CAMILA FREITAS BATISTA
Dinâmica da resposta imune inata do sistema
respiratório de bezerros
Dissertação apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Clínica Veterinária da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo para obtenção do título de Mestre em Ciências
Departamento: Clínica Médica
Área de Concentração: Clínica Veterinária
Orientadora:
Profª Drª Alice Maria Melville Paiva Della Libera
Autorizo a reprodução parcial ou total desta obra, para fins acadêmicos, desde que citada a fonte.
DADOS INTERNACIONAIS DE CATALOGAÇÃO-NA-PUBLICAÇÃO
(Biblioteca Virginie Buff D’Ápice da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo)
T.2460 Batista, Camila Freitas
FMVZ Dinâmica da resposta imune inata do sistema respiratório de bezerros / Camila Freitas Batista. -- 2011.
121 f. : il.
Dissertação (Mestrado) - Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia. Departamento de Clínica Médica, São Paulo, 2011.
Programa de Pós-Graduação: Clínica Veterinária. Área de concentração: Clínica Veterinária.
Orientador: Profa. Dra. Alice Maria Melville Paiva Della Libera.
RESUMO
BATISTA, C. F. Dinâmica da resposta imune inata do sistema respiratório de bezerros. [Dynamic of the innate immune response of the respiratory system in calves] 2011. 121f. Dissertação (mestrado em Ciências) – Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2011.
As influências etárias do sistema imune de bezerros são descritas na primeira fase de vida
desses animais e a hipótese de também ocorrerem variações nos principais mecanismos de
resposta inata do pulmão pode identificar períodos de maior suscetibilidade às principais
doenças respiratórias que acometem os bezerros nesse período. Com a finalidade de
minimizar os prejuízos econômicos associados às doenças respiratórias em bezerros, este
estudo objetivou avaliar a dinâmica imunológica inata do sistema respiratório de bezerros
sadios nos três primeiros meses de vida, no qual nove bezerros sadios foram acompanhados
por três meses e submetidos a oito avaliações imunológicas. O material recuperado do lavado
broncoalveolar colhido por broncoscopia foi submetido à avaliação funcional dos macrófagos
alveolares utilizando as provas de fagocitose (SaPI e E.coli), burst oxidativo, quantificação de
imunoglobulinas e expressão de CD14. Os dados foram avaliados pelo teste ANOVA
one-way (unstacked) (paramétricos) e pelo teste Mann-Whitney (não paramétricos).
Verificaram-se alterações funcionais de fagócitos CD14+, que apesar de Verificaram-se manterem constantes em Verificaram-seus
valores relativos durante todo o período, apresentou intensidade de fagocitose elevada pontual
na terceira semana de vida e um aumento da fagocitose por mononucleares CD14+ aos 45
dias de idade com diminuição da intensidade da fagocitose por essas mesmas células a partir
dessa idade. Conclui-se que a partir de 45 dias de vida os animais começam a montar uma
resposta imune própria, porém pontual e que até os 90 dias não atingem a estabilidade
necessária para atestar a conclusão do processo de maturação da resposta inata local.
Palavras-chave: Bezerros. Fagocitose. Metabolismo oxidativo. Lavado broncoalveolar.
ABSTRACT
BATISTA, C. F. Dynamic of the innate immune response of the respiratory system in
calves. [Dinâmica da resposta imune inata do sistema respiratório de bezerros] 2011. 121f.
Dissertação (mestrado em Ciências) – Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2011.
The influences of age in calves’ immune system are described in their first phase of life. The
hypothesis that variations occur in the main mechanisms of lung innate response can help to
identify periods of greater susceptibility to the respiratory diseases that affect calves in the
first stage of their life. With the purpose of minimizing the economic losses associated with
respiratory disease in calves, this study aimed to evaluate the innate immune dynamics of the
respiratory system of healthy calves in the first three months of life. Nine healthy calves were
monitored for three months and eight immunologic evaluations were performed.
Bronchoalveolar lavage samples were recovered by bronchoscopy. Then, the alveolar
macrophages in samples were identified by protein expression of CD14 and undergone
functional evaluation of phagocytosis (SAPI and E.coli) and oxidative burst. Immunoglobulin
were also quantified in samples. Data was assessed by one-way ANOVA (unstacked)
(parametric) and the Mann-Whitney test (nonparametric). Functional alterations in phagocytes
CD14 + were observed, and although their relative values were kept throughout the period,
higher intensity of phagocytosis in the third week and increased phagocytosis by macrophages
CD14 + at 45 days of life was observed. Decreased intensity of phagocytosis was observed
after this age. It is concluded that from 45 days of life on, calves began to maintain their
immune response, but until 90 days of life they did not achieve the stability to conclude the
maturation of local innate response.
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Batista, 2011 1 INTRODUÇÃO
A bovinocultura tem um impacto importante na econômia brasileira e gerou um
lucro bruto de aproximadamente R$ 67 bilhões em 2010. Neste mesmo ano o rebanho
composto por 205,3 milhões de bovinos, permitiu um abate de 7,183 milhões de cabeças, e
8,802 mil toneladas de leite foram exportadas (IBGE, 2011). Neste contexto, a perda de
bezerros representa um prejuízo considerável, pois além da sua morte comprometer as taxas
de reposição, impede o retorno do investimento de sua concepção e nascimento, muitas vezes
expressivo.
Vários estudos têm sido realizados na fase neonatal (PRINGLE et al., 1988;
BORGES et al., 2001; COSTA et al., 2007; SNOWDER et al., 2006; GORDEN; PLUMMER,
2010), a mais crítica para a sobrevivência dos bezerros (PICCIONE et al., 2010), para
minimizar. Nessa fase deve ocorrer a adaptação do neonato à vida extrauterina e a
necessidade de atender exigências vitais como homeotermia, nutrição e função
cardio-respiratória imediatas ao nascimento (KASARI, 1994), representam um estresse natural
tornando-os mais susceptíveis a determinadas enfermidades.
