Pesquisa de anticorpos anti Toxoplasma gondii em fluidos intra-oculares (humor vítreo e humor aquoso) de pacientes com toxoplasmose ocular, na cidade de Belém, PA.

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Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical 3 8 ( 1 ) :7 7 -7 9 , jan-fev, 2 0 0 5

_{COMUNICAÇÃO/COMMUNICATION}

A toxoplasmose, infecção causada pelo To xo pla sm a go ndii, é uma das protozooses mais comuns em todo o mundo, apresentando diferentes formas clínicas e dentre elas a ocular. Esta forma é uma das mais importantes causas mundiais de uveítes posteriores1 15_{. A}

forma ocular de toxoplasmose pode ser de origem congênita com manifestações clínicas precoces ou tardias, ou ainda ser adquirida após o nasc imento. A manifestaç ão oc ular mais c omum é a r e tino c o r o idite gr anulo mato sa ne c r o tizante que po de vir acompanhada de outras alterações oculares5 8 12 14_{. O diagnóstico da}

toxoplasmose ocular é presuntivo, baseando-se na análise conjunta do quadro clínico observado, testes sorológicos e exclusão de outras etiologias como sífilis, CMV, toxocaríase e outras9_.

1 . Pro grama de To xo plasmo se do Instituto Evandro Chagas da Sec retaria de Vigilânc ia em Saúde, Ministério da Saúde, B elém, PA. 2 . Clínic a de Olho s do Pará, B elém, PA. 3 . Núc leo de Medic ina Tro pic al da Universidade Federal do Pará, B elém, PA.

Supo rte Financ eiro : Instituto Evandro Chagas/SVS-MS, Pro j eto RENOR/FADESP ( Nº 2 4 9 ) .

En de r e ço par a cor r e spon dê n ci a: Dr. Edic lei Lima do Carmo . Seç ão de Parasito lo gia/Instituto Evandro Chagas. Ro do via B R 3 1 6 -KM 0 7 s/nº, B airro Levilândia, 6 6 0 9 0 -0 0 0 B elém, PA.

Tel: 5 5 9 1 2 1 4 -2 1 4 8 , Fax: 5 5 9 1 2 1 4 -2 0 4 3 . e-mail: edic leic armo @ iec .pa.go v.br Rec ebido para public aç ão em 1 0 /8 /2 0 0 4 Ac eito em 2 7 /9 /2 0 0 4

Pesquisa de anticorpos anti

Toxoplasma gon dii

em fluidos

intra-oculares ( humor vítreo e humor aquoso) de pacientes

com toxoplasmose ocular, na Cidade de Belém, PA

Research on antibodies anti

to xo pla sm a go ndii

in intraocular fluids

( Aqueous and vitreous humor) from patients with ocular toxoplasmosis,

in the City of Belém, Pará State

Ediclei Lima do Carmo

1

_{, Edmundo Frota Almeida}

2

_{, Cléa Nazaré Bichara}

3

e Marinete Marins Póvoa

1

RESUMO

Fo i re a liza da pe sq u isa de a n tic o rpo s IgG, IgM e IgA a n ti-Toxoplasma gondii n o so ro e flu ido s in tra - o c u la re s ( hu m o r a q u o so e vítre o ) de pa c ie n te s c o m to xo pla sm o se o c u la r. A pa rtir do s re su lta do s o b tido s ve rific o u - se q u e a n tic o rpo s IgG e IgA in tra o c u la r a n ti-Toxoplasma gondii po de m vir a se r im po rta n te s m a rc a do re s n o dia gn ó stic o de to xo pla sm o se o c u la r.

Pal avr as-chave s: To x o p la sm o se o c u la r. An ti c o rp o s. Hu m o r ví tre o . Hu m o r a q u o so .

