R e v i s t a d a S o c i e d a d e B r a s i l e i r a d e M e d i c i n a T r o p i c a l 2 1 ( 4 ) : 1 8 7 - 1 9 2 , O u t - D e z , 1 9 8 8
E P ID E M IO L O G IA D E U M C A S O D E D O E N Ç A D E C H A G A S N A IL H A D O M O S Q U E IR O - P A R Á
Ad e lso n A.A. de Sou za , Fe r n a n d o T o b ia s Silveira, M ich a e l A. M iles, M a rine t e M. Póvoa, Jo sé Ap r íg io N u n e s U m a e Se b a st iã o Ald o S. Valent e.
O s a u t o r e s a p r e s e n t a m o s r e s u l t a d o s d o e s t u d o e p i d e m i o l ó g i c o d e u m c a s o a u t ó c
t o n e d a f a s e a g u d a d a d o e n ç a d e C h a g a s n a i l h a d o M o s q u e i r o , E s t a d o d o P a r á , a p r o x i
m a d a m e n t e 7 5 k m d a c a p i t a l , B e l é m . 0 c a s o j á h a v i a s i d o o b j e t o d e u m a p u b l i c a ç ã o
a n t e r i o r . A g o r a s ã o a p r e s e n t a d a s i n f o r m a ç õ e s e p i d e m i o l ó g i c a s . N a s p r o x i m i d a d e s d a
c a s a d o p a c i e n t e f o r a m c a p t u r a d o s e m d u a s p a l m e i r a s d e I n a j á ('Maximilian regi ay e e m u m a d e M u c a j á ( Acrocomia sclerocarpia) 1 1 4 t r i a t o m í n e o s : Rhodnius pictipes, R.
robustus, Panstrongylus lignarius, P. geniculatus e Microtriatoma trinidadensis, c o m
t r i p a n o s s o m a s e m 3 1 d e l e s . N a c a s a d o p a c i e n t e f o r a m e n c o n t r a d o s e x e m p l a r e s d e
Rhodnius pictipes, i n f e c t a d o s c o m f o r m a s m e t a c í c l i c a s d o Trypanosoma cruzi. E m 1 4 m a r s u p i a i s , c a p t u r a d o s n a l o c a l i d a d e , h a v i a m 3 i n f e c t a d o s c o m o r g a n i s m o s s e m e l h a n
t e s a o T. cruzi. A e l e t r o f o r e s e d o s i s o e n z i m a s n o s t r i p a n o s s o m a s i s o l a d o s d o p a c i e n t e , d e
R. pictipes e d e Didelphis marsupialis o s c l a s s i f i c o u c o m o z i m o d e m a 1. O s a u t o r e s c o n c l u e m q u e a d o e n ç a d e C h a g a s d o p a c i e n t e t e v e o r i g e m s i l v e s t r e .
Palavras-chaves: T r y p a n o s o m a c r u z i .
miologia.
Em 1979 Lainson e cols3 quando examinavam
1187 animais silvestres do Estado do Pará, em busca de hematozoários, encontraram parasitos semelhantes ao T . c r u z i em 13 espécies diferentes, sendo particu
larmente comuns em uma variedade de marsupiais
( D i d e l p h i d a e ) , porco-espinho (C o e n d o u p r e h e n s i l i s ) ,
tatus (D a s y p u s n o v e m c i n c t u s ) e coati mundi (N a s u a n a s u a ) . N operíodode 1977 a 1987, fizemos observa
ções em 1772 animais silvestres de diferentes áreas e
foi possível constatar infecções por T . c r u z i em uma
grande variedade de animais, além dos acima cita- doslS. Até o momento existem descritos 10 casos autóctones de doença de Chagas no Estado do Pará, a partir dos primeiros descritos por Shaw e col1^.
O Inquérito Sorológico Nacional sobre a doen ça de Chagas, realizado pela Superintendência de Campanhas de Saúde Pública do Ministério da Saúde (SUCAM), no período de 1975-1980, revelou que a prevalência da doença de Chagas, no Estado do Pará, era de 0,5% em 29.824 amostras processadas no laboratório do Instituto Evandro Chagas^. Segundo Lainson e col3, não existe evidência de espécies de barbeiros silvestres (Hemiptera: Reduviidae) coloni
zando casas, porém, ocasionalmente, adultos de P .
