R e v i s t a d a S o c i e d a d e B r a s i l e i r a d e M e d i c i n a T r o p i c a l 1 7 ( 1 ) : 1 3 - 1 6 , J a n - M a r , 1 9 8 4
TESTE REVERSO PARA ANTICORPOS IgM NA TOXOPLASMOSE, COM
HEMÁCIAS SENSIBILIZADAS POR ANTÍGENOS DE
TOXOPLASMA GONDII
N a n cy N a v a r r e t e 1 , M á r io E. C a m a r g o
2
e G a st ã o d e A lm e id a
2
D e s c r e v e - s e u m t e s t e p a r a a n t i c o r p o s I g M - a n t i t o x o p l a s m a b a s e a d o n a t é c n i c a d e
c a p t u r a d e I g M d o s o r o p o r a n t i c o r p o s a n t i - I g M a d s o r v i d o s a p l a c a s p l á s t i c a s . P a r a
e v i d e n c i a ç ã o d o s a n t i c o r p o s a n t i t o x o p l a s m a n e s s a f r a ç ã o , u t i l i z a - s e u m a s u s p e n s ã o d e
h e m á c i a s h u m a n a s , f o r m o l i z a d a s e s e n s i b i l i z a d a s p o r a n t í g e n o s d e T o x o p la s m a g o n d ii.
N o s t e s t e s p o s i t i v o s e s t a s a p a r e c e m c o m o u m a c a m a d a c o n t í n u a , e n q u a n t o q u e n o s t e s t e s
n e g a t i v o s d e p o s i t a m - s e a o f u n d o d a s c a v i d a d e s d a s p l a c a s . A l e i t u r a d o s t e s t e s é m u i t o
m a i s e v i d e n t e d o q u e n a t é c n i c a a n t e r i o r m e n t e p r o p o s t a p o r D e s m o n t s e c o l s , 1 9 8 1 , q u e
u t i l i z a s u s p e n s õ e s d e t o x o p l a s m a s . A s u s p e n s ã o d e h e m á c i a s s e n s i b i l i z a d a s p o d e s e r p r e p a r a d a p o r s i m p l e s d i l u i ç ã o d o r e a g e n t e p a r a o t e s t e d e h e m a g l u t i n a ç ã o p a r a a
t o x o p l a s m o s e .
P a la v ra s - c h a v e s : T o x o p la s m o s e . S o ro lo g ia . Ig M . T e s te re v e rs o .
A d e m o n s tr a ç ã o d e a n tic o r p o s s é ric o s a n ti to x o p la s m a d e c la s s e M d e im u n o g lo b u lin a s é d e g ra n d e v a lo r d ia g n ó s tic o , u m a v e z q u e e s s e s a n ti c o rp o s c o n s titu e m in d ic a d o r e s d e in fe c ç ã o r e c e n te m e n te a d q u ir id a d o a d u lto , o u d e in fe c ç ã o c o n g ê n ita d o re c é m - n a s c id o .
A s té c n ic a s c o m a n tic o r p o s m a r c a d o s p r o p o r c io n a m te s te s p a r a e s s a d e m o n s tr a ç ã o , p o r m e io d e r e a ç õ e s u tiliz a n d o c o n ju g a d o s flu o re sc en te s-* 1 3 o u e n z im á tic o s -' ^ d e a n tic o r p o s a n ti-Ig M . P o r é m , n e s se s te s te s p o d e m o c o r r e r r e s u lta d o s fa lso s , ta n to p o s itiv o s c o m o n e g a tiv o s . A s s im , a p r e s e n ç a d e a n ti c o rp o s a n tin ú c le o 1 e , e s p e c ia lm e n te , d e f a to r re u - m a tó id e 2, é c a u s a f re q ü e n te d e r e s u lta d o s p o s itiv o s in e s p e c ífic o s . P e la c o m p e tiç ã o d e a n tic o r p o s Ig G , o s a n tic o r p o s Ig M p o d e m d e ix a r d e r e a g ir n o s te s te s , o r ig in a n d o -s e r e s u lta d o s n e g a tiv o s fa ls o s . P a r a m a io r c o n fia b ilid a d e d a p e s q u is a d e a n tic o r p o s Ig M , im p õ e - se a s s o c ia r a o s te s te s v á rio s p r o c e d im e n to s , c o m o o b lo q u e io d o f a to r r e u m a tó id e , p o r a b s o r ç ã o d o s s o ro s c o m g lo b u lin a s a g r e g a d a s 2 , a r e m o ç ã o d e I g G d o s o r o p e la P r o te ín a A in so lu b iliz a d a ® , o u a r e a liz a ç ã o d o s te s te s c o m a f r a ç ã o I g M p re v ia m e n te is o la d a d o
12
s o ro .
