• Nenhum resultado encontrado

formulação com extrato da folha de goiabeira (Psidium guajava L.) em um modelo de hipertensão sódio-

N/A
N/A
Protected

Academic year: 2023

Share "formulação com extrato da folha de goiabeira (Psidium guajava L.) em um modelo de hipertensão sódio-"

Copied!
167
0
0

Texto

A hipertensão é caracterizada por um aumento abrupto e sustentado dos níveis pressóricos (MALACHIAS; SOUZA; PLAVNIK; RODRIGUES et al., 2016). Ensaios clínicos e estudos experimentais já demonstraram a ligação entre o aumento do consumo de sódio e, consequentemente, o aumento dos níveis pressóricos (CAMPAGNOLI; GONZALEZ; CRUZ, 2012; GOMES; SA; AGUIAR; PAES et al., 2017). Um estudo realizado em uma amostra populacional na cidade de Vitória, Espírito Santo, Brasil, correlacionou o consumo de sódio com o aumento dos níveis pressóricos (RODRIGUES; SOUZA JUNIOR; PIMENTEL; BALDO et al., 2015).

Testes in vitro confirmaram que a alta concentração de sódio no meio inibe o crescimento de Lactobacillus murinus (WILCK; MATUS; KEARNEY; OLESEN et al., 2017). Como resultado, observou-se aumento da sensibilidade à inflamação em camundongos com sobrecarga de sódio (MIRANDA; DE PALMA; SERKIS; LU et al., 2018). Dentre o grupo enzimático, podemos destacar a superóxido dismutase (SOD), glutationa peroxidase (GSH) e catalase (CAT) (DJORDJEVIC; SPASIC; JOVANOVIC-GALOVIC; DJORDJEVIC et al., 2004).

Objetivos

Preparação de extrato de Psidium guajava L., formulação à base de extrato de Psidium guajava L. PsE) e análise fitoquímica de Psidium guajava L..

Estratégias experimentais

As etapas de preparo do extrato bruto seco da folha da goiabeira são apresentadas na Figura 1. Etapas da produção do extrato bruto seco da folha da goiabeira. Para preparar a formulação à base de extrato de Psidium guajava L. PsE, foi utilizado um extrato bruto seco, seguido de uma formulação conforme descrito na patente depositada sob o registro BR10201900148. Para isso, 1 mg de extrato bruto seco e PsE foram diluídos em metanol adicionado a solução de vanilina 1% e HCl 8%, deixados no escuro por 20 minutos e em seguida lidos em espectrômetro a 520 nm.

Para isso, foi utilizada uma amostra do extrato bruto seco (10 mg/mL), que foi ressuspensa em metanol e posteriormente filtrada em filtro de seringa de 0,2 μm.

Resultados

A análise UPLC-DAD resultou no cromatograma, no qual foram registrados vários picos de absorção na região do UV. Alguns desses picos foram selecionados para análise espectral de massa e os resultados combinados do cromatograma UPLC-DAD e espectros de massa foram tomados em conjunto para representar compostos presentes no extrato com base em análises anteriores já descritas na literatura.

Objetivos

Estratégia experimental

Para tanto, a ração comercial foi moída para facilitar a incorporação do cloreto de sódio. Na 16ª semana, foi registrada atividade simpática na região lombar dos animais, os quais permaneceram em jejum de ração por 12 horas sem restrição hídrica. Avaliação do Efeito Agudo do PsE 200 na Atividade Simpática Lombar Após esse período de avaliação do barorreflexo, outro período basal de 20 minutos foi coletado e então administrado agudamente por sonda orogástrica (1 ml em aproximadamente 1 minuto) PsE 200 ou veículo (água destilada) através de uma sonda previamente inserida no abdômen do animal e observaram mudanças nos níveis de pressão e atividade simpática no leito lombar.

Conteúdo de PsE 200 no intestino delgado no final do experimento de registro da atividade simpática lombar. Para a coleta dos dados da atividade simpática do nervo lombar (ASNL), o sinal captado pelo eletrodo foi filtrado, registrado na faixa de 100 a 1000 Hz e amplificado 10.000 vezes por um amplificador diferencial DP-311 (Warner Instruments, EUA) . O sinal analógico filtrado e amplificado foi convertido em sinal digital por um conversor analógico/digital PowerLab 8/35 (ADInstruments, EUA) e processado pelo software Lab Chart 8.1 para Windows para criar registros temporais das variáveis ​​adquiridas.

