Estudo imunocitológico do fígado, baço e gânglio linfático de pacientes na forma hepatoesplênica da esquistossomose mansônica, utilizando a microscopia de fluorescência.

ESTUDO IM UNOLÕGICO DO FÍG A D O , BAÇO E GÂNGLIO LINFÁ-

TICO DE PACIENTES NA FO RM A HEPATOESPLÊNICA DA ESQUIS-

T O SS O M O SE M ANSÔNICA, UTILIZANDO A M ICR O SCO PIA DE

FLUORESCÊNCIA

A. M a g a lh ã e s Filho *, V ital L ira ** e R. d e B arros C oelho ***

O s a u to r e s e s t u d a r a m a m o s t r a s d e fíg a d o , b a ç o e lin f o n o ã o s d e 45 p a c i e n ­ t e s p o r ta d o r e s d a f o r m a h é p a t o e s p l ê n i c a d a e s q ú is to s s o m o s e m a n s ô n i c a , u t i l i ­ z a n d o a t é c n i c a d e i m u n o f l u o r e s c ê n c i a p a r a d e te c ç ã o d e a n t í g e n o s e m te c id o s . O s c a s o s q u e d i s p u n h a m d e d a d o s c lín ic o s e la b o r a to r ia is m a i s c o m p le to s fo r a m d iv id id o s e m 3 g r u p o s , d e a c ô r d o c o m a id a d e , t e n d o s id o t e n t a d a u m a c o r r e la ­ ç ã o e n t r e a g r a v id a d e d a d o e n ç a e o s a c h a d o s im u n o ló g ic o s n o b a ç o e f í g a d o . A c o r r e la ç ã o s e m o s t r o u p o s i t i v a q u a n t o a o b a ç o e, s o b r e tu d o , n o s g r u p o s d e c r ia n ç a s e a d u l t o s j o v e n s . O e s t u d o i m u n o c i to ló g ic o d o s f í g a d o s à lu z U .V . d e m o n s t r o u a p r e s e n ç a d e c é lu la s f a g o c i t á r í a s f l u o r e s c e n t e s n o s e s p a ç o s p o r ta , f a i x a s d e fib r o s e e , m a i s r a r a m e n t e n o s s i n u s o i d e s . A d is t r ib u i ç ã o e fr e q ü ê n c ia d a s c é lu la s f l u o r e s c e n t e s , e x c e t u a d o s o s g r a n u l o m a s , m o s t r o u s e ir r e g u la r e i n -c a r a -c t e r í s t i -c a . E s t u d o s e m e l h a n t e n o b a ç o d e m o n s t r o u u n i f o r m i d a d e d e d i s ­ tr ib u i ç ã o d a s c é lu la s f l u o r e s c e n t e s , p r e d o m i n a n t e m e n t e n o s c o r d õ e s d e B il lr o th c n o s s in u s o id e s ; m e n o s f r e q ü e n t e m e n t e n a s t r a b é c u l a s . O s f o líc u lo s lin fó id e s a p a r e c e m d e s p r o v id o s ã e c é lu la s f l u o r e s c e n t e s . D o e x a m e d e n u m e r o s o s g r a n u ­ lo m a s e m f í g a d o e lin f o n o d o s , f o i r e a liz a d o u m e s t u d o e v o l u t iv o d e s ta le s ã o . O s d iv e r s o s a s p e c t o s im u n o c ito ló g ic o s p e r m i t i r a m e s ta b e le c e r c in c o fa s e s n e s t e p r o c e s s o . A s c é lu la s f l u o r e s c e n t e s s ã o fa g o c i t á r i a s e r e c o n h e c ív e is c o m o p o li-m o i f o n u c l e a r e s n e u t r ó f i l o s e h i s t i ó c i t o s ; c é lu la s r e d o n d a s p e q u e n a s e a l g u li-m a s c é lu la s a lo n g a d a s n ã o p u d e r a m s e r i d e n t i f i c a d a s . O m a t e r i a l f l u o r e s c e n t e d e n t r o d o ô v o o u n o i n t e r i o r d o c i t o p l a s m a d o s fa g ó c ito s a p a r e c e n a f o r m a ã e g r u m o s e ã e f i n o s g r â n u lo s c o m f l u o r e s c ê n c i a v e r d e - m a ç ã b r i l h a n t e .

O s p r i n c i p a i s a s p e c to s d e f e n d i d o s p e lo s a u to r e s p o d e m s e r s u m a r ia d o s c o m o s e g u e : o b a ç o é m a i s u n i f o r m e m e n t e r e p r e s e n t a t i v o d o e s ta d o im u n o ló g ic o v i g e n t e n e s t a d o e n ç a ; a s le s õ e s fi b r o p l á s t i c a s d o f í g a d o g u a r d a m r e la ç ã o d i r e t a c o m r e a ç õ e s i m u n o l ó g i c a s ; o i n f i l t r a d o i n f l a m a t ó r i o d o s esp aç o s p o r t a e d a s J a ix a s ã e fib r o s e é e s p e c ific o , p e lo m e n o s e m p a r t e ; 0 g r a n u l o m a e s q u is to s s o -v i ó t i c o é u m p r o c e s s o r e a c io n a l e s p e c ífic o f r e n t e a o m a t e r i a l a n t i g ê n i c o c o n»• tid o n o ô v o ; o m a t e r i a l a n t i g ê n i c o d e m o n s t r a d o p e lo m é t o d o u s a d o n a e s -q u is to s o m o s e m a n s ô n i c a é p a r t i c u l a d o (0 m é t o d o n ã o p e r m i t e d e m o n s t r a r a n -ií g e n o s s o l ú v e i s ) .

IN TR O D U Ç Ã O

D esd e h á a lg u m te m p o f o ra m d e s c rita s a lte ra ç õ e s m o rfo ló g ic a s d e se n v o lv id a s em a n im a is e x p e r im e n ta lm e n te in fe c ta d o s com s c h is to so m a s que, e m b o ra n ã o fô sse m c o n - v é n ie n te m e n te in te r p r e ta d a s , r e p re s e n ta m , se m d ú v id a , m a n ife s ta ç õ e s de u m m e c a n is ­

m o im u n o a lé rg ic o (9, 10, 13, 24, 31 e 32) . P o s te rio rm e n te foi ta m b é m o b serv ad o q u e re in fe c ç õ e s p o d e m d e s e n c a d e a r e x a ­ c e rb a ç ã o d ê ste e s ta d o im u n o ló g ico , d e te r ­ m in a n d o u m a re a ç ã o c e lu la r in te n s a c o n ­ t r a o p a r a s ito e se u s p ro d u to s (11, 15, 16, 17, 18, 20 e 2 3 ) . N o c a s o p a r tic u la r d o S . m a n s o n i , u m a s é rie d e tr a b a lh o s p a r a s ito

-(*) P r o f . A c lju n to C a d . A n a t. F i s i o l . P a t o l . , F a c . M e d ic in a U n iv . F e d e r a l P e r n a m b u c o .

(**) P e s q u is a d o r C a d . A n a to m ia F i s i o l . P a t o l ., F a c . M e d . U n iv . F e d e r a l P e r n a m b u c o .

112 Rev. Soc. Bras. M ed Trop Vol. II — N ? 3

lógicos, sorológicos e b io q u ím ic o s ta m b é m c o n firm a ra m q u e o m e c a n ism o im u n o ló g ic o a tu a com o e le m e n to b ásico n a p a to g ê n e s e d a d o en ça , s e ja d e m o n s tra n d o a e x is tê n ­ cia de fra ç õ e s a n tig ê n ic a s n o sô ro de p a ­ c ie n te s o u d e a n im a is in fe c ta d o s (6 e 27), s e ja de a n tic o rp o s esp ecificn s d e m o n s tr a - veis p o r té c n ic a s d e im u n o d ifu s ã o e o u tr a s (28 e 29), s e ja , fin a lm e n te , p e la c o n s ta ta ­ ção de fe n ô m e n o s p re m u n itó rio s a p ó s a p rim o -in fe c ta ç ã o , com o re c e n te m e n te foi d e m o n s tra d o p o r S a d u n (26) e S m ith e rs

(30), em m a c a c o s.

ü ltim a m e n te , té c n ic a s im u n o c ito q u í ■ m icas v ie ra m c o n firm a r, e m n ív e l tis s u la r, a p a rtic ip a ç ã o de re a ç õ e s a n tíg e n o - a n ti- corpo em a n im a is e x p e r im e n ta lm e n te i n ­ fe c ta d o s (1 e 22) .

O p re s e n te tr a b a lh o u tiliz a té c n ic a s de im u n o flu o re sc ê n c ia p a r a a d e te c ç ã o de a n - tíg e n o s e a s a lte ra ç õ e s p o r êles in d u z id a s em fíg ad o , b aço e g â n g lio lin fá tic o de p a ­ c ie n te s e sq u isto ss o m ó tic o s.

M A TER IA L E M ÉTO D O S

F o ra m e stu d a d o s 45 c aso s de p a c ie n te s esq u isto so m ó tico s in te r n a d o s n o s h o s p ita is U n iv e rsitá rio , I n f a n til M a n o e l de A lm eid a e B a rã o de L u c e n a , n o R e c ife . E m to d o s os casos a d o e n ç a se m a n if e s ta v a n a fo rm a h é p a to e s p lê n ic a e a c o lh e ita do m a te r ia l p a r a e stu d o se fa z ia d u r a n te os d iv erso s p ro c e d im e n to s cirú rg ic o s u tiliz a d o s p a r a o tr a ta m e n to d a h ip e r te n s ã o p o r ta o u do h i- p e re sp le n ism o . A lém do e stu d o c lín ic o e la b o ra to ria l a q u e e ra m su b m e tid o s n a s e n ­ f e rm a ria s o n d e in te rn a d o s , se le c io n a m o s os d o e n te s c u ja s in tr a d e r m o r r e a ç õ e s ( té c n i­ c a de P e le g rin o -K a g a n (12) se m o s tra v a m in te n s a s .