C o m a f in a lid a d e d e o b te r u m te s te m a is s e n s ív e l e e s p e c ífic o q u e p u d e s s e e v ita r o s in c o n v e n ie n te s
1. I n s titu to d e P a r a s ito lo g ia , U n iv e r s id a d e A u s tr a l d e C h ile e L a b o r a tó r io d e I m u n o lo g ia e S o ro e p id e m io lo g ia d o I n s titu to d e M e d ic in a T r o p ic a l d e S ã o P a u lo , S ã o P a u lo , B ra sil.
2. L a b o r a tó r io d e Im u n o lo g ia e S o r o e p id e m io lo g ia d o I n s titu to d e M e d ic in a T r o p ic a l d e S ã o P a u lo , S ã o P a u lo , B ra sil.
R e c e b id o p a r a p u b lic a ç ã o e m 2 0 / 1 1 / 1 9 8 3 .
a s s in a la d o s N a o t e R e m in g to n 11 e m 1 9 8 0 a p lic a ra m à p e s q u is a d e a n tic o rp o s Ig M a n tito x o p la s m a a té c n ic a E L I S A re v e rs a , o u d e c a p tu r a d e a n tic o rp o s Ig M , a n te r io r m e n te d e s c r ita p o r D u e r m e y e r e v a n d e r V e e n 1®, e a q u e d e n o m in a r a m té c n ic a E L I S A -Ig M d e d u p lo s a n d u íc h e ( D S - I g M - E L I S A ) . N e s s e s te s te s , f ix a v a m a n tic o r p o s a n ti- Ig M à s p la c a s d e p lá s tic o , q u e c a p ta v a m im u n o g lo b u lin a s M d o s o r o aí in c u b a d o . A r e a tiv id a d e d e s s a s I g M p a r a o to x o p la s m a e ra p e s q u is a d a in c u b a n d o - s e a s p la c a s s u c e s s iv a m e n te c o m u m a n tíg e n o s o lú v e l d o p a r a s ita e c o m u m c o n ju g a d o a n tito x o p la s m a m a r c a d o p o r e n z im a . S e g u ia -s e o d e s e n v o lv im e n to d e c o r c o m in c u b a ç ã o d e m is tu ra c ro m ó g e n a . P o s te r io r m e n te , D e s m o n ts e co ls^ d e s c r e v e r a m u m p r o c e d im e n to q u e c o m b in a c e r ta s c a r a c te r ís tic a s d o te s te D S - I g M - E L I S A c o m o te s te d e a g lu tin a ç ã o d ir e ta p a r a a to x o la sm o se ® . N e s s e p ro c e d im e n to o a n tíg e n o so lú v e l d o p a r a s ita e o c o n ju g a d o e n z im á tic o a n tito x o p la s m a , d o p r o c e s s o d e N a o t e R e m in g to n , e r a m s u b s titu íd o s p o r u m a n tíg e n o p a rti- c u la d o , c o n s titu íd o p o r s u s p e n s ã o d e to x o p la s m a s .
N o p r e s e n te tr a b a lh o é a p r e s e n ta d o u m te s te re v e rs o p a r a a n tic o r p o s Ig M a n tito x o p la s m a u tili- z a n d o -s e , c o m o in d ic a d o r, s u s p e n s ã o d e h e m á c ia s fo r m o liz a d a s e s e n s ib iliz a d a s p o r a n tíg e n o s so lú v e is d o to x o p la s m a . E s t a s u s p e n s ã o é p r e p a r a d a p o r s im p le s d ilu iç ã o d o re a g e n te p a r a o te s te d e h e m a g lu tin a ç ã o , a n te r io r m e n te d e s c r ito p o r C a m a r g o e c o ls^ .
