Sociedade Brasileira de Química ( SBQ)
34a Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Química
Planejamento estatístico de misturas em cromatografia líquida para aumento da seletividade em extratos de plantas medicinais.
Daniely Xavier Soares1* (PG), Ieda S. Scarminio2 (PQ), Roy Edward Bruns1(PQ)
*daniely.soares@iqm.unicamp.br
1Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
2Universidade Estadual de Londrina(UEL)
Palavras Chave: cromatografia, seletividade, componentes principais.
Introdução
A impressão digital é uma poderosa ferramenta para o controle de qualidade multicomponente das plantas medicinais e seus produtos. A obtenção de uma boa impressão digital cromatográfica de um material vegetal depende de vários fatores, como o método de extração, instrumentos de medição e condições de medição. Portanto, se quisermos obter uma impressão digital informativa precisamos de um bom método de extração e um cromatograma com boa separação. Por estas razões, otimizar tanto a solução de extração e a fase móvel é importante. O objetivo deste trabalho foi investigar o efeito de quatro solventes usando planejamento de misturas no fracionamento em cromatografia de coluna aberta para obtenção do maior número de frações possíveis, visando a busca da impressão digital da Erythrina speciosa Andrews. As folhas da Erythrina speciosa foram coletadas na Universidade Estadual de Londrina (UEL). A exsicata está depositada no herbário da UEL com o número UEL 35.133 . O extrato foi preparado em uma mistura de etanol, diclorometano e hexano 1:1:1 (v:v:v). Para o preparo da coluna foram utilizados 2g. O fracionamento
cromatográfico do extrato
etanol/diclorometano/hexano utilizando-se os eluentes do planejamento estatístico de misturas resultou 580 frações. Estas frações foram agrupadas por meio da cromatografia em camada delgada de resultando 38 grupos distintos e analisados por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE).
Resultados e Discussão
Para a análise exploratória dos extratos, cada grupo de frações analisado por CLAE, em duas fases móveis, ACN:Água:MeOH, 35:30;35,%(v) e 17,5:65;17,5,%(v), de forma isocrática, com forças distintas, foram submetidas a análise de componentes principais (ACP) e análise hierárquica.
A melhor discriminação dos grupos em duas dimensões pode ser visualizada nas projeções da CP1 e CP3 com 54 % da informação total contida nos dados, Figura 1. Analisando os grupos formados pela ACP observou-se que o grupo VII difere dos demais por apresentar as frações agrupadas com fases ternárias incluindo o hexano. Já os grupos IV e V foram influenciados separados pelo acetato de etila puro e mistura ternária envolvendo 20% desse
solvente. Para confirmar os resultados da ACP foi utilizada a análise hierárquica, Figura 2.
1 2a
2b 2c2d2e
3a
3b 5a 4
5b 6 5c
7a 7b
8 10
11 12
13a
13b
14 15
16a 16b
17
20
21
22a 22b 23a
23b24 25
26 27
28 1819
0,00 0,02 0,04 0,06 0,08 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18 0,20 0,22 0,24 CP1
-0,4 -0,3 -0,2 -0,1 0,0 0,1 0,2 0,3 0,4
CP3
VII
V
IV
VI
III
II
I VIII
IX
X XI
XII
Figura 1 - Gráfico dos escores CP1 e CP3 dos dados cromatográficos na fase móvel ACN:Água:MeOH, 35:30;35,% (v).
Figura 2 – Dendrograma referente aos dados cromatográficos na fase móvel ACN:Água:MeOH, 35:30;35,% (v).
Conclusões
Na cromatografia em coluna aberta o solvente e não a polaridade influenciou na separação das frações.
O aumento da força da fase móvel diminuiu o número de picos, portanto a fase ACN:Água:MeOH, 17,5:65;17,5,%(v) não serve para a busca da impressão digital. Os resultados obtidos pela análise de componentes principais foram confirmados pela analise hierárquica. A fração mais informativa para a impressão digital foi obtida na coluna aberta na fase móvel hexano: diclorometano:acetato de etila, 60:20:20 %(v) e CLAE ACN:Água:MeOH, 35:30;35,%(v).
Agradecimentos
Agradecimentos para CAPES, CNPq e FAPESP
1 Soares, P. K.; Bruns, R. E.; Scarminio, I. S. J. Sep. Sci. 2009, 32, 644.
62e82b18191211272d 2c2116b5a2a26257b413b23a177a1513a2016a3a1022b22a5c5b3b2423b28141 0,0
0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 1,8 2,0
Distância Euclidiana