D ois caso s fo ra m to m a d o s com o te s t e ­ m u n h a s p a r a c o n tro le d a e sp e c ific id a d e d a s té c n ic a s : u m de a n e m ia fa lc ifo rm e e, o o u tro , d e h é p a to e s p le n o m e g a lia n ã o e sq u is- to s o m ó tic a .

DETA LH ES TÉC N IC O S

1. C o lh e ita e p r e p a r o d a s a m o s t r a s d e te c id o s — B ió p sias d e fíg ad o , o b a ço e

e v e n tu a lm e n te lin fo n o d o s e r a m re tir a d o s p elo c iru rg iã o e im e d ia ta m e n te c o rta d o s e m a m o s tr a s d e c ê rc a d e 10 x 5 x 3 m m a fim d e se re m s u b m e tid a s a c o n g e la m e n to in s ta n tâ n e o e m u m b a n h o d e g ê lo -sê c o - - a c e to n a , te n d o o c u id a d o de e v ita r o c o n ­ ta c to d ire to d a s a m o s tr a s com a m is tu r a c o n g e la d o ra , o q u e g a r a n te a in te g r id a d e p ro te ic a dos tec id o s, p o s sib ilita n d o seu p o s ­ te r io r uso em té c n ic a s d e im u n o flu o re s c ê n - c ia . A m o s tra s s e m e lh a n te s e r a m fix a d a s e m líq u id o de C a rn o y p a r a in c lu s ã o em p a ­ r a f i n a e e stu d o d e s u a s secções p e la s té c ­ n ic a s h isto ló g ic a s e h is to q u ím ic a s u su a is

(H . E ., tric rô m ic o s e té c n ic a d e U n n a - P a p e n h e im ) .

2. C o r te d o s te c id o s — As a m o s tra s p a r a fin s im u n o ló g ic o s e ra m c o r ta d a s em m ic ró - to m o c rio s tá tic o (m o d êlo IT C ) e m seções de 4/i m o n ta d a s em lâ m in a s , a s q u a is, no m o m e n to do e stu d o , e r a m d e g e la d a s e m c â ­ m a r a sê c a p o r a lg u n s m in u to s e t r a n s f e r i ­ d a s p a r a c â m a r a ú m id a a p ó s se re m c o b e r­ t a s com o sô ro in d ic a d o p elo te s te e m r e a ­ liz a ç ã o (v e ja t e s t e s ) .

3. S e le ç ã o e c o n ju g a ç ã o d o a n t i - s ô r o e s ­ p e c í f i c o — D os p a c ie n te s q u e a p r e s e n ta v a m a s m a is in te n s a s re a ç õ e s p o sitiv a s p e la té c ­ n ic a d e P e le g rin o -K a g a n (1 2 ), e r a r e tir a d o s a n g u e p a r a a o b te n ç ã o do a n ti- s ô r o . P a r ­ te d ê s te e r a m a n tid o em n a tu r e z a p a r a u t i ­ liz a ç ã o n o te s te in d ir e to ; p a r te , c o n ju g a d o com is o tio c ia n a to d e flu o re s c e in a em c e - lite , s e g u n d o a té c n ic a d e C oons, m o d ifi­ c a d a * (8 ), p a r a u tiliz a ç ã o n o s te s te s d i­ re to e d e in ib iç ã o . A n te s d a u tiliz a ç ã o n o s te ste s , o a n ti- s ô r o c o n ju g a d o é a d so rv id o n a p r e s e n ç a d e p ó d e te c id o p a r a d ê le r e ­ t i r a r o c h a m a d o “m a te r ia l flu o re s c e n te n ã o c o n ju g a d o ” (U F M ), p o r v e n tu r a e x is te n te .

A pós ê ste s p ro c e d im e n to s, u m a a m o s tr a do a n ti- s ô r o c o n ju g a d o é d ilu íd o e m p r o ­ p o rç õ e s c re s c e n te s em so lu ç ã o ta m p o n a d a d e f o s ta to - d if o s f a to d e sódio, p H 7 .1 (1 :2 ; 1:5; 1:10; 1:20) e te s ta d a s a s u a e sp e c ific i­ d a d e e in te n s id a d e d e flu o re s c ê n c ia . A m a io r d ilu iç ã o e fic ie n te — n o n o sso caso 1:10 — é to m a d a com o b a se p a r a a d ilu iç ã o do r e s ta n te do a n ti- s ô r o c o n ju g a d o que, e n ­ tã o , d is trib u íd o em a líq u o ta s d e 2m l, é e s ­ to c a d o em c o n g e la d o r (— 2 0 ° C ) .

(*) 2 m l d e s ô ro sã o m is tu r a d o s cm 2 m l d e ta m p ã o c a r b o n a to - b ie a r b o n a to d e s ó d io , p H 8 .5 . A g ita -se p o r 5 m in u to s e a d ic io n a m - s e 5-10 m g d o f lu o r o c r o m o (IT C F e m c e lite ) . N o v a m e n te é a g ita d a a m is tu r a e, e m s e g u id a , c e n t r i f u g a d a . O so b re n a d a n tí* é d e ix a d o f l u i r s ô b r e u m a c o lu n a dc S e p h a d e x G-25 p a r a f i lt r a ç ã o e s e p a r a ç ã o d o c o n ju g a d o . O p r e p a r o d a c o lu n a p o d e s e r v is to cjt i

M aic - Junho, 1968 Rev. Soe. B ras. M ed . Trop 113

4. A n t i g a m a g l o b u l i n a h u m a n a f l u o -r e s c e in iz a d a — T o m a -s e 1 m l d a a n t i - g a ­ m a - g lo b u lin a h u m a n a flu o re s c e in iz a d a co ­ m e rc ia l — W ellcom e L a b o ra to rie s , L o n - d o n ) , n o n o sso caso — e a êle se a d ic io n a m 11 m l do ta m p ã o fo s fa to -d ifo s fa to de sódio, pH 7 .1 (P B S ) . A pós m is tu r a , a d ic io n a m -s e 20 m g de pó de te c id o e a g ita - s e p o r 30 m in u to s ; c e n tr if u g a - s e a 2.000 rp m p o r 5 m i n u t o s . O s o b r e n a d a n te é d iv id id o e m a lí­ q u o ta s de 2 m l, que se p r e s ta m à u tiliz a ç ã o n o te s te in d ir e to .

5. T e s te s

a ) T e s te d ir e to — O s c o rte s de te c id o s ã o c o b e rto s com o a n ti- s ô r o c o n ju g a d o e d e ix a d o s re a g ir p o r 30 m in u to s e m c â m a r a ú m id a . A se g u ir, são la v a d o s com u m a so ­ lu ç ã o ta m p o n a d a de fo s fa to -d ifo s fa to de sódio pH 7.1 (P B S ), m o n ta d a s com o m e s­ m o ta m p ã o sob la m ín u la e la c r a d a s com e s m a lte de u n h a s .

b) T e s t e i n d i r e t o — O s c o rte s são re c o ­ b e rto s com a n ti- s ô r o n ã o c o n ju g a d o e d e i­ x a d o s r e a g ir p o r 30 m in u to s em c â m a r a ú m id a ; la v a d o s com o PB S, p H 7 .1 e n o v a ­ m e n te re c o b e rto s p e la a n ti- g a m a - g lo b u íín a h u m a n a flu o re s c e in iz a d a d u r a n te 30 m in u ­ tos, em c â m a r a ú m id a . O f in a l do p ro c e d i­ m e n to s é o m esm o d a té c n ic a d ir e ta .

c) T e s t e d e in ib iç ã o — A p rim e ir a e t a ­ p a d ê ste te s te é a m e sm a o b s e rv a d a n o te s te in d ir e to . E m se g u id a , à la v a g e m , com o ta m p ã ó , os c o rte s são n o v a m e n te e x p o sto s p o r 30 m in u to s ao a n ti- s ô r o c o n ju g a d o , em c â m a r a ú m id a , o f in a l do p ro ce sso se n d o o m e sm o j á d e s c rito .

6y E x a m e d a s p r e p a r a ç õ e s — F o i u sa d o u m fo to m ic ro sc ó p io Zeiss, com fo n te U l­ tr a v io le ta H B O 200. C om o filtro p rim á rio foi u tiliz a d o o G B 12 e, com o se c u n d á rio , o a m a re lo 530. U so u -se o c o n d e n s a d o r m a is sim p le s e, e n tr e êle e a lâ m in a , u m a g ô ta d e g lic e rin a .

7. D o c u m e n ta ç ã o — P a r a fo to g ra fia s em p r ê to - b r a n c o u sa m o s o T ri X P a n d e 400 ASA (K o d a k ) e o C T 18 ( A g f a ) , p a r a as c o lo r id a s .

R E SU L T A D O S

D os 45 c a so s h u m a n o s d e esq u isto sso m o se m a n s ô n ic a , f o ra m e s tu d a d o s o fíg a d o e o b aço em 25; e m u m , a lé m d ê ste s, lin fo n o - dos m e s e n té ric o s f o r a m ta m b é m e x a m in a ­ d o s. N os r e s ta n te s , a p e n a s o b a ç o foi p o s ­

sív el e s tu d a r . E m b o ra to d o s te n h a m sido in ic ia lm e n te e s tu d a d o s do p o n to de v is ta d a im u n o flu o re s c ê n c ia tis s u la r, 34 — p o r d is- p o re m d e d a d o s c lín ic o -la b o ra to ria is m a is c o m p le to s — fo ra m selecio n ad o s, p o r id ad e, e m 3 g ru p o s n o s q u a is se te n to u u m a c o r­

re la ç ã o c lín ic o -im u n o ló g ic a (Q u a d ro I) . P a r a t a l fim , u m c rité rio a r b itr á r io de g ra d a ç ã o d a g ra v id a d e c lín ic a foi u tilizad o , to m a n d o p o r b a se os se g u in te s d a d o s: h é - p a to e s p le n o m e g a lia , h e m o rra g ia s d ig e s ti­ v as, h ip e r te n s ã o p o r ta , c ito p e n ia s a n g u í­ n e a e p r o tid o g r a m a . P a r a a g ra d a ç ã o do

c o n ju n to d e d a d o s im u n o ló g ico s, n o fígado, fo ra m c o n s id e ra d o s os s e g u in te s ite n s : f r e ­ q ü ê n c ia d e flu o re sc ê n c ia, p re s e n ç a de m a ­ te r ia l flu o re s c e n te e x tra c e lu la r, célu la s flu o re s c e n te s n o e sp aç o p o rta , no p a r ê n - q u im a e n a s fa ix a s de fib ro se; g ra n u lo m a s e sq u isto so m ó tico s, com m a te r ia l flu o re sc e n ­ te in tr a o v u la r e n a s cé lu la s que os c ir ­ c u n d a m . No baço, p a r a o m esm o pro p ó sito , fo ra m c o n s id e ra d a s : fre q ü ê n c ia de flu o ­ re sc ê n c ia , p re s e n ç a d e c é lu la s flu o re sc e n ­ te s n a p ô lp a v e rm e lh a , n a s tra b é c u la s e n a p ô lp a b r a n c a .

