Caracterização de mecanismos de resistência antimicrobiana e relações genéticas em cepas de Escherichia coli isoladas de mexilhões Perna Perna capturados na costa da praia. Caracterização de mecanismos de resistência antimicrobiana e relações genéticas em cepas de Escherichia coli isoladas de mexilhões Perna Perna cultivados no litoral da Praia de Itaipu e de um mercado varejista, Niterói, RJ. Sequência de oligonucleotídeos, reagentes e condições de amplificação utilizadas na detecção de genes de resistência à sulfonamida, trimetoprima e integrase e detecção de Integron em E.
Sequência oligonucleotídica, reagentes e condições de amplificação utilizadas para detecção de genes de resistência à tetraciclina em cepas E. Sequência oligonucleotídica, reagentes e condições de amplificação utilizadas para detecção de genes de resistência a aminoglicosídeos em cepas E. Sequência oligonucleotídica, reagentes e condições de amplificação utilizadas para detecção de resistência ao cloranfénico. genes em E.
Sequência de oligonucleotídeos, reagentes e condições de amplificação utilizadas na detecção de grupos filogenéticos em cepas E. Sequência de oligonucleotídeos, reagentes e condições de amplificação utilizadas na detecção dos principais grupos de incompatibilidade plasmidial em cepas E.
Mexilhões
Para os moluscos bivalves submetidos a cozimento e industrializados, refrigerados ou não, destinados ao consumo humano, a Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA) determina, por meio da RDC nº. 12 de 2001, limites máximos de 5x101 MPN/g de coliformes termotolerantes. No entanto, apesar dos actuais padrões estabelecidos, microrganismos indicativos de contaminação fecal e outros membros da família Enterobacteriaceae ainda são detectados consistentemente em mexilhões destinados ao consumo humano. Investigadores de todo o mundo têm, nos últimos anos, relatado resultados que comprovam a existência de mexilhões destinados ao consumo humano contaminados com membros da microbiota intestinal normal, desafiando os padrões de vigilância sanitária dos países.
Desses muitos relatos, podemos citar Grevskott et al. 2017), que realizaram seu estudo em moluscos bivalves da costa norueguesa e identificaram E. coli, através do sistema API-20, multirresistente e capaz de transferir seus genes através do ensaio de conjugação. No Brasil, Jayme et al. 2016) identificou E. coli em mexilhões por meio de métodos bioquímicos e determinou o perfil de resistência antimicrobiana, apresentando maior grau de resistência aos β-lactâmicos. Collin, Rehnstam-Holm e Hernroth (2008) em Moçambique estudaram moluscos bivalves comestíveis (Meretrix meretrix e Eumarcia paupercula) e identificaram E.coli através do sistema API-20 com resistência principalmente à tetraciclina mas também aos β-lactâmicos.
Doenças transmitidas por alimentos
Porém, em muitos países é difícil obter um estudo estatístico porque muitos casos não são notificados às autoridades responsáveis, porque os sintomas são leves e, consequentemente, não há procura pelas instituições de saúde (BATISTA; BEZERRA, 2015; SANTOS; VIEIRA , 2013). ; BRASIL, 2018). De acordo com os Centros de Controle e Prevenção de Doenças (CDC, 2016) dos Estados Unidos, os DTAs são um problema de saúde pública comum, caro, mas evitável. No Brasil, muitos autores, com foco na prevenção, publicaram trabalhos com foco na prevenção/informação, como por exemplo o manuscrito brasileiro publicado por Sezefredo et al. 2016) onde desenvolveram histórias em quadrinhos sobre DTAs para crianças.
O Ministério da Saúde também mantém um serviço de divulgação de informações do DTA, por meio da divulgação de dados epidemiológicos completos e de apostilas destinadas aos profissionais de saúde e ao público em geral, como o “Manual Integrado de Vigilância, Prevenção e Controle de Doenças Transmitidas por Alimentos” publicado em 2010 e disponível online. . Dado que o maior percentual de casos de DTA está relacionado à alimentação domiciliar (38,9%) (BRASIL, 2016), percebe-se a importância de uma maior popularização das informações sobre DTA.
Escherichia coli
Os tipos mais comuns são metalo-β-lactamase codificada por integron de Verona (VIM), β-lactamase Imipenem (IMP) e metalo-β-lactamase de Nova Delhi (NDM) (JEON et al. 2015; VIAU et al., 2016; ZEIGHAMI ; HAGHI; HAJIAHMAD, 2014). Inicialmente, foi descrito que o mecanismo de resistência às quinolonas ocorre por meio de mutações pontuais nos genes gyrA e gyrB, que codificam DNA girase e topoisomerase IV (RICÓN et al., 2014). Os principais representantes desta classe são gentamicina, canamicina, amicacina, neomicina, tobramicina e estreptomicina (PARAVISI, 2017; ZIMMERMANN et al., 2016).
