Sociedade Brasileira de Química (SBQ)
35a Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Química
Fototoxicidade da hipericina encapsulada em nanopartículas lipídicas sólidas
Adriel M. Lima (PG)1*, Carine Dal Pizzol (PG)3, Tania B. Creczynski Pasa (PQ)3, Anderson O. Ribeiro (PQ)4, Tania T. Tominaga (PQ)2, Claudia Bernal (PQ)1, Janice R. Perussi (PQ)1
e-mail: adriel@iqsc.usp.br
1-Instituto de Química de São Carlos, Universidade de São Paulo, São Carlos, SP, Brasil 2- Universidade do Centro Oeste, Guarapuava, PR, Brasil
3- Universidade Federal de Santa Catarina, Florianópolis, PR, Brasil 4- Universidade Federal do ABC, Santo André, SP, Brasil
Palavras Chave: Fotossensibilizador, nanopartículas, hipericina, terapia fotodinâmica
Introdução
A Terapia Fotodinâmica (PDT) é uma modalidade de tratamento do câncer que se baseia na administração de uma substância sensível à luz, fotossensibilizador (FS), que fica retida preferivelmente nos tecidos tumorais, seguida pela irradiação com luz visível em comprimento de onda adequado1. A principal desvantagem em utilizar os FSs livres no organismo é a hidrofobicidade de alguns FSs que pode levar à agregação em meio biológico e à redução da atividade. Assim, a incorporação de FSs em sistemas nanocarreadores poderá ser uma alternativa a esse problema2.
A hipericina (HY) é um potente FS e apresenta alta hidrofobicidade, o que limita a sua utilização em meio biológico. Neste contexto, a incorporação da HY em um sistema nanoestruturado poderá aumentar a sua solubilidade, evitando a agregação em meio biológico.
Este estudo teve como objetivo preparar, caracterizar e investigar a citotoxicidade da hipericina encapsulada em nanopartículas lipídicas sólidas (NLS).
Resultados e Discussão
NLS-HY foi preparada pelo método de difusão de solvente em um sistema aquoso3. A caracterização foi realizada utilizando um Zetasizer Nano ZS e resultou num diâmetro médio de 150 nm com índice de polidispersão (PI < 0,3), indicando a formação de um sistema monodisperso. O potencial zeta das NLS-HY, que determina a carga superficial, resultou em valor negativo de -19 mV. devido a presença de um tensoativo aniônico. A eficiência de encapsulação foi de 82% demonstrando que a maior parte da HY está associada ao nanocarreador. O encapsulamento da HY em NLS tornou-a mais solúvel em meio aquoso (Fig. 1).
Figura 1: Espectro de absorção de a) 1,0 µg mL-1 de HY em PBS;
b) 1,0 µg mL-1 de NLS-HY em PBS.
Para os ensaios celulares foram utilizadas células epiteliais de carcinona epidermóide de laringe humana (HEp-2), 1,0 x 105 células mL-1 incubadas em meio de cultura a 37 ºC e 5% de CO2. Após o período de incubação irradiou-se as células com LED 585 nm ± 14 (Amarelo) e determinou-se a concentração inibitória média (IC50). As NLS brancas não apresentaram citotoxicidade, podendo ser considerada ideal para o uso em PDT.
Figura 2: Índice de Sobrevivência da HY e NLS-HY a) irradiadas no LED Amarelo e b) no escuro.
Tabela 1: Índice inibitório médio utilizando HY e NLS-HY em células HEp-2.
FS IC50 (µg mL-1) LED Amarelo HY livre 0,030 ± 0,003
NLS-HY 0,020 ± 0,003
Após o encapsulamento da HY em NLS ocorreu um aumento de 33% na fotocitotoxidade da HY.
Conclusões
As NLS-HY apresentaram grande potencial para o uso em PDT devido ao aumento da solubilidade da HY em meio aquoso, da ausência de citotoxicidade no escuro e da maior citotoxicidade sob irradiação.
Agradecimentos
Ao CNPq, IQSC e UFSC.
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1Simplicio, F. I.; Maionchi, F.; Hioka, N. Química Nova. 2002, 25, 801- 807.
2Konan, Y. N., Gurny, R., et al. State of the art in the delivery of photosensitizers for photodynamic therapy. Journal of Photochemistry and Photobiology B-Biology. v. 66, p. 89-106, 2002.
3Hu, F.Q., Yuan, H., Zhang, H.H., Fang, M. Preparation of solid lipid nanoparticles with clobetasol propionate by a novel solvent diffusion method in aqueous system and physicochemical characterization. Int. J.
Pharm. v. 239, p. 121-128, 2002.
320 360 400 440 480 520 560 600 640
0,00 0,04 0,08 0,12 0,16 0,20
Absorbância (u.a.)
(nm)
a)
320 360 400 440 480 520 560 600 640
0,00 0,04 0,08 0,12 0,16 0,20
(nm)
Absorbância (u.a.)
b)
0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5
0 20 40 60 80 100
HY Livre NLS-HY
[FS] (g mL-1)
Índice de Sobrevivência %
b)
0,00 0,05 0,10 0,15 0,20
0 20 40 60 80 100
HY NLS-HY NLS Pura
[FS] (g mL-1)
Índice de Sobrevivência %
a)
