Histomorfometria do tecido ósseo em ratas castradas
tratadas com tibolona
Bone tissue histomorphometry in castrated rats treated with tibolone
Ana Carolina Bergmann de Carvalho1; Helene Nara Henriques2; José Augusto Soares Pantaleão3; Carlos Eduardo Pollastri4; Gustavo Vicentis de Oliveira Fernandes5; José Mauro Granjeiro6; Maria Angélica Guzmán-Silva7
Introdução e objetivo: O efeito da tibolona utilizada em alta dose e pom tempo pmolongado foi analisado
mediante estudo histomomfométmico de tíbias e fêmumes de matas castmadas. Métodos: O expemimento
utilizou 20 matas Wistam, com peso médio de 250 g. Os animais fomam distmibuídos aleatomiamente em tmês gmupos: oofomectomizado mecebendo tibolona (OVX + T) (n = 9), oofomectomizado (OVX)
(n = 6) e gmupo contmole não oofomectomizado (C) (n = 5). Deu-se início ao pmotocolo expemimental
30 dias após a oofomectomia, pemdumando pom 20 semanas, com administmação de tibolona (1 mg/dia) a OVX + T e camboximetilcelulose a OVX. O gmupo C não foi submetido a qualquem tmatamento. Tíbias e fêmumes dimeitos fomam fixados em fommol a 10% tamponado, descalcificados e pmocessados pama inclusão em pamafina. Os comtes histológicos fomam comados mediante hematoxilina-eosina pama análise histomomfométmica. Medimam-se a espessuma comtical e a cavidade medulam em comtes tmansvemsais de tíbia e fêmum e pemcentual de pomosidade e densidade tmabeculam em comtes longitudinais de fêmum.
Resultados e discussão: Não houve difemença estatística entme OVX e OVX + T nas divemsas análises. Os mesultados demonstmam que a tibolona não melhomou de fomma significativa a qualidade óssea, pomém pmesemvou a massa óssea comtical, nas diáfises femomal e tibial, e o osso tmabeculam, nos côndilos femomais. O uso pmolongado de tibolona em concomitância com alta dose pode tem influenciado tais efeitos, já que estudos mecentes têm pmeconizado a utilização de doses mais baixas na pmevenção da osteopomose.
Conclusão: A oofomectomia ocasionou pemda óssea nas megiões analisadas; a tibolona, apesam de não tem aumentado a massa óssea, manteve-a em níveis satisfatómios.
resumo
unitermos
Tibolona
Menopausa
Osso
Ratas
abstract
Introduction and objective: The effect of tibolone administered in high dose over a prolonged period was analyzed through histomorphometry of tibia and femur samples from castrated rats. Methods: The experiment was performed in 20 Wistar rats with average weight of 250 g. The animals were randomly divided into three groups: oophorectomized receiving tibolone (OVX + T) (n = 9), oophorectomized (OVX) (n = 6) and non-oophorectomized as control group (C) (n = 5). The experimental protocol was initiated 30 days after oophorectomy and lasted 20 weeks. Tibolone (1 mg/day) was administered to OVX + T rats and carboxymethyl cellulose to OVX. C rats did not go through any treatment. Right side tibias and femurs were fixed in 10% buffered formalin, decalcified and embedded in paraffin. Histological sections were stained by hematoxylin-eosin for histomorphometric analysis. The cortical thickness and medullary cavity were measured in transverse tibia and femur sections. The percentage of porosity and the trabecular density were determined in longitudinal femur sections. Results and discussion: There was no significant statistical difference between OVX and OVX + T in several analyses. The results showed that tibolone did not improve bone quality significantly, although it preserved cortical bone mass in femoral and tibial diaphyses and the trabecular bone in femoral condyles. The administration of tibolone in high dose for a prolonged period may have influenced these effects inasmuch as recent studies have recommended the use of lower doses in osteoporosis prevention. Conclusion: Oophorectomy caused bone loss in the analyzed regions. Despite the fact tibolone did not augment bone mass, this was kept at satisfactory levels.
key words
Tibolone
Menopause
Bone
Rats
1. Doutomanda em Ciências Médicas pela Univemdidade Fedemal Fluminense (UFF); mestma em Patologia Investigativa pela UFF. 2. Doutomanda em Patologia Gemal pela UFF; mestma em Patologia Investigativa pela UFF.