A superação dessa fase de estresse natural é gradual para muitas funções como,
por exemplo, o sistema imune, que adquirirá pleno funcionamento em um momento mais
tardio de suas vidas (BENESI, 1993). Ao nascimento o sistema imune está totalmente
desenvolvido, mas ainda imaturo (CORTESE, 2009). Essa imaturidade se reflete na
ocorrência de enfermidades localizadas particularmente sobre determinados órgãos e
sistemas, onde o sistema respiratório é frequentemente afetado por enfermidades neonatais
(KOTERBA, 1993).
Dentre as afecções do sistema respiratório, a mais comum é o Complexo Doença
Respiratória ou a Pneumonia Enzoótica (AMES; BAKER; WIKSE, 2006). O complexo
constitui uma das maiores causas de perdas econômicas na bovinocultura, no âmbito nacional
e internacional, Possui etiologia multifatorial e qualquer estímulo estressante pode afetar
adversamente o sistema imune do hospedeiro provocando uma infecção viral primária seguida
de infecção bacteriana secundária (LEKEUX, 1994; GONÇALVES et al., 2000;
ACKERMANN; DERSCHEID; ROTH, 2010).
As broncopneumonias são mais observadas até o quinto mês de idade dos
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Batista, 2011
et al., 2000; AMES; BAKER; WIKSE, 2006), também acometem bezerros que mamaram
níveis adequados de colostro (SNOWDER et al., 2006; ACKERMANN; DERSCHEID;
ROTH, 2010; GORDEN; PLUMMER, 2010). Os macrófagos alveolares representam a
principal defesa celular do pulmão e são responsáveis pela fagocitose de partículas exógenas
entre outras mediações inflamatórias. São o tipo celular predominante do trato respiratório de
bezerros com mais de uma semana de vida, e guiam a resposta imunológica posterior,
recrutando outros tipos celulares e/ou componentes humorais locais ou do sangue (YEO et al.;
1993; ACKERMANN; DERSCHEID; ROTH, 2010).
Para este processo ser efetivo, as células das respostas imunes local e sistêmica
devem estar ativas. Existem pesquisas estudando a maturidade do sistema imunológico
sanguíneo (COSTA et al., 2008; FEITOSA et al., 2003; KAMPEN; TOLLERSRUD; LUND,
2004b), porém são poucos os trabalhos que avaliam a imunologia do sistema respiratório, e
quando o fazem, abordam indistintamente neonatos e animais adultos e os relacionam a
quadros infecciosos específicos (FAGLIARI, 2003; NIEMCZUK; BEDNAREK, 2003;
HAGBERG et al., 2005; GRELL et al., 2005a; GRELL et al., 2005b) ou a fatores que levam a
Síndrome do Estresse Respiratório (KARAPINAR; DABAK, 2008; BLEUL, 2009).
A função de macrófagos alveolares já foi estudada em leitões (DICKIE et al.,
2009), ratos neonatos (BAKKER et al., 1998); hamster adultos (KOBZIK; GODLESKI;
BRAIN, 1990) e equinos adultos (RAIDAL; BAILEY; LOVE, 1998a,b). Em bovinos,
Gonçalves (1997) e Wachholz (2002) avaliaram o sistema respiratório de bezerros, abordando
quantificações celulares mas não suas funções. Bertagnon (2003), estudou a inter-relação das
imunoglobulinas séricas e do trato respiratório durante o primeiro mês de vida, período em
que ainda há forte influência das imunoglobulinas colostrais.
Como a maturação da resposta inata do pulmão de bezerros pode ser gradual, e
não há pesquisas avaliando esta dinâmica de maturação em bovinos, o presente trabalho
avaliou a função dos macrófagos alveolares e as imunoglobulinas séricas e do lavado
broncoalveolar durante os primeiros três meses de vida dos bezerros, com a finalidade de
verificar quando esta resposta torna-se efetiva. Essa informação contribuirá para identificar
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Batista, 2011 7 CONCLUSÕES
Conclui-se que há variação etária funcional da imunidade inata de bezerros sadios,
embora seja sugestivo que essa não atinja sua maturidade nos três primeiros meses de idade.
As alterações pontuais se manifestam por volta dos 21 dias de idade, mas a partir dos
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Batista, 2011 REFERÊNCIAS
ABBAS, A. K.; LICHTMAN, A. H.; PILLAI, S. Imunologia celular e molecular. Rio de Janeiro: Elsevier, 2008. 564 p.
ACKERMAN, M. R.; DERSCHEID, R.; ROTH, J. A. Innate immunology of Bovine Respiratory Diseases. Veterinary Clinical Food Animals, v. 26, p. 215-228, 2010.
ALBERTS, B.; JOHNSON, A.; LEWIS, J.: RAFF, M.; ROBERTS, K.; WALTER, P.
Molecular biology of the cell. 4. ed. New York: Garland, 2002. 1616 p.
ALLEN, J.W.; VIEL, L.; BATEMAN, K. G.; ROSENDAL, S.; SHEWEN, P. E. Cytological findings in bronchoalveolar lavage fluid from feedlot calves: associations with pulmonary microbial flora. Canadian Journal Veterinary Research v.56. p.122-126, 1992.
ALVARENGA, F. C. L.; PRESTES, N. C.; SANTOS, T. C. M. Manejo de Neonato. In.: PRESTES, N. C.; ALVARENGA, F. C. L. Obstetrícia Veterinária., Rio de Janeiro: Guanabara Koogan. 2006. p. 158-177.
AMERICAN THORACIC SOCIETY. Clinical role of bronchoalveolar lavage in adults with pulmonary disease. American Review Respiratory Disease, v.142, p. 481–486, 1990.
AMES, T. R.; BAKER, J. C.; WIKSE, S. E. As broncopneumonias (Complexo de Doenças Respiratórias de Bovinos, Ovinos e Caprinos). In: SMITH, B. P. Medicina interna de
grandes animais. 3º ed. São Paulo: Manole, 2006. p. 511-570.
ANDREWS, A. H.; PRITCHARD, D. G.; MORZARIA, S. P.; GILMOUR, N. J. L. Observations on a respiratory disease outbreak in weaned suckled calves. Veterinary
Records, v. 108, p. 130-142, 1981.