M A T E R I A L E M É T O D O S
S o r o s
F o r a m e s tu d a d o s 75 s o ro s , p e r te n c e n te s à so- r o te c a d o I n s titu to d e M e d ic in a T r o p ic a l d e S ã o P a u lo . E s te s s o r o s e r a m m a n tid o s a - 2 0 ° C , c o n s e rv a d o s c o m
N a v a r r e t e N , C a m a r g o M E , A l m e i d a G . T e s t e r e v e r s o p a r a a n t i c o r p o s I g M n a t o x o p l a s m o s e , c o m h e m á c i a s s e n s i b i l i z a d a s p o r a n t i g e n o s d e T o x o p la s m a go nd ii. R e v i s t a d a S o c i e d a d e B r a s i l e i r a d e M e d i c i n a T r o p i c a l 1 7 : 1 3 - 1 6 , J a n - M a r , 1 9 8 4
ig u a l v o lu m e d e g lic e rin a , e h a v ia m s id o s u b m e tid o s a te s te s p a r a a n tic o r p o s a n tito x o p la s m a ^ e o u tr o s a n ti c o r p o s , d is p o n d o - s e ta m b é m d e in f o rm a ç õ e s d ia g n o s tic a s d iv e rs a s , c o n fo rm e o s c a s o s , d e n a t u r e z a c lín ic a , p a r a s ito ló g ic a o u e p id e m io ló g ic a . T r i n ta c a s o s a p r e s e n ta v a m h is tó r ia c lín ic a e p e rfil so ro ló g ic o d e to x o p la s m o s e re c e n te m e n te a d q u ir id a d o a d u lto , c o m p re s e n ç a d e a n tic o r p o s Ig M a n tito x o p la s m a in d ic a d a p e la p o s itiv id a d e d o te s te I F - I g M . O s d e m a is 4 5 so ro s n ã o a p r e s e n ta v a m a n tic o r p o s I g M a n tito x o p la s m a n o s te s te s e s p e c ífic o s re a liz a d o s e p r o v in h a m d e p a c ie n te s c o m d iv e rs a s c o n d iç õ e s p a to ló g ic a s . H a v ia 4 s o ro s d e p a c ie n te s c o m D o e n ç a d e C h a g a s n a f a s e a g u d a , c o m a n tic o r p o s Ig M a n ti-7 ! c r u z i \ 8 c a s o s d e lu p u s e rite m a to s o s is tê m ic o , c o m a lto s títu lo s d e a n tic o r p o s a n tin ú c le o ; 8 c a s o s d e a r tr ite r e u m a tó id e c o m te s te s p o s itiv o s p a r a f a to r r e u m a tó id e ; 4 c a s e s d e m a lá r ia , c o m a n tic o r p o s I g M a n tip la s m ó d io ; 5 c a s o s d e sífilis r e c e n te c o m a lto s títu lo s d e a n tic o rp o s lip ó id ic o s e tre p o n ê m ic o s ; 5 c a s o s d e to x o p la s m o s e e m fa se e v o lu tiv a (p e rfil I I ) 1 e 11 c a s o s d e p e s s o a s c lin ic a m e n te n o rm a is .
R e a g e n t e d e h e m a g l u t i n a ç ã o
F o i p r e p a r a d o c o m o descrito-*, a p a r tir d e h e m á c ia s h u m a n a s f o rm o liz a d a s e s e n s ib iliz a d a s c o m e x tra to so lú v e l d e to x o p la s m a . E s te s f o ra m o b tid o s d e e x s u d a to p e r ito n e a l d e c a m u n d o n g o s p r e v ia m e n te in o c u la d o s c o m s a rc o m a T .G . 18 0 7 .