N u m a v isão m a is d e ta lh a d a do q u a d ro v e rific a m -s e os se g u in te s re su lta d o s, com re la ç ã o ao b a ço :

1. No g ru p o 1 (0-19 a n o s) — com posto d e 9 casos, em 6 d êles h o u v e c o in c i­ d ê n c ia e n tr e a in te n s id a d e dos a c h a ­ dos im u n o cito ló g ico s e a g ra v id a d e c lín ic a do caso; e m 2, h o u v e p r e ­ d o m in â n c ia d a g ra v id a d e c lín ic a sô- b re os a c h a d o s im u n o ló g ic o s; f in a l­ m e n te , e m 1 caso o c o rre u o in v e rso . 2. No g ru p o 2 (20-29 a n o s, 15 casos) —

h o u v e c o in c id ê n c ia e n tr e a g ra v id a d e c lín ic a e a in te n s id a d e dos a c h a d o s im u n o ló g ic o s em 6; dos re s ta n te s , em 5 p re d o m in o u a in te n s id a d e c lín ic a e, em 4, o c o rre u o in v e rso .

3. No g ru p o 3 (30-39 anos; 9 ca so s), h o u v e c o in c id ê n c ia em a p e n a s 2; dos 7 r e s ta n te s , e m 5 p re d o m in o u a i n ­ te n s id a d e im u n o ló g ic a e, em 2, a clí­ n ic a .

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M aic - Junho, 1968 Rev. Soc. Bras. M ed . T rop. 115

los e h is tió c ito s e m ite m lu z v e rd e -m a ç ã b r i­ lh a n te , d e ix a n d o tr a n s p a r e c e r a s o m b ra n u ­ c le a r, o q u e fa z id e n tific á -lo s fà c ilm e n te . A f lu o re s c ê n c ia e sp e c ífic a e s tá d is tr ib u íd a n e sse s e le m e n to s c e lu la re s q u e in f iltr a m os e sp a ço s p o r ta , a s fa ix a s d e fib ro se e, m a is r a r a m e n te , n o s sin u só id e s. N os esp aço s p o r ta o u n a s fa ix a s de fib ro se , e s ta s c é lu ­

la s flu o re s c e n te s se d isp õ e m d ifu s a m e n te e /o u à m a n e ir a d e g r a n u lo m a s . Ê stes, ev i­ d e n c ia m s e m p re ovos ou os se u s re s to s q u itin o so s, de a c ô rd o com o esúacks ev o lu ­ tiv o em que se e n c o n tr a m . C m a te r ia l ílu o re s c e n te a p a re c e d e n tr o do ôvo, em x o rm a d e g ru m o s, e n o c ito p la s m a de c é ­ lu la s q u e se d isp õ e m e m c o ro a ;je rio v u la r.

O u tra s vêzes, q u a n d o o ôvo e s tá re d u z id o a u m a c a s c a c o n tr a íd a ( a u to f lu o r e s c e n te ) , r e s ta m a p e n a s r a r a s c é lu la s flu o re sc e n te s d a lo c a liz a ç ã o p e r if é r ic a (V eja se q ü ê n c ia e v o lu tiv a do g ra n u lo m a ) . C om re la ç ã o à s c é lu la s q u e flu o re s c e m d if u s a m e n te n o s es- e sp aço s p o r ta e fa ix a s fib ro sa s, n ã o h á d is ­ p o sição Ou c a r a c te r ís tic a s e sp e c ia is. (Figs. 1 e 2) . A p e n as, v a ria m sob o p o n to de v is­ t a q u a n tita tiv o d e caso p a r a caso, ou, às vêzes, n o m e sm o fíg a d o , em c o rte s d ife ­ r e n te s . C o n tu d o , n o ta - s e q u e o in f iltr a d o d ifu so d a s f a ix a s fib ro s a s é q u a se e x c lu s iv a ­ m e n te fo rm a d o p o r c é lu la s m o n o n u c le a d a s , fà c ilm e n te re c o n h e c ív e is p e la so m b ra n u ­ c le ar, e m b o ra n e m se m p re fôsse p ossível id e n tif ic á - la s . Às c é lu la s flu o re sc e n te s o c a ­ s io n a lm e n te v is ta s n o s sin u só id es, c o n sid e ­ ra m o s com o c é lu la s de K u p f f e r .

Os c o rte s h isto ló g ic o s dos fíg a d o s, e s tu ­ d a d o s p e la s té c n ic a s u su a is, m o s tra m os a sp e c to s j á co n h e cid o s, d esd e d isc re to s i n ­ filtra d o s in f la m a tó r io s p o rta is , com ou sem g ra n u lo m a s esq u isto so m ó tic o s, a té a s f a i­ x a s de fib ro se p o r ta l c a r a c te r ís tic a s rias f o r ­ m a s a v a n ç a d a s d a “ fib ro se h e p á tic a tip o

S y m m e rs '’. T o d a v ia , o in f iltr a d o c e lu la r dos e sp a ço s p o r ta is e f a ix a s de fib ro se , a lé m dos e le m e n to s c e lu la re s o b se rv a d o s a t r a ­ vés d a lu z u ltr a v io le ta (h istió tic o s e p o li-

m o rfo n u c le a re s n e u tr ó f ilo s ) , a p r e s e n ta a i n ­ d a c é lu la s lin fó id e s, p la s m ó c ito s e o u tr a s c é lu la s de o rig e m d is c u tid a , s e m e lh a n te s à q u e la s v is ta s n o s co rd õ es esp lê n ico s e que, ao c o n tr á r io dos lin fó c ito s e p la sm ó c ito s, flu o re sc e m co m a té c n ic a p o r n ó s e m p re ­ g ad a p a r a d e te c ta r a n tíg e n o s . F in a lm e n ­ te, c o m p a ra n d o -s e os a c h a d o s h isto ló g ic o s e im u n o c ito q u ím ic o s, o b s e rv a -s e e x is tê n c ia de c o rre la ç ã o p o s itiv a e n tr e a riq u e z a c e­

lu la r d os esp a ç o s e fa ix a s de fib ro se p o r­ ta is , v is ta sob m ic ro sc o p ia de luz, e o n ú ­ m e ro d e cé lu la s flu o re sc e n te s v isu a liz a d a s a tr a v é s d a lu z u ltr a v io le ta .

E S T UD O IMU NO C ITO LÓ G IC O E H IS TO - L Ó G IC O D OS BAÇOS — Do p o n to de v is­ t a d a d isp o siç ão e c a r a c te r ís tic a s c e lu la ­ res, os b a ç o s se c o m p o rta m ao e x am e sob m ic ro sc o p ia de flu o re sc ê n c ia de u m a m a ­ n e ir a m a is ou m e n o s u n ifo rm e . As c é lu ­ la s flu o re s c e n te s a p a re c e m se m p re n a p ô l­ p a v e rm e lh a de m a n e ir a d ifu s a e re g u la r, d e t a l m o d o q u e q u a lq u e r c a m p o e x a m in a d o p o d e ria s e r c o n sid e ra d o com o r e p r e s e n ta ­ tiv o do c o n ju n to . (F ig . 3) As c. lu la s flu o ­ r e s c e n te s e s tã o se m p re d is p o s ta s n a i n t i ­ m id a d e dos co rd õ es de B illro th e, m en o s f r e q ü e n te m e n te , n o lito r a l dos sin u só id e s. (F ig . 4) O s e le m e n to s flu o re s c e n te s n a p ô lp a v e rm e lh a sã o p re d o m in a n te m e n te de fo rm a ovóide, e n tr e ta n to c é lu la s a lo n g a ­ d a s ta m b é m sã o v ista s, e m b o ra em m e n o r n ú m e ro . A p ô lp a b r a n c a p r à tic a m e n te se a p r e s e n ta d e sp ro v id a de c é lu la s flu o re s­ c e n te s (ex c eto em ra ro s casos o n d e u m a ou o u tr a c é lu la é v is ta sem lo c alização r e ­ g u la r ) , se n d o fà c ilm e n te id e n tific a d a p elas a r e a s e s c u ra s q u e os fo lícu lo s d e te rm in a m n a s p re p a ra ç õ e s em c o n tr a s te com as c é ­ lu la s flu o re s c e n te s d a p ô lp a v e rm e lh a que d e lim ita o fo lícu lo (F ig s. 3 e 5) O c a sio ­ n a lm e n te , c é lu la s flu o re sc e n te s e s p a rs a s sã o v is ta s n a in tim id a d e d a s tra b é c u la s .