ANTONIS, A. F. G.; JONG, M. C.; VAN DER POEL, W. H. M.; VAN DER MOST, R. G.; STOCKHOFE-ZURWIEDEN,N.; KIMMAN, T.; SCHRIJVER, R. S. Age-dependent differences in the pathogenesis of bovine respiratory syncytial virus infections related to the development of natural immunocompetence. Journal of General Virology. v. 91, p. 2497– 2506, 2010.
AZEDO, M. R. Influência da leucose enzoótica bovina na atividade oxidativa de
leucócitos. 2007. 151 f. Dissertação (Mestrado em Clínica Veterinária) – Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2007.
BAKER, J. M.; BROUG-HOLUB, E.; KROES, H.; VAN REES, E. P.; KRAAL, G.; VAN IWAARDEN, J. F. Functional immaturity of rat alveolar macrophages during postnatal development. Immunology. v. 94, p. 304 – 309, 1998.
R e f e r ê n c i a s | 110
Batista, 2011
BARROS, M. S. R. M.; CASTRO, R. S.; TABOSA, J. H. C.; BRITO, M. F.; AMARAL, B. Colheita do fluído brônquico - alveolar de bezerros através da traqueocentese transcutânea.
Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v. 46, n. 1, p. 41-49, 1994.
BARRY, S. M.; CONDEZ, A.; JOHNSON, M. A.; JONOSSY, G. Determination of
bronchoalveolar lavage leukocyte populations by flow cytometry in patients investigated for respiratory disease. Cytometry (Clinical Cytometry), v. 50, p. 291-297, 2002.
BASS, D. A.; PARCE, J. W.; DECHATELET, L. R.; SZEJDA, P.; SEEDS, M. C.; THOMAS, M. Flow cytometric studies of oxidative product formation by neutrophils: a graded response to membrane stimulation. Journal of Immunology, v.130, n. 4, p.1910-1917, 1983.
BEGIN, R.; ROLA-PLESZCZYNSKI, M.; SIROIS, P.; MASSEE, S.; NADEAU, P.;
BUREAU M.A. Sequential analysis of bronchoalveolar milieu in conscious sheep. Journal
Apply Physiology, v. 50, p. 665-671, 1981.
BENESI F. J. Hematologia de bezerros recém-nascidos. Influência da asfixia neonatal, do
tipo de parto e da ingestão de colostro sobre a crase sanguínea. 1992. 126p.Tese de
Livre-Docência, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, São Paulo, 1992.
BENESI, F. J. Síndrome asfixia neonatal dos bezerros. Importância e avaliação crítica.
Arquivos da Escola de Medicina Veterinária da Universidade Federal da Bahia, v. 16, n.
p. 38-48, 1993.
BENESI, F. J. Diarréia infecciosa neonatal dos bezerros. In: SIMPÓSIO PFIZER SOBRE DOENÇAS INFECCIOSAS E VACINAS PARA BOVINOS, São Paulo, 1996. p.15-24.
BERTAGNON, H. G. Perfil de variação de imunoglobulinas no trato respiratório de
bezerros holandeses sadios durante o primeiro mês de vida. 2003. 125 f. Dissertação
(Mestrado em Clínica Veterinária) – Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2003.
BERTAGNON, H. G.; SILVA, P. E. G.; WACHHOLZ, L.; LEAL, M. L. R.; FERNANDES, W. R.; BENESI, F. J. Imunoglobulinas no trato respiratório de bezerros sadios durante o primeiro mês de vida. Pesquisa Veterinária Brasileira, v. 27, n. 12, p. 487-490, 2007.
BILYK, N.; HOLT, P. G. Inhibition of the immunosuppressive activity of resident pulmonary
alveolar macrophages by granulacite/macrophage colony – stimulating factor. Journal of
experimental medicine. V. 177, p.1773 – 1777, 1993.
BIRGEL, E. H. Hematologia Clínica Veterinária. In: BIRGEL, E. H. BENESI, F. J. Patologia
clínica Veterinária. São Paulo: Sociedade Paulista de Medicina Veterinária, 1982. p. 2-49.
BLAGITZ, M. G. Avaliação funcional de fagócitos sanguíneos e lácteos de vacas
R e f e r ê n c i a s | 111
Batista, 2011
Ciências) – Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, São Paulo. 2011.
BLAND, R. D. Formation of fetal lung liquid and its removal near birth In: OX, W.W. Fetal
and new natal physiology. 2. ed. Philadelphia: W.B. sounders, 1998. p. 1047-1054.
BLEUL, U. Respiratory distress syndrome in calves. Veterinary Clinics of North America
Food Animal Practice, v. 25, p. 179-193, 2009.
BLOOD, D. C.; RADOSTITS, O. M. Veterinary medicine. 7. ed. London: Bailliére Tindall, 1989. p. 299-318.
BOHLAND, E. Atividade funcional de polimorfonucleares do sangue de bezerros
neonatos versus Escherichia coli 'in vitro': influencia do volume de colostro mamados e da idade. 2008. Tese (Doutorado em Clínica Veterinária) - Faculdade de Medicina
Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo, 2008. 166f.
BORGES, A. S.; FEITOSA, F. L. F.; BENESI, F. J.; BIRGEL, E. H.; MENDES, L. C. N. Influência da forma de administração e da quantidade de colostro sobre a concentração de proteína total e de suas frações eletroforéticas no soro sanguíneo de bezerros da raça
Holandesa. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v. 53, n. 05, p. 629-634, 2001.
BURTON, J. L.; ERSKINE, R. J. Immunity and mastitis some new ideas for an old disease.
The Veterinary Clinical Food Animal Practice, v. 19, p. 1-45, 2003.
CALLEGARI-JACQUES, S. M. Bioestatística: princípios e aplicações. Porto Alegre: Artmed, 2003. 256 p.
CANTINIEAUX, B.; HARIGA, C.; COURTOY, P.; HUPIN, J.; FONDU, P. Staphylococcus aureus phagocytosis: A new cytofluorometric method using FITC and paraformaldehyde.
Journal of immunological Methods, v. 121, p. 203-208, 1989.
