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Universidade do Estado do Rio de Janeiro

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Academic year: 2023

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Também é perceptível o aumento da resistência à insulina no fígado e no músculo esquelético (Wang, Li et al. 2013). Assim, a associação de dieta rica em gordura e ooforectomia agrava os efeitos deletérios de ambos os insultos (Ludgero-Correia, Aguila et al. 2012). Portanto, estudos envolvendo ooforectomia, dieta rica em gordura e esse sistema de treinamento são escassos na literatura (Moholdt, Madssen et al. 2013).

Menopausa

Uma menor incidência de doenças cardiovasculares é observada em mulheres antes da menopausa, levando à ideia de que o estrogênio é responsável por esta proteção cardiovascular (Khalil 2005).

Obesidade

No entanto, uma compreensão completa da sua fisiopatologia permanece sem resposta (Gurevich-Panigrahi, Panigrahi et al. 2009). Assim, a obesidade induz aumento de radicais livres locais e sistêmicos, com alteração do estado redox e redução da capacidade do sistema antioxidante (Stefanovic, Kotur-Stevuljevic et al. 2008).

Estresse Oxidativo

A obesidade também pode causar estresse oxidativo sistêmico, devido ao aumento da produção de radicais livres na gordura acumulada e à consequente redução da capacidade do sistema de defesa antioxidante. Na fisiopatologia da obesidade, ocorre grande formação de radicais livres nas células adiposas, o que leva a alterações na expressão gênica dos adipócitos, no metabolismo lipídico e no conteúdo de fatócitos, que são acompanhadas pelo aumento dos níveis de NADPH oxidase e diminuição da defesa antioxidante. Por exemplo, a produção de radicais livres nas proporções corretas permite a formação de ATP através da cadeia de transporte de elétrons, fertilização do óvulo, ativação de genes e participação de mecanismos de defesa durante o processo de infecção (Halliwell e Whiteman 2004).

Os mecanismos de geração de radicais livres ocorrem principalmente nas mitocôndrias, nas membranas celulares e no citoplasma. As mitocôndrias são a principal fonte de radicais livres através da cadeia de transporte de elétrons, pois aproximadamente 2% a 5% do oxigênio metabolizado nas mitocôndrias para gerar ATP é desviado para outra via metabólica e reduzido de forma univalente, que é a origem dos radicais livres. (Verde, Marca et al. 2004). Outra razão para justificar a importância do H2O2 como um tipo de potencial nocivo é a sua longa vida, ao contrário dos radicais livres que têm uma vida muito curta.

O radical livre superóxido (O2-), além de participar das reações de geração de OH-, também pode gerar a espécie reativa de nitrogênio, o peroxinitrito (ONOO), através da reação do OH- com o óxido nítrico (ON-) (Green, Brand et. em 2004). As reações que geram radicais livres podem ter associados catalisadores, cujos íons são responsáveis ​​pelos metais ferro e cobre.

Sistema Antioxidante

A reação de Fenton corresponde à formação do radical OH- pela reação do H2O2 com íons ferro ou cobre, e a reação de Haber-Weiss corresponde à reação do H2O2 com O2, produzindo OH-, catalisado por esses íons (Barry, Mueller -Bunz e outros 2012). Existem também outras vias geradoras de radicais livres, como as enzimas NADPH oxidases (Nicotinamida Adenina Dinucleotídeo Fosfato Oxidases), que são proteínas transmembrana que têm a função de transferir elétrons através das membranas celulares. O sistema de defesa enzimático inclui as enzimas Superóxido Dismutase (SOD), que são representadas pelo manganês mitocondrial SOD (Mn-SOD), dependente de manganês, e pelo citoplasmático cobre-zinco SOD (Cu-SOD), dependente de cobre e zinco; Catalase (CAT), dependente de ferro, e Glutadiona Peroxidase (GPx), dependente ou não de selênio (Valko, Leibfritz et al. 2007).

A GPx tem ação fundamentalmente citosólica e catalisa a redução de H2O2 e peróxidos orgânicos através do uso da glutadiona (GSH), que atua como co-substrato da glutadiona peroxidase, doando elétrons, que são regenerados pela glutadiona redutase (GR) com a transferência de hidrogênio do NADPH. Assim as enzimas CAT e GPx funcionam com o mesmo propósito, nomeadamente prevenir a acumulação de peróxido de hidrogénio. Tal ação integrada é de grande importância, pois esta espécie reativa, através das reações de Fenton e Haber-Weiss, através da participação dos metais ferro e cobre, culmina na formação do radical OH contra o qual não existe sistema de defesa enzimática. (Mayne 2003; Valko, Leibfritz et al. 2007).