T e s t e r e v e r s o
P a r a o te s te fo ra m e m p r e g a d a s p la c a s p lá s tic a s e m U (In te rla b , S ã o P a u lo , B ra s il), à s q u a is e r a m a d s o rv id o s a n tic o r p o s a n ti- Ig M re c o b rin d o - a s c o m 1 0 0 \ i l de g lo b u lin a s d e c a r n e ir o a n ti-Ig M h u m a n a
d ilu íd a s e m ta m p ã o c a r b o n a to 0 .1 M , p H 9 ,8 , n a c o n c e n tr a ç ã o d e 1 O O y g /m l. A s p la c a s e r a m in c u b a d a s c o m e s s a s o lu ç ã o p o r 18 h o r a s e , e m s e g u id a , la v a d a s 3 v e z e s c o m s o lu ç ã o s a lin a ta m p o n a d a c o m f o s fa to s 0 ,0 1 M , p H 7 ,2 , c o n te n d o T w e e n 2 0 a 0 ,0 5 % ( P B S T ) . A p ó s n o v a in c u b a ç ã o p o r 1 h o r a a 3 7 ° C c o m a lb u m in a b o v in a ( B S A ) a 1 % e m P B S T , a s p la c a s f o r a m la v a d a s n o v a m e n te . P a r a u s o , in c u b a r a m - s e p o r 1 h o r a a 3 7 ° C c o m 1 5 0 y l d o s s o ro s , d ilu íd o s e m P B S , d e 1 :1 6 e m d ia n te n a r a z ã o 4.
D e p o is d e la v a d a s , a s p la c a s fo ra m in c u b a d a s p o r u m a n o ite , a 3 7 ° C , c o m 5 5 y l d e s u s p e n s ã o d e h e m á c ia s h u m a n a s fo rm o liz a d a s e s e n s ib iliz a d a s c o m a n tíg e n o d e T . g o n d i i . E s t a s u s p e n s ã o fo i p r e p a r a d a r e c o n s titu in d o -s e o re a g e n te lio filiz a d o d e h e m a g lu tin a ç ã o p a r a a to x o p la s m o s e e d ilu in d o -s e a 1:8 e m P B S .
A p ó s e s s a in c u b a ç ã o p r o c e d ia - s e à le itu r a d o te s te , n a s r e a ç õ e s n e g a tiv a s fo rm a n d o -s e u m b o tã o d e h e m á c ia s s e d im e n ta d a s e, n a s p o s itiv a s , u m ta p e te h o m o g ê n e o .
R E S U L T A D O S
C o m to d o s o s 3 0 s o ro s d e c a s o s d e to x o p la s m o s e r e c e n te o te s te I g M - R - H A fo i p o s itiv o , s e n d o n e g a tiv o c o m o s d e m a is s o r o s e s tu d a d o s . N ã o se o b s e r v a r a m r e a ç õ e s n e g a tiv a s p o r c o m p e tiç ã o d e a n tic o r p o s I g G , b e m c o m o r e a ç õ e s p o s itiv a s f a ls a s p e la p r e s e n ç a d e a n tic o r p o s a n tin ú c le o , d e f a to r r e u m a tó id e , o u d e a n tic o r p o s I g M d e a lto títu lo , d e c o r re n te s d e o u tr a s in f e c ç õ e s a g u d a s q u e n ã o a to x o p la s m o s e .
A o se c o m p a r a r títu lo s d o s te s te s d e I F - I g M e d e I g M - R - H A , n ã o f o r a m o b s e r v a d a s d iv e rg ê n c ia s a c e n tu a d a s , c o m o m o s tr a a T a b e la 1.
T a b e l a 1 - C o m p a r a ç ã o d e r e s u l t a d o s d o s t e s t e s I F - I g M e I g M - R - H A , e m 7 5 s o r o s h u m a n o s .
