Rozvoj moderních metod vede k mnohem podrobnějšímu pochopení patofyziologie aterosklerózy na patologicko-anatomické, buněčné a molekulárně biologické úrovni (Horváth et al., 2014). Termín vulnerabilní aterosklerotický plát (VP) se týká léze, která s vysokou pravděpodobností způsobí akutní koronární syndrom (ACS) (Goldstein et al., 2011; Muller et al., 1989). Mezi snímky, které se nejčastěji vyskytují v terénu akutní koronární trombózy, patří kalcifikovaný uzlík, eroze plaku a především TCFA (Virmani et al., 2006).
Pro TCFA je typická excentrická remodelace, díky které ani objemné aterosklerotické pláty nezpůsobují výrazné zúžení lumenu a zůstávají klinicky němé (Pedrigi et al., 2014). Pozitivní prediktivní hodnota většiny diagnostických metod zaměřených pouze na anatomické charakteristiky TCFA je stále poměrně nízká (Stone et al., 2011). Jsou tkáňově specifické, stabilní a snadno detekovatelné pomocí kvantitativní polymerázové řetězové reakce (qPCR) (Leistner et al., 2016; Kaudewitz et al., 2015; Fichtlscherer et al., 2011).
Pilotní data z preklinického výzkumu naznačují, že miR mohou být v budoucnu využívány i ve farmakoterapii (Ulrich et al., 2016). Blízká infračervená spektroskopie (NIRS) je schopna detekovat lipidové jádro, což je důležitý rys VP (Fleg et al., 2012). Metoda byla validována proti kadaverózním vzorkům a je bezpečná pro provedení in vivo (Gardner et al., 2008; Waxman et al., 2009).
U vzorků pacientů se STEMI byla plazma nejprve ošetřena heparinázou podle protokolu publikovaného Li a kolektiv (Li et al., 2016).
Experiment 3 - Analýza složení karotického plátu pomocí intravaskulární spektroskopie v závislosti na vlivu endoteliálního smykového tření
4 VÝSLEDKY
Experiment 1 - MikroRNA-331 a mikroRNA-151-3p jako biomarkery u pacientů s infarktem myokardu s elevací ST segment
Z pěti biomarkerů ACS vybraných jako pozitivní kontroly pro studii byly hladiny čtyř (miR-146a, miR-145, miR-24 a miR-323p) statisticky významně zvýšeny ve skupině pacientů se STEMI. Jedinou výjimkou z tohoto kvartetu byl miR-24, kde byla zaznamenána statisticky významně zvýšená hladina ve srovnání s pacienty s NCA. Exprese biomarkerů aktivace krevních destiček (miR-191 a miR-223) byla, jak se očekávalo, zvýšena u pacientů se STEMI (obr. 1B).
Zvýšená exprese miR spojená s aktivací krevních destiček (miR-223 a miR-191) u STEMI potvrdila, že se jedná o infarkty myokardu 1. Biomarkery nekrózy myokardu nebyly exprimovány v žádné ze skupin, a proto byly vzorky odebírány dostatečně včas (adoptovány od Horvátha a kol., 2020). Ze tří miR vybraných jako potenciální VP biomarkery na základě výsledků screeningové fáze studie byly hladiny dvou (miR-331 a miR-151-3p) významně zvýšené u pacientů se STEMI.
ROC analýza potvrdila vhodnost miR-331 jako biomarkeru STEMI a extenso vulnerabilního aterosklerotického plátu s dobrou senzitivitou a specificitou (panel A). Relativní exprese miR-151-3p byly také významně zvýšeny u pacientů se STEMI ve srovnání s kontrolami (panel B).
Maximální LCBI významně negativně korelovalo s plochou příčného řezu lumen v místě maximálního LCBI (obr. 3D), ale ne se zátěží plakem. Korelace mezi stupněm stenózy vyjádřeným jako MLA a množstvím detekovaného lipidu kvantifikovaným jako LCBI ve 4 mm v místě MLA (Panel C). Negativní korelace mezi průměrem tepny a maximálním LCBI v každém segmentu 4 mm (panel D) (upraveno podle Štěchovský et al., 2016).
Experiment 3 - Analýza složení karotického plátu pomocí intravaskulární spektroskopie v závislosti na vlivu endoteliálního smykového tření
U všech pacientů byla úspěšně získána data NIRS-IVUS a jejich digitální forma umožnila analýzu pomocí QIvus. Průměrný LCBI ve středním tercilu byl statisticky významně vyšší ve srovnání s oběma proximálními (průměr LCBI vs.