As variáveis ​​pressão arterial, atividade simpática lombar bruta e integrada foram coletadas e apresentadas simultaneamente no programa. Os dados foram então calculados e os gráficos criados usando o software Prisma 8.0 para Windows (GraphPad Software, San Diego, CA, EUA). Os registros da atividade simpática integrada foram analisados ​​na constante de tempo de integração de 0,1 segundo na construção dos dados quantitativos.

Com relação aos dados qualitativos, a análise foi realizada na constante de tempo de integração de 0,01 segundos da atividade simpática lombar integrada. Todos os dados foram analisados ​​estatisticamente usando o software GraphPad Prism 8.0 para Windows (GraphPad Software, San Diego, CA, EUA).

Figura 3. Imagem representativa do modelo experimental HS12W
Figura 3. Imagem representativa do modelo experimental HS12W

Resultados

Traços qualitativos da atividade simpática lombar em ratos HSD e SSD anestesiados com uretano após administração oral de PsE 200 ou veículo. Efeito do MAP e ASNL da administração intragástrica de uma dose única de PsE 200 ou veículo em ratos SSD e HSD anestesiados e cronicamente não tratados. Os painéis A e B mostram registros de pressão arterial e atividade simpática lombar (sinal bruto e integrado) ao longo de 110 minutos.

As alterações máximas no MAP e na atividade do nervo simpático lombar (ASNL) devido ao PsE 200 foram calculadas e expressas como ΔMAP (painel C) e ΔInt. Para os painéis C e D, os quadrados e círculos dispersos representam os valores individuais de SSD e HSD, respectivamente, e as barras representam os dados médios do grupo (média ± SEM). ANOVA two-way seguida do teste post-hoc de Dunnett; p<0,05, # difere da linha de base (antes da administração de PsE 200.

Objetivo

Estratégias experimentais

Testes para avaliar a absorção intestinal de sódio Determinação do teor de sódio, umidade e excreção nas fezes. No final da 16ª semana após o desmame, após 4 semanas de administração oral de veículo ou PsE 200, o transporte de sódio no intestino foi medido usando a técnica de perfusão intestinal ex vivo. A cânula foi preenchida com solução isotônica de fosfato de cloreto de sódio (PBS) e a extremidade PE-20 foi fechada com um pino de aço níquel.

Os resultados referentes ao índice de umidade, teor fecal de sódio e excreção fecal de sódio são apresentados na Figura 7, divididos em painéis A, B e C. Foram realizados experimentos in situ de perfusão intestinal para verificar a absorção intestinal dos animais, com o objetivo de determinar absorção intestinal total de sódio e potássio em ratos após administração oral aguda e crônica de PsE 200. Conforme observado, houve diminuição da concentração de sódio no efluente em relação ao afluente durante os primeiros 30 minutos após a administração de PsE 200, indicando que o intestino absorve sódio da solução de infusão (tempo 30: veículo SSD: 116 mmol/L, veículo HSD: 130,8 mmol/L, ANOVA bidirecional; p>0,05).

A administração oral de PsE 200 crônico por 4 semanas também foi um fator determinante neste ensaio, pois a absorção de sódio foi menor em ratos que receberam veículo do que em ratos que receberam PsE 200, indicando que a administração oral de PsE 200 a reduz. Quando os animais foram submetidos à administração aguda, ou seja, a administração de PsE 200 durante o experimento, houve uma redução na absorção intestinal de sódio entre os animais HSD e SSD que receberam PsE 200 e veículo HSD em comparação aos ratos SSD-veículo. O painel C da Figura 8 representa a concentração plasmática de sódio de ratos SSD e HSD, que receberam portador agudo ou crônico ou PsE 200.

Com base nesses dados, pode-se concluir que os animais que receberam a administração oral de PsE 200 apresentaram absorção de volume isotônico, sem alterações na concentração e no volume de sódio durante o experimento. Concentração de sódio no efluente (Painel A), concentração de sódio no efluente (Painel B) e concentração de sódio no plasma (Painel C) de ratos Wistar em dieta hipersódica por 16 semanas submetidos ao procedimento de perfusão intestinal com PsE 200.