Departamento de Parasitologia do Instituto Evandro Chagas - Fundaçao Serviço Especial de Saúde Pública (SESP) e Departamento de Protozoologia da London School of Hy- giene and Tropical Medicine.
Suporte financeiro fornecido pela Wellcome Trust e Fun dação SESP.
R e c e b i d o p a r a p u b l i c a ç ã o e m 2 8 / 1 / 8 8 .
Doença de Chagas. Triatomíneo.
Epide-g e n i c u l a t u s e R . p i c t i p e s foram encontrados em casas
no subúrbio próximo a florestas. A doença de Chagas poderá tomar-se endêmica na bacia Amazônica, se os triatomíneos silvestres forem capazes de adaptar-se às habitações domésticas; porém o perigo maior está na possibilidade da importaçao de vetores já domiciliados ao longo das grandes rodovias procedentes de outras regiões endêmicas. Vários métodos foram empregados para identificar espécies de triatomíneos silvestres e seus ecótopos naturais nos arredores de Belém, Estado
do Pará7. Dez espécies foram encontradas: R h o d n i u s
p i c t i p e s , R . r o b u s t u s , R . p a r a e n s i s , P a s t r o n g y l u s
l i g n a r i u s , P . g e n i c u l a t u s , P . r u f o t u b e r c u l a t u s , E r a
t y r u s m u c r o n a t u s , M i c r o t r i a t o m a t r i n i d a d e n s i s , B e l
-m i n u s h e r r e r i e T r i a t o m a r u b r o f a s c i a t a .
Apesar de todas essas evidências, da transmis são silvestre do T . c r u z i , não se conhece, até o
momento, vetores domiciliares do T . c r u z i em toda a
bacia Amazônica7. E sabido que alguns exemplares adultos desses triatomíneos podem, ocasionalmente, voar a distância razoável3, podendo localizar-se no interior das casas. Tal fato pode ocorrer c o m R h o d n i u s p i c t i p e s , P a n s t r o n g y l u s g e n i c u l a t u s , T r i a t o m a
m a c u l a t a e E r a t y r u s m u c r o n a t u s no Estado do
Amazonas e com R . p i c t i p e s , P . g e n i c u l a t u s e P . l i g n a r i u s no Estado do Pará.
M A TERIA L E M ÉTODOS
S o u z a A A A , S i l v e i r a F T , M i l e s M A , P ó v o a M M , L i m a J A N , V a l e n t e S A S . E p i d e m i o l o g i a d e u m c a s o d e D o e n ç a d e C h a g a s n a I l h a d o M o s q u e i r o - P a r á . R e v i s t a d a S o c i e d a d e B r a s i l e i r a d e M e d i c i n a T r o p i c a l 2 1 : 1 8 7 - 1 9 2 , O u t - D e z , 1 9 8 8
distante aproximadamente 75 km da capital, Belém. Nossos estudos epidemiológicos complementam o diagnóstico do “Nono caso autóctone de doença de
Chagas registrado no Pará” por Silveira e col14 em
1979.
I n v e s t i g a ç ã o e d i s s e c a ç ã o d e p a l m e i r a s
E sse m étodo é desenvolvido atrav és'd a disseca
ção de possíveis refúgios de animais, tais como a copa
de palm eiras. A s palm eiras são derru b ad as e disseca
das inteiramente, através do auxílio de motosserra, luvas de couro, terçados, pinças e roupas especiais, requerendo bastante atenção por parte dos pesquisa
dores p a ra a cap tu ra de triatom íneos e de algum animal
que nela faça morada. 0 critério para selecionar
palmeiras que serão derrubadas e dissecadas requer, pelas nossas observações, que elas sejam de preferên cia sujas, possibilitando assim melhores condições de abrigo para os animais. No trabalho de dissecação de palmeiras, de um modo geral utilizou-se motosserra
STHIL modelos 51 e 8. Os triatomíneos capturados
são acondicionados em copos plásticos com tampa perfurada, possibilitando a entrada de ar, sendo usado, geralmente, um copo para cada palmeira.