I F - I g M Ig M -R -H A
< 16 16 6 4 2 5 6 1 0 0 0 4 0 0 0 8 0 0 0 1 6 0 0 0
N ã o re a g e n te 45
16 1
6 4 2
2 5 6 2 2
1 0 0 0 7 2
4 0 0 0 1 7 1
> 1 6 0 0 0 3 2
N a v a r r e t e N , C a m a r g o M E , A l m e i d a G . T e s t e r e v e r s o p a r a a n t i c o r p o s I g M n a t o x o p l a s m o s e , c o m h e m á c i a s s e n s i b i l i z a d a s p o r a n t í g e n o s d e T o x o p la s m a g o n d ii R e v i s t a d a S o c i e d a d e B r a s i l e i r a d e M e d i c i n a T r o p i c a l 1 7 : 1 3 - 1 6 , J a n - M a r , 1 9 8 4
D I S C U S S Ã O
O te s te r e v e rs o p a r a a n tic o r p o s I g M a n ti to x o p la s m a u tiliz a n d o , c o m o in d ic a d o r , o r e a g e n te d e h e m a g lu tin a ç ã o , m o s tr o u - s e s e n s ív e l e e s p e c ífic o . O te s te é m u ito p r á tic o p o r q u e u tiliz a r e a g e n te s d e fá c il o b te n ç ã o e d is p e n s a o e m p re g o d e r e a ç ã o im u n o e n - z im á tic a , c e r ta m e n te u m a lim ita n te p a r a la b o r a tó r io s c lín ic o s d e m e n o r e s r e c u r s o s té c n ic o s . C o m r e la ç ã o à v a r ia n te d e n o m in a d a p o r D e s m o n ts e cols® c o m o I S A G A ( I m m u n o s o r b e n t A g g lu tin a tio n A s s a y ) , a u tiliz a ç ã o d e h e m á c ia s s e n s ib iliz a d a s c o m o p o r n ó s p r e c o n iz a d o to r n a a le itu r a d a s r e a ç õ e s m u ito m a is fá c il e e v id e n te , p e la in te n s a c o lo r a ç ã o d o re a g e n te . A le itu r a d o te s te s e g u n d o D e s m o n ts e c o ls a p r e s e n ta a d ific u ld a d e d e v is u a liz a ç ã o d a r e a ç ã o , u m a v e z q u e é in c o lo r a s u s p e n s ã o d e to x o p la s m a s u tiliz a d a c o m o in d ic a d o r . A v a n ta g e m p r in c ip a l d o te s te é a sim p li c id a d e d e s u a e x e c u ç ã o a lia d a a o f a to d e d is p e n s a r to d o u m c o n ju n to d e p r o c e d im e n to s re la tiv a m e n te c o m p le x o s p a r a fin s d e ro tin a , e x ig id o s p a r a re m o v e r o s r e s u lta d o s fa ls o s o b s e rv a d o s n o s te s te s a n tig lo - b u lín ic o s p a r a a n tic o r p o s Ig M , ta n to d e im u n o flu o re s - c ê n c ia c o m o im u n o e n z im á tic o s .
E s ta m o s c e r to s d e q u e o te s te o r a d e s c rito p o d e r á c o n s titu ir e le m e n to ú til, n o c o n ju n to d e te s te s p a r a a to x o p la s m o s e , p a r a a d e fin iç ã o d e p e rfis s o ro ló g ic o s n o d ia g n ó s tic o d e s s a in fe c ç ã o .
S U M M A R Y
A t e s t i s d e s c r i b e d f o r t h e d e t e c t i o n o f l g M a n t i
t o x o p l a s m a a n t i b o d i e s b a s e d o n t h e t e c h n i q u e o f
s e r u m I g M c a p t u r e b y a n t i - I g M a n t i b o d i e s a d s o r b e d
t o p l a s t i c p l a t e s . A s u s p e n s i o n o f f o r m o l i z e d h u m a n
e r y t h r o c y t e s , s e n s i t i z e d w i t h T o x o p la s m a g o n d ii
a n t i g e n s i s t h e n u s e d a s a i n d i c a t i v e o f a n t i - t o x o p l a s m a
s p e c i f i c i t y o f t h e c a p t u r e d a n t i b o d i e s . T h e u s e o f
s e n s i t i z e d r e d - c e l l s i n s t e a d o f p a r a s i t e s u s p e n s i o n s ,
a s p r e v i o u s l y d e s c r i b e d b y D e s m o n t s e t a l . , 1 9 8 1 ,
r e s u l t s i n a m o r e p r a c t i c a l t e s t . A d e q u a t e r e d c e l l s
s u s p e n s i o n s a r e e a s i l y p r e p a r e d j u s t b y d i l u t i n g t h e
u s u a l t o x o p l a s m o s i s h e m a g g l u t i n a t i o n r e a g e n t a n d
r e a d i n g t h e t e s t i s m u c h f a c i l i t a t e d w i t h r e d c e l l s a s
i n d i c a t o r t h a n w i t h t h e c o l o r l e s s p a r a s i t e s , w i t h c l e a r
-c u t r e s u l t s .