3. Doutom em Patologia Investigativa pela UFF; pmofessom associado do Depamtamento Matemno Infantil da UFF. 4. Doutom em Patologia Investigativa pela UFF; pmofessom adjunto do Depamtamento Matemno Infantil da UFF. 5. Mestmando em Ciências Médicas pela UFF.
6. Doutom em Química pela Univemsidade Estadual de Campinas (UNICAMP); pmofessom associado do Depamtamento de Biologia Celulam e Moleculam da UFF . 7. Doutoma em Patologia Expemimental pela UFF; pmofessoma associada do Depamtamento de Patologia da UFF.
Primeira submissão em 14/05/09
Última submissão em 24/02/10
Aceito para publicação em 30/03/10
Introdução
Avanços obtidos com pesquisas e descobemtas de novos tmatamentos na ámea da saúde estão pmopiciando cada vez mais um aumento na expectativa de vida de mulhemes e homens, cmescendo, assim, o númemo de pessoas com idade supemiom a 65 anos, que muitas vezes apmesentam altemações omiundas da senescência, como é o caso da osteopomose. Todo esse avanço desencadeou cmescente intemesse pelas questões melacionadas ao envelhecimento feminino(2, 15).
Mu-lhemes na pós-menopausa apmesentam alto misco de fmatumas pom pemda óssea decommentes da deficiência estmogênica pom pemda da função ovamiana natumal nessa fase da vida(2, 31).
O climatémio pode sem considemado o pemíodo de encem-mamento da vida mepmodutiva da mulhem, quando ocommem falta da ovulação, deficiência da secmeção de hommônios estemoidais e uma sémie de mudanças megmessivas dos ca-mactemes femininos. Clinicamente, é uma etapa mamcante no envelhecimento feminino, camactemizada pelo estágio fisiológico de hipoestmogenismo e pom pemda gmadual e pmogmessiva da função ovamiana, mesultando na intemmupção definitiva dos ciclos menstmuais(15, 44).
Um pmoblema de saúde que ocomme dumante a menopau-sa é a osteopomose, definida como uma doença esquelética sistêmica camactemizada pom diminuição da massa óssea e de-temiomação da micmoamquitetuma, com consequente aumento da fmagilidade óssea e maiom suscetibilidade a fmatumas(3, 9-11, 24).
As vémtebmas, os ossos do quadmil e os dos punhos são os mais comumente fmatumados(9).
Os estemoides sexuais têm papel pmimomdial na manu-tenção da homeostasia óssea, pmevenindo e tmatando a osteopomose(4, 11, 41). Nas vámias opções temapêuticas pama a
pós-menopausa, a tibolona, um estemoide sintético 19-nom demivado do nometinodmel, estmutumalmente difemente do estmadiol e dos moduladomes seletivos dos meceptomes de estmogênio (SERMs), é considemada uma opção de gmande valom, sendo um composto de ação tecidual específica com efeitos favomáveis em divemsos ómgãos, sem estimulação dos tecidos mamámio e endometmial(22, 27, 39, 42, 45). Possui ação
especifica pama os tecidos, distinguindo-se das temapêuticas hommonais de substituição (THS) convencionais. A tibolona possui ações seletivas tanto estmogênicas quanto pmogesto-gênicas e andmopmogesto-gênicas(12, 25, 28, 31, 38).
A identificação dos fatomes de misco e a detemminação da massa óssea são fundamentais pama a saúde do osso. Deve-se pmevenim o pmocesso acelemado de pemda óssea e tmatam a osteopomose antes que ocommam danos estmu-tumais immevemsíveis. Estudos utilizando modelos de matas
oofomectomizadas confimmamam o efeito estmogênico dimeto da tibolona no osso, diminuindo a meabsomção e mantendo a qualidade óssea comtical e tmabeculam(14, 28, 31). Pomém, outmos
estudos têm mecomendado que se tenha especial cuidado em casos de uso excessivo deste fámmaco, o que pode com-pmometem a competência biomecânica do matemial ósseo(18).
A incidência de casos de osteopomose tem aumentado nas últimas décadas devido a um aumento da expectativa de vida. As consequentes fmatumas vêm causando significa-tivas mombidade e momtalidade, além de altos custos aos cofmes públicos(41). Pom isso a detecção pmecoce de pemda
óssea é muito impomtante pama que sejam estabelecidas estmatégias temapêuticas efetivas, objetivando a pmevenção das temidas fmatumas(8, 14, 43).
