Sociedade Brasileira de Química (SBQ)
34a Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Química
Isolamento e caracterização estrutural da valinomicina produzida por actinobactéria isolada da rizosfera do mangue.
Fernanda S. Figueiró1 (PG)*, Ana Paula F. Peti1 (PG), Sarah P. Canova2 (PG), Itamar S. de Melo2 (PQ), Luiz Alberto B. de Moraes1 (PQ).
* fernandafigueiro@pg.ffclrp.usp.br
1. Departamento de Química, FFCLRP - Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto - SP.
2. Laboratório de Microbiologia Ambiental – EMBRAPA, Jaguariúna – SP.
Palavras Chave: Fitotoxinas, Espectrometria de Massas, Desreplicação, Peptídeos Bioativos.
Introdução
A preocupação em relação a utilização indiscriminada e abusiva de herbicidas sintéticos tem sido destaque no cenário mundial em conseqüência da contaminação ambiental. Nesse contexto algumas pesquisas têm sido desenvolvidas estrategicamente para a descoberta de novas substâncias provenientes de fontes naturais1. Compostos químicos metabolizados por micro- organismos apresentam benefícios ao meio ambiente por serem fontes de substâncias biodegradáveis fornecendo estruturas relativamente simples e com alvo específico2. A busca de novas fontes naturais bem como o desenvolvimento de novas metodologias analíticas, em especial a espectrometria de massas acoplada à cromatografia líquida (LC-MS/MS), tem contribuído para acelerar o isolamento e a identificação de substâncias bioativas3.
Resultados e Discussão
A partir de um screening empregando o bioensaio de fitotoxicidade com Lemna minor (Figura 1) foi possível a seleção de um extrato bruto, produzido por uma actinobactéria isolada de mangue (denominada actino-14), o qual apresentou atividade fitotóxica quando comparada ao herbicida sintético, a atrazina.
Figura 1. Bioensaio de fitotoxicidade
O princípio ativo (Fr Ativa) foi isolado através do fracionamento guiado pelo bioensaio com Lemna.
As análises de RMN1H, 13C, bidimensional, IV, espectrometria de massa de ultra-resolução, MS/MS mostram que a substância com atividade fitotóxica é a valinomicina. A valinomicina é um peptídeo cíclico com atividade antibiótica produzida pela Streptomyces fulvissimus.
Os espectros de massas obtidos são apresentados pela Figura 2.
.
Figura 2. a) Estrutura da valinomicina, b) Espectro ESI+; c) MS/MS do íon de m/z 1111.
Os espectros de massas de FT-ICR e MS/MS permitiram a identificação e caracterização do composto responsável pela atividade fitotóxica como sendo a valinomicina.
Conclusões
A metodologia analítica empregada mostrou-se bastante eficiente na identificação de compostos com atividade fitotóxica. No presente estudo foi atribuida uma nova atividade biológica para o peptídeo valinomicina.
Agradecimentos
Agradecimentos ao CNPq, CAPES e a FAPESP pelo apoio financeiro.
1 Saxena, S.; Pandey, A. K. : Applied Microb. Biotech., 2001, 55, 395- 403.
2Li, Y.; Sun, Z.; Zhuang, X.; Xu, L.; Chen,S.; Li, M.; Crop Protection 2003, 22, 247–252.
3 Moraes, L. A. B.; Andrei, C. C.; Ferreira, D. T.; Faccione, M.;
Carvalho, M. G.; Braz-Filho, R.; Phytochemistry, 2000, 55, 799-804.
m/z
100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 1100 1200
%
0
100 1083.690 66.4
713.452 343.218
325.205 172.139 117.114
371.217
514.321
449.307
443.235
542.337
570.368 642.390
884.567
714.455 741.456
813.508 912.562
1065.652 913.590
984.603 1084.695
1111.677
1112.655
%
0
100 1128.633
587.385 288.278 389.234
567.310
1111.627 590.403 678.458 766.481 854.443 983.498
1129.619 1133.606
1150.580
a)
b)
Fr Ativa
c)