T h e t e s t w a s c o m p a r a b l e i n s e n s i t i v i t y t o t h e
I g M - i m m u n o f l u o r e s c e n c e t e s t , b u t w i t h n o i n t e i f e r e n c e
o f r h e u m a t o i d f a c t o r o r c o m p e t i t i o n o f l g G a n t i b o d i e s .
K e y w o rd s : T o x o p la s m o s is . I m m u n o d ia g n o s is . Ig M .
R E F E R Ê N C I A S B I B L I O G R Á F I C A S
1. A r a ú jo F G , B a m e t t E V , G e n t r y L O , R e m in g to n J S . F a l s e p o s itiv e a n ti- to x o p la s m a f lu o re s c e n t a n tib o d y te s ts in p a tie n ts w ith a n tin u c le a r a n tib o d ie s . A p p lie d M i- c ro b io lo g y 2 2 : 2 7 0 - 2 7 5 , 1 9 7 1 .
2 . C a m a r g o M E , L e s e r P G , R o c c a A . R h e u m a to id f a c to rs a s a c a u s e f o r fa ls e p o s itiv e I g M a n ti- to x o p la s m a flu o re s - c e n c e te s ts . A te c h n iq u e fo r s p e c ific r e s u lts . R e v is ta d o In s titu to d e M e d ic in a T r o p ic a l d e S ã o P a u lo 14: 3 1 0 - 3 1 3 , 1 9 7 2 .
S . C a m a r g o M E , L e s e r P G , L e s e r W S P . D ia g n o s tic in f o r m a tio n fro m s e ro lo g ic a l te s ts in h u m a n to x o p la s m o s is . T. A c o m p a r a tiv e s tu d y o f h e m a g g lu tin a tio n , c o m p le m e n tf ix a tio n , I g G a n d I g M -im m u n o flu o re s c e n c e te s ts in 3 .7 5 2 s e r u m s a m p le s . R e v is ta d o I n s titu to de M e d ic in a d e S ã o P a u lo 18: 2 1 5 - 2 2 6 , 1 9 7 6 .
4 . C a m a r g o M E , L e s e r P G . D ia g n o s tic in fo rm a tio n fro m s e ro lo g ic a l te s ts in h u m a n to x o p la s m o s is . II. E v o lu tiv e s tu d y o f a n tib o d ie s a n d s e ro lo g ic a l p a tte m s in a c q u ire d to x o p la s m o s is , a s d e te c te d b y h e m a g g lu tin a tio n , c o m - p le m e n t fix a tio n , I g G a n d Ig M -im m u n o flu o re s c e n c e tests. R e v is ta d o I n s titu to d e M e d ic in a T r o p ic a l d e S ã o P a u lo 18: 2 2 7 - 2 3 8 , 1 9 7 6 .
5. C a m a r g o M E , F e r r e i r a A W , M in e o J R , T a k ig u ti C K , N a k a h a r a O S . I m m u n o g lo b u lin G a n d im m u n o g lo b u lin M E n z y m e L in k e d I m m u n o s o r b e n t A s s a y a n d d e fin e d to x o p la s m o s is s e ro lo g ic a l p a tte m s . I n fe c tio n a n d Im m u n ity 2 1 : 5 5 - 5 8 , 1 9 7 8 .
6. C a m a r g o M E , L e s e r P G , R o c c a A . D e te c tio n o f Ig M a n ti- to x o p la s m a a n tib o d ie s in a c u te a c q u ir e d a n d c o n - g e n ita l to x o p la s m o s is a f te r P r o te in A tr e a tm e n t o f se ru m . R e v is ta d o I n s titu to d e M e d ic in a T r o p ic a l d e S ã o P a u lo 2 5 : 2 0 1 - 2 0 6 , 1 9 8 3 .
