efeito de probiótico inoculado via ovo sobre o desempenho e

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41ª Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Zootecnia 19 de Julho a 22 de Julho de 2004 - Campo Grande, MS

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EFEITO DE PROBIÓTICO INOCULADO VIA OVO SOBRE O DESEMPENHO E COLONIZAÇÃO DO TRATO GASTRINTESTINAL POR "SALMONELLA

ENTERITIDIS" DE PINTOS DESAFIADOS

A

UTORES

NADJA SUSANA MOGYCA LEANDRO"1", ADSON SANTA CRUZ OLIVEIRA"2", MARIA AUXILIADORA ANDRADE"1", JOSÉ HENRIQUE STRINGHINE"1", LEONARDO ANDRADE"3", LEANDRO DA SILVA CHAVES"4",

THIAGO REZENDE SILVA"4"

1 ROFESSORES DA ESCOLA DE VETERINÁRIA DA UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIÁS. CP 131 CAMPUS SAMAMBAIA GOIÂNIA- GO. e-mails: mogyca@vet.ufg.br, auxiliadora@vet.ufg.br, jhstring@uol.com.br; ?

2 MESTRANDO EM CIÊNCIAS ANIMAIS PELA ESCOLA DE VETERINÁRIA DA UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIÁS, EV/UFG.E- MAIL: vetoliveira@pop.com.br. ? ?

3 MÉDICO VETERINÁRIO DO MINISTÉRIO DA AGRICULTURA.PRAÇA CIVICA GOIÂNIA GOIÁS.E-MAIL: landrade@uol.com.br? ? ? ?

4 ALUNOS DE GRADUAÇÃO DA EV/UFG. e-mails: leandro.haves@bol.com.br, threzendeufg@bol.com.br.?

R

ESUMO

O objetivo desde trabalho foi avaliar a ação de um probiótico inoculado via ovos, sobre o desempenho e a exclusão de "Salmonella Enteritidis" em pintosm, no período de um a 21 dias de idade. Ovos de 16 dias de incubação foram inoculados na cavidade alantóide com dose de 0,3 mL de água destilada esterelizada ou solução contendo probiótico, 10"6" UFC/ovo. Após a eclosão os pintos foram desafiados com S. Enteritidis por inoculação direta no papo com 0,1mL de uma solução contendo 13,6x10"6" UFC/ml. As aves foram alojadas em baterias metálicas com aquecimento artificial, de acordo com os tratamentos: inoculadas com placebo ou probiótico e submetidas ou não ao desafio por S.Enteritidis. A análise estatística foi realizada pelo PROC GLM SAS e as variáveis estudadas foram ganho de peso, consumo de ração e conversão alimentar.

Os piores resultados foram para as aves desafiadas, independente da inoculação do probiótico. Por outro lado houve interação (p<0,007) entre inoculação e desafio para peso vivo aos 21 dias de idade, no qual pintos desafiados apresentaram melhores resultados quando inoculados com o probiótico, via ovo. Do mesmo modo observou-se que a inoculação de probiótico promoveu a eliminação de S. Enteritidis no papo e no ceco das aves, aos sete e 21º dia de idade. Esses resultados indicam que é possível excluir a S.

Enteritidis através da inoculação de probiótico via ovo, melhorando o peso vivo ao 21 dia de idade, em pintos desafiados após a eclosão.

P

^ALAVRAS

-

^CHAVE

digestibilidade, frango, inoculação, ovo, probiotico, salmonella

T

ITLE

EFFECT OF THE PROBIOTICC INOCULATED VIA EGG ON THE PERFORMANCE AND SETTLING OF THE GASTRI-INTESTINAL TREATMENT BY "SALMONELLA ENTERITIDI" OF BLUNT YOUNG CHICKENS

A

BSTRACT

This work Evaluated a probiotic inoculated via egg, on performance and exclusion of Salmonella Enteritidis in chickens (1 to 21 days of age). Eggs with 16 days of incubation was inoculated in allantoids cavity with 0,3 ml of distilled water or solution with probiotic (10"6"UFC/ml). After hatcher the chickens were blunted with S.Enteritidis by direct inoculation in crop (0,1 ml of solution with 13,6 x 10"6"UFC/ml).The chickens were raised in cages. The estatistical analyse was realized by PROC GLM from SAS. It was differences (p<0,05) to weight gain, ration comsuption and feed/gain between chikens blumed or no. The bird blumedhad worst performance, independent of probiotic inoculation. It was interaction between treatments (p<0,007) to live weight to 21 days old. Chicks blumed showed better results when inoculated on probiotic by egg. The chickens inoculated on probiotic eliminated S.Enteritidis in the cecum and crops fron seven to 21 days old. It is possible exclude the S. Enteritidis by probiotic inoculation in ovo.