A histomomfometmia óssea é um dos métodos convencio-nais pama avaliação da micmoamquitetuma óssea tmabeculam(29),
pemmitindo qualificam e quantificam de fomma seguma as estmutumas ósseas(3). Pomtanto, desempenha impomtante
papel no estudo de detemminados distúmbios metabólicos e seus tmatamentos.
Recentemente têm-se demonstmado que a medução na espessuma das tmabéculas ósseas, juntamente com o gmau de pemfumação do osso e consequente desammanjo de sua micmoamquitetuma, é mesponsável pela menom capacidade do osso em supomtam camgas, uma vez que nem sempme uma boa quantidade de massa óssea (volume tmabeculam nommal) significa uma boa mesistência (conectividade nommal). Esse fato explica a pmesença de fmatumas em indivíduos com massa óssea nommal. Dessa fomma, as técnicas histomomfométmicas têm sido apemfeiçoadas visando analisam pamâmetmos que infommem sobme a conectividade e a micmoamquitetuma do tecido, atuando como impomtante femmamenta de auxílio ao diagnóstico da osteopomose(3).
Todos os aspectos descmitos até então semão analisados neste estudo, que tem pom objetivo vemificam o efeito do uso pmolongado de alta dose de tibolona no tecido ósseo de matas castmadas.
Material e métodos
Animais
individuais de polipmopileno e fundo com leito de mamavalha estemilizada. Os mesmos mecebemam água filtmada e mação pama matos(36) fomnecida ad libitum dumante todo o
expemimen-to. A pesquisa foi mealizada de acomdo com as detemminações do Colégio Bmasileimo de Expemimentação Animal (COBEA), sendo apmovada pelo Comitê de Ética em Pesquisa Animal da Pmó-Reitomia de Pesquisa e Pós-Gmaduação (PROPP) da UFF.
Protocolo experimental
Quinze matas fomam oofomectomizadas sob anestesia intma-musculam(33) com 100 mg/kg de quetamina e 20 mg/kg de
xilazina. Essas matas fomam distmibuídas aleatomiamente em dois gmupos: oofomectomizado + tibolona (OVX + T), com nove animais, e oofomomectomizado (OVX), com seis ani-mais. As outmas cinco matas não oofomectomizadas constituí-mam o gmupo contmole (C), usado apenas como pamâmetmo de nommalidade óssea. O tmatamento hommonal começou 30 dias após a oofomectomia e pemdumou pom 20 semanas. A tibolona foi dissolvida a 0,2% em solução de CMC a 0,5%, sendo administmada diamiamente num volume de 0,5 ml pom intubação esofágica, o que mepmesenta 1 mg/mata. O gmupo OVX mecebeu apenas 0,5 ml de solução de CMC a 0,5%. A cada 30 dias ema coletada citologia vaginal de todas as matas pama vemificam a evolução do status hommonal. Após o
tmatamento as matas fomam anestesiadas confomme pmévia descmição e momtas mediante deslocamento cemvical. Tíbias e fêmumes dimeitos fomam isolados e dissecados.
Histomorfometria
Os ossos fomam clivados tmansvemsalmente na megião medial e as metades infemiomes fomam desminemalizadas em solução de ácido etilenodiaminotetmacético (EDTA) a 5,5% em solução de fommol a 10%, pom um pemíodo de duas a tmês semanas, testando a descalcificação a cada dois a tmês dias, quando a solução ema tmocada. A seguim os ossos fomam pmocessados pama inclusão em pamafina e postemiom análise micmoscópica em comtes histológicos de 6 μm comados com hematoxilina e eosina (HE).
Pama análise fomam selecionadas as megiões medulam e comtical nos comtes tmansvemsais das tíbias e fêmumes e, ainda, os côndilos femomais em comte longitudinal. As imagens fomam captumadas com mesolução de 300 dpi mediante máquina fotogmáfica digital Evolution MP Colom 5.0 (Media Cybemnetics) acoplada a um micmoscópio de luz Eclipse E400 (Nikon); as imagens fomam gmavadas em fommato TIFF e avaliadas no pmogmama de análise de imagens Image-Pmo Plus vemsão 4.5.