O estresse oxidativo gera metabólitos específicos, marcadores de estresse oxidativo, que podem ser identificados e quantificados. Outra forma de abordar a avaliação do estresse oxidativo é utilizar métodos indiretos, baseados na capacidade antioxidante (Huang, Ou et al. 2005).

Treinamento Intervalado de Alta Intensidade

Sabendo que, visando aumentar o sistema antioxidante, a melhor estratégia pode realmente ser expor o organismo a momentos de estresse oxidativo fisiológico (Finkel e Holbrook 2000). Neste contexto, o exercício físico parece ser a melhor forma de expor o corpo ao estresse oxidativo de forma controlada e adaptável, uma vez que o efeito agudo do exercício é gerar estresse oxidativo e o volume desse estresse está diretamente relacionado à intensidade. de treinamento, mas lembrando que o protocolo deve ser elaborado de forma a não gerar uma sobrecarga crônica no sistema antioxidante (Bogdanis, Stavrinou et al. 2013).

Geral

Específicos

Animais e dietas

Cirurgia

Grupo castrado: Os ovários foram identificados in situ e puxados suavemente lateralmente para expor adequadamente o pedículo ovariano. A artéria e veia ovariana foram cauterizadas com bisturi elétrico e os ovários foram liberados e removidos por dissecção romba com tesoura curva. Posteriormente, foi revisada a hemostasia da cavidade peritoneal e da parede abdominal e a ferida cirúrgica fechada com sutura contínua (VYCRIL R000).

Grupo Sham: Os ovários foram identificados in situ e puxados suavemente lateralmente para expor adequadamente o pedículo ovariano. A hemostasia da cavidade peritoneal e da parede abdominal foi então revisada e a ferida cirúrgica fechada com sutura contínua. O exame citológico dos esfregaços vaginais foi realizado duas vezes durante os 7 dias do experimento: primeiro após um período de descanso de 2 semanas para verificar se o procedimento cirúrgico induziu a menopausa e novamente, na véspera da eutanásia para garantir que todos os animais foram sacrificados em na mesma fase do ciclo estral.

A massa uterina foi medida após a eutanásia para garantir que a cirurgia de ooforectomia induzisse com sucesso a menopausa (Belchetz 1994). O grupo SHAM também foi dividido aleatoriamente em 2 grupos: animais alimentados com dieta padrão (SH-SC; n = 20) e animais alimentados com dieta rica em gordura (SH-HF; n = 20).

Tabela 1 -  Composições das dietas.
Tabela 1 - Composições das dietas.

Protocolo de treinamento

Pressão arterial

Eutanásia

Bioquímica do plasma e estresse oxidativo nos eritrócitos

Os níveis de TBARS foram determinados a absorvância de 532 nm (AmershamBiotrak II Visible Plate Reader, GE Healthcare, Uppsala, Suécia), utilizando 1,1,3,3-tetrametoxipropano como padrão.

Western Blot

RT-qPCR

Análise estatística

Massa do útero

Massa corporal

Antes do HIIT

Depois do HIIT

34;Maximum acute exercise tolerance in hyperthyroid and hypothyroid rats subjected to forced swimming." Horm Metab Res. 34;High- and moderate-intensity exercise normalizes ventricular function and mechanoenergetics in mice with diet-induced obesity." Diabetes. 34; Swimming prevention of oophorectomy-induced obesity through activation of PPARalpha in skeletal muscle." Int J Sport Nutr Exerc Metab.

34;Effects of high-fat diet on plasma lipids, adiposity and inflammatory markers in ovariectomized C57BL/6 mice.". ". 34; Biochemical study of markers of oxidative stress in liver, kidney and heart of high-fat diet-induced obesity in rats." Diabetol Metab Syndr 3(1): 17.

34;Duration of menopause and behavior of malondialdehyde, lipids, lipoproteins and carotid artery intima-media thickness.". 34;Aerobic interval training versus continuous moderate exercise as a treatment for metabolic syndrome: a pilot study.". 34; Free radicals and antioxidants in normal physiological functions and human diseases." Int J Biochem Cell Biol.

34; Disease Mechanisms: Oxidative Stress and Inflammation in the Pathogenesis of Hypertension." Nat Clin Pract Nephrol.

Figura 1 - Massa corporal (média e erro padrão da média).
Figura 1 - Massa corporal (média e erro padrão da média).

Ingestão alimentar e ingestão energética

Pressão arterial

Os grupos que receberam o treinamento obtiveram redução da pressão arterial equivalente ao grupo controle (Figura 2). Quando o item foi interação entre fatores, o HIIT afetou tanto a ooforectomia (P<0,0001) quanto a dieta (P=0,004), e não houve relação entre cirurgia e dieta. Legenda: SHAM, procedimento simulado; OVX, ooforectomia; SC, dieta padrão; IC, dieta hiperlipídica; T, treinado; NT, destreinado.