CLARK, L. C. Monitor and control of blood and tissue oxygen tensions. Transactions
American Society for Artificial Internal Organs, v. 2, p. 41-48, 1956.
COOPER, V. L.; BRODERSEN, B. W. Respiratory disease diagnostics of cattle. Veterinary
Clinics of North America Food Animal Practice, v. 26, p. 409-416, 2010.
CORSTVET, R. E.; RUMMAGE J. A.; HOMER J. T. Recovery of pulmonary alveolar macrophages from no anaesthetized calves. American Journal Veterinary Research, v. 43, 2253-2254. 1982.
CORTESE, V. Neonatal Immunology. Veterinary Clinical Food Animals, v. 25, p. 221– 227, 2009.
COSTA, J. N.; PEIXOTO, A. P. C.; KOHAYAGAWA, A.; SOUZA, T. S. Proteinograma sérico de bezerras da raça Holandesa do nascimento aos 150 dias de idade. Revista Brasileira
R e f e r ê n c i a s | 112
Batista, 2011
COSTA, M. C.; FLAIBAN, K. K. M. C.; CONEGLIAN, M. M.; DOGNANI, R.; VETTORATO, E. D.; BALARIN, M. R. S.; LISBÔA, J. A. Metabolismo oxidativo dos neutrófilos de bezerros das raças Nelore e Limousin nos primeiros quatro meses de vida.
Pesquisa Veterinária Brasileira. v. 28, n.9, p. 431-436, 2008.
COUTINHO, A. S. Complexo das doenças respiratórias de bezerros. In: SIMPÓSIO
MINEIRO DE BUIATRIA, 2005. Belo Horizonte. 2005.
DICKIE, R; TASAT, D.R.; FERNANDEZ ALANIS, E.; DELFOSSE V.; TSUDA A.L. Age-dependent changes in porcine alveolar macrophage function during the postnatal period of
alveolarization. Developmental and Comparative Immunology. v. 33, p. 145–151, 2009.
DIRKSEN, G.; GRUNDER, H. D.; STOBER, M. Rosenberger: exame clínico dos bovinos. 3. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 1993. 419 p.
DUNCAN, H. P. Physiology of fetal adaptation at birth. Current Paediatrics, v.9, p.118-122, 1999.
ECKERSALL, P. D. The time is right for acute phase proteins assays. The Veterinary
Journal, London, v. 168, p. 3-5, 2004.
EUROPEAN SOCIETY OF PNEUMOLOGY TASK GROUP ON BAL. Technical
recommendations and guidelines for bronchoalveolar lavage (BAL). Europe. Respiratory
Journal. v. 2. p. 561–585, 1989.
FAGLIARI, J. J.; SANTANA, A. E.; LUCAS, F. A.; CAMPOS FILHO, E.; CURI, P. R. Constituintes sanguíneos de bovinos recém-nascidos das raças Nelore (Bos indicus) e Holandesa (Bos taurus) e de bubalinos (Bubalus bubalis) da raça Murrah. Arquivos
Brasileiro Medicina Veterinária Zootecnia. v. 50, n.3. p. 253-262, 1998.
FAGLIARI, J. J. Estudo clínico e laboratorial da pneumonia de bezerros induzida pela inoculação intrabronquial de Mannheimia haemolytica. Arquivo Brasileiro de Medicina
Veterinária e Zootecnia, v. 55, n. 1, p. 8-14, 2003.
FAGLIARI, J. J.; RIZOLLI, F. W.; SILVA, S. L.; SILVA, D. G. Proteinograma sérico de bezerros recém-nascidos da raça Holandesa obtido por eletroforese em gel de poliacrilamida.
Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v. 58, n. 3, p. 450-453, 2006.
FEITOSA, F. L. F. Dinâmica do Proteinograma e da atividade da
Gamaglutamiltranferase no soro sanguíneo de bezerros desde o nascimento até um ano de idade e de vacas, antes e após o parto, da raça holandesa. 1998 219 f. Tese (Doutorado
em Clínica Veterinária) – Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, São Paulo, 1998.
R e f e r ê n c i a s | 113
Batista, 2011
FEITOSA, F. L. F.; BIRGEL, E. H.; MIRANDOLA, R. M. S.; PERRI, S. H. V.
Proteinograma sérico de bezerros holandeses do nascimento até um ano de vida. Revista
Brasileira de Ciência Veterinária, v. 8, n. 2, p. 105-108, 2001b.
FEITOSA, F. L. F.; BORGES, A. S.; BENESI, F. J.; BIRGEL, E. H.; MENDES, L. C. N.; PEIRÓ, J. R. Concentração de imunoglobulinas G e M no soro sanguíneo de bezerros da raça Holandesa até os 90 dias de idade. Brazilian Journal of Veterinary Research and Anima
Science, v. 40, p. 26-31, 2003. Suplemento 1.
FEITOSA, F. L. F.; CAMARGO, D. G.; YANAKA, R.; MENDES, L. C. N.; PEIRÓ, J. R.; BOVINO, F.; LISBÔA, J. A. N.; PERRI, S. H. V.; GASPARELI, E. R. F. Índices de falha de transferência de imunidade passiva (FTIP) em bezerros holandeses e nelores, às 24 e 48 horas de vida: valores de proteína total, de gamaglobulina, de imunoglobulina G e da atividade sérica da gamaglutamiltransferase, para o diagnóstico de FTIP. Pesquisa Veterinária
Brasileira, v. 30, n. 8, p. 696-704, 2010.
FERNANDES, R. W. Estudo clínico e da dinâmica de imunoglobulinas séricas e no
lavado Broncolaveolar de eqüinos experimentalmente infectados com herpesvírus eqüino tipo 1. 2001. 92 f. Tese (Livre Docência)- Faculdade de Medicina Veterinária e
Zootecnia, Universidade de São Paulo, 2001.
FISHER, E.W.; SIBARTIE, D.; GRIMSHAW, W. T. R. A comparison of the pH, pCO2,
pO2 and total CO2 content in blood from the brachial and caudal auricular arteries in normal
cattle. British Veterinary Journal, v. 136, p. 496-499, 1980.