(F ig . 6)

116 Rev. Soc. Bras. M ed . T rop. Vol. n — N? 3

A SPEC TOS P A R T IC U L A R E S DO M AT E ­ RIA L E DAS CÉLULAS FL UO RE SC E N T E S

S endo o o b je tiv o f u n d a m e n ta l d e s ta e x ­ p e riê n c ia a d e te c ç ã o d e a n tíg e n o n o s te c i­ dos, v a le r e g is tr a r a f o rm a sob a q u a l êle se a p r e s e n to u . No in te r io r d e ovos a in d a ín te g ro s, o m a te r ia l flu o re sc e n te se m o stro u h o m o g ê n e o . Q u a n d o , p o ré m se d a v a a ex - tru s ã o , o e x a m e e m m a io r a u m e n to (500 a lOOOx) d e m o n s tra a e x is tê n c ia d e f in a s p a r tíc u la s c o n g lo m e ra d a s, liv re s ou n o c i- to p la s m a d a s c é lu la s. E s ta c a r a c te r ís tic a m o rfo ló g ica é c o m u m à s c é lu la s flu o re s c e n ­ te s in d e p e n d e n te s de g ra n u lo m a , n o fíg a d o e no b a ç o .

C o m p a ra n d o os a c h a d o s c e lu la re s o b s e r­ vados à m ic ro sc o p ia c o m u m com os a s p e c ­ to s visto s a tr a v é s d a im u n o flu o re s c ê n c ia , é possível a d m itir que os e le m e n to s c e lu la re s po lig o n a is flu o re sc e n te s c o rre s p o n d a m a cé ­ lu la s h is tio c itá ria s ; os p o lim o rfo n u c le a re s n e u tró filo s, p o r o u tro lad o , sã o f à c ilm e n te re c o n h e c ív e is à luz u ltr a v io le ta . A i d e n t i ­ ficação , c o n tu d o , dos e le m e n to s c e lu la re s alo n g ad o s, que ta m b é m se m o s tra m flu o re s ­ ce n te s, o c a sio n a is n o fíg a d o e m a is f r e ­ q ü e n te s n o s cordões esp lên ico s, n ã o n o s foi possível re a liz a r.

SEQÜÊNCIA EVO LU TIV A DO G R A NU - LGMA ESQ U ISTOSO M ÓTICO À M IC R OS ­ CO PIA DE FLUO RESC ÊN C IA — Do e stu d o de n u m ero so s c o rte s de fíg a d o e lin fo n o d o s o n d e re a ç õ e s g ra n u lo m a to s a s ao ôvo de

S .M . a p a re c ia m sob v a ria d o s a sp e c to s, c a ­ ra c te rís tic o s de u m pro cesso d in â m ic o , é possível co m p o r a s e g u in te se q ü ê n c ia evo­ lu tiv a :

1) ôvo ín te g ro , re p le to de m a te r ia l flu o ­ re s c e n te específico, n a fo rm a de m a s s a s ou g ru m o s, sem flu o re sc ê n c ia d e cé lu la s em tô rn o ; (fig . 7) .

2) ôvo com c a s c a r ô ta , e x tr a v a s a m e n to p a rc ia l do m a te r ia l flu o re s c e n te esp ecífico e p re s e n ç a de a lg u m a s c é lu la s c a r r e g a d a s d e m a te r ia l flu o re s c e n te n a e s tr e ita v izi­ n h a n ç a d a c a sc a (fig . 8 );

3) ôvo le v e m e n te c o n tra íd o , e sv az ia d o de m a te r ia l flu o re s c e n te esp e c ífico e c ir ­ c u n d a d o de g ra n d e n ú m e ro de c é lu la s flu o ­ re sc e n te s (fig . 9 );

4) ôvo to ta lm e n te vazio, e n v o lto p o r u m a co ro a de cé lu la s flu o re s c e n te s , s e g u i­ d a d e u m h a lo o n d e a s c é lu la s flu o re s c e n ­ te s são r a r a s e m a is p e rif è r ic a m e n te c ir ­ c u n d a d o p o r u m a z o n a d e n s a m e n te p o v o a ­

d a d e e le m e n to s flu o re s c e n te s (fig s . 10 e

1 1 ) .

5) C a sc a de ôvo to ta lm e n te v azia, d e s ­ p ro v id a d e e n v o ltó rio d e c é lu la s flu o re s ­ c e n te s, n o ta n d o - s e r a r a s c é lu la s flu o re s ­ c e n te s e m d isp o siç ão a in d a c irc u la r, p o ré m m u ito d is ta n te do ôvo (fig . 12) .

A p e sa r d a i n te n s a fa g o c ito se , m a te r ia l flu o re s c e n te e m g ru m o s ta m b é m é v isto e x tr a c e lu la r m e n te , m esm o n o s e s tá d io s f i­ n a is a c im a e n u m e ra d o s .

CO MEN TÁ R IOS

U tiliz a m o s d e lib e ra d a m e n te a s té c n ic a s p a r a d e te c ç ã o d e a n tíg e n o em te c id o s a p a r t i r do a n ti- s ô r o d e p a c ie n te s e sq u isto so - m ó tic o s flu o re sc e in iz a d o (te s te d ire to ) p o r s e r re c o n h e c id a m e n te a q u ê le q u e p e rm ite fix a r d ir e ta m e n te o a n tic o rp o sô b re o a n ­ tíg e n o ; ou do a n ti- s ô r o n ã o m a rc a d o ( p r i­ m e ira fa s e do te s te in d ire to ) q u e fu n c io n a com o p e ç a in te r m e d iá r ia e s p e c ífic a e n tr e o a n tíg e n o e a a n ti- g a m a - g lo b u lin a flu o ­

re s c e in iz a d a . D e m odo d iv e rso se tê m c o m ­ p o r ta d o a lg u n s a u to r e s (3) q u e u s a r a m a n ti- g a m a - g lo b u lin a a n tie s p é c ie flu o re s c e i­ n iz a d a , a p lic a d a d ir e ta m e n te sô b re os t e ­ c id o s. T a l p ro c e d im e n to c o n d ic io n a a p e n a s a v isu a liz a ç ã o d e g a m a -g lo b u lin a s p r e s e n ­ te s n o in te r io r d a s cé lu la s, q u e e m b o ra p o s­ s a m in c lu ir a n tic o rp o s esp ec ífico s d a d o e n ­ ç a em c a u s a , c o n tê m sem d ú v id a o u tro s a n tic o r p o s .

F ig . 1 — F íg a d o — C a s o 44 — C é lu la s f lu o r e s c e n t e s d if u s a m e n t e d is t r ib u í­ d a s e m f a ix a d e f ib r o s e p o r t a l ( a p r o x . 63 x ) .

F ig . 2 — F íg a d o — C a so 30 — C é lu la s f lu o r e s c e n t e s d e d is t r ib u iç ã o ir r e g u la r e m p la c a d e fib r o s e p o r t a l. P r a t ic a m e n t e t ô d a s a s c é lu la s s ã o m o n o n u c le a d a s ( a p r o x . 160 x ) .

F ig . 3 — B a ç o — C a s o 29 — C é lu la s f lu o r e s c e n t e s d is t r ib u íd a s n a p ô lp a v e r m e lh a . A á r e a e s c u r a c o r r e s p o n d e a f o l í -c u lo li n f ó i d e . (A p r o x . 63 x ) .

F ig . 4 — B a ç o — C a s o 38 — D e t a lh e d a p ô lp a v e r m e lh a d e m o n s t r a n d o c é lu la s f lu o r e s c e n t e s n o s s in u s ó id e s ( a p r o x . 160 x ) .

F ig . 5 — B a ç o — C a s o 44 — D e t a lh e d e m o n s t r a n d o lim it e e n t r e a p ô lp a v e r m e lh a ( à e s q u e r d a ) e a p ô lp a b r a n c a ( à d ir e it a ) , n o t a n d o - s e a u s ê n c ia d e f lu o r e s c ê n c ia n e s t a ú lt im a , e x c e t o e m u m a c é lu la p r o v a ­ v e lm e n t e d e n t r o d a a r t e r ío la c e n t r o - f e lic u la r

( a p r o x . 160 x ) .

F ig . 7

F ig . 8

F i g . 9

F ig . 10

F ig . 11

F ig . 12

G â n g lio — C a s o 31 — O v o r e p le t o d e m a t e r ia l f lu o r e s c e n t e e s p e c í ­ f ic o ; a u s ê n c ia d e c é lu la s f l u o r e s c e n t e s e m t ô m o (A p r o x . 160 x ) .

G lâ n g io — C a s o 31 — O v o c o m c a s c a r ô t a c o m e x t r a v a z a m e n t o p a r ­ c ia l d o m a t e r ia l f lu o r e s c e n t e e s p e c íf ic o ; a lg u ­ m a s c é lu la s f lu o r e s c e n t e s s ã o v i s t a s n a v iz i­ n h a n ç a d a c a s c a (A p r o x . 160 x ) .

• F íg a d o

• F íg a d o — C a s o 30

F íg a d o

F íg a d o

C a s o 31 — O v o c o m c a s c a v a z ia d e m a t e r ia l f lu o r e s c e n t e ; n u m e r o s a s c é l u l a s f lu o r e s c e n t e s c ir c u n d a m -- n o ( A p r o x . 160 x ) .

G r a n u lo m a e m c o m p le t o d e s e n v o lv im e n t o (Aprox. 63 x ).

C a s o 30 — D e t a lh e d o c e n t r o d e u m g r a n u lo m a , v e n d o -- s e o v o v a z io , e n v o lt o p o r m a t e r ia l f lu o r e s c e n ­ t e e s p e c íf ic o , liv r e e f a g o c it a d o (A p r o x . 40 0 x ) .

Medo - Junho, 1968 Rev. Soe. Bras. M ed T rop. 121

ovos r e p r e s e n ta m u m c o n s id e rá v e l ac êrv o a n tig ê n ic o . C o n tu d o com o a n o s s a a m o s ­ t r a r e p r e s e n ta a d o e n ç a n a s u a fo rm a h é - p a to e s p lê n ic a , o n d e fe n ô m e n o s d c n a tu r e z a c ir c u la tó r ia p a r tic ip a m d a s u a a p r e s e n ta ­ ç ão c lín ic a , n o sso o b je tiv o foi o d e v e rifi­ c a r a té q u e p o n to a fe n o m e n o lo g ia im u - n o ló g ic a c o n tin u a v a a a t u a r .