7. C o u z in e a u P , B e a u f in e - D u c r o c q H . A g g lu tin a tio n d ir e c te d e s to x o p la s m e s . P r é p a r a tio n d e 1’a n tig è n e e t e x a m e n d e 4 0 0 s é ru m . A n n a le s d e B io lo g ie C lin iq u e 2 8: 4 1 1 - 4 1 5 , 1 9 7 0 .
8 . D e s m o n ts G , R e m in g to n J S . D i r e c t a g g lu tin a tio n t e s t fo r d ia g n o s is o f to x o p la s m a in fe c tio n s . M e th o d fo r in c re a s in g s e n s itiv ity a n d s p e c ific ity . J o u r n a l o f C lin ic a i M ic ro - b io lo g y 11 : 5 6 2 - 5 6 8 , 1 9 8 0 .
9 . D e s m o n ts G , N a o t J , R e m in g to n J S . Im m u n o g lo b u lin M - i m m u n o s o r b e n t a g g lu tin a tio n a s s a y fo r d ia g n o s is o f in fe c tio u s d is e a s e s . D ia g n o s is o f a c u te c o n g e n ita l a n d a c q u ir e d to x o p la s m a in fe c tio n s . J o u r n a l o f C lin ic a i M ic r o b io lo g y 14: 4 8 6 - 4 9 1 , 1 9 8 1 .
1 0 . D u e r m e y e r W , v a n d e r V e e n J . S p e c ific d e te c tio n o f Ig M a n tib o d ie s b y E L I S A , a p p lie d in h e p a titis A . L a n c e t 2: 6 8 4 - 6 8 5 , 1 9 7 8 .
N a v a r r e t e N , C a m a r g o M E , A l m e i d a G . T e s t e r e v e r s o p a r a a n t i c o r p o s I g M n a t o x o p l a s m o s e , c o m h e m á c i a s s e n s i b i l i z a d a s p o r a n t í g e n o s d e T o x o p la s m a g o n d ii R e v i s t a d a S o c i e d a d e B r a s i l e i r a d e M e d i c i n a T r o p i c a l 1 7 : 1 3 - 1 6 , J a n - M a r , 1 9 8 4
11 . N a o t J , R e m in g to n J S . A n E n z y m e - L in k e d Im m u n o s o r - b e n t A s s a y fo r d e te c tio n o f Ig M a n tib o d ie s to T o x o p l a s m a g o n d i i . U s e f o r d ia g n o s is o f a c u te a c q u ir e d to x o - p la s m o s is . J o u r n a l o f I n f e c tio u s D i s e a s e s 1 4 2 : 7 5 7 - 7 6 6 ,
1 9 8 0 .
12 . P y n d ia h N , K r e c h U , P r ic e R , W ilh e lm J . S im p lifie d c h ro m a to g r a p h ic s e p a r a tio n o f im m u n o g lo b u lin M fro m G a n d its a p p lic a tio n to t o x o p la s m a in d ir e c t im m u n o - flu o re s c e n c e . J o u r n a l o f C lin ic a i M ic r o b io lo g y 9 : 1 7 0 - 1 7 4 , 1 9 7 9 .
13 . R e m in g to n J S , M ille r M J , B ro w n le e J . I g M a n tib o d ie s in a c u te to x o p la s m o s is . I. D ia g n o s tic s ig n ific a n c e in c o n - g e n ita l c a s e s a n d a m e th o d fo r t h e i r r a p id d e m o n s tr a tio n . P e d ia tr ic s 4 1 : 1 0 8 2 - 1 0 9 1 , 1 9 6 8 .
14 . V o lle r A , B id w e ll D E , B a r tle tt A , F le c k D G , P e r k in s M , O la d e h im B . A m ic r o p la te e n z y m e - im m u n o a s s a y fo r to x o p la s m a a n tib o d y . J o u r n a l o f C lin ic a i P a th o lo g y 2 9 : 1 5 0 - 1 5 3 , 1 9 7 6 .