ABSTRACT

Te sts we re p e rf o rm e d f o r a n ti b o d i e s IgG, IgM a n d IgA a n ti -To xo plasma go ndii a n ti b o d i e s i n se ru m a n d i n tra o c u la r f lu i d s ( Aq u e o u s a n d vi tre o u s h u m o r) f ro m p a ti e n ts wi th o c u la r to x o p la sm o si s. By th e re su lts o b ta i n e d , i t wa s ve ri f i e d th a t i n tra o c u la r IgG a n d IgA a n ti -To xo plasma go ndii a n ti b o d i e s c a n b e i m p o rta n t m a rk e rs f o r th e d i a gn o si s o f o c u la r to x o p la sm o si s.

Ke y-words: Oc u la r to x o p la sm o si s. An ti b o d i e s. Vi tre o u s h u m o r. Aq u e o u s h u m o r.

Devido a gravidade e irreversibilidade das lesões causadas pelo T. go n di i, o diagnóstic o prec oc e dessa infec ç ão é de fundamental impo rtânc ia para que seja po ssível aplic ar a intervenção adequada, principalmente nos casos em que o quadro clínico e os resultados sorológicos não são conclusivos1 9_.

O objetivo desse estudo foi realizar a pesquisa de anticorpos anti T. go ndii ( IgG, IgM e IgA) nos fluidos intra-oculares ( humor vítreo e humor aquoso) de pacientes com toxoplasmose ocular.

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Car mo EL e t al

Todos os pacientes receberam esclarecimento médico sobre os objetivos e riscos da pesquisa e após concordar em participar, assinaram um termo de consentimento livre e esclarecido e fo r ne c e r am dado s par a pr e e nc hime nto de fic ha c línic o -epidemiológica, de acordo com as recomendações do Comitê de Ética em Pesquisa do Instituto Evandro Chagas ao qual o estudo foi avaliado e aprovado ( CEP/IEC-Nº 0 0 3 /2 0 0 2 ) .

Foram feitas coletas de amostra de sangue venoso e amostras de fluídos intra-oculares dos pacientes, estas realizadas no centro c irúrgic o da Clínic a de Olhos do Pará. Foram c oletadas 9 amostras de humor vítreo e duas de humor aquoso, de nenhum paciente foi possível coletar amostras de ambos os fluidos. Todas as amostras foram testadas pela reação de imunofluorescência indireta ( IFI) e ensaio imunoenzimático ( ELISA) . Na IFI, para pe sq uisa de IgG e IgM, utilizo u-se antíge no s c o me r c iais liofilizados ( Imunotoxo® ( B iolab-Mérieux SA) e a téc nic a desenvolvida de acordo com a metodologia descrita por Camargo2_.

O ponto de corte foi determinado como títulos

≥

8 0 . No teste ELISA indireto para pesquisa de IgG e de captura para IgM e IgA, utlizou-se Kits comerciais ( ELISA Platélia® Toxo IgG, IgM, IgA) . A técnica foi realizada e o ponto de corte determinado, segundo as recomendações do fabricante.

Na pesquisa de antic orpos séric os, a imunoglobulina G foi detec tada em todas as amostras por ambas as téc nic as, enquanto a IgM não foi enc ontrada em nenhuma e a IgA em apenas 2 pac ientes ( Tabela1 ) .

Na pesquisa de anticorpos no humor vítreo, seis pacientes apresentaram IgG ( 6 6 ,7 %) . Nesses, a IgG foi detectada em 3 por ambas as técnicas, em 2 somente pelo ELISA e em 1 somente pela IFI. Não foi detectado IgM em nenhuma das amostras de HV. Nas duas amostras de humor aquoso, observou-se presença de anticorpos IgG e ausência de IgM ( Tabela 1 ) . Em relação a pesquisa de antic orpos IgA no humor vítreo, esta c lasse foi detectada em 5 pacientes, todos apresentando também IgG intra-ocular e sérico. Dos 5 pacientes que apresentavam IgA, somente um apresentava IgA sérico. Nas duas amostras de humor aquoso anticorpos IgA também foram detectados, dos quais apenas uma apresentava IgA sérico ( Tabela 1 ) .

Desde 1 9 8 2 , o T. go ndii vem sendo incriminado como o principal causador de uveítes no Brasil. Porém, devido a alta soroprevalência de anticorpos IgG anti-T. go ndii, há dificuldade em se estabelecer o diagnóstico laboratorial da forma ocular de toxoplasmose, daí a necessidade de se procurar outra alternativas para realização desse diagnóstico6 9 1 1_.