FLAMINIO, M. J. B. F.; RUSH, B. R.; DAVIS, E. G.; HENNESSY, K.; SHUMAN, W.; WILKERSON, M. J. Characterization of peripheral blood and pulmonary leukocyte function in healthy foals. Veterinary Immunology and Immunopathology, v. 73, p. 267-285, 2000.
FOGARTY, U; QUINN, P. J., HANNAN, J. Bronchopulmonary lavage in the calf: a new technique. lrish Veterinary Journal, v. 37, p. 35-38, 1983.
FOX, M. L. The bovine alveolar macrophage, 1. Isolation, in vitro cultivation, ultrastructure and phagocytosis. Canadian Journal Microbiology, v. 19, p. 1207-1210, 1973.
FRANZ, S. Importance of endoscopic techniques for diagnosis and therapy in ruminants.
Hungarian Veterinary Journal, v. 130 p. 33-36, 2008. Suplement 1
FRIEDMAN, H. S. A standardized procedure for serum protein electrophoresis on cellulose acetate membrane strips. Clinica Chimica Acta, v. 6, p. 775-781, 1961.
GARN, H. Specific aspects of flow cytometric analysis of cells from the lung. Experimental
and toxicologic pathology, v. 57, p.2 1-24, 2006. Suplement 2.
GONÇALVES, R. C. Estudo clínico e citológico em bezerros clinicamente sadios e
portadores de broncopneumonia moderada e grave: o lavado traqueobrônquico como
R e f e r ê n c i a s | 114
Batista, 2011
GONÇALVES, R. C.; KUCHEMBUCK, M. R. G.; ALMEIDA, C. T. Lavagem
traqueobrônquica por traqueocentese em bovinos. Revista da Faculdade de Veterinária e
Zootecnia – UNESP, v. 2, p. 17-25, 1990.
GONÇALVES, R. C.; LISBÔA, J. A. N.; SOUSA, M. V.; A. C. T.; KUCHEMBUCK, M. R. G.; C. S. B. Aspectos clínicos e epidemiológicos da broncopneumonia dos bezerros em Botucatu, SP. Revista Brasileira de Ciências Veterinárias. v. 7, p. 144-147, 2000.
GONÇALVES, R. C.; FEITOSA, F. L. F. Semiologia do sistema respiratório de grandes animais. In: FEITOSA, F.L.F. Semiologia veterinária: a arte do diagnostico. São Paulo: Roca, 2008. p. 275-306.
GONÇALVES, R. C.; KUCHEMBUCK, M. R. G.; CURI, P. R.; CHIACCHIO, S. B.; ALMEIDA, C. T.; BORGES, A. S. Diferenciação clínica da broncopneumonia moderada e grave em bezerros. Ciência Rural, Santa Maria, v. 31, n. 2, p. 263-269, 2001.
GONÇALVES, R. C. MATTOS, M. C. F. I; KUCHEMBUCK, M. R. G.; LOPES, R. S.; BORGES, A. S. Lavagem traqueobrônquica por sondagem nasotraqueal em bezerros.
Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v. 56, n. 3, p. 307-311, 2004.
GONÇALVES, R. C.; LISBOA, J. A. N.; SOUZA, M. V.; ALMEIDA, C. T.; KUCHEMBUCK, M. R. G. Doenças de bezerro. Pneumonia. Aspectos clínicos e epidemiológicos na região de Botucatu. In: Congresso Internacional de Medicina
Veterinária em Língua Portuguesa, 6, 1993. Salvador. Anais... Salvador, 1993. 289p.
GORDEN, P. J.; PLUMMER, P. Control, Management and Prevention of Bovine
Respiratory disease in dairy calves and cows. The veterinary clinics of the North America
food animal practice, v. 26, n. 2, p. 243-259, 2010.
GORNALL, A. G.; BARDAWILL, C. J.; DAVID, M. M. Determination of serum proteins by meas of biuret reaction. Journal of Biological Chemistry, v. 177, n. 2, p. 751-766, 1949.
GRELL, S. N.; KIRSTEN TJORNEHOJ, U. R.; LARSEN, L. E.; HEEGAARD, M. H. Age-dependent differences in cytokine and antibody responses after experimental RSV infection in a bovine model. Vaccine, v. 2, p. 3412–3423, 2005a.
GRELL, S. N.; KIRSTEN TJORNEHOJ, U. R.; LARSEN, L. E.; HEEGAARD, M. H. Marked induction of IL-6, haptoglobin and IFNg following experimental BRSV infection in young calves. Veterinary Immunology Immunopathology. v.103, p. 235–245, 2005b.
GRIFFITH, D,; BLEVINS, W,; GIRARD, B,; CARTER, R,; KURDOWSKA, A. Single-cycle lavage provides estimates of solute concentrations in the epithelial lining fluid of specific regions of the lungs. Europe Respiratory Journal. v.24.10s. 2004. Suplement 48.
GUTH, A. M.; JANSEN, W. J.; BOSIO, C. M.; CROUCH, E. C.; HENSON, P. M.; DOW, S. W. Lung environment determines unique phenotype of alveolar macrophages. American
Journal Physiology Lung Cellular Molecular Physiology, v. 296, p. L936-L946, 2009.
HAGBERG, M.; WATTRANG, E.; NISKANEN, R.; TRAVEN, M.; HOGLUND, J.;
R e f e r ê n c i a s | 115
Batista, 2011
viviparus infection of calves: a potential role for gamma/delta TCR-expressing cells in airway immune responses? Parasite Immunology (Oxford). v.27, n. 5, p. 151-161, 2005.
HASUI, M,; HIRABAYASHI, Y.; YOHNOSUKE, K. Simultaneous measurement by flow cytometry of phagocytosis and hydrogen peroxide production of neutrophils in whole blood.
Journal of Immunological Methods, v. 117, n. 1, p. 53-58, 1989.
HAUSER, M. A.; KOOB, M. D.; ROTH, J. A. Variation of neutrophil function with age in calves. American Journal Veterinary Research, v. 47, n. 1, p. 152- 153. 1986
HEARST, J .E., WARR, J. A., JAKAB, G. J., Characterization of murine lung and peritoneal macrophages. Journal Reticuloendothel. Society., v. 27, p. 631-637. 1980.