5 DISKUSE
MikroRNA-331 a mikroRNA-151-3p jako biomarkery u pacientů s infarktem myokardu s elevací ST segment
Tři skupiny kontrolních miR pak pomohly potvrdit, že jsme metodu detekce miR provedli správně, že zdrojem miR-331 a miR-151-3p nebyly nekrotické kardiomyocyty a patofyziologickým podkladem STEMI byla ruptura VP s penetrující koronární. trombóza. Jeho deregulace je spojována s patogenezí různých onkologických onemocnění u lidí a některá data naznačují, že je spojena se systémem monocytů a makrofágů (Luers et al., 2010; Naqvi et al., 2016; ZHAO et al., 2016 Butrym a kol., 2015). Ve studii pacientů s chronickou lymfocytární leukémií byla popsána asociace mezi touto molekulou a supresorem cytokinového signalizačního proteinu 1 (SOCS1), tzn. inhibitor dráhy Janus kináza/signál s aktivátorem transkripce (JAK/STAT), který může zesilovat zánětlivou odpověď (Zhao et al., 2016; Xiao et al. 2011).
Dalším možným spojením mezi miR-331 a rupturou VP by mohl být jeho předpokládaný účinek na signální transdukční dráhu fosfatidylinositol 3-kinázy/proteinkinázy B (PI3K/AKT), která hraje roli ve stabilizaci VP (ZHAO et al., 2016; Auge a kol., 2002; Zhai a kol., 2014). V minulosti byla popsána negativní zpětná vazba mezi hladinou miR-331 a expresí proteinu Bax, která je důležitá v proapoptotické signalizaci (Zhao et al., 2021). Posledně uvedený mechanismus by mohl ovlivnit zánětlivou odpověď v systému monocytů a makrofágů ovlivněním NF-KB nejen prostřednictvím této signální transdukční dráhy, ale také změnou hladiny TNF-α (Fan et al., 2020).
Malá preklinická studie popsala vliv miR-331 na regulaci genové exprese integrinu IIbIIIa, což vedlo k jeho zvýšené afinitě k fibrinogenu (Rowley et al., 2016). Podobně jako u miR-331 by vysvětlením mohlo být spojení se systémem JAK/STAT prostřednictvím interakční dráhy mezi miR-151-3p a STAT3 (Liu et al., 2018). Zvýšení hladin miR vede k potlačení exprese STAT3 a následně k poklesu produkce IL-6, který má silný proaterogenní efekt (Liu et al., 2018).
Zvýšená exprese miR-151-3p může vést k ovlivnění apoptózy prostřednictvím aktivace dráhy protein kinázy 1 spojené se smrtí (DAPK-1) a tumor supresorového genu p53 (Guo et al., 2021). Tato cesta může způsobit zvýšenou depozici LDL a provokovat zánět zvýšením aktivity lipoproteinové lipázy (Zhen et al., 2019). Zvýšená exprese genu p53 v důsledku oxidačního stresu vede k rozvoji endoteliální dysfunkce a četnější apoptóze makrofágů, které podporují progresi nekrotického jádra (Chan et al., 2022; Jebari-Benslaiman et al., 2022).
Souvislost mezi expresí miR-151-3p a vlivem translace vysoce konzervovaného genu pro TWIST1 byla popsána v několika pracích (Yeh et al., 2016; Nairismägi et al., 2013). Jeho exprese je ovlivněna vlivem ESS a k jeho zvýšené produkci dochází právě v oblastech cév se sníženým ESS (vnitřní část cévních zakřivení, větvení cév) (Mahmoud et al., 2016). Jiná práce popsala vliv TWIST1 na dediferenciaci buněk hladkého svalstva, což je důležitý mechanismus v progresi aterosklerotického plátu a rozvoji jeho nestability (Nurnberg et al., 2020).
To nám neumožnilo spolehlivě ověřit, zda hladiny miR ve studii mohly být ovlivněny některými možnými matoucími faktory, které nebyly mezi skupinami pacientů stejně vyvážené. Studie byla příliš malá na to, aby bylo možné otestovat, zda nárůst studijních miR není závislý na rozsahu nekrózy, popř.
Analýza složení karotického plátu pomocí intravaskulární spektroskopie v závislosti na vlivu endoteliálního smykového tření
Nedávno publikovaná prospektivní studie s NIRS-IVUS v koronárních artériích zjistila souvislost mezi velikostí ESS při vstupním vyšetření a progresí LCBI při kontrolním vyšetření vedoucí k rozvoji AP bohaté na lipidy stanovené pomocí NIRS (Shishikura et al., 2018). Na základě těchto zjištění předpokládáme, že naše pozorování lze vysvětlit také vlivem vysoké ESS na destabilizaci karotidové AP. Domníváme se, že detekce lipidových jader pomocí NIRS v proximálních částech karotického plátu může v budoucnu ovlivnit naše klinické rozhodování.