C a p t u r a e s e g u i m e n t o d e m a m í f e r o s
Para captura de mamíferos foram utilizadas armadilhas dobráveis, feitas de arames (Kinro Pro ducts Ltd.), tendo como isca a mistura de pasta de amendoim, ração, óleo de dendê, banana e um peque no pedaço de jaca ou abacaxi, bem como um pequeno pedaço de milho, principalmente para roedores. Pelas nossas observações, essa isca tem grande aceitação pelos animais, além de possuir um odor muito ativo e atraente.
Para segui-los, foi utilizado um método simples
de seguir mamíferos, criação de Miles4 e Miles e cols7 .
Consta de um tubo de plástico contendo em seu interior linhas de variadas dimensões, e, por esta razão foram denominadas tipo A (2300 metros), B (1300 metros), C (280 metros), D (160 metros) e E (1350 metros), constituindo diferentes aparelhos, com dife rentes pesos e para determinados portes de animais. Os aparelhos são colocados no dorso ou no lado do animal anestesiado com Sagatal (May-Baker Ltd. Dagenham) ou Ketalar (Parke Davis), geralmente no fim da tarde, sendo soltos ao anoitecer, tendo a extremidade da linha amarrada em árvore próxima da armadilha, onde foram capturados. No dia seguinte, a linha é seguida, objetivando identificar-se os ecótopos e examinar seus ninhos para captura de barbeiros. Em geral, os ninhos são trazidos em sacolas plásticas para melhores investigações no laboratório, enquanto os
aparelhos são pesados novamente para determinar a distância percorrida na floresta.
A r m a d i l h a d e l u z
Colocamos duas armadilhas entre duas palmei ras de Mucajá ( A c r o c o m i a s c l e r o c a r p a ) , de aproxi
madamente 15 metros de altura e distante 30 metros da residência do paciente que apresentou a fase aguda da doença de Chagas, tendo como fonte de energia um gerador Honda modelo E 300 que era ligado ao anoitecer e desligado ao amanhecer. Essas observa ções foram realizadas durante cinco noites.
X e n o d i a g n ó s t i c o
Esse método parasitológico foi utilizado como tentativa de confirmação de diagnóstico e isolamento de cepa para posterior caracterização bioquímica por eletroforese de enzimas.
H e m o c u l t u r a
Método que tem sido utilizado ao lado do xenodiagnóstico para o diagnóstico parasitológico da tripanosomíase americana. Utilizamos o meio bifá- sico5.
E l e t r o f o r e s e d e e n z i m a s
A eletroforese de isoenzimas foi utilizada como método de caracterização das cepas de T . c r u z i , de
acordo com Miles e cols® 10.
RESULTADOS
Informações sobre o caso: SBS, 19 anos, sexo masculino, pardo, solteiro, estudante, natural do Pará, procedente de Vila do Mosqueiro, onde reside desde o nascimento, foi internado na Enfermaria São Miguel no dia 11.09.79, acusando, como sintoma principal,
febre elevada, há 11 dias, de caráter continuo, acom
panhada desde o início de calafrios intermitentes e mal-estar geral. O exame físico revelou, entre outras
coisas, fígado palpável a 1 cm do rebordo costal
direito, superfície lisa, bordos arredondados e mode radamente dolorosos à palpação profunda; baço palpá
vel a 1 cm do rebordo costal esquerdo, consistência
normal e pouco doloroso à palpação profunda; micro- poliadenopatia, não dolorosa, de localização cervical, retroauricular, axilar e inguinal. O exame direto do sangue, a fresco e em esfregaço corado pela Giemsa,
apresentou parasito com morfologia semelhante ao T .
c r u z i . O xenodiagnóstico com leitura após 30 dias
apresentou resultado positivo. A imuncfluorescência
S o u z a A A A , S i l v e i r a F T , M i l e s M A , P ó v o a M M , L i m a J A N , V a l e n t e S A S . E p i d e m i o l o g i a d e u m c a s o d e D o e n ç a d e C h a g a s n a I l h a d o M o s q u e i r o - P a r á . R e v i s t a d a S o c i e d a d e B r a s i l e i r a d e M e d i c i n a T r o p i c a l 2 1 : 1 8 7 - 1 9 2 , O u t - D e z , 1 9 8 8
indireta para doença de Chagas foi positiva: 1:160 (IgM )e 1:160 (IgG).