HECKER, R. A.; SAIF, L. J.; MENGEL, J. P.; MYERS, G. W. Mucosal and systemic antibody responses to bovine coronavirus structural proteins in experimentally challenge-exposed calves fed low or high amounts of colostral antibodies. American Journal
Veterinary Research, v. 52, n. 5, p. 700-708, 1991b.
HECKER, R. A.; SAIF, L. J.; MENGEL, J. P.; MYERS, G. W. Isotype- specific antibody responses to bovine coronavirus structural proteins in serum, feces, and mucosal secretions from experimentally challenge-exposed colostrum- deprived calves. American Journal
Veterinary Research, v. 52, n. 5, p. 692-699, 1991a.
HENNIG-PAUKA, I.; BREMERICH, S.; NIENHOFF, H.; SCHRODER, C.; GANTER, M.; BLECHA, F.; WALDMANN, K. H.; GERLACH, G. F. Comparison of Three Common Methods of Lung Lavage in Healthy Pigs. Journal Veterinary Medicine Association, v. 54, p. 428–433, 2007.
HIRABAYASHI, Y.; TANIUCHI, S.; KOBAYASHI, Y. A quantitative assay of oxidative metabolism by neutrophils in whole blood using flow cytometry. Journal of immunology
and Immunopathology, v. 112, n. 1-2, p. 12-23, 2006.
KLEBANOFF, S. J. Oxygen metabolism and the toxic properties of phagocytes. Annals of
Internal Medicine. v. 93, n.3, p. 480 – 489. 1989.
IBGE. INSTITUTO BRASILEIRO DE GEOGRAFIA E ESTATÍSTICA. Indicadores do IBGE: estatística da produção pecuária. 2011. Disponível em:
<http://www.ibge.gov.br/home/estatistica/indicadores/agropecuaria/producaoagropecuaria/ab ate-leite-couro-ovos_201004_publ_completa.pdf>. Acesso em:15 jun. 2011.
JANEWAY, C. A.; TRAVERS, P.; WALPORT, M.; SHLOMCHIK, M. J. Immunology: the
immune system in health and disease. 6. ed. New York: Garland, 2004. 800 p.
R e f e r ê n c i a s | 116
Batista, 2011
KALTREIDER H. B.; TURNER F. N.; SALMON S. E. A canine model for comparative studies of respiratory and systemic immunological reactions. American Review Respiratory
Disease, v. 111, p. 257-265, 1975.
KAMPEM, A. H.; TOLLERSRUD, T.; LARSEN, S.; ROTH, J. A.; FRANK, D. E.; LUND, A. Repeatibility of flow cytometric and classical measurement of phagocytosis and
respiratory burst in bovine polymorphonuclear leukocytes. Veterinary Immunology and
Immunopathology, v.97, n.1-2, p. 405-414, 2004a.
KAMPEM, A. H.; TOLLERSRUD, T.; LUND, A. Flow citometric measurement of
neutrophil respiratory burst in whole bovine blood using live Staphylococcus aureus. Journal
of Immunological Methods, v. 289, n.1-2, p.47-55, 2004b.
KARAPINAR, T.; DABAK, M. Treatment of premature calves with clinically diagnosed respiratory distress syndrome. Journal of Veterinary Internal Medicine, v.2, n. 22, p. 462-466, 2008.
KASARI, T. R. Physiologic mechanisms of adaptation in the fetal calf at birth. Veterinary
Clinics of North America: Food Animal Practice, v. 10, n. 1, p. 127 – 136, 1994.
KHADOM, N. J.; DEDIEU, J. F.; VISO, M. Bovine alveolar macrophage: A Review.
Annales de Recherches Vétérinaires, v. 16, n. 3, p. 175-183, 1985.
KLEBANOFF, S. J. Oxygen metabolism and the toxic properties of phagocytes. Annals
Internal Medicine, v. 93, p. 480, 1980.
KOBZIK, L.; GODLESKI, J. J.; BRAIN, J. D. Selective down regulation of alveolar
macrophage oxidative response to opsonin-independent phagocytosis. Journal Immunology, v. 144, p. 4312-4319, 1990.
KOESS, C.; HAMANN, J. Detection of mastitis in the bovine mammary gland by flow cytometry at early stages. Journal of Dairy Research, v. 75, n. 2, p. 225-232, 2008.
KOTERBA, A. M. Identificação do neonato de alto risco. Distúrbios e tratamento do neonato. In: SMITH, B. P. Tratado de medicina interna de grandes animais. São Paulo: Manole, 1993. v. 1, p. 299-301.
LEAL, M. L. R.; BENESI, F. J.; LISBÔA, J. A. N.; COELHO, C. S.; MIRANDOLA, R. M. S. Proteinograma sérico de bezerras sadias, da raça holandesa, no primeiro mês
pós-nascimento. Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science, v. 40, n. 2, p. 138-145, 2003.
LEE, J. W.; PAAPE, M. J.; ELSASSER, T. H.; ZHAO, X. Elevated milk soluble CD14 in bovine mammary glands challenged with Escherichia coli lipopolysaccharide. Journal of
Dairy Science, v. 86, n. 7, p. 2382-2389, 2003.
R e f e r ê n c i a s | 117
Batista, 2011
LEKEUX, P. Síndrome Respiratória dos Bovinos: Uma Perspectiva Européia. Simpósio Internacional Sobre Doença Respiratória Bovina. In: CONGRESSO MUNDIAL DE BUIATRIA. FRANÇA. Resumos ... 18, 1994, França. 1994. p. 7-13.
LISBOA, J. A. N.; BENESI, F. J.; MARUTA, C. A.; MIRANDOLA, R. M. S.; TEIXEIRA, C. M. C. Tempo de viabilidade de amostras de sangue venoso bovino destinadas ao exame hemogasométrico quando mantidas sob conservação em água gelada. Ciência Rural, v.31, n. 2, p. 271-276, 2001.