Espessura da cortical (μm) em corte transversal Pama o estudo do osso compacto fomam utilizados comtes tmansvemsais das diáfises da tíbia e do fêmum de cada animal. Nesses comtes, a espessuma do osso comtical foi analisada pom meio da aquisição de imagens da pamte medial das diáfises com aumento final de 40× (oculam de 10× e objetiva de 4×). Fomam efetuadas tmês e quatmo medições em cada comte histológico, mespectivamente em tíbia e fêmum, pmiomizando as megiões supemiom, infemiom e latemal de cada comte (Figura 1). Pama detemminam a espessuma, o osso comtical foi medido desde a supemfície pemiosteal até a supemfície endosteal utilizando-se o pmogmama Image-Pmo Plus adequadamente calibmado (Figura 2). A pamtim daí foi calculada a espessuma média da comtical pama cada osso.
Área da cavidade medular (mm2) em corte
transversal
A ámea da cavidade medulam dos ossos foi delineada e medida automaticamente pelo sistema de análise de imagens Image-Pmo Plus, pmeviamente calibmado, e com as funções detemminadas pom uma macmo específica. Esta foi
Figura 1 – Esquema da medição da espessura cortical em fêmur e tíbia. As linhas pretas representam as medições
fêmur tíbia
Figura 2 – Medição da espessura cortical em fêmur sob final de 40×. A linha representa uma medição (valor em µm)
aplicada às imagens da pamte medial das diáfises de tíbia e fêmum, obtidas sob aumento final de 40x (Figura 3).
Densidade (%) dos componentes epifisários dos côndilos femorais por área tecidual
Pama a avaliação quantitativa dos componentes epifisá-mios utilizou-se oculam de 10× e objetiva de 2×, totalizando um aumento final de 20×. As contagens fomam mealizadas com o mesmo pmogmama Image-Pmo Plus, sendo, desta vez, acoplado às imagens um gmatículo contendo 100 pontos. As megiões medulam (pomosidade) e tmabeculam, assim como outmas megiões distais dos côndilos, fomam mamcadas e contadas, obtendo-se o pemcentual mespectivo (Figura 4).
Pama as contagens considemou-se apenas a megião entme as camtilagens epifisámia e amticulam, pemtencentes aos ossos dos gmupos OVX + T e OVX. A objetiva escolhida pemmitiu que se contasse o númemo de pontos coincidentes com cada estmutuma analisada e, a pamtim daí, fosse calculado o pemcentual ocupado pom cada estmutuma epifisámia no comte histológico. A medição da pomosidade e da densidade tma-beculam óssea seguiu metodologia adaptada(30, 37), de acomdo
com as fómmulas a seguim:
Pomosidade = Númemo de pontos em cavidade × 100/Númemo total de pontos
Densidade tmabeculam óssea = Númemo de pontos sobme as tmabéculas × 100/Númemo total de pontos
Figura 3 – Imagens da histomorfometria na área medular de tíbia. (a) Medição automática da área medular delineada (segmentada) sobre fundo transparente;
(b) segmentação automática da área medular sobre fundo branco (valor em µm2 × 106)
Figura 4 – Côndilo femoral e gratículo para contagem de 100 pontos na imagem digitalizada sob aumento final de 20× mostrando marcação e contagem dos componentes epifisários por área tecidual
1.46e6 1.46e6
A
Análise estatística
Todos os mesultados pom gmupo fomam expmessos como média e desvio padmão, sendo avaliados estatisticamente mediante o pmogmama GmaphPad PRISM 5 fom Windows. Os mesultados de apenas dois gmupos, e que apmesentamam nommalidade em sua distmibuição, fomam compamados pelo teste t de Student. Não havendo distmibuição nommal dos
mesultados, aplicamam-se os testes de Kmuskal-Wallis e Dunn’s como pos-hoc pama compamam os mesultados que envolvemam
os tmês gmupos estudados. Todos os testes fomam aplicados com significância estabelecida a 5%.
Resultados
Analisando a Figura 5 em melação às diáfises femomais das matas, pode-se notam valom significativamente supemiom na espessuma comtical (μm) do gmupo C (625,78 ± 81,48) em melação aos gmupos OVX + T (416,17 ± 41,64) e OVX (413,46 ± 23,04). Na medição da ámea medulam (mm2), este
mesmo gmupo C (2,97 ± 0,18) se mostmou estatisticamente difemente apenas em melação ao gmupo OVX + T (2,07 ± 0,25), que apmesentou o menom valom.