A bomba de efluxo e a proteção do ribossomo são os mecanismos de resistência à tetraciclina mais comuns adquiridos pelas bactérias (ARENZ et al., 2015). Os genes mais comuns e bem caracterizados que codificam proteínas que protegem o ribossomo são os genes tetO e tetM (ARENZ et al., 2015; . DUTTA et al., 2016). Em contrapartida, o trimetoprima inibe competitivamente a enzima diidrofolato redutase (ACOSTA, 2016; HAMMOUDEH et al., 2014; SILVA, 2016).
A tigeciclina é um agente antimicrobiano semissintético análogo à tetraciclina, mas não é afetado pelos mecanismos de resistência descritos para as tetraciclinas (PIONER, 2015; RODRIGUEZ et al., 2017). Atua inibindo a síntese proteica e a ligação à subunidade 30S do ribossomo bacteriano, sendo assim considerado um agente bacteriostático (OSORIO et al., 2017).
Teste de susceptibilidade aos antimicrobianos (TSA)
Detecção fenotípica de beta-lactamases do tipo AmpC
A pesquisa sobre a produção de -lactamases do tipo AmpC foi realizada de acordo com as recomendações estabelecidas por Thomson e Sanders (1992). O resultado foi considerado positivo quando na leitura do TSA foi observada uma zona de achatamento entre os halos de inibição das substâncias antimicrobianas cefoxitina (30 μg) e cefotaxima (30 μg) distantes 2 cm entre si, uma vez que a cefoxitina atua como indutor do tipo AmpC -lactamases.
Detecção fenotípica de ESBL
Determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM)
Extração do DNA genômico
Detecção dos genes de resistência aos antimicrobianos
Tabela 3 - Sequências de oligonucleotídeos, reagentes e condições de amplificação utilizadas na detecção de genes de resistência a sulfonamidas, trimetoprima e integrase e detecção de Integron nas cepas E. Tabela 4 - Sequências de oligonucleotídeos, reagentes e condições de amplificação utilizadas na detecção de resistência à tetraciclina genes em E. Tabela 5 - Sequências de oligonucleotídeos, reagentes e condições de amplificação utilizadas na detecção de genes de resistência a aminoglicosídeos em E.
Tabela 6 - Sequências de oligonucleotídeos, reagentes e condições de amplificação utilizadas na detecção de genes de resistência ao cloranfenicol em cepas E Tabela 8 - Sequências de oligonucleotídeos, reagentes e condições de amplificação utilizadas na detecção de grupos filogenéticos em cepas E Tabela 9 - Sequências de oligonucleotídeos e condições de amplificação utilizadas na detecção dos principais grupos de incompatibilidade plasmidial em E.
Tabela 11 - Principais grupos de incompatibilidade plasmidial e perfil de resistência antimicrobiana em cepas de E. Em relação à análise dos grupos filogenéticos de E. 2016) encontrou prevalência do grupo filogenético A em cepas isoladas de peixes e camarões, também relacionadas a cepas comensais. Tal diversidade genética entre cepas de E. coli também foi observada por Dib et al. 2018) em cepas de enterobactérias, incluindo E.
Presença de genes de virulência e resistência em cepas uropatogênicas de Escherichia coli obtidas de pacientes com câncer ginecológico: comparação entre cepas resistentes e sensíveis à ciprofloxacina. Caracterização molecular de genes de resistência a cefalosporinas de espectro estendido em Escherichia coli isolada de frango e carne de frango. Plasmídeos e genes de resistência a quinolonas e cefalosporinas de terceira geração em amostras clínicas e comensais de Escherichia coli isoladas de frangos de corte, galinhas poedeiras e perus no Brasil.
Resistência antimicrobiana em cepas de Escherichia coli isoladas de peixes marinhos comercializados na feira livre de mucuripe - Fortaleza-CE, Brasil. Caracterização dos mecanismos de resistência antimicrobiana em cepas de enterobactérias isoladas de carcaças de frango comercializadas na cidade do Rio de Janeiro. Caracterização por métodos fenotípicos e moleculares dos mecanismos de resistência antimicrobiana em cepas de Aeromonas spp.