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K

^EYWORDS

digestibilite, chickens, inoculated, egg, probiotic, salmonella

I

^NTRODUÇÃO

Os probióticos surgem como uma alternativa aos antimicrobianos, já que são considerados naturais e não provocam resíduos nos produtos de origem animal (Andreati filho e Sampaio, 2000). Pelo modo de ação, exclusão competitiva, o probiótico pode eliminar patógenos, potencialmente perigosos à saúde avícola e humana. Medeiros et al. (1998) demonstraram que probióticos são capazes de reduzir a colonização intestinal por bactérias do gênero Salmonella spp, e deste modo diminuir a incidência dessas bactérias nas criações comerciais e ainda contribuir para minimizar os casos de intoxicação alimentar em humanos. Já, as pesquisas de desempenho com frangos alimentados com rações contendo esse aditivo, apresentam resultados contraditórios. Por outro lado, a colonização precoce do trato gastrintestinal (TGI) das aves por bactérias não patogênicas favorece a exclusão das bactérias patogênicas. De acordo com Gonzales et al.

(2003), é viável a inoculação de probiótico em ovos embrionados, promovendo a colonização do TGI das aves, por bactérias desejáveis, o mais cedo possível. Esse trabalho tem como objetivo de avaliar a capacidade do probiótico inoculado em ovos embrionados, na eliminaçao da Salmonella Enteritidis, do trato intestinal, de pintos desafiados experimentalmente após a eclosão e seu efeito sobre o desempenho até aos 21 dias de idade.

M

ATERIAL E MÉTODOS

O experimento foi realizado no Departamento de Produção Animal da Escola de Veterinária da Universidade Federal de Goiás no período de 24 de outubro a 05 de dezembro de 2003. Foram utilizados 400 ovos de matrizes Cobb-500, de 50 semanas de idade, provenientes de um incubatório comercial. Os ovos foram pesados e distribuídos uniformemente em três incubadoras, mantidas a 37,8 ºC e 55% de umidade, durante todo o período de incubação. Aos 16 dias de incubação os ovos com embriões viáveis foram inoculados de acordo com os tratamentos: T1- ovos inoculados com água e pintos não submetidos ao desafio com Salmonella, T2- ovos inoculados com probiótico e pintos submetidos ao desafio com Salmonella, T3- ovos inoculados com água e pintos submetidos ao desafio com Salmonella, T4- ovos inoculados com probiótico e pintos submetidos ao desafio com Salmonella. Os ovos dos tratamentos T1 e T3 foram inoculados, na cavidade alantóide, com 0,3 mL de água destilada estéril. E os ovos dos tratamentos T2 e T4 foram inoculados com solução contendo 10 mg do Probiótico Probios®, composto por, Lactobacillus casei, plantrum e Enterococus faecium (1,1x10"8"UFC/g) para atender a dose de 10"6"UFC/g em cada ovo. Após a eclosão de 80% dos ovos, os pintos viáveis foram retirados das incubadoras inoculados diretamente no papo, por meio de uma pipeta de um 1,0 ml com 0,1ml de um inóculo conforme os tratamentos, sendo T1 e T3 inoculados com água e T2 e T4 com 1,36 x 10"6" UFC de Salmonella Enteritidis. Em seguida, os pintos foram distribuídos em baterias aquecidas em galpões distintos, conforme os tratamentos desfiados ou não desafiados com a Salmonella. O delineamento utilizado foi o inteiramente casualizado em esquema fatorial 2 x 2 (2 inoculações nos ovos - placebo e probiótico; 2 inoculações nos pintos - placebo e Salmonella), totalizando 4 tratamentos e 10 repetições de 9 aves cada. As aves receberam água e ração “ad libitum” por todo período experimental. A ração a base de milho e farelo de soja foi formulada, sem antimicrobianos e agentes anticoccidianos, para atender às exigências nutricionais da fase inicial (21,40%PB e 2950 kcal de EM/kg de ração). Para as avaliações microbiológicas foram coletados fragmentos de papo e ceco de 20%