Bioquímica do plasma e estresse oxidativo nos eritrócitos

Western blot (músculo esquelético)

SOD

ANOVA de três fatores mostrou que OVX, HF e HIIT afetaram o conteúdo proteico da enzima SOD (P<0,0001). O conteúdo proteico da enzima catalase foi menor: nos grupos OVX-HF-NT comparado ao OVX-SC-NT (-82%, P<0,02), OVX-HF-NT comparado ao SHAM-HF-. ANOVA de três fatores mostrou que OVX e HF afetaram o conteúdo protéico da enzima catalase, mas não o HIIT.

RT-qPCR (músculo esquelético)

SOD

34; Short-term high-intensity interval training attenuates oxidative stress responses and improves antioxidant status in healthy humans." Food Chem Toxicol 61: 171-7. 34; Cellular mechanism by which estradiol protects ovariectomized female mice against high-fat diet-induced liver and muscle insulin resistance." Endocrinology. 34;Resistance training restores the gene expression of molecules related to fat oxidation and lipogenesis in the liver of ovariectomized rats." Eur J Appl Physiol.

34;A comparative evaluation of thiobarbituric acid methods for the determination of malondialdehyde in biological materials." Free Radic Biol Med. 34;Effects of estrogen, estrogen/progesterone combination and genistein treatments on oxidant/antioxidant status in the brain of ovariectomized rats." Eur Rev Med Pharmacol Sci. 34; Adverse association between obesity and menopause in mice treated with bezafibrate, a panperoxisome proliferator-activated receptor agonist." Menopause.

34;Effect of estrogen replacement therapy on endothelial function in peripheral resistance arteries in normotensive and hypertensive postmenopausal women." Hypertension 37(2 Pt 2): 651-7. 34;Swimming eliminates the weight gain and abdominal fat associated with ovariectomy in retired breeding rat despite selection of a high-fat diet." Appetite 35(1): 1-7. 34;The influence of obesity on oxidative stress status and leptin concentration in diabetes mellitus type 2 patients." Diabetes Res Clin Pract.

34; Metabolic effects of estrogen replacement combined with targeted exercise training on the therapy of obesity in ovariectomized Wistar rats." J Steroid Biochem Mol Biol.

Figura 4 – A expressão relativa da proteína da superóxido dismutase, da glutadiona peroxidase, da glutadiona redutase e da  catalase no músculo esquelético (média e erro padrão da média)
Figura 4 – A expressão relativa da proteína da superóxido dismutase, da glutadiona peroxidase, da glutadiona redutase e da catalase no músculo esquelético (média e erro padrão da média)

GPx e GR

Catalase

Além disso, o estrogênio preserva a função endotelial agindo como um antioxidante que reduz a peroxidação lipídica (Malone, Schuler et al. 2014). Estudos demonstraram que o treinamento contínuo pode ser responsável pela redução da pressão arterial em ratas OVX devido à redução do estresse oxidativo associado ao aumento da biodisponibilidade de NO (Irigoyen, Paulini et al. 2005). O estresse oxidativo é responsável pela fisiopatologia de inúmeras doenças crônicas, incluindo aterosclerose, diabetes mellitus tipo 2, distúrbios neurodegenerativos e câncer (Green, Brand et al. 2004).

O início do estresse oxidativo devido a uma dieta rica em gordura pode causar redução nas enzimas antioxidantes e aumento nos níveis de TBARS (Jayakumar, Pugalendi et al. 2014). É importante destacar que a ação das enzimas antioxidantes no estresse oxidativo é variável e depende diretamente do órgão analisado, pois algumas enzimas oferecem resultados diferentes em órgãos diferentes (Noeman, Hamooda et al. 2011). Um estudo recente mostrou que é possível aplicar este sistema de treino a mulheres na pós-menopausa com efeitos benéficos nos parâmetros avaliados (Klonizakis, Moss et al. 2014).

34;Adipose tissue IL-6 content correlates with resistance to insulin activation of glucose uptake both in vivo and in vitro." J Clin Endocrinol Metab. 34;Indices of diet and lifestyle quality with/without activity physical activity and markers of insulin resistance in European adolescents: the HELENA study." Br J Nutr. 34; Response of oxidative stress markers and antioxidant parameters to an 8-week aerobic physical activity program in healthy, postmenopausal women." Arch Gerontol Geriatr 49(1): e67-71.

34; Redox cycling of catechol estrogens generating apurinic/apyrimidinic sites and 8-oxo-deoxyguanosine via reactive oxygen species distinguishes equine and human estrogens.” Chem Res Toxicol.

Imagem

Tabela 1 -  Composições das dietas.
Tabela 2 - RT-qPCR primers e respectivas sequências.
Figura 1 - Massa corporal (média e erro padrão da média).
Figura 2 – Pressão arterial (média e erro padrão da média).
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Referências

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