No referido estudo, a positividade ( 6 6 ,7 %) de IgG observada nas amostras de HV, c orroboram os resultados obtidos por Canosa et al3_{, que avaliando 7 amostras de humor vítreo de}

pac ientes c om suspeita de toxoplasmose oc ular, obtiveram resultados similares. Pela téc nic a de IFI, eles enc ontraram fr e q üê n c ia de po s itivida de pa r a I gG de 7 1 , 4 % , to do s apresentando também IgG sérico. Turunen et al1 6_{referem o IgG}

intra-ocular como um bom marcador nos casos de coriorretinites toxoplásmicas. A ausência de anticorpos IgM no soro e fluidos intra-oculares indica que nenhum dos pacientes estava na fase aguda da toxoplasmose.

Em relação a pesquisa de anticorpos IgA intra-ocular, os n o s s s o s r e s ulta do s de m o n s tr a m , a pe s a r de n ã o s e r e m estatísticamente significativos ( P> 0 ,0 0 5 – Teste Exato de Fisher) , que esta imunoglobulina nesses fluidos pode ser importante marcador no diagnóstico de toxoplasmose ocular. Não há relatos na literatura a respeito de pesquisa de IgA anti-T. go ndii no humor vítreo de pacientes com toxoplasmose ocular. Contudo, vários estudos relatam a importância da pesquisa de IgA no humor aquoso no diagnóstico de toxoplasmose ocular4 7 1 0 1 3_.

O estudo de fluidos intra-oculares na rotina laboratorial de diagnóstico de toxoplasmose ainda pode ser considerado inviável, devido ao elevado grau de invasibilidade dos procedimentos de coleta, porém nos casos cujo diagnóstico clínico e sorológico são inconclusivos, a pesquisa de anticorpos e de DNA pela PCR nos fluidos intra-oculares, podem ser ferramentas alternativas para auxiliar o diagnóstico dessa forma de toxoplasmose.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1 . Abreu MT, B elfo rt Jr R, Oréfic e, F. To xo plasmo se Oc ular. In: Oréfic e F, B elfo rt Jr R ( eds) Uveítes, Ro c a, São Paulo , p. 2 1 1 -2 3 0 , 1 9 8 7 . 2 . Camargo ME. Impro ved tec hnique o f indirec t immuno o fluo resc enc e fo r

sero lo gic al diagno sis o f to xo plasmo sis. Revista do Instituto de Medic ina Tro pic al de São Paulo 2 8 : 2 1 1 -2 1 4 , 1 9 6 4 .

3 . Cano sa A, Gulh, F, Ac evedo G, De Sánc hez N, Marinkelle CJ. Antic uerpo s espec ífic o s em humo r vítreo em c aso s de to xo plasmo sis c c ular. Revista Latino americ ana de Mic robio lo gia 2 7 : 2 0 9 -2 1 2 , 1 9 8 5 .

Tabela 1 - Resultado da pesquisa de anticorpos anti-T. gondii pelos teste de IFI ( IgG e IgM) , ELISA ( IgG, IgM e IgA) n o soro e flu idos intra-oculares ( HV ou HA) de 11 pacientes com diagnóstico clínico de toxoplasmose ocu lar.

Paciente Fluidos IFI-IgG IFI-IgM ELISA ELISA ELISA ( Título) ( Título) IgG IgM IgA

1 soro 80 - + -

-HV - - + -

-2 soro 2.560 - + - +

HV 80 - + - +

3 soro 1.280 - + -

-HV - - + - +

4 soro 2.560 - + -

-HV 320 - + - +

5 soro 10.240 - + - -HV 1.280 - + - + 6 soro 2.560 - + - -HV 1.280 - - - + 7 soro 10.240 - + -

-HV - - - -

-8 soro 1.280 - + -

-HV - - - -

-9 soro 320 - + -

-HV - - - -

-10 soro 10.240 - + - + HA 1.280 - + - + 11 soro 2.560 - + -

-HA NR NR + - +

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4 . Gar we g JG, Jac quie r P, B o e hnk e M. Ear ly Aque o us Humo r Analysis In P a ti e n ts Wi th Hu m a n Oc u l a r To x o p l a s m o s i s . J o u r n a l o f Cl i n i c a l Mic ro bio lo gy 3 8 : 9 9 6 -1 0 0 1 , 2 0 0 1 .