P a re c e -n o s líc ito a d m itir s e r o b a ç o m a is re p r e s e n ta tiv o d a s a lte ra ç õ e s im u n o ló g ic a s, s o b re tu d o e m c r ia n ç a s e in d iv íd u o s jo v e n s (g ru p o s I e I I ) , o q u e s e ria c o m p re e n s í­ vel te n d o e m v is ta s e r ê s te ó rg ã o re c e p to r e t r a d u t o r d a s m a n ife s ta ç õ e s im u n o ló g ic a s. No fíg a d o , ao c o n tr á r io — u m dos ó rg ã o s o n d e se a s s e s ta m a s a lte ra ç õ e s f r e n te a v erm es, ovos e seu s p ro d u to s — o a c h a d o d a flu o re s c ê n c ia e s p e c ífic a e m b o ra n o s t r a g a a sp e c to s in te r e s s a n te s n o q u e se r e ­ fe re a o s g ra n u lo m a s e ao in f iltr a d o d ifu so do e sp a ç o p o r ta e d a s f a ix a s d e fib ro se, se m o s tro u ir r e g u la r e m d is trib u iç ã o . E s ta c o n s ta ta ç ã o d e m o n s tr a a e sc a ssa p ro b a b ili­ d a d e d e q u e a m o s tra s , n e c e s s à r ia m e n te co ­ lh id a s ao a ca so , v e n h a m a s e r r e p r e s e n ta ­ tiv a s p a r a a a v a lia ç ã o d a in te n s id a d e d a d o e n ç a . P o r ta is m o tiv o s, d e ix a m o s d e a v a ­ lia r os r e s u lta d o s c o n c e rn e n te s ao s a sp e c to s im u n o ló g ic o s h e p á tic o s .

F in a lm e n te , p o d e ría m o s a f ir m a r q u e o baço, a p a r tic u la r m e n te s u a p ô lp a v e rm e ­ lh a , se c o m p o rta à lu z u ltr a v io le ta com o u m e sp e lh o dos fe n ô m e n o s im u n o ló g ico s d e se n c a d e a d o s p e la c irc u la ç ã o d e a n tíg e - n o s n e s ta d o e n ç a . Ê ste a sp e c to se c o a d u n a p e r f e ita m e n te com a s co m p ro v aç õ e s o b ti­ d a s a tr a v é s d e e x p e rim e n ta ç ã o em a n im a is . (2 e 21) .

2. A SPE C TOS IM U NO C ITO L Ó G IC OS —

F ig a d o — É c o n h e c id o o e n c o r tr o t a n to

n o s e sp a ç o p o r ta com o e m fa ix a s d e f i­ b ro se, d e c é lu la s in f l a m a t ó r i a s . E n tr e ta n to fa z ia - s e n e c e s s á rio a n a lis a r a n a tu r e z a e s ­ p e c ífic a o u n ã o d ê ste s e le m e n to s c e lu la ­ re s . E m n o s sa s p re p a ra ç õ e s e x a m in a d a s sob lu z u ltr a v io le ta , v á r ia s d e s ta s c é lu la s a p a re c e m flu o re s c e n te s, c o m p ro v a n d o que m e sm o n a ev o lu ção d e lesõ es fib ro p lá sic a s d a h e p a to p a tia c rô n ic a e sq u isto so m ó tic a , a p a r tic ip a ç ã o do m e c a n is m o im u n o ló g ic o c o n tin u a a se fa z e r . U m o u tro a s p e c to d ig ­ n o d e r e g is tro fo i a o b se rv a ç ã o d e f r a g ­ m e n to s, a s vêzes d im in u to s , d e c a s c a de ovos a u to flu o re s c e n te s , n ã o v isu a liz a d o s n a s p re p a ra ç õ e s h isto ló g ic a s r e a liz a d a s n o s

m e sm o s c o rte s . R a r a m e n te foi e n c o n tra d a a flu o re s c ê n c ia e m c é lu la s sin u so id ais, c o n ­ s id e r a d a s com o de K u p f f e r . A trib u ím o s a r a r id a d e d ê s te a c h a d o à p o ssib ilid ad e de blo q u eio a n te r io r d e s ta s c é lu la s fa g o c itá ria s p o r p ig m e n to s d o p a r a s ito , com o sugerido

e m tr a b a lh o e x p e rim e n ta l (2 2 ).

R e c e n te m e n te , A n d ra d e (4 ), te n ta n d o d e ­ t e c t a r a n tic o rp o e n ã o a n tíg e n o com o no p r e s e n te tr a b a lh o , em fíg a d o de p a c ie n te s e sq u isto so m ó tic o s, d esc re v e o a c h a d o , e m ­ b o ra r a ro , d e flu o re sc ê n c ia e sp e c ífic a em c é lu la s “lo c a liz a d a s d a m e s m a m a n e ir a que a s c é lu la s d e K u p f f e r ” . A c h a m o s e s tr a n h a e s ta o b se rv a ç ã o , b e m com o a in te r p r e ta ç ã o do a u to r d e q u e a c é lu la d e K u p ffe r se h o u v esse d ife re n c ia d o e m c é lu la fo rm a d o ra de a n tic o rp o .

P o r o u tro la d o , o e n c o n tro “de in f i l t r a ­ ç ã o ” p o r ta l d ifu s a , m e sm o n o s casos a v a n ­ ç a d o s d a e sq u isto so m o se h é p a to e sp lê n ic a , te m sid o d isc u tid o p o r a lg u n s a u to re s (4 e 5 ), com o in d ic a tiv o de u m a h e p a tite em evolução, n ã o h a v e n d o a c ô rd o q u a n to à s u a e sp e c ific id a d e . A n d ra d e (4 ), co m e n ­ t a n d o o p ro b le m a , a d m ite com o provável

u m m e c a n is m o de h ip e rs e n sib ilid a d e r e t a r ­ d a d a p a r a e x p lic á -lo . A c re d ita m o s h a v e r d e m o n s tra d o , com os d a d o s a c im a r e f e r i­ dos, q u e a p r e s e n ç a do “ in f iltr a d o ” in f la m a - tó rio d ifu so , n ã o re la c io n a d o com g ra n u lo - m a e s is te m a tic a m e n te o b se rv a d o n o s e s­ p a ç o p o r ta e n a s fa ix a s de fib ro se, tr a d u z

u m g r a n d e c o n tin g e n te a n tig ê n ic o re tid o p e la s cé lu la s fa g o c itá ria s e que n a t u r a l ­ m e n te g a r a n te a c o n tin u id a d e d as reaçõ es e s p e c ífic as n o n ív e l d e s ta s e s tr u tu r a s . N ão n o s p a re c e c a b e r d u v id a , p o r ta n to , de que n a b a s e dos fe n ô m e n o s fib ro p lá sic o s p o rta is e d a d a c h a m a d a “h e p a tite c rô n ic a ” se e n ­ c o n tr a a e tio lo g ia esq u isto so m ó tic a re p r e ­ s e n ta d a p e la s s u a s fra ç õ e s a n tig ê n ic a s .

Q u a n d o se o lh a m a s lesõ es p o rta is em a tiv id a d e , s o b re tu d o a tr a v é s do â n g u lo h is - to fu n c io n a l q u e n o s fa v o re c e ra m a h is to - q u ím ic a e a im u n o c ito q u ím ic a , p e rc e b e -se u m a s e m e lh a n ç a e n tr e ela s e a p ô lp a v e r­ m e lh a do b aço , com o se “m ic ro -ó rg ã o s ” re - tíc u lo -e n d o te lia is se h o u v e sse m d e se n v o lv i­ do n e s ta s á r e a s .

B a ç o — A u n ifo rm id a d e de d istrib u iç ã o

d a s c é lu la s flu o re s c e n te s n a p ô lp a v e rm e ­ l h a do b a ç o c a r a c te r iz a m a is u m a vez o

122 Rev. Soc. Bros. M ed . T rop. VoL H — N? 3

h a v e re m d e m o n s tra d o , com o j á e r a do co ­ n h e c im e n to p ré v io : dois a sp e c to s m o rfo ló - gicos (h ip e rc e lu la rid a d e d a p ô lp a v e rm e ­ lh a , h ip e r p la s ia e n d o te lia l e dos ío líc u lo s;

e e m o u tro tip o , fib ro se s u p e rp o s ta a o s a sp e c to s a n te r io r e s ) , n ã o h o u v e d ife re n ç a d e te c tá v e l n a d is trib u iç ã o e lo c a liz a ç ã o d a s cé lu la s flu o re s c e n te s e n tr e ê s te s d o is tip o s .

A r a r a p r e s e n ç a d e e le m e n to s flu o re s ­ c e n te s in d ic a tiv o s d e a n tíg e n o n o s fo lícu lo s lin fó id es, com o j á r e f e r id a em v á rio s t r a ­ b a lh o s e x p e rim e n ta is (7, 14, 22 e 33) ju s ti- fic a -s e p elo f a to d e a s u a p o p u la ç ã o s e r c o n s titu íd a p o r c é lu la s lin fó id e s jo v e n s, p re c u rs o ra s d a s f o rm a d o ra s d e a n tic o rp o s e n ã o f a g o c itá r io s . M u ito a o c o n trá rio , n a p ô lp a v e rm e lh a se s itu a m , t a n t o n o lito ­ r a l com o n a in tim id a d e dos co rd õ es, n u ­ m e ro sa s c é lu la s fa g o c itá r ia s .

3. CO NSIDER A Ç Õ ES G E R A IS SÔ B R E O M ATER IA L E AS CÉLULAS F L UO RE SC E N ­ T E S — A f o rm a sob a q u a l o m a te r ia l flu o ­ re s c e n te foi v isu a liz a d o le v a -n o s a a d m i­ t i r a n a tu r e z a p a r tic u la d a d o co m p lex o a n - tig ê n ic o o b se rv a d o . No e n ta n to , ê s te f a to n ã o n o s a u to riz a a a f a s t a r a p o ssib ilid a d e d a e x is tê n c ia d e fra ç õ e s a n tig ê n ic a s so lú ­ veis, q u e a té c n ic a u tiliz a d a n ã o p e rm ite d e te c ta r .