Foram capturados, no interior da residência do paciente, três exemplares de R h o d n i u s p i c t i p e s , sendo
dois machos e uma fêmea, os quais foram dissecados, e ao microscópio foram observados organismos diferen tes ao T . c r u z i .
Investigação e dissecação de palmeiras: Nessa fase do trabalho foram dissecadas duas palmeiras de Inajá (M a x i m i l i a n r e g i a ) e uma de Mucajá ( A c r o c o - t n i a s c l e r o c a r p a) localizadas às proximidades da
residência, e um total de 114 triatomíneos foram capturados entre adultos e ninfas de 5 espécies diferentes, R h o d n i u s p i c t i p e s , R h o d r à u s r o b u s t u s , P a n s t r o n g y l u s l i g n a r i u s , P . g e n i c u l a t u s e M i c r o t r i a - t o m a t r i n i d a d e n s i s (Tabela 1).
Captura e seguimento de mamíferos: N a área próxima à residência do paciente, foram capturados um C a l u r o m y s p h i l a n d e r e um D i d e l p h i s m a r s u p i a -l i s . Em outra área de estudo epidemiológico foram
capturados 19 animais (Tabela 2). Foram soltos e
seguidos 14 animais com diferentes tipos de linha, sendo recuperados um total de 7 com uma taxa de recuperação de 50%. Os ninhos examinados não continham nenhum triatomíneo.
Armadilha de luz: Foram capturados 3 triato míneos, 1 exemplar de P . g e n i c u l a t u s (macho) e 2
exemplares de R . p i c t i p e s (macho). Observamos que
nas duas últimas noites essas armadilhas foram preju dicadas pelo mal tempo, com a ocorrência de muita chuva e fortes ventos.
Xenodiagnóstico: Foram realizados 10 xeno- diagnósticos entre os familiares do paciente, tendo todos resultados negativos.
Estudo de enzimas: N as presentes observações desse nono caso autóctone do Estado do Pará, o trabalho de eletroforese de enzimas demonstrou que os tipos enzimáticos de T r y p a n o s o m a c r u z i identificados
foram semelhantes, tanto no tripanossoma isolado no paciente como nos R . p i c t i p e s e D . m a r s u p i a l i s , exa
minados, sendo tais amostras caracterizadas como zimodema tipo I (Figura I).
T a b e l a 1 - Infecção por tripanossomas semelhantes ao T. c r u z i na Ilha do Mosqueiro
Triatomíneos Estágio Quantidade Infectados
R . p i c t i p e s Adultos 29 20
Ninfas -V 15
-IV 4
-III 17
-II 11
-I 9
-R . r o b u s t u s Adultos 23 10
M . t r i n i d a d e n s i s Adultos 3
-Ninfas - II 1
-P . g e n i c u l a t u s Adultos 1 - Armadilha de luz - 1
P . l i g n a r i u s Ninfas - III 1
-Total 114 31
Obs: 2 exemplares de R . p i c t i p e s foram capturados em armadilha de luz.
T a b e l a 2 - Infecção por tripanossomas semelhantes ao T . c r u z i em animais capturados na Ilha do
Mosqueiro.
Animais capturados Quantidade Infectados
P . o p o s s u m 6 1
D . m a r s u p i a l i s 8 2
M . n u d i c a u d a t u s 4 0
O r y z o m y s s p . 1 0
P . g u y a n n e n s i s 2 0
S o u z a A A A , S i l v e i r a F T , M i l e s M A , P ó v o a M M , L i m a J A N , V a l e n t e S A S . E p i d e m i o l o g i a d e u m c a s o d e D o e n ç a d e C h a g a s n a I l h a d o M o s q u e i r o - P a r á . R e v i s t a d a S o c i e d a d e B r a s i l e i r a d e M e d i c i n a T r o p i c a l 2 1 : 1 8 7 - 1 9 2 , O u t - D e z , 1 9 8 8
Figura I - P l a c a s d e e l e t r o f o r e s e c o n t e n d o a a m o s t r a d e S B S , c o n f i g u r a n d o o z i m o d e m a 1 , o m e s m o d a s a m o s t r a s d e R. pictipes e D. marsupialis. A s e n z i m a s m o s t r a d a s s ã o : a ) A S A T ; b ) A L A T ; c ) G P I e d ) P G M .