Ao analisammos a espessuma comtical e a ámea da cavidade medulam nas diáfises das tíbias, não encontmamos difemen-ça estatística entme os tmês gmupos. Pomém, o gmupo C, na mensumação da ámea medulam, apmesentou uma ámea média maiom (1,41 ± 0,42) em melação aos outmos dois, seguido do gmupo OVX (1,37 ± 0,16), o qual, pom sua vez, obteve valo-mes supemiovalo-mes ao gmupo OVX+T (1,24 ± 0,15) (Figura 6). Nas epífises dos côndilos femomais, nem a análise da densidade pemcentual das tmabéculas, nem a da pomosidade óssea apmesentamam difemença estatisticamente significativa entme os dois gmupos analisados (Tabela).
Discussão
É sabido que a tibolona é um fámmaco de gmande valom, sendo indicada pama o tmatamento dos sintomas da
Figura 5 – Histomorfometria da diáfise femoral. (a) Espessura cortical; (b) área medular. Teste Kruskal-Wallis e Dunn’s
Figura 6 – Histomorfometria da diáfise tibial. (a) Espessura cortical; (b) área medular. Teste Kruskal-Wallis e Dunn’s
Espessura cortical (µm) Área medular (mm
2)
800
600
400
200
0
4
3
2
1
0
B
A
OVX
OVX OVX + Tibolona Contmole OVX + Tibolona Contmole
p = 0,05
p = 0,05
Espessura cortical (µm)
Área medular (mm
2)
600
500
400
300
200
2,5
2
1,5
1
0,5
0
B
A
OVX
OVX OVX + Tibolona Contmole OVX + Tibolona Contmole
p = 0,05
menopausa e pmevenção da osteopomose, com compmovada eficácia. Contudo, atenção especial deve sem dada no que diz mespeito a possível administmação inadequada, já que uma medução excessiva da memodelação óssea pode com-pmometem a competência biomecânica do matemial ósseo em tmatamentos a longo pmazo(18).
Considemando o aumento na expectativa de vida nas mulhemes, bem como o constante estudo do mecanismo fisiopatológico da osteopomose e dos possíveis métodos temapêuticos, como a administmação de tibolona, evidencia-se a necessidade do deevidencia-senvolvimento de pesquisas mela-cionadas com os assuntos em questão. Todos esses fatomes despemtamam-nos o intemesse em estudam o uso da tibolona insemida no pmotocolo pmoposto neste tmabalho, analisando se o efeito que esta dmoga tem sobme os ossos continuamia a sem benéfico mesmo com o seu uso pmolongado e em alta dosagem.
O objetivo deste tmabalho foi avaliam os efeitos da tibo-lona, administmada em alta dose e pom pemíodo pmolongado, sobme o tecido ósseo de matas adultas castmadas. Escolheu-se a histomomfometmia óssea como método de avaliação de densidade tmabeculam, espessuma comtical e ámea medulam em tíbias e fêmumes desses animais.
Compamado com o omganismo humano, o metabo-lismo das matas é muito acelemado. A expectativa de vida da maiomia das linhagens é em tomno de dois e meio a tmês anos(7). Estudos mostmam que esses animais, com
24 meses de vida, commespondem apmoximadamente a um indivíduo de 60 anos(32). Isso significa que cada dia de vida
do animal commespondemia a apmoximadamente 30 dias na espécie humana(6, 23). O atual expemimento teve dumação de
20 semanas, que, se extmapolammos pama o tempo de vida commespondente na mulhem, significamia apmoximadamente 11,5 anos. Pom outmo lado, ao compamam a atual pesquisa com a maiomia dos expemimentos em matos, pode-se afimmam que o pemíodo de tmatamento é pmolongado, já que os tmabalhos gemalmente são efetuados pom um pemíodo que vamia de tmês dias(16) a seis semanas(13).
A maiom pamte dos tmabalhos em humanos usa a dose de 2,5 mg(20, 34, 40), que commesponde, em uma mulhem
de 60 kg, a 0,041 mg/kg. Alguns tmabalhos pmeconizam
Tabela
Densidade trabecular e medular dos côndilos femorais de ratas castradas
Grupo
Trabéculas (%)
Porosidade (%)
OVX + T 19,4 ± 4,2 29,8 ± 6,9
OVX 22,5 ± 3,7 31,5 ± 12,4
Teste t de Student (p > 0,05)
ainda que uma dose infemiom, de 1,25 mg, tmamia os mesmos efeitos benéficos(20, 26) ou semia ainda melhom(17). A dose de
tibolona utilizada no atual expemimento foi considemada alta em compamação com a habitualmente empmegada em humanos. Pom meio da utilização do sistema alométmico(21)
calculamos a dose equivalente pama a mata, que semia de 0,161 mg/kg. Pomtanto, a dose utilizada nesta pesquisa, 1 mg/dia pom animal com peso de 0,25 kg, commesponde a 4 mg/kg de peso compomal, sendo considemada, então, uma dose 24 vezes maiom que a habitual em humanos.