Q u a n to à s cé lu la s flu o re sc e n te s , p o d em o s a f ir m a r s e re m f a g o c itá r ia s . P o lim o rfo n u - c le a re s n e u tró filo s e h is tió c ito s f o ra m p e r ­ fe ita m e n te re c o n h e c id o s, s o b re tu d o n a s le ­ sões g ra n u lo m a to s a s p e r io v u la r e s . Ao c o n - tá rio , p e q u e n a s cé lu la s re d o n d a s e c é lu la s a lo n g a d a s , e s ta s ú ltim a s m a is f r e q ü e n te ­ m e n te lo c a liz a d a s n a p ô lp a v e rm e lh a do baço, n ã o p u d e ra m s e r c la s s ific a d a s . E s ta d ific u ld a d e j á h a v ia sid o e n c o n tr a d a p o r a lg u n s a u to re s . A ssim W h ite (3 3 ), u s a n d o te s te d ire to p a r a d e te c ç ã o de a n tíg e n o n o b aço de g a lin h a , re fe re te x tu a lm e n te q u e “a n tig e n w a s m a in ly d e te c te d in o r on r a t h e r e lo n g a te d s p in d le - s h a p e d cells, w h ic h w h e re d is tr ib u te d in th e w h ite p u lp n e a r t h e m a r g in w ith t h e re d p u ip ”, o m i­ tin d o a . id e n tid a d e d ê s te s e le m e n to s . A n ­ d ra d e & A n d ra d e , (3) r e f e r ir a m - s e a “ cé ­

lu la s fu s ifo rm e s c o m p rim id a s n a p ô lp a e s- p l ê n i c a .. . c o n fu n d ív e is com fib ro b la s to s ”, à s q u a is a tr ib u e m n a tu r e z a r e tíc u la i, b a ­ se a d o s e m m é to d o h is to q u ím ic o .

4 . CO NSIDER A Ç Õ ES SÔ B R E A S E ­ Q Ü ÊN CIA EVO LU TIV A DO G RA NULOM A

E S Q U IS TOSO M ÓT ICO — O q u a d ro g e ra l d a s a lte ra ç õ e s im u n o ló g ic a s lo c a is f r e n te a o ôvo d e S c h i s t o s o m a m a n s o n i se c o m ­ p o r ta d e m o d o s e m e lh a n te ao a d m itid o p a r a o u tro s a g e n te s p a r a s itá r io s e n d ó g e - n o s . O ôvo n ã o se lim ita a d e s p e r ta r s im ­ p le s m e n te u m a re a ç ã o do tip o “c o rp o e s ­ t r a n h o ” , m a s c a r a c te r iz a u m co m p lex o r e a - c io n a l esp e c ífico c o n tr a o m a te r ia l a n t i - g ên ic o q u e c o n té m . C om o fic o u d e m o n s ­ tr a d o , a p ó s a r o t u r a d a c a sc a e c o n s e q ü e n ­ te e x tru s ã o d os p ro d u to s do m ira c íd io , te m in íc io u m a r e a ç ã o f a g o c itá r ia lo cal, que se p ro lo n g a a té o to ta l e s v a z ia m e n to d a c a r g a a n tig ê n ic a do ôvo. Q u a n to a o m a te ­ r ia l flu o re s c e n te e x tra c e lu la r, p r e s e n te p o r vêzes n a v iz in h a n ç a do ôvo, a d m itim o s r e ­ s u l t a r d e in s u fic ie n te c a p a c id a d e f a g o c itá ­ r i a . T a lv e z e s ta o c o rrê n c ia s e ja a e x p lic a ­ çã o p a r a o fe n ô m e n o d a “ f r a n j a eo sin o - fílic a ” d e s c r ita e m o u tr a p a r te (1 9 ). E m e stá g io s p o ste rio re s , q u a n d o a p e n a s re s ta m os fra g m e n to s d a c a sc a , a s c é lu la s fa g o c i­ tá r i a s flu o re s c e n te s sã o e n c o n tr a d a s d is­ ta n te s do c e n tro do g ra n u lo m a , p a re c e n d o h a v e r o c o rrid o u m a m ig ra ç ã o a tiv a d ê ste s e le m e n to s c e lu la re s p a r a os e sp a ç o s p o r ta e fa ix a s d e fib ro se , n o caso do fíg a d o .

E x p e rim e n ta lm e n te , o g r a n u lo m a esq u is- to so m ó tic o j á h a v ia sid o e s tu d a d o sob im u ­ n o flu o re s c ê n c ia (1) e, e m b o ra n ã o h o u v e s­ se sid o te n ta d o u m e stu d o d a s u a evolução, a lg u n s d os a s p e c to s d e sc rito s c o in c id e m com os a g o r a a p r e s e n ta d o s .

A G R ADEC IM EN TO

Mcric - Junho, 1968 Rev. Soc. Bras. M ed . T rop. 123

S U M M A R Y

F l u o r e s c e n t a n t i b o d y t e c h n i c s w e r e u s e d to d e t e r m i n e t h e lo c a liz a tio n a n d d i s t r i b u t i o n o f s c h i s t o s o m a l a n t i g e n i n t i s s u e c e lls , u s i n g s u r g ic a l s a m p l e s o f liv e r , s p l e e n a n d l y m p h n o d e s . S a m p l e s o b t a i n e ã f r o m 45 p a t i e n t s d u r in g s p i e n e c t o m y w e r e J r o z e n i n ã r y - i c e - a c e t o n e b a t h a n d s e c t i o n s 4 n t h i c k w e r e c u t o n a c r y o s t a t m i c r o t o m e . S i m i l a r s e c ti o n s w e r e f i x e d f o r r o u t i n e h is to lo g ic a l a n ã h i s t o c h e m i c a l s t u d y .

S e r u m s a m p l e s w e r e ó b t a i n e d f r o m s e l e c t e d p a t i e n t s b y s k i n t e s t a n d c o n j u g a t e d w i t h f u o r e s c e i n i s o t h i o c y a n a t e a c c o r d in g to t h e m o d i f i e d m e t h o d o f C o o n s e t a l . F o r lo c a liz in g t h e s i t e s o f a n t i g e n d e v o s z tio n i n ti s s u e c e lls , d ir e c t a n d i n d i r e c t t e s t s w e r e p e r f o r m e d u s i n g f l u o r e s c e i n a t t a c h e d t o t h e a n t i b o d y ( f r o m p a t i e n t s s e r u m ) . T h u s t h e s ite s o f a n t i g e n - a n t i b o d y c o m b i n a t i o n c o u ld b e i ã e n t i f i e ã b y t h e i r a p p l e - g r e e n b r i g h t f l u o r e s c e n c e . F o r c o n f i r m a t i o n o f s p e c i f i t y i n h i b i t i o n , t e s t s w i t h n o n - c o n j u g a t e ã s e r u m f r o m t h e s a m e p a t i e n t s lo e r e p e r f o r m e d .

T h e p r e s e n c e o f a n t i g e n o n t h e s p le e n a n ã t h e i r r e l a t i v e a m o u n t w e r e a r b i t r a r i l y g r a d e d a c c o r d in g t o t h e f r e q u e n c e o f c e lls i n v o lv e d , so t h a t a n a t t e m p t w a s m a ã e t o c o r r e l a t e t h e i m m u n o l o g i c a l f i n d i n g w i t h t h e c lin ic a i a s p e c t s o f t h e p a t i e n t s . T h e p a t i e n t s w e r e ã i v i d e d i n 3 g r o u p s (0 t o 19, 2 0 t o

29 a n d 30 t o 39 y e a r s o f a g e ) a n d w e r e g r a d e d a c c o r d in g t o t h e s e v e r i t y o f s y m p t o m s . A p o s i t i v e r e la t ic m s h ip w a s f i n ã i n t h e f i r s t g r o u p (0 -1 9 y e a r s ) w i t h a s u g g e s t i v e p a r a l l e l i s m b e t w e e n t h e i m m u n o l o g i c a l a n ã c li n i c a i a s p e c t s .

P a t h o lo g ic a l f i n d s : — T h e s p le e n f r o m p a t i e n t s o f a li t h r e e g r o u p s s h o w e d h y p e r p l a s i a o f l y m p h a t i c fo l lic le s w i t h a la r g e g e r m i n a l c e n t e r a n d h y p e r p la s ia o f t h e r e d p u l p ; t h e s i t e s o f a n t i g e n d e p o s i t i o n w e r e f o u n ã b y t h e f l u o r e s c e n t a n t i b o d y t e c h n i c i n c e lls o f t h e r e d p u l p r e c o g n iz e d a s n e u t r o p h i l s a n d h i s t i o -c y t e s , t h e y w e r e l o -c a te d i n t h e s in u s o id s a n d B i l l r o t h -c o r d s a n d s o m e i n t h e t r a b e c u l a e .

T h e c e lls o f t h e l y m p h a t i c c e n t e r s ã iã n o t s h o w f l u o r e s c e n c e .

T h e p a t h o l o g i c a l c h a n g e s o b s e r v e d i n t h e l i v e r w e r e c h a r a c te r iz e d b y i n f l a m a t o r y c e lls i n f i l t r a t i n g t h e p o r t a l s p a c e s a n ã p o r t a l fib r o s is c h a r a c te r is tic a s t h a t d e s c r ib e ã i n S y m m e r s “c ir r h o s is ” . T h e y w e r e lo c a te d , i m m e ã i a t e l y a r o u n d t h e e g g s , i n s e v e r a l la y e r s o f h i s t i o c y t e s a n d n e u t r o p h i l s ( s o m e e o s in o -p h i l s ) , o r a ã i f u s e i n f i l t r a t i o n o f t h o s e c e lls w e r e -p r e s e n t i n -p o r t a l s -p a c e s w i t h o r w i t h o u t fib r o s is s u g g e s t i n g n o r e l a t i o n s h i p t o t h e e g g s .

