Estudo comparativo da patogenicidade e virulência de Entamoeba dispar com amostras de Entamoeba histolytica.

(1)

ESTUDO COMPARATIVO DA PATOGENICIDADE

E VIRULÊNCIA DE

Entamoeba dispar

COM

AMOSTRAS DE

Entamoeba histolytica

(2)

Universidade Federal de Minas Gerais Instituto de Ciências Biológicas Departamento de Parasitologia

ESTUDO COMPARATIVO DA PATOGENICIDADE

E VIRULÊNCIA DE

Entamoeba dispar

COM

AMOSTRAS DE

Entamoeba histolytica

Tese apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Parasitologia do Instituto de Ciências Biológicas da Universidade Federal de Minas Gerais, como parte dos

requisitos para obtenção do grau de Doutor.

Orientador: Prof. Dr. Edward Félix Silva

(3)

043

D659e

Dolabella, Silvio Santana.

Estudo comparativo da patogenicidade e virulência de Entamoeba dispar com amostras de Entamoeba histolytica [manuscrito] / Silvio Santana Dolabella. – 2007.

xviii, 120 f. : il. ; 29,5 cm. Orientador: Edward Félix Silva.

Tese (doutorado) – Universidade Federal de Minas Gerais, Departamento de Parasitologia.

(4)

Trabalho realizado no Laboratório de Amebíase e Protozoários Intestinais do Departamento de Parasitologia, Instituto de Ciências Biológicas, Universidade Federal de Minas Gerais e nos Laboratórios de Patologia Geral e Biologia Celular do Centro de Investigação e Estudos Avançados do Instituto Politécnico Nacional-México, com o auxílio financeiro da Coordenadoria de Aperfeiçoamento

de Pessoal de Nível Superior (CAPES) e Fundação de Desenvolvimento e Amparo à Pesquisa do Estado de Minas

(5)

(6)

A G R A D E C I M E N T O S

A o P r o f e s s o r E d w a r d F é l i x S i l v a p e l a o r i e n t a ç ã o , i n c e n t i v o , c a r i n h o e p e l a s i n c e r a e v a l i o s a a m i z a d e .

A o P r o g r a m a d e P ó s - G r a d u a ç ã o e m P a r a s i t o l o g i a p e l a c o n f i a n ç a , a p o i o , c o b r a n ç a s e f a c i l i d a d e s c o n c e d i d a s p a r a a r e a l i z a ç ã o d e s t e t r a b a l h o .

A C A P E S ( C o o r d e n a d o r i a d e A p e r f e i ç o a m e n t o d e P e s s o a l d e N í v e l S u p e r i o r ) , p e l a c o n c e s s ã o d a b o l s a d e d o u t o r a d o e p e l a o p o r t u n i d a d e d e e s t u d a r e m o u t r o p a í s , a t r a v é s d o P r o g r a m a d e D o u t o r a d o c o m E s t á g i o n o E x t e r i o r ( P D E E ) .

A R o s á r i a , q u e n o v a m e n t e a c e i t o u m i n h a s l o n g a s n o i t e s e m f r e n t e a o c o m p u t a d o r , p e l a c o m p r e e n s ã o n o s m o m e n t o s d e a u s ê n c i a e p e l o i n c e n t i v o .

A o s a m i g o s d o L a b o r a t ó r i o d e A m e b í a s e , E d n a M a r i a P i r e s e J o ã o d a C o s t a V i a n a , p e l o a p o i o i n c o n d i c i o n a l , p a c i ê n c i a e c o n s t a n t e d i s p o n i b i l i d a d e n a r e a l i z a ç ã o d o s e x p e r i m e n t o s .

A M i c h e l l e R i b e i r o , a m i g a d e t o d a u m a j o r n a d a , p e l o c a r i n h o , a p o i o , a m i z a d e e a l e g r i a s c o m p a r t i l h a d a s .