Objetivos

Estratégia experimental

Abundância bacteriana total (painel A) e abundância relativa da família Ruminococaccea (painel B), gênero Firmicutes (painel C), Bacteriodetes (painel D) do intestino de ratos Wistar submetidos a dieta padrão (SSD), dieta com sobrecarga de sódio ( HSD) e tratados com PsE 200 ou veículo. Altura das vilosidades jejunais: A) Visão geral da seção histológica do jejuno de ratos SSD de veículos; B) SSD PsE 200; C) HSD do veículo; Altura do vilo ileal: A) Visão geral da seção histológica do íleo de ratos SSD veículo; B) SSD PsE 200; C) HSD do veículo;

Espessamento da camada muscular no duodeno: A) Visão geral do corte histológico do duodeno de ratos veículo-SSD; B) SSD PsE 200; C) HSD do veículo; Espessamento da camada muscular do jejuno: A) Visão geral do corte histológico do jejuno de ratos SSD veículo; B) SSD PsE 200; C) HSD do veículo; Espessamento da camada muscular do íleo: A) Visão geral do corte histológico do íleo de ratos veículo-SSD; B) SSD PsE 200; C) HSD do veículo;

74 Figura 21. Contagem de células caliciformes duodenais: A) Visão geral do corte histológico do duodeno de ratos SSD veículo; B) SSD PsE 200; C) HSD do veículo; Número de células caliciformes no íleo: A) Visão geral da parte histológica do íleo de ratos SSD veículo; B) SSD PsE 200; C) HSD do veículo; Altura das vilosidades do intestino delgado: Duodeno (A), Jejuno (B) e Íleo (C) para ratos alimentados com dieta padrão (SSD), dieta com sobrecarga de sódio (HSD) e tratados com PsE 200 ou veículo.

Espessamento da camada muscular do intestino delgado: Duodeno (A), Jejuno (B) e Íleo (C) para ratos alimentados com dieta padrão (SSD), dieta com sobrecarga de sódio (HSD) e tratados com PsE 200 ou veículo. Número de células caliciformes no intestino delgado: Duodeno (A), Jejuno (B) e Íleo (C) para ratos alimentados com dieta padrão (SSD), dieta com sobrecarga de sódio (HSD) e tratados com PsE 200 ou veículo.

Figura  11 1  representa  o  log  da  contagem  de  unidades  de  formação  de  colônias  das  bactérias por gramas de fezes
Figura 11 1 representa o log da contagem de unidades de formação de colônias das bactérias por gramas de fezes

Objetivos

Com base nos resultados deste estudo de efeitos biológicos, é possível que a administração oral de extrato de Psidium guajava L. PsE) esteja associada à inibição da absorção intestinal de sódio em ratos HS12W, com inibição ainda maior em animais submetidos à administração oral crônica de PsE. Por outro lado, Neto et al., 2013 quantificaram o teor de P, K, Ca e Mg nas folhas de Psidium guajava L. Esses resultados estão de acordo com os resultados de Liang et al. (2005) que identificaram flavonoides e glicosídeos flavonoides nas folhas de Psidium guajava L.

95 observado por outros autores em estudos para determinação de compostos polares nas folhas e extrato de Psidium guajava L. O composto 3 (miricetina, flavonol), que apresentou pico básico [M - H] - em m/z 317, também foi identificada em Psidium guajava L Dados anteriores da literatura já comprovaram que o extrato da folha de Psidium guajava tem efeito antimicrobiano.

Os autores observaram que na concentração de 100 μg/ml testaram a atividade antimicrobiana do extrato de Psidium guajava L contra algumas cepas bacterianas. Um estudo in vitro conduzido por Mehta et al. (2014) investigaram o potencial antimicrobiano de Psidium guajava L.

Os resultados obtidos com o estudo foram que as concentrações de 5% e 20% do extrato de Psidium guajava foram capazes de inibir o crescimento de S.mutans e S.mitis (MEHTA; RAJESH; RAO; . SHENOY et al., 2014). Estudos na literatura já destacam que extratos de Psidium guajava têm apresentado propriedades anti-inflamatórias por meio de mecanismos envolvendo aumento dos níveis da citocina anti-inflamatória IL-10. Além disso, houve aumento da concentração de SOD no plasma de ratos com a maior dose de Psidium guajava (250 mg/kg) e não houve alteração com a menor dose, que foi de 125 mg/kg (HUANG; YIN ; CHIU , 2011).

Efeitos do tratamento com suspensão de P. na absorção intestinal de sódio em ratos HS12S. Efeitos do tratamento com suspensão de folha de Psidium guajava L. goiaba por 4 semanas na absorção intestinal de sódio em ratos HS12W.

Imagem

Figura 3. Imagem representativa do modelo experimental HS12W
Figura 4. Conteúdo de PsE 200 no intestino delgado ao fim do experimento de registro de atividade  simpática lombar
Figura  11 1  representa  o  log  da  contagem  de  unidades  de  formação  de  colônias  das  bactérias por gramas de fezes
Tabela 4. Dosagens de concentração de amostras em nanodrop  Amostra  T1
+3

Referências

Documentos relacionados

Assim, tendo em vista a evolução do setor de Gestão de Pessoas o objetivo deste estudo é verificar a relevância da referida área para as organizações enquanto setor estratégico