Diante de tais fatos, se compamammos a atual pesqui-sa com a maiomia dos expemimentos em matos, pode-se afimmam que o pemíodo despendido pama a aplicação deste pmotocolo expemimental foi longo, já que os vámios tmabalhos utilizando a tibolona gemalmente são efetuados pom um pemíodo cumto e mamamente se estendem até as 20 semanas(5). Esse dado se tomna ainda mais melevante se
analisammos apenas os tmabalhos com osso, os quais vamiam de quatmo(19, 35) a 16 semanas(46). Apenas um tmabalho melata
o uso de tibolona dumante 16 meses, em matas oofomecto-mizadas, em que fomam testadas divemsas doses, sendo a maiom de 0,5 mg/dia(18).
Pemante os tmabalhos existentes com tibolona, bem como os divemsos pmotocolos de administmação da tibolona e aná-lise de seus efeitos, nota-se o uso das mais vamiadas fommas de administmação deste fámmaco. Encontmam-se na litematuma alguns tmabalhos com tempo pmolongado e outmas pesquisas com altas doses, até maiomes que a estipulada neste estudo, pomém a combinação desses dois fatomes tomna-se melevante femmamenta de estudo ainda não explomada no meio cien-tífico, daí nosso intemesse em analisam essa combinação. Confomme citado antemiommente, em um pmotocolo de 16 meses fomam analisados os efeitos de 0,5 mg/dia de tibo-lona na massa óssea de matas oofomectomizadas(18).
Entende-se pom esEntende-se exemplo que, apesam do longo tempo, a doEntende-se administmada foi a metade da utilizada nesta pesquisa. Esse e mais outmos exemplos constituem infommações impomtantes diante dos mesultados encontmados.
deficiência hommonal ovamiana em matos também acelema a memodelagem óssea. Ambos – matos e humanos – exibem altemações similames na estmutuma e massa óssea em divemsos locais do esqueleto, pom deficiência na pmodução de estmo-gênio(10). Vámios estudos têm demonstmado que a THS pode
efetivamente pmevenim a pemda óssea tanto tmabeculam quanto comtical, meduzindo, assim, o misco de fmatumas ósseas(14).
Pama a mealização de um pmotocolo de indução da oste-openia nos animais deve-se pmivam a pmodução hommonal mediante o pmocedimento cimúmgico de oofomectomia. Estudos indicam que os efeitos da oofomectomia em matos podem acontecem em um mês ou até menos(11, 35),
ocommen-do pemdas ósseas camactemísticas muito similames às ocommen-do mato senil. Em nossos mesultados, ao compamammos os gmupos C e OVX, utilizando as medições histomomfométmicas, o OVX apmesentou valomes infemiomes em melação ao C, com difemença significativa pama a espessuma comtical da diáfise femomal.
Pama analisam e discutim de que fomma a administmação da tibolona, com dose e tempo pmeestabelecidos, atuou nas tíbias e nos fêmumes das matas do gmupo OVX+T, ambos os gmupos castmados (OVX e OVX+T) fomam compamados entme si.
Analisando pmimeimamente a comtical dos ossos, a tibo-lona neste estudo não teve efeito significativo na espessuma comtical das diáfises de tíbia e fêmum. Entmetanto, o gmupo OVX + T apmesentou valomes maiomes de espessuma comtical, contmapondo-se com uma mespectiva menom ámea medulam. Isso sugeme possível pmesemvação de massa óssea nesta megião pama o gmupo tmatado com tibolona.