LOHMANN-MATTHES, M.L.; STEINMÜLLER, C.; FRANKE-ULLMANN, G. Pulmonary macrophages. European Respiratory Journal, v. 7, p. 1678-1689, 1994.
LOHMEYER, J.; FRIEDRICH, J.; ROSSEAU, S.; PRALLE, H. SEEGER, W.
Multiparameter flow cytometric analysis of inflammatory cells contained in bronchoalveolar lavage fluid. Journal of Immunological Methods, v. 172, p. 59-70, 1994.
MASSOCO, C.; PALERMO-NETO, J. Effects of midazolan on equine innate imune
response: a flow cytometric study. Veterinary Immunology and Immunopathologyn, v. 95, p. 11-19, 2003.
MAYER, L. Mucosal immunity. Pediatrics. v. 111, n. 6. Pt 3, p. 1595 -1600, 2003.
MC GUIRE, R. L.; BABIUK, L. A. Evidence for defective neutrophil function in calves exposed to infectious bovine rhinotracheitis virus. Veterinary Immunology and
Immunopathology, v. 5, p. 259-271, 1984.
MCCOY JR, J. P. Basic principles in clinical flow cytometry. In: KEREN, D. F.; HANSON, C. A.; HURTUBISE, P. E. (Ed.). Flow cytometry and clinical diagnosis. Chicago:
American Society of Clinical Pathologists, 1994. p. 26-55.
MUGGENBURG, B. A.; MAUDERLY, J. L.; HALLIWELL, V. H.; SLAUSON, D. O. Cardiopulmonary function and morphologic changes in Beagle dogs after multiple lung lavages. Archives Environment Nealth, v.35, p. 85-91, 1980.
MYRVIK, O. N.; LEAK, E. S.; FARISS, B. Lysozyme content of alveolar and peritoneal macrophage from rabbit. Journal Immunology, v. 86, p.133-136, 1961.
NIEMCZUK, K.; BEDNAREK, D. Changes in the peripheral leukocyte phenotype of calves in clinical cases of bronchopneumonia complicated with chlamydial co-infectious agent.
Polish Journal of Veterinary Sciences, v. 6, n. 2, p. 125-129, 2003.
NOGUEIRA, R. B.; PARDO, P. E. Terapêutica do sistema respiratório. In: ANDRADE, S. F.
Manual de terapêutica veterinária. 2. ed. São Paulo: Rocca, 2001. p. 206 – 215.
PAAPE, M. J.; WERGIN, W. P.; GUIDRY, A. J.; SCHULTZE, W. D. Phagocytic defense of the ruminant mammary gland. Advances in Experimental Medicine and Biology, v. 137, p. 555-578, 1981.
R e f e r ê n c i a s | 118
Batista, 2011
branca – Influência dos fatores etários. Revista brasileira de saúde e produção animal, v. 3, n. 1, p. 16 -20, 2002.
PETERSON, B. T.; IDELL, S.; MACARTHUR, C.; GRAY, L. D.; COHEN, A. B. A
modified bronchoalveolar lavage procedure that allows measurement of lung epithelial lining fluid volume. American Review Respiratory Disease, v. 141. p. 314-320, 1990.
PHIPPS, R. J.; ABRAHAM, W. M.; MARIASSAY, A. T. TERREALBA, P. J.; SIELCZAK, M. W.; AHMED, A.; MACCRAY, M.; STEVENSON, J. S.; WANNER, A. Developmental chances in the tracheal mucociliary system in neonatal sheep. Journal Applied Physiology, v. 67, p. 824- 832, 1989.
PICCIONE, G.; CASELLA, S.; PENNISI, P.; GIANNETTO, C.; COSTA, A.; CAOLA, G. Monitoring of physiological and blood parameters during perinatal and neonatal period in calves. Arquivos Brasileiros Medicina Veterinaria Zootecnia, v. 62, n. 1, p. 1-12, 2010.
PIEPERS, S.; DE VLIEGHER, S.; DEMEYERE, K.; LAMRECHT, B. N.; KRUIF, A.; MEYER, E.; OPSOMER, G. Technical note: Flow cytometric identification of bovine milk netrophils and simultaneous quantification of their viability. Journal of Dairy Science, v. 92, p. 626-631, 2009.
POULSEN, K. P.; McGUIRK, S. M. Respiratory Disease of Bovine Neonate. Veterinary
Clinics of North America Food Animal Practice, v. 25, p.121-137, 2009.
PRINGLE, J. K.; VIEL, L.; SHEWEN, P. E.; WILLOUGHBY, R. A.; MARTIN, S. W.; VALLI, V. E. O. Bronchoalveolar lavage of cranial and caudal lung regions in selected normal calves: Cellular, microbiological, immunoglobulin, serological and hitological variables. Canadian Journal of Veterinary Research, v. 52, n. 2, p. 239-248, 1988.
RABELO, S. S. A.; LIMA JUNIOR, A. D.; CASTRO, R. S.; TABOSA, J. H. C. Sazonalidade da broncopneumonia em bezerros da microrregião de Garanhuns, Pernambuco (1983-1991).
Arquivos Brasileiros de Medicina Veterinária e Zootecnia, v. 48, n. 1, p. 19-26, 1996.
RADOSTITIS, O. M.; GAY, C. C.; BLOOD, D. C.; HINCHCLIFF, K. W. Doenças do sistema respiratório. In: RADOSTITIS, O.M.; GAY, C.C.; BLOOD, D.C.; HINCHCLIFF, K.W. Clínica Veterinária. Um Tratado de Doenças dos Bovinos, Ovinos, Suínos
Caprinos e Eqüinos. 9º Ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2002. p. 377-427.
RAIDAL, S. L; BAILEY, G. D.; LOVE, D. N. The Flow cytometric evaluation of
phagocytosis by equine peripheral blood neutrophils and pulmonary alveolar macrophages.
The Veterinary Journal, v. 156, p.107-116, 1998a.
RAIDAL, S. L; BAILEY, G. D.; LOVE, D. N. Flow cytometric determination of oxidative burst activity of equine peripheral blood and bronchoalveolar lavage – derived leucocytes.
The Veterinary Journal, v. 156, p.117-126, 1998b.