Odhad ESS pomocí neinvazivní metody by mohl poskytnout informace, které by následně ovlivnily volbu mezi farmakoterapií a invazivní léčbou. Informace o lokalizaci lipidového jádra může pomoci optimalizovat karotický stenting tak, aby stent pokryl celou lézi a zabránil distální embolizaci ateromových mas (Dixon et al., 2012; Horváth et al., 2016). Naše data pocházela z registru a neměli jsme k dispozici displej, který by nám umožňoval provádět výpočetní dynamiku tekutin.
Jednalo se o relativně malou observační studii, která nám neumožnila otestovat, zda naše pozorování má nějaký klinický význam.
6 ZÁVĚR
7 SOUHRN
MikroRNA-331 a mikroRNA-151-3p jako biomarkery u pacientů s infarktem myokardu s elevací ST segment
Blízká infračervená spektroskopie spojená s intravaskulárním ultrazvukem v karotických arteriích
Analýza složení karotického plátu pomocí intravaskulární spektroskopie v závislosti na vlivu endoteliálního smykového tření
8 SUMMARY
MicroRNA-331 and microRNA-151-3p as biomarkers in patients with ST- segment elevation myocardial infarction
Near-infrared spectroscopy combined with intravascular ultrasound in carotid arteries
Carotid artery plaque composition and distribution: near-infrared spectroscopy and intravascular ultrasound analysis
9 LITERATURA
Spoluautorské publikace s impakt faktorem
Srovnání 30denních výsledků po stentování karotické tepny u pacientů s téměř okluzí a těžkou stenózou: Analýza odpovídající skóre sklonu. info HONĚK, Jakub, Martin ŠRÁMEK, Tomáš HONĚK, Aleš TOMEK, Luděk ŠEFC, Jaroslav JANUŠKA, Jiří FIEDLER, Martin HORVÁTH, Štěpán NOVOTNÝ, Marek BRABEC a Josef VESELKA. Strategie screeningu a stratifikace rizika Snížení dekompresní nemoci u potápěčů s otevřeným foramen ovale.
VESELKA, Josef, Petr HÁJEK, Cyril ŠTĚCHOVSKÝ, Martin HORVÁTH, Radka ADLOVÁ, Robert ROLAND, Ingrid HOMOLOVÁ, Eva HANSVENCLOVÁ in Petra ZIMOLOVÁ. Dolgoročno preživetje bolnikov s karotidnim stentiranjem glede na eno- ali dvožilno karotidno arterijsko bolezen: analiza ujemanja rezultatov nagnjenosti. HONĚK, Jakub, Martin ŠRÁMEK, Tomáš HONĚK, Aleš TOMEK, Luděk ŠEFC, Jaroslav JANUŠKA, Jiří FIEDLER, Martin HORVÁTH, Štěpán NOVOTNÝ in Josef VESELKA.
info HONĚK, Jakub, Martin ŠRÁMEK, Luděk ŠEFC, Jaroslav JANUŠKA, Jiří FIEDLER, Martin HORVÁTH, Aleš TOMEK, Štěpán NOVOTNÝ, Tomáš HONĚK a Josef VESELKA. Vysoce kvalitní patent foramen ovale je rizikovým faktorem pro nevyprovokovanou dekompresní nemoc u rekreačních potápěčů. Vliv koexistujícího multicévního onemocnění koronárních tepen na krátkodobé výsledky a dlouhodobé přežití pacientů léčených karotidovým stentováním.
Composition of carotid artery stenosis and restenosis: A series of patients assessed with intravascular ultrasound and near-infrared spectroscopy. Evaluation of cerebrovascular reserve in patients undergoing carotid artery stenting and its utility in predicting significant hemodynamic changes during temporary carotid occlusion. Impact of single- and double-vessel carotid disease on long-term survival in patients treated with carotid stenting.
The effect of conservative diving profiles on the occurrence of venous and arterial blebs in divers with a patent foramen ovale: a pilot study.
Spoluautorké publikace bez impact faktoru
NOVOTNÝ Štěpán, Jakub HONĚK, Jaroslav JANUŠKA, Luděk ŠEFC, Martin HORVÁTH, Jiří FIEDLER, Martin ŠRÁMEK, Josef VESELKA, Tomáš HONĚK en Miloš TATAR. Patent foramen ovale: transkathetersluiting of conservatief duikprofiel bij decompressieziektepreventie bij duikers. HONĚK Jakub, Tomáš HONĚK, Jaroslav JANUŠKA, P ŠEBESTA, Štěpán NOVOTNÝ, Luděk ŠEFC, Jiří FIEDLER, Martin ŠRÁMEK, Martin HORVÁTH en M PAROBKOVÁ.
Přednášky, plakátová sdělení na odborných setkáních