das aves sendo 18 aves por tratamento em cada períodos (7 e 21 dias de idade). Realizou-se a pesquisa de Salmonella de acordo com a metodologia proposta pelo Geórgia Poultry Laboratory (1997), sendo a Salmonella identificada, considerada como a mesma inoculada. As variáveis de desempenho estudadas até os 21 dias de idade foram: Peso Médio PM(g), Ganho de Peso GP(g), Consumo de Ração CR(g), Conversão Alimenta CA(g/g) e Mortalidade Mort (%), com valores transformados em Arc seno (( %Mmort / 100)+0,05)0,5. Os dados foram submetidos a analise estatística pelo PROC GLM SAS. Quando necessário as médias foram comparadas pelo teste Tukey (P< 0,05).

R

ESULTADOS E DISCUSSÃO

Os resultados de desempenho estão apresentados nas Tabelas,1 onde pode-se observar que não houve interação significativa entre probiótico x desafio (p>0,05) para ganho de peso (GP), consumo de ração (CR), conversão alimentar (CA) e mortalidade. Assim como, a utilização do probiótico não melhorou os resultados dessas variáveis. Por outro lado, aves desafiadas apresentaram pior desempenho em relação as não

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MR 101 - pág. 3 desafiadas com salmonela após a eclosão. No entanto, a dose inoculada de Salmonella Enteritidis (1,36x.

10"6" UFC) não promoveu diferenças na mortalidade (p>0,005). Os piores resultados para GP, CR e CA, sugerem que houve uma infecção subclínica capaz de prejudicar o desempenho das aves infectadas pela Salmonella Enteritidis. Com respeito ao peso vivo houve interação (p<0,007) entre os tratamentos (probiótico x desafio), podendo-se observar que pintos desafiados e provenientes de ovos inoculados com probiótico apresentaram maior peso vivo, aos 21 dias de idade, quando comparados com aqueles desafiados com salmonela que não receberam probiótico, via ovo. Divergindo de Leandro et al, (2002), que não encontram diferenças de desempenho entre pintos desafiadas ou não com a Salmonelha EnterItidis, que receberam probiótico na ração, aos 21 dias de idade. Entretanto, Gonzales et al. (2003) não encontraram diferenças no desempenho entre frangos de corte submetidos ou não ao mesmo tipo de probiótico (inoculado via ovo, nas mesmas dosagens usadas neste experimento) e atribuiram os achados às boas condições sanitárias durante o experimento. Os resultados do ensaio microbiológico, para pesquisa de Salmonella, estão apresentados na Tabela 2. Pode-se observar que houve diferença entre os tratamentos na identificação de Salmonella, onde pintos não desafiados foram negativos para a presença dessa salmonela, demosntrando que não houve contaminação experimental. A presença da Salmonella, aos 7 e 21 dias de idade, foi identificada somente nas aves desafiadas e não inoculadas com o probiótico. Esses resultados sugerem que as bactérias probióticas na dose de 10"6"UFC/g, por ovo, evitaram a colonização do TGI das aves por S. Enteritidis, inoculada via papo em 1,36 UFC/ave. Essses resultados estão de acordo com os obtidos por Ziprin e Deloache (1993) que constataram redução na colonização intestinal por Salmonella sp quando se administrou cultura cecal para pinto de corte.

C

ONCLUSÕES

O desafio após a eclosão, com Salmonella Enteritidis, prejudicou o desempenho dos frangos na fase inicial.

A inoculação de probiótico "in ovo" evitou a colonização do papo e do ceco em pintos desafiados após a eclosão com Salmonella Enteritidis e proporcionou melhorias no peso vivo aos 21 dias de idade.

R

EFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. ANDREATTI FILHO, R. L., SAMPAIO, H.M . C Probióticos e Prebióticos. Avicultura Industrial, Ano 90, n.

1078, p. 16-32, 2000.