R e f e r ê n c i a s | 119
Batista, 2011
ROSENFELD, G. Corante pancrômico para hematologia e citologia clínica. Nova
combinação dos componentes do may-grunwald e do giemsa num só corante de emprego rápido. Memórias do Instituto Butantan, v. 20, p. 329-335, 1947.
SANTRA, A. K.; PACHALAG, S. V. Mortality pattern in crossbred calves. Indian Journal of
Animal Sciences, v. 66, n. 3, p. 237-238, 1996.
SEGRE, C. A.M. Taquipneia transitória do RN. In: SEGRE, C. A.M. Perinatologia –
fundamentos e prática. São Paulo: Sarvier, 2002. p. 504 – 506.
SILVA, R. O. P.; LOPES, A .F.; FARIA, R. M. D. Eletroforese de proteínas séricas:
interpretação e correlação clínica. Revista Médica de Minas Gerais; v.18, n. 2, p. 116-122, 2008.
SILVEIRA, L. R. Considerações críticas e metodológicas na determinação de espécies reativas de oxigênio e nitrogênio em células musculares durante contrações. Arquivos
Brasileiros de Endocrinologia e Metabologia, v. 48, n. 6, p. 812-822, 2004.
SLADEK, Z.; RYZNAROVA, H.; RYSANEK, D. Macrophages of the bovine heifer
mammary gland: Morphological features during initiation and resolution of the inflammatory response. Anatomia, Histologia, Embryologia, v. 35, p. 116-124, 2006.
SMITS, E.; BURVENICH, C.; HEYNEMAN, R. Simultaneous flow cytometric measurement of phagocytotic and oxidative burst activity of polymorphonuclear leukocytes in whole bovine blood. Veterinary Immunology and Immunopathology, v. 56, n. 3-4, p. 259-69, 1997.
SNOWDER,G. D.; VAN VLECK, L. D.; CUNDIFF, L.V.; BENNETT, G. L. Bovine respiratory disease in feedlot cattle: Environmental, genetic, and economic factors. Journal
Animals Science, v. 84, p. 1999-2008, 2006.
SOETHOUT, E. C.; MÜLLER, K. E.; VAN DEN BELT, A. J. M.; RUTTEN, V. P. M. G. Identification and Phenotyping of Leukocytes in Bovine Bronchoalveolar Lavage Fluid.
Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology, v. 11, n. 4, p. 795-798, 2004.
SOH, N. Recent advances in fluorescent probes for the detection of reactive oxygen species.
Analytical and Bioanalytical Chemistry, v. 386, n. 3, p. 532 – 543, 2006.
SOUZA, F. N. Avaliação do estresse oxidativo sob a resposta immune de bovines
infectados pelo vírus da leucose enzoótica bovina. 2010. 83 f. Dissertação (Mestrado em
Ciências) – Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2010.
STIERSCHNEIDER, M.; FRANZ, S.; BAUMGARTNER, W. Endoscopic examination of the upper respiratory tract and oesophagus in small ruminants: Technique and normal appearance.
The Veterinary Journal, v.173, p. 101-108, 2007.
STÖBER, M. Aparelho Respiratório. In: DIRKSEN, G.; GRÜNDER, H. D.; STÖBER, M.
R e f e r ê n c i a s | 120
Batista, 2011
TAVERA, E. T.; TAVERA, F. T.; LUGO, G. H.; CASILLAS, C. R.; VILLALOBOS, M. B. Patologia y bacteriologia de pulmones neumónicos de becerros. Veterinária del México, v. 13, p. 131-140, 1982.
THRUNAVUKKARASU, P.; SENTHILKUMAR, G.; DHANAPALAN, P.; VASU, K. Bronchoalveolar findings in bovine respiratory disorders. Indian Veterinary Journal, v. 82, p. 1206-1207, 2005.
TIZARD, I.R. Veterinary immunology: an introduction. 8.ed. St.Louis, Missouri. Elsevier. 2009. 574p.
UNDERHILL, D. M.; OZINSKY, A. Phagocytosis of microbes: Complexity in action.
Annual Review Immunology, v.20, p. 825-852, 2002.
VIKSMAN, M. Y.; LIU, M. C.; SCHLEIMER, R. P.; BOCHNER, B. S. Application of a flow cytometric method using autofluorescence abd tandem fluorescent dye to analyze human alveolar macrophage surface markers. Journal of Immunological Methods, v. 137, p. 17-24, 1994.
VOWELLS, S. J.; SEKHSARIA, S.; MALECH, H. L.; SHALIT, M.; FLEISHER, T. A. Flow cytometric analysis of the granulocyte respiratory burst: a comparison study of fluorescent probes. Journal of Immunological Methods, v. 178, n. 1, p. 89-97, 1995.
WACHHOLZ, L. Citologia dos lavados traqueobrônquicos (LTB) e broncoalveolar
(LBA) de bezerros holandeses sem alterações respiratórias, no primeiro mês de vida.
2002. 106 f. Dissertação (Mestrado em Clínica Veterinária) – Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2002.
WEISS, D. J.; WARDROP, K. J. Schalm's veterinary hematology, 6 ed, Iowa: Blackwell Publishing. 2010. 1206 p.
WILKIE, B. N.; MARKHAM R. J. F.; SHEWEN P.E. Response of calves to lung challenge exposure with Pasteurella haemolytica after parenteral or pulmonary immunization. American Journal Veterinary Research, v.41, p. 1773-1778. 1980.
WILKIE, B. N.; MARKHAM R. J. F. Sequential titration of bovine lung and serum antibodies after parenteral or pulmonary inoculation with Pasteurella haemolytica.
American Journal Veterinary Research, v.40, p. 1690-1693, 1979.
WILKIE, B. N.; MARKHAM R. J .F. Bronchoalveolar washing cells and immunoglobulins of clinically normal calves. American Journal Veterinary Research, v. 42, p. 241-243; 1981.
WILKIE, B. N. Respiratory tract immune response to microbial pathogens. Journal of the
American Veterinary Medical Association, v.181, n. 10, p. 1074-1079, 1982.
R e f e r ê n c i a s | 121
Batista, 2011
