XXIV Congresso de Iniciação Científica
Susceptibilidade aos antifúngicos Fluconazol e Voriconazol por leveduras isoladas de Cyphomyrmex transversus (Emery)
Lídia de Azevedo Duarte, Fernando Carlos Pagnocca, Aline Silva, Lucimeire Ramos de Souza Lacau, Rio Claro, Instituto de Biociências, Ciências Biológicas, lazevedoduarte@yahoo.com, bolsista PIBIC
Palavras Chave: Insetos sociais, antifúngicos, leveduras
Introdução
A frequência de micoses invasivas causadas por fungos patógenos oportunistas vem aumentando significativamente nas últimas décadas1, principalmente em pacientes imunocomprometidos.
Novos e emergentes fungos patógenos também incluem leveduriformes como, por exemplo, Trichosporon sp.
Neste trabalho, 30 estirpes de leveduras isoladas de 8 ninhos da formiga Cyphomyrmex transversus foram testadas quanto a susceptibilidade a dois antifúngicos azólicos tradicionais, fluconazol (FCZ) e voriconazol (VCZ) .
Material e Métodos
A caracterização e identificação das estirpes foram feitas através de métodos polifásicos, incluindo a técnica de MSP-PCR e sequenciamento dos domínios D1/D2 do rDNA. A avaliação da atividade antimicrobiana dos dois antifúngicos foi realizada através do método de microdiluição em microplaca, de acordo com a norma M27-A2 (CLSI, 2002)2. Segundo esta norma, valores de MIC acima de 32 mg/L e 2mg/L são considerados resistentes para FCZ e VCZ, respectivamente. C. parapsilosis ATCC 22019 e C. krusei ATCC 6258 foram utilizadas como controle.
Resultados e Discussão
As 30 estirpes foram identificadas como:
Trichosporon asahii (18), Trichosporon coremiiforme (4), Candida carpophila (syn. C. guilliermondii) (4), Galactomyces candidum (3) e Cryptococcus laurentii (1). Todas elas são conhecidas por serem patógenos oportunistas.
Com relação ao teste de susceptibilidade in vitro, a concentração inibitória mínima (CIM) foi obtida a partir da análise de 50% de crescimento, visto que os azóis possuem ação fungistática. Os valores da CIM estão descritos na Tabela 1.
Com exceção de Galactomyces candidus, que apresentou susceptibilidade dose-dependente, todas as estirpes foram sensíveis ao fluconazol. Em relação ao voriconazol, todos os isolados foram sensíveis, sendo inibidos pelas menores concentrações.
Tabela 1. Atividade in vitro de dois antifúngicos azólicos contra 30 estirpes de leveduras, baseado no método de microdiluição do CLSI.
Espécie (no de isolados)
Tempo de incubação
(h)
CIM (mg/L) Fluconazol Voriconazol
Faixa de CIM
Faixa de CIM T. asahii (18) 24 0,5-1 0,015-0,03
48 1-2 0,03
T. coremiiforme (4) 24 0,5-1 0,015-0,03
48 0,5-2 0,03-0,06
C. carpophila (4) 24 0,5-1 0,03
48 2-4 0,06-0,125
G. candidus (3) 24 8-16 0,06-0,125
48 16 0,125-0,25
C. laurentii (1) 24 1 0,03
48 1 0,06
CIM=concentração inibitória mínima (mg/L). Os valores de CIM para FCZ e VCZ, em mg/L foram, respectivamente: C.
parapsilosis ATCC 22019 = 1-2 e 0,03-0,06 e C. krusei ATCC 6258 = 16-32 e 0,12-0,5.
Conclusões
A identificação das estirpes isoladas de C.
transversus nos permite afirmar que os ninhos desta espécie de formiga podem servir como um reservatório natural de micro-organismos com potencial patogênico, como já observado com outras espécies de formigas da mesma tribo Attini3. G.
candidus demonstrou susceptibilidade dose- dependente ao fluconazol e uma possível infecção com este patógeno pode ser de difícil controle terapêutico.
Agradecimentos
Apoio financeiro: CNPq/PIBIC
1PFALLER, M. A.; DIEKEMA, D. J. Rare and emerging opportunistic fungal pathogens: concert for resistance beyond Candida albicans and Aspergillus fumigatus. Journal of Clinical Microbiology, 2004, 42,4419
2CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute). Método de Referência para Testes de Diluição em Caldo para Determinação da Sensibilidade de Leveduras à Terapia Antifúngica. Norma Aprovada M27-a2, 2002.
3PAGNOCCA, F. C.; LAGASPE, M. F. C.; RODRIGUES, A.; RUIVO, C. C. C.; NAGAMOTO, N. S.; JR, M. B. and FORTI, L. C. Yeasts isolated from a fungus-growing ant nest, including the description of Trichosporon chiarellii sp. nov., an anamorphicbasidiomycetous yeast.
Internat. J. Syst. and Evolut. Microbiol, 2010, 60,1454.