5 . Glasne r PD, Silve ir a C, Kr uszo n-Mo r an D, Mar tins MC, B ur nie r Jr M, Silve ir a S, Camar go ME, Nusse nb latt RB , Kaslo w RA, B e lfo r t Jr. R. An unusually high prevalenc e o f o c ular to xo plasmo sis in So uthern B razil. Americ an Jo urnal o f Ophthalmo lo gy 1 1 4 : 1 3 6 -1 4 4 , 1 9 9 2

6 . Hay J, Dutto n GN. To xo plasma and the eye. B ritish Medic al Jo urnal 3 1 0 : 1 0 2 1 -1 0 2 2 , 1 9 9 5 .

7 . Katina JH, Oréfic e F, Mineo JR. Antic orpos IgA espec ífic os no soro e humor aquoso de pac ientes c om uveíte de provável etiologia toxoplásmic a. Revista B rasileira de Oftalmo lo gia 5 1 : 2 1 -2 6 , 1 9 9 2 .

8 . Montoya JG, Remington JS. Toxoplasmic c horioretinitis in the setting of ac ute ac quired toxoplasmosis. Clinic al Infec tious Diseases 2 3 : 2 7 7 -2 8 2 , 1 9 9 6 . 9 . Nusse nb latt RB , B e lfo r t J r. R. Oc ular To xo plasm o sis: An o ld dise ase

revisited. Jo urnal o f Americ an Medic al Asso c iatio n 2 7 1 :3 0 4 -3 0 7 , 1 9 9 4 . 1 0 . Ongk o suwito JV, B o sc h-Dr ie sse n EH, Kij lstr a A, Ro tho va A. Se r o lo gic

Evaluatio n Of Patients With Primary And Rec urrent Oc ular To xo plasmo sis

Fo r Evide nc e Of Re c e nt Infe c tio n. Ame r ic an Jo ur nal o f Ophthalmo lo gy 1 2 8 : 4 0 7 -4 1 2 , 1 9 9 9 .

1 1 . Or é fic e F. Síndr o me Do Olho Ve r me lho . In: Mar r a UD ( e d) Me dic ina Ambulato rial, Guanabara Ko o gan, Rio de Janeiro , p. 4 9 4 -5 0 5 , 1 9 8 2 . 1 2 . Pe r k ins ES. Oc ular To xo plasmo sis. B r itish J o ur nal o f Ophthalmo lo gy

5 1 : 1 , 1 9 7 3 .

1 3 . Ro nday MJH, Ongk o suwito JV, Ro tho va A, Kij lstr a A. Intr ao c ular Anti-To xo pla sm a go ndii I gA a ntib o dy pr o duc tio n in pa tie nts with o c ula r to xo plasmo sis. Americ an Jo urnal o f Ophthalmo lo gy 1 2 7 : 2 9 4 -3 0 0 , 1 9 9 9 . 1 4 . Silveira C, B elfo rt Jr R, B urnier R, Nussenblatt R. Ac quired to xo plasmic infe c tio n a s the c a us e o f to xo pla s m ic r e tino c ho r o iditis in fa m ilie s . Ame r ic an Jo urnal o f Ophthalmo lo gy 1 0 6 : 3 6 2 -3 6 4 , 1 9 8 8 .

1 5 . Tenter AM, Hec kero th AR, Weiss LM. To xo plasma go ndii: fro m animals to humans. Internatio nal Jo urnal fo r Parasito lo gy 3 0 :1 2 1 7 -1 2 5 8 , 2 0 0 0 . 1 6 . Turunen HJ, Leiniki PO, Saari KM. Demo nstratio n o f intrao c ular synthesis