E m c a d a p l a c a a s a m o s t r a s d e t r y p a n o s o m a s ã o ( d a
DISCUSSÃO
Após vários anos de trabalho de campo, em diversas áreas estudadas, chamamos a atenção para a importância que as palmeiras, das e s p é c i e s A c r o c o m i a s c l e r o c a r p a (mucajá), M a x i m i l i a n r e g i a (inajá), O r -b i g n i a s p e c i o s a (babaçu) , J e s s e n i a b a t a u a (patauá) e M a u r i t i a f l e x u o s a (miriti), oferecem como fonte de
casos esporádicos da doença de Chagas na região Amazônica, por apresentarem, segundo nossas inves tigações, um percentual elevado de infestação por triatomíneos.
Acreditamos que tenhamos detectado os pontos cardeais associados à cadeia epidemiológica, da doen ça de Chagas, identificando os vetores associados, bem como os prováveis animais silvestres implicados nesse caso agudo autóctone do Estado do Pará.
e s q u e r d a p a r a d i r e i t a ) : 1 - W A 2 5 0 c l o n e 2 , p a d r ã o d e Z l ; 2 - E s m e r a l d o c l o n e 3 , p a d r ã o d e Z 2 ; 3 - C A N I I I c l o n e 1, p a d r ã o d e Z 3 ; 4 - R 1 6 2 5 , Trypanosoma rangelid o h o m e m , E l S a l v a d o r ; 5 - X 1 0 c l o n e 1 , a m o s t r a d o p a c i e n t e S B S ; 6 - B u g 4 2 0 7 , R pictipes e 7 - C a i x a 1 0 7 8 , D. marsupialis.
A captura e identificação de animais silvestres
possibilitaram o isolamento de cepas de T . c r u z i , que
foram caracterizados por eletroforese de enzimas como zimodema tipo I, o mesmo perfil enzimático que ofereceram os isolamentos de cepas de triatomineos e a cepa do paciente estudado, mostrando claramente que a origem desse caso foi originariamente silvestre, pela completa ausência do zimodema II, prevalente nas áreas endêmicas de transmissão doméstica. As populações de parasitos identificados por perfis enzi- máticos idênticos têm sido chamadas de zimódema por Miles e cols7. Os estudos de enzimas realizados na bacia Amazônica demonstram que os zimodemas I e III são prevalentes entre os mamíferos e triatomíneos do Estado do Pará, tendo sido responsáveis pelos primei ros casos autóctones de doença de Chagas na cidade de Belém, confirmando a origem local desses casos^.
S o u z a A A A , S i l v e i r a F T , M i l e s M A , P ó v o a M M , L i m a J A N , V a l e n t e S A S . E p i d e m i o l o g i a d e u m c a s o d e D o e n ç a d e C h a g a s n a I l h a d o M o s q u e i r o - P a r á . R e v i s t a d a S o c i e d a d e B r a s i l e i r a d e M e d i c i n a T r o p i c a l 2 1 : 1 8 7 - 1 9 2 , O u t - D e z , 1 9 8 8
Ressaltamos também que, desde 1970, o método de eletroforese de enzimas tem se revelado importante com largo emprego na taxonomia zoológica por constituí- rem-se, as enzimas, excelentes marcadores genéticos que vieram possibilitar o entendimento da epidemiolo- gia e biologia básicas de tripanossomas e leishmânias. Por essa razão, o uso das enzimas, como marcadores genéticos, tem crescido de maneira acentuada nos últimos anos. Ready e M ilesH, demonstraram a aplicação da eletroforese de enzimas na taxonomia
numérica, quando detectaram três zimodemas de T .