T h e c e n t r a l a r e a o f t h e g r a n u l o m a c o r r e s p o n â i n g to t h e e g g s u b s ta n c e s h o w e ã b r i g h t fl u o r e s c e n c e , w i t h t h e s u r r o u n ã i n g c e lls . W h e n t h e e g g w a s e m p t y a n ã t h e s h e l l s h r u n k e ã , t h e f l u o r e s c e n t m a t e r i a l w a s f o u n ã a r o u n d t h e s h e ll, a n d t h e n u m b e r o f f l u o r e s c e n t c e lls w e r e m o r e p r o e m i n e n t i n t h e g r a n u l o m a .

T h e ã i f f e r e n t s a s p e c ts r e l a t e d to t h e a n t i g e n i c m a t e r i a l c o r r e s p o n d in g t o t h e e g g s u b s t a n c e , w h i c h s h o w e d p o s i t i v e to f l u o r e s c e n t e a n t i b o d y a n ã t h e p r e s e n c e o f f l u o r e s c e n t c e lls a r o u n d , p e r m i t t o ã e s c r ib e a p a t t e r n o f t h e g r a n u lo m a m e c h a n i s m : 1 s t ) T h e e g g is f u l l o f f l u o r e s c e n t m a t e r i a l w i t h o u t f l u o r e s c e n t c e lls a r o u n ã ; 2 n ã ) t h e e g g s h e l l s h o w s ã i s r u p t u r e a n ã f l u o r e s c e n t m a t e r i a l s t a r t s t o c o m e o u t ; s o m e f l u o r e s c e n t c e lls a r e f o u n ã j u s t a b o u t t h e s h e l l ; 3 r ã )

t h e e g g s h e l l is c o n t r a c t e d a n ã e m p t y , f l u o r e s c e n t m a t e r i a l c a n b e f o u n ã a r o u n ã 4 t h ) t h e e g g s s h e l l is r e d u c e ã t o a s h r u n k e d U n e ( n o n s p e c if ic flu o r e s c e n t ) w i t h a n ã a la r g e n u m b e r o f f l u o r e s c e n t c e lls s u r r o n ã t h e s h e l l ( f u l l s iz e g r a n u l o m a ) ; a n a r e a o f n o n f l u o r e s c e n t c e lls , s u r r o n d e ã b y a z o n e o f f l u o r e s c e n t c e lls ; 5 t h ) . F in a lly , t h e g r a n u l o m a is r e d u c e ã t o a s h r u n k e ã s h e l l s u r r o n ã e d b y a f e w f l u o r e s ­ c e n t c e lls f a r f r o m t h e c e n t e r . L y n p h n o d e s , a s w e ll a s t h e s p le e n , d i d n o t s h o w f l u o r e s c e n t c e lls i n t h e l i m p h a t i c fo lli c le s b u t t h e y w e r e v e r y la r g e a n d q u i t e a n u m b e r o f e g g s w e r e l o c a t e d i n t h e r e t i c u l a r c a p p ila r i e s . T h e g r â n u loi- m a t o u s r e a c ti o n s ã i ã n o t s h o w d i f f e r e n c e s f r o m t h o s e d e s c r ib e ã i n t h e l iv e r .

124 Rev. Soc. B ras. M ed . T rop. VoL II — N° 3

B IB L IO G R A F IA

1 — ANDRADE, Z .; PA RO NE T TO , F . & P O P PE R , H . — Im m u n o c y to c h e m ic a i s tu d ie s in S c h is to s o m ia s is . A m . J . 14 - P a t h . 39: 589-598, 1961.

2 — ANDRADE, Z . — A sp ecto s e x p e ri­ m e n ta is d a e s p le n o m e g a lia d a es- q u isto so m o se . R e v . I n s t . M e d . T ro p .

S ão P a u lo , 4: 249-255, 1962.

3 — ANDRADE, Z. & ANDRADE, S .G . — P a to lo g ia do B aço n a E sq u isto so m o - se h é p a to e s p lê n ic a . R e v . I n s t . M ed . 15 - T ro p . S ão P a u lo , 7: 218-227, 1965.

4 — ANDRADE, Z .A . — O P ro b le m a d a h e p a tite c rô n ic a n a E sq u isto so m o se m a n s ô n ic a . J o r n a l B ra sile iro de M e­ d ic in a T ro p ic a l, 1: 19-26, 1967. 5 — BO G LIO LO , L . & NEVES, J . — O c o r­

r ê n c ia de h e p a tite n a fo rm a a g u d a 16 - ou to x ê m ic a d a E . m a n s ô n ic a , a n te s d a m a tu r a ç ã o dos v e rm e s e d a p o s ­ t u r a dos ovos, com a lg u m a s c o n s id e ­ ra ç õ e s sô b re a fo rm a a g u d a com to - x e m ia d a E sq u isto sso m o se. A n ais d a F a c u ld a d e de M e d ic in a d a U n iv e rs i­

d a d e de M in a s G e ra is . 22: 47-74, 1965, 17 -(P u b lic a d o e m 1967) .

6 — CAM ARGO, M .E .; HOSH INO , S . & SILVA, L .C . d a — A slid e flu o re s - c e n t a n tib o d y te c h n iq u e w ith a d u lt w o rm a n tig e n fo r th e se ro lo g ic a l d ia g n o sis os S c h is to s o m ia s is m a n s o - 18 n i. R e v . I n s t . M ed . T ro p . S ão P a u ­ lo, 7: 327-331, 1965.

7 — CANNON, D .C . & W ISSL E R , R .W . — S p le e n cell m ig r a tio n in th e im - m u n e re sp o n s e o f t h e r a t . A rc h . 19 P a t h . 84: 109, 1967.

8 — COONS, A .H . a n d K A PLA N , M .H . — L o c a lisa tio n o f a n tig e n in tiss u e c e lls . I I Im p ro v im e n ts in a m e th o d fo r th e d e te c tio n o f a n tig e n by m e a n s o f flu o re s c e n t a n tib o d y . J . E x p . M ed . 9: 1-13, 1950.

9 — FA IR L E Y , N .H .; M A C K IE, F . P . & 20 JASUDASAN, F . — S tu d ie s in S c h is- to so m a sp in d a le , P a r ts I - V I . I n d ia n M . R e s e a rc h M em . 17, 1930.

2 1

10 — FA U ST, E .C . & M ELEN EY , H .E . — S tu d ie s o n S c h is to so m a ja p o n ic a . A m . J . H y g . M o n a g . S e r ., 1924. 11 — KAGAN, I . G . & M ERANZE, D .R. —

T h e h is to p a th o lo g y o f im m u n e a n d n o r m a l m o u se s k in ex p o sed to c e rc - a r ia e o f S c h is to s o m a tiu m D o u th itti. J o u r . I n f . D is. 97: 187-193, 1955. 22 12 — K A G A N , I . G . & PE L L E G R INO , J .

— A c ritic a i rev iew of im m u n o lo g ic a l m e th o d s io r t h e d ia g n o sis o f b ilh a r z i- a s is. B u il. W o rld H e a lth O rg . 25: 611-674, 1961.

13 — K O P P IS C H , E . — S tu d ie s o n s c h is ­ to so m ia sis m a n s o n i in P u e rto R ic o . 23 IV . T h e p a th o lo g ic a l a n a to m y of e x p e rim e n ta l s c h isto s o m ia s is m a n s o ­ n i in th e r a b b it a n d a lb in o r a t .

P u e rto R ico J . P u b . H e a lth & T r o p . M ed . 13: 1-54, 1937.

- LA VIA, M .F .; D IT C H , F .W .; G U N -

DER SO N , C .H . & W IS S L E R , R .W . — T h e r e la tio n s o f a n tib o d y f o r m a t- io n re tic u lo - e n d o th e lia l s tr u c tu r e a n d f u n c tio n s . I n H E L L E R , J . H . ,

e d . — R e tic u lo -e n d o th e lia l s tr u c tu r e a n d f u n c t i o n . N . Y o rk , R o n a ld P ress, 1960.

- L IC H T E M B E R G , F . v o n & R IT C H IE , L .S . — C e llu la r re s is ta n c e a g a in s t s c h is to s o m u la o f S c h is to s o m a m a n ­ s o n i in m a c a c a m u l a t t a m o n k e y s fo llo w in g p ro lo n g e d in f e c tio n s . A m . J . T ro p . M ed . H y g . 10: 859-869, 1961.

- L IN , S .S . & SADUN, E .H . — S tu d ie s o n h o s t- p a r a s ite r e la tio n s h ip s to S c h is to s o m a ja p o n ic u m . V — R e a c t- io n s in sk in , lu n g s a n d liv e r o f n o r ­ m a l a n d im m u n e a n im a l fo llo w in g in fe c tio n s w ith S c h isto s o m a j a p o n ­ ic u m . J . P a r a s ito l. 45: 549-559, 1959. - M A GALHÃES F .°, A . & COÊLHO, R. DE B A R ROS — E s tu d o h is to p a to ló - gico d a p e n e tr a ç ã o d e c e rc a ria s de S . m a n s o n i n a p ele d e c a m u n d o n g o s p r è v ia m e n te in f e s ta d o s . A n Soçied. de B io l. d e P e . 15: 2o5-281, 1957. - M A G A LH Ã ES F .°, A . — P u lm o n a ry

le sio n s in m ic e e x p e rim e n ta lly in f e c t- e d w ith S c h is to s o m a m a n s o n i. Am. J . T ro p . M e p . H y g . 8: 527-535, 1959

- M A G ALHÃES F .°, A ., COU T IN HO - A BATH , E . & JA M PO LS K Y , R . — S ô b re a h is to p a to lo g ia e a h is to q u í- m ic a d e p ro v á v e is re a ç õ e s de h ip e r - s e n s ib ilid a d e o b s e rv a d a s n a E sq u is­ to sso m o se m a n s ô n ic a . R e v . L a ti- n o a m e r . d e A n a t. P a t . 4: 251-259,

1960.

- M A GALHÃES F .°, A . — R e a çõ e s de h ip e r se n sib ilid a d e e m m a c a c u s C e -b u s s p . in fe c ta d o s com S c h isto so m a

O ia n so n i. R e v . I n s t . M e d . tr o p .

S ão P a u lo 3: 239-253, 1961.