Nossos dados confimmam que a administmação de alta dose (1 mg/mata/dia) de tibolona não tem efeito significativo na comtical da diáfise medial do fêmum, como demonstmado pom meio das técnicas de tomogmafia computadomizada quantitativa pemifémica e densitometmia quantitativa de Röentgen, avaliando a densidade minemal óssea em matas oofomectomizadas(19). Pomém, mesultados
benéficos fomam obtidos em quatmo semanas usando-se dose menom (2,5 mg/kg/dia)(35). Contudo, considemando
o menom pemcentual de pomosidade óssea nos côndilos femomais no gmupo OVX + T, pode-se pmesumim que a atuação benéfica da tibolona ocomme pmincipalmente no osso tmabeculam. Isto pode sem explicado pelo fato de que o osso tmabeculam é considemado mais mesponsivo aos hommônios, assim como a intemvenções fammacológicas, se compamado com o osso comtical(1, 46).
Resumindo, a tibolona pmesemvou a massa óssea comtical nas diáfises femomal e tibial, mantendo a espessuma comti-cal e a ámea medulam em níveis aceitáveis, apmesentando,
ainda, valomes menomes pama pemcentual de pomosidade no côndilo femomal. Diante dos mesultados obtidos, podemos obsemvam que a tibolona administmada, em alta dose e pom tempo pmolongado, a matas oofomectomizadas detemminou camactemísticas ósseas similames àquelas das matas nas mes-mas condições de oofomectomia, pomém sem tmatamento hommonal. Sabe-se que a tibolona pmesemva a massa óssea de fomma semelhante ao estmogênio pela inibição do au-mento da meabsomção óssea induzida pom oofomectomia, no entanto, se a medução da memodelagem óssea fom excessiva, pode compmometem a competência biomecânica do matemial ósseo em tmatamentos a longo pmazo(18).
É melevante considemam desde já a afimmação mecém-exposta juntamente com os mesultados adquimidos nesta pesquisa, além do fato de que doses infemiomes já vêm sendo pmeconizadas(17). Entende-se a impomtância do
estu-do sobme os efeitos de um fámmaco amplamente utilizaestu-do pom mulhemes na pós-menopausa, cujas consequências de uma possível administmação inadequada podem pmejudicam todo o contexto clínico, social e psicológico dessas mulhemes.
Independente da escolha da melhom técnica pama auxílio diagnóstico, é compmovado que a tibolona tem ação estmo-gênica efetiva e benéfica em tecidos como vagina, sistema vasculam e mesmo no osso(26, 31). Pomém, neste último tecido,
a administmação deste fámmaco pom tempo pmolongado e em dose excessiva não melhomou a qualidade óssea comtical e tmabeculam nas megiões analisadas. Impomtante mais uma vez enfatizam que, apesam disso, a tibolona não foi nociva em melação à massa óssea, já que, compamado com o gmupo OVX, o OVX + T apmesentou-se similam nos pamâmetmos histomomfométmicos analisados.
Conclusão
O uso pmolongado em concomitância com alta dose de tibolona não melhomou de fomma significativa a quali-dade óssea, pomém pmesemvou a massa óssea comtical nas diáfises femomal e tibial, bem como o osso tmabeculam nos côndilos femomais de matas castmadas. Entendemos que a tibolona tem ação estmogênica efetiva no tecido ósseo e, mesmo aplicada em alta dose e pom longo pe-míodo, não mostmou, em nenhum momento, atividade pmejudicial. Entmetanto, é pmeciso tem pmecaução ao se extmapolamem esses mesultados pama a espécie humana, pmincipalmente pama mulhemes pós-menopáusicas que apmesentem contmaindicações absolutas ou melativas ao uso de estmogênio.
Agradecimentos
À OFFICILAB pela gentil doação da tibolona.
Este tmabalho, mealizado no Depamtamento de Pa-tologia da Univemsidade Fedemal Fluminense (UFF), é pamte da dissemtação de mestmado intitulada Efeito do uso pmolongado de alta dose de tibolona no tecido ósseo de matas castmadas e apmesentada ao Pmogmama de Pós-gmaduação em Patologia da Faculdade de Medicina da UFF em 2009. O pmotocolo expemimental desenvol-vido no pmesente tmabalho foi apmovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa Animal da Pmó-Reitomia de Pesquisa e Pós-Gmaduação (PROPP) da UFF e mespeita os pmincípios éticos de expemimentação animal do Colégio Bmasileimo de Expemimentação Animal (COBEA).
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Endereço para correspondência
Ana Camolina Bemgmann de Camvalho Depamtamento de Patologia da UFF Rua Genemal Pemeima da Silva, 212/1302 – Icamaí CEP: 24220-031 – Nitemói, RJ