c r u z i do Brasil, os quais foram claramente definidos e
separados por caracteres enzimáticos. Recursos para o diagnóstico da doença de Chagas ficaram bastante evidenciados através das técnicas de hemocultura do
s a n g u e dos animais4 bem c o m o através da cultura das
fezes dos triatomíneos dissecados e que apresentaram
positividade com formas metacíclicas do T . c r u z i . Em
se tratando de diagnóstico da doença de Chagas, estudo comparativo entre a hemocultura e o xeno- diagnóstico foi realizado por vários pesquisadores e a maioria dos resultados permitiu concluir que o método mais sensível foi o xenodiagnóstico. Para captura de vetores triatomíneos, o uso de armadilha de luz tem se revelado altamente produtivo. N o Panamá, Whitlaw e C h a n i o t i s l 6 , demonstraram sua eficiência, pois captu
raram 7 de 8 espécies, conhecidas naquele país. Foi
demonstrada também uma diferença de captura em diferentes estações com 0,56 triatomíneos, por noite, nas estações secas, e 0,26 para as estações chuvosas. Em nossos trabalhos, na bacia Amazônica, tivemos
oportunidade de capturar exemplares de 7 espécies: R .
p i c t i p e s , P . g e n i c u l a t u s , E . m u c r o n a t u s , P . l i g n a r i u s ,
P . r u f o t u b e r c u l a t u s , R . r o b u s t u s e M i c r o t r i a t o m a t r i n i d a d e n s i s . A partir das nossas observações, reco
mendamos um trabalho de pesquisa mais profundo, associado à vigilância epidemiológica e uso de inseti cidas nas espécies de palmeiras citadas, principal mente aquelas localizadas na cidade de Belém e em sua periferia, objetivando evitar novos casos seme lhantes a este aqui descrito.
SUMMARY
T h e a u t h o r s p r e s e n t t h e r e s u l t s o f a n e p i d e m i o l o g i c a l s t u d y r e l a t i n g t o a c a s e o f a c u t e C h a g a s ’ d i s e a s e a c q u i r e d i n t h e i s l a n d o f M o s q u e i r o , S t a t e o f P a r a , a p p r o x i m a t e l y 7 5 k m f r o m t h e c a p i t a l B e l e m .
T h e p a t i e n t h a s b e e n t h e o b j e c t o f a p r e v i o u s p u b l i c a t i o n b u t n o w e p i d e m i o l o g i c a l i n f o r m a t i o n i s r e p o r t e d . N e a r t h e h o u s e o f t h e p a t i e n t i n t w o I n a j a p a l m t r e e s
(Maximilian regia) a n d o n e M u c a j a p a l m (Acroco-
mia sclerocarpia) 1 1 4 t r i a t o m i n e b u g s w e r e c a p t u r e d o f t h e f o l l o w i n g s p e c i e s : Rhodnius pictipes, R. robus
tus, Panstrongylus lignarius, P. geniculatus a n d Mi
crotriatoma trinidadensis. T r y p a n o s o m e s w e r e f o u n d
i n 3 1 b u g s . I n t h e h o u s e o f t h e p a t i e n t s p e c i m e n s o f
R. pictipes w e r e c a p t u r e d i n f e c t e d w i t h m e t a c y c l i c f o r m s ó f Trypanosoma cruzi. I n 1 4 m a r s u p i a l s c a p t u r e d i n t h e l o c a l i t y t h r e e h a d i n f e c t i o n s w i t h c r u z i l i k e t r y p a n o s o m e s . E n z y m e e l e c t r o p h o r e s i s o f t h e t r y p a n o s o m e s i s o l a t e d f r o m t h e p a t i e n t , R. pictipes a n d Didelphis marsupialis w e r e c l a s s i f i e d a s z y m o - d e m e 1 . T h e a u t h o r s c o n c l u d e t h a t t h e p a t i e n t s C h a g a s ’ d i s e a s e w a s o f s y l v a t i c o r i g i n .
Key-words: T r y p a n o s o m a c r u z i . Chagas’ disease.
Triatomids. Epidemiology.
AG RA D ECIM EN TO S
Agradecemos a decisiva colaboração de nossos auxiliares Francisco dos Santos Gomes e Raimundo Nivaldo de Almeida, bem como do Sr. Paulo Barbosa da Silva pelos contatos, facilidades e informações prestadas na Ilha do Mosqueiro. Ao dr. Habib Fraiha Neto, entomologista da IEC pela identificação dos triatomíneos capturados. A Sra. Maria das Graças Soares da Silva pelo serviço datilográfico e ao Sr. Aluízio de Figueiredo Silva pelo serviço fotográfico.
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