- M A G A LH Ã ES F .u, A.; COU T IN HO - -A B ATH , E . — S p le n ic R e a c tio n s in m u ltip le in fe c tio n s w ith S c h isto so - Sw iss a lb in o m ic e to s in g le a n d m a m a n s o n i. A m . J o u r . tr o p . M ed. H y g 10: 356-364, 1961.

- M A G A LH Ã ES F .°, A.; IR IS , M .K . & M A LEK , F . A . — L o c a liz a tio n of a n tig e n a n d p re s e n c e o f a n tib o d y in tis s u e o f m ic e in f e c te d w ith S c h is to ­ s o m a m a n s o n i, a s in d ic a te d b y flu o re s c e n t a n tib o d y te c h n ic s . A m . J . t r o p . M e d . H y g . 14: 84-89, 1965. - M ERA N ZE, D .R . — T h e h is to p a th o ­

M aio - Junho, 1968 Rev. Soc. Bras. M ed . T rop. 125

S c h is to s o m a tid a e ) . J o u r . I n f . D is. 97: 187-193, 1955.

24 — NA RA BA Y ASH I, H . — C o n trib u tio n 29 to th e s u td y o f S c h is to s o m ia sis j a - p o n ic a . K y o to I g a k a i Z osshi ( J . K y o to M e d . A s s n .) 13 (n .° 2-3) 1916. J a p a n e s e te x t. A p u ã K A G A N , I .G .

25 — O L IV IE R , L . & W E IN S T E IN , P . P . — E x p e rim e n ta l sc h isto so m e d e r m a titis in r a b b its . J . P a ra s ito l. 39: 1-12, 1953.

26 — SADUN, E . H . ; B R U C E, J . I . & M A-CO M BER, P .B . — P a ra sito lo g ic , p a th o lo g ic a n d sero lo g ic r e a c tio n s to S c h is to s o m a m a n s o n i in m o n k e y s ex p o sed to ir r a d ia te d c e r c a ria e . A m . J . tro p . M ed. H y. 13: 548-557, 1964. 27 — SADUN, E .H .; SC HOEN B EC H LER ,

N . J . & B EN TZ, M . — M u ltip le 32 a n tib o d y re sp o n s e in S c h is to so m a m a n s o n i in fe c tio n s : a n tig e n ic c o n s t- itu e n ts in eggs, c e rc a ria e , a n d a d u lts (e x c re tio s a n d se c re tio n s ) d e te r m in - e d by flo c u la tio n re a c tio n s , cross a b s o rp tio n a n d d o u b le d iffu sio n s tu d iç s . A m . J . tr o p . M ed . H yg. 14: 977-995, 1965.

28 — SILVA, L .C . & F E R R I, R .G . — I m -m u n o d iffu s io n s tu d ie s in h u -m a n sc h isto s o m ia s is m a n s o n i. I . H e p a to -

in te s tin a l a n d h e p a to e s p le n ic fo rm s.

33 —

R e v . I n s t . M ed . tr o p . S ão P au lo , 7 1-6, 1965.

SILV A , L .C . & F E R R I, R .G . — I m - m u n o d iffu s io n s tu d ie s in h u m a n s c h isto s o m ia s is m a n s o n i. I I . L ocal - iz a tio n o f a n tib o d ie s by im m u n o e le c - tr o p h o r e s is . R e v . I n s t . M ed. tro p . S ão P a u lo , 7: 7-10, 1965.

S M IT H E R S , S .R . a n d TB R R Y , R .J . — N a tu r a lly a c q u ire d re s is ta n c e to e x p e rim e n ta l in fe c tio n o f S c h isto so ­ m a m a n s o n i in m o n k e y s — (m a c a c a m u la tta ) — P a ra sito lo g y , 55: ... 701-710, 1965.

SU EY A SU , Y . — O n th e m ig ra to ry c o u rse o f S c h isto so m a ja p o n ic u m in t h e bo d y o f th e f in a l h o s t. K y o to I g a k a i Z o ssh i. 17 (n .° 1 ), 1920. J a ­ p a n e s e te x t w ith G e rm a n a b s tr a c t. W A TA RA I, J . — S tu d ie s o n th e sk in r e a c tio n s c a u s e d by S c h is to so m a j a ­ p o n ic u m c u ta n e o u s ly a p p lie d o n th e a n im a is . J a p . J . E x p e r. M ed. 14 (1 -1 8 ), 1936.

W H IT E , R .G . — F u n c tio n a l reco g - n a tio n of im m u n o lo g ic a lly c o m p e t- e n t cells by m e a n s o f th e flu o re sc e n t a n tib o d y te c h n iq u e . I n W o lste n h o l- m e, G .E .W . & K n ig h t, 3 . , e d s. —

126 Rev. Soc. Bros. M ed . T rop. Vol. n — N ? 3

I.° SIM PÓ SIO F A R M IT A L IA NO B R ASIL

D A U N O M I C I N A

E n a lte c e n d o o p r o g r a m a de c o m e m o ­ ra ç ã o do 20.° a n iv e rs á rio d a Q U ÍM IC A E FA RM A CÊU TICA P RO QU IF A R S /A , r e p r e ­ s e n ta n te e f a b r ic a n te e x c lu siv a n o B ra s il d a S o c ie tà F a r m a c e u tic i- I ta lia — F A R M I- TALIA — d e M ilão, r e a liz a r - s e - á n o d ia 5 de o u tu b ro d e 1968, à s 9 h o ra s , n o A UD I­

T Ó R IO FA R M ITA LIA , a s e r in a u g u r a d o n a o casião, n a s m o d e rn a s in s ta la ç õ e õ s d a P ro q u ifa r, à R o d o v ia W a s h in g to n Luiz, K m 5 — DU Q U E DE C A X IA S — E sta d o do R io de J a n e iro , o

I.° SIM P Ó S IO F A R M IT A L IA NO B R ASIL SÔ B R E A D AU NO M IC IN A

O n ô v o a n tib ió tic o d e a tiv id a d e a n tile u - c ê m ic a co m a p a r tic ip a ç ã o d os re n o m a d c s c ie n tis ta s :

P ro f. A u rélio D i M arc o — I t á l i a D r. S. H o lla n d — USA

D ra . L u ís a M assim o — I t á l i a D ra . C h a r lo tte T a n — USA

D r. M o ac y r S a n to s S ilv a — B ra s il

D r. L u iz C a rlo s F a m a d a s — B ra sil D r. A lfre d o P a w lo w sk y — A rg e n tin a

R E G U L A M E N T O D O P R Ê M I O G E R H A R D D O M A G K

A r t. 1.° — O p r ê m io G e r h a r d D o -m a g k é c f e r e c id o a n u a l-m e n t e a p a r t ir d e 1 9 6 3 , p e la A C H I M I C A “B A Y E R ” S .A . e m c o m e m o r a ç ã o d o c e n t e n á r io d a f u n d a ­

ç ã o d a F A R B E N F A B R I K E N B A Y E R A G ., d e L e v e r k u s e n , A le m a n h a , a o a u to r o u a u t o r e s d o m e lh o r t r a b a lh o s ô b r e t e ­ m a s d e m e d ic in a t r o p ic a l ( D o e n ç a s I n f e c t u o s a s e P a r a s it á r ia s , d e N u t r iç ã o , F i -s io lo g ia e H i g i e n e T r o p ic a i-s ) * u m a v e z q u e o m e s m o s a t is f a ç a à s e x ig ê n c ia s d ê s t e R e g u la m e n t o .

A r t. 2 .° — C o n c o r r e r ã o a o r e f e r id o p r ê m io t o d o s o s t r a b a lh o s p u b lic a d o s n a R E V I S T A D A S O C I E D A D E B R A S I ­ L E I R A D E M E D I C I N A T R O P I C A L d u r a n t e o a n o a n te r io r .

A r t. 3 .° — O p r ê m io c o n s t a r á d e u m a im p o r t â n c ia e m d in h e ir o , e s t ip u la d a a n u a lm e n t e , e d e u m a m e d a l h a c o m o r e s p e c t iv o d ip lo m a a s s in a d o p e l o P r e s i ­ d e n t e e S e c r e t á r io -G e r a l d a S o c ie d a d e . N o c a s o d e t r a b a lh o e m c o la b o r a ç ã o , o p r ê ­ m io e m d in h e ir o s e r á c o n f e r id o à e q u ip e , p o r é m , c a d a u m d o s c o - a u t o r e s r e c e b e r á u m a m e d a lh a e u m d ip lo m a , q u e m e n ­ c io n a r á s e r o p r ê m io p e r t e n c e n t e à e q u ip e .

A r t. 4 .° — S e r ã o m e m b r o s d a C o ­ m is s ã o J u lg a d o r a o P r e s i d e n t e d a S o c ie ­ d a d e B r a s ile ir a d e M e d i c i n a T r o p ic a l, q u e a p r e s id ir á , e o s in t e g r a n t e s d o C o n s e lh o C o n s u lt iv o d a R E V I S T A D A S O C I E D A ­

D E B R A S I L E I R A D E M E D I C I N A

T R O P I C A L .

A r t. 5 .° — C a d a m e m b r o d a C o m is ­ s ã o J u lg a d o r a in d ic a r á o s 5 m e lh o r e s t r a ­ b a lh o s p u b lic a d o s d u r a n t e o a n o , s e n d o p r e m ia d o a q u ê l e q u e o b t iv e r m a io r n ú m e -S o c i e d a d e B r a s ile ir a d e M e d i c i n a T r o p i ­ c a l a d e c is ã o f in a l e m c a s o d e e m p a t e .

A r t. 6 .° — A C o m is s ã o J u lg a d o r a d e ­ v e r á e m it ir s e u p a r e c e r a t é a d a t a d o in íc io d o C o n g r e s s o a n u a l d a S o c ie d a d e B r a s ile ir a d e M e d i c i n a T r o p ic a l, q u a n d o o p r ê m io s e r á e n t r e g u e e m s e s s ã o s o l e n e .

A r t. 7 .° — N ã o c a b e r á q u a lq u e r r e ­ c u r s o a o p a r e c e r d a C o m is s ã o J u lg a d o r a .