2. GEORGIA POULTRY LABORATORY . MONITORING AND DEFECTION OF SALMONELLA IN THE POULTRY AND POULTRY ENVIROMENTOAKWOOD, 1997. OAKWOOD. GEORGIA POULTRYLABORATORY, 1997.223P.(WORKSHOP).

3. GONZALES, E. OLIVEIRA A.S.C, LEANDRO N.S.M, ANDRADE, M. A, STRINGHINI, J. H, CRUZ, C.P.

Inoculação de Probiótico em ovos embrionados de frangos de corte. In: Congresso Latino Americano de Avicultura, Santa Cruz de La Sierra, Bolívia, 2003. Anais...(CD-ROM).

4. LEANDRO, N.S.M., OLIVEIRA, A.S.C., STRINHINI, J. H, ANDRADE, M.A., ANDRADE, L. . Efeito de probiótico sobre o desempenho e a exclusão de Salmonella Enteritidis em frangos de corte na fase inicial. In:XXXX REUNIÃO ANUAL DA SBZ, 2002, Recife-PE. Anais de resumos nutrição de não ruminantes...(CD-ROM), Recife-PE 2002.

5. AMEDEIROS, A.A., SCHOCKEN-ITURRINO, R.P., JUNQUEIRA, O.M., PAULILLO, A.C., RONCHI, C.P.H . Avaliação da proteção conferida por estirpes de Lactobacillus sp. a frangos de corte infectados por Salmonella. In: CONFERÊNCIA APINCO DE CIÊNCIA E TECNOLOGIA AVÍCOLAS – TRABALHOS CONCORRENTES AO PRÊMIO DE PESQUISA AVÍCOLA JOSÉ MARIA LAMAS DA SILVA, 1998, Campinas. Anais...Campinas: FACTA, 1998. p. 57.

6. ZIPRIN, R.L., DELOACHE, J.R . Comparison of Probiotics MaitainedBy In Vivo Passage Through Laying Hens and Broilers. Pultry Science. Texas, v. 72, n. 4, p. 628-635., 1993.

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MR 101 - pág. 4 Anexo

Tabela 1- Desempenho de pinto de um a 21 dias de idade originados de ovos inoculados com água (placebo) ou prbiótico e desafiados ou não com S. Enteritidis após a eclosão

Tratamentos Variáveis estudadas

GP(g) CR(g) CA(g/g) Mort*(%)

Inóculo no ovo

Placebo 669,93 964,10 1,362 0,123

Probiótico 684,58 954,41 1,361 0,137

Inóculo no papo

Placebo 717,63a 980,47 1,291b 0,128

Salmonella 633,89b 938,13 1,443a 0,132

P

Probiótico ns ns ns ns

Salmonella <0,0001 ns <0,0007 ns

ProbióticoxSalmonella ns ns ns ns

CV(%) 4,45 10,51 9,6 29,81

Peso final(g)

Inóculo no papo Inóculo no ovo

Placebo Salmonella

Placebo 765Aa 655Bb

Probiótico 755Aa 699Ba

CV(%) 4,19

Letras maiúsculas diferentes na mesma linha e letras minúsculas diferentes na mesma coluna diferem pelo teste de Tukey (p<0,007) para o peso final. E pelo teste F para GP, CR e CA. Mort*= mortalidade transformada Arc seno ((%Mmort / 100)+0,05)^0,5

Tabela 2- Pesquisa de Salmonella em fragmentos de ceco e papo de frangos de corte aos 7,0 e 21 dias de idade de acordo com os tratamentos inóculo no ovo aos 16 dias de incubação (água ou probiótico) e inóculo no papo no dia do alojamento.

Idade em dias Idade em dias

Tratamentos

7 dias 21dias

Inoculo e desafio Ceco Papo Ceco Papo

Água e sem desafio ausente* ausente ausente ausente

Probiótico e sem desafio ausente ausente ausente ausente Água e desafio com Salmonella presente* Presente Presente Presente

Probiótico e desafio com Salmonella

ausente ausente ausente ausente

*ausente= Não se confirmou a presença de Salmonella *presente= Confirmou a presença de Salmonella de acordo com a metodologia proposta pelo Geórgia Poultry Laboratory (1997).