânus e o aparelho genital
Olhos fechados, cor vermelho-sangue, presença de leite no estômago, vibrissas, orelhas fechadas. Para animais black, a coloração é escura 1 Pele rosada, leite no estômago, olhos e orelhas fechados Pele rosada, leite no estômago, olhos e orelhas fechados 2 Pele rosa-claro, olhos e orelhas fechados. Animais black apresentam pele rosada,
com tonalidade mais escura no dorso
Pele rosa-claro, olhos e orelhas fechados. Animais black apresentam pele rosada, com tonalidade mais escura no dorso
3 As orelhas começam a se descolar da cabeça As orelhas começam a se descolar da cabeça 4 Metade da orelha é descolada da cabeça Metade da orelha é descolada da cabeça 5 Animais albinos não apresentam coloração e animais black apresentam
coloração mais definida
Animais albinos não apresentam coloração e animais black apresentam coloração mais definida
6 Os pelos começam a nascer como uma penugem no dorso Os pelos começam a nascer como uma penugem no dorso 7 Presença de pelagem fina em maior quantidade na região dorsal Presença de pelagem fina em maior quantidade na região dorsal
8
As mamas começam a ficar visíveis nas fêmeas de camundongos albinos, enquanto nos camundongos black as mamas ainda são invisíveis
As mamas ainda não podem ser visualizadas
9 Pelos mais fechados no dorso. Mamas visíveis em camundongos de coloração escura
Dentes incisivos inferiores visíveis e os incisivos superiores começam a apontar 10 Dentes incisivos inferiores visíveis Idem ao dia 9
11 Dentes incisivos superiores podem ser visualizados As mamas ficam visíveis 12 As orelhas se abrem totalmente As orelhas se abrem totalmente 12-14 Começam a consumir alimentos sólidos, mas a amamentação ainda é a principal
fonte de alimentação
Começam a consumir alimentos sólidos, mas a amamentação ainda é a principal fonte de alimentação
13-14 Início da abertura dos olhos Início da abertura dos olhos
Figura 2. Perfil de desenvolvimento de camundongos. Dados não publicados e obtidos no Biotério FCF-IQ/USP
Figura 3. Perfil de desenvolvimento de ratos. Dados não publicados e obtidos no Biotério FCF-IQ/USP Sexagem de neonatos e recém-desmamados
A
B
Figura 4. A) Neonatos de ratos com um dia de vida: macho à direita e fêmea à esquerda; B) Ratos recém-desmamados: macho à esquerda e fêmea à direita
Figura 5. A) Neonatos de camundongos com um dia de vida: macho à esquerda e fêmea à direita; B) Camundongos recém-desmamados. : macho à esquerda e fêmea à direita
AMBIENTE E CONDIÇÕES DE ALOJAMENTO