A o a m i g o F r a n c e s c o Iu d i c i N e t o , p o r s u a a m i z a d e e e s t í m u l o s .

(7)

A o s P r o f e s s o r e s O r i v a l d o A l v e s R o c h a e A n i l t o n C e s a r V a s c o n c e l o s , d o D e p a r t a m e n t o d e P a t o l o g i a d o IC B / U F M G , p e l a v a l i o s a c o l a b o r a ç ã o n a p a r t e d e p a t o l o gi a .

A o P r o f e s s o r R i c a r d o W a g n e r d e A l m e i d a V i t o r , p o r s e u e x e m p l o e c o n s i d e r a ç ã o .

A o s D r s . M i n e k o S h i b a ya m a e V i c t o r T s u t s u m i , p e s q u i s a d o r e s d o D e p a r t a m e n t o d e P a t o l o g i a E x p e r i m e n t a l d o C e n t r o d e In v e s t i g a ç ã o e E s t u d o s A v a n ç a d o s d o In s t i t u t o P o l i t é c n i c o N a c i o n a l – M é x i c o ( C IN V E S T A V ) , p e l a a t e n ç ã o e o r i e n t a ç ã o n o d e s e n v o l v i m e n t o d e p a r t e d e s t e t r a b a l h o .

A o s d e m a i s i n t e g r a n t e s d o D e p a r t a m e n t o d e P a t o l o g i a E x p e r i m e n t a l d o C e n t r o d e In v e s t i ga ç ã o e E s t u d o s A v a n ç a d o s d o In s t i t u t o P o l i t é c n i c o N a c i o n a l – M é x i c o , q u e m e p r o p o r c i o n a r a m u m e s t á gi o t r a n q u i l o e u m ó t i m o a m b i e n t e d e t r a b a l h o : S i l v i a G a l i n d o G ó m e z , A n g é l i c a S i l v a O l i v a r e s , M i r e ya S á n c h e z P a l o m e r o , D a g o b e r t o C a r r a s c o , J u d i t h P a c h e c o Y é p e z , M a r t h a D u e ñ a s e J e s ú s S e r r a n o Lu n a . U m c a r i n h o e s p e c i a l a o s a m i go s q u e a v i d a m e d e u a o p o r t u n i d a d e d e c o n h e c e r : Is a a c C e r v a n t e s S a n d o v a l , J u a n M a n u e l G u t i é r r e z M e z a e M a r í a F e r n a n d a Ló p e z G ó m e z , o s l e v o e m m e u c o r a ç ã o .

A o D r . F e r n a n d o N a v a r r o G a r c í a , p e s q u i s a d o r d o D e p a r t a m e n t o d e B i o l o g i a C e l u l a r d o C IN V E S T A V , q u e t ã o g e n t i l m e n t e m e a u x i l i o u n o s e x p e r i m e n t o s c o m c u l t i v o s d e c é l u l a s M D C K . U m a g r a d e c i m e n t o e s p e c i a l a R o c í o H u e r t a C a n t i l l o , a u x i l i a r d e i n v e s t i ga ç ã o e q u e m e a c o m p a n h o u e m g r a n d e p a r t e d o s e x p e r i m e n t o s n e s t e l a b o r a t ó r i o , m u i t o o b r i g a d o .

(8)

E d i l m a P a r a g u a i d e S o u z a D i a s , A n a C r i s t i n a N o g u e i r a d e M e l o , A n a Lú c i a V a z q u e z V i l l a e T h a l i t a R o d r i g u e s D u a r t e .

A t o d o s o s p r o f e s s o r e s d o c u r s o d e P ó s - G r a d u a ç ã o e m P a r a s i t o l o g i a , p e l a c o n t r i b u i ç ã o e m m i n h a f o r m a ç ã o a c a d ê m i c a .

A S u m a r a A p a r e c i d a G u i l h e r m e , s e c r e t á r i a d e P ó s - G r a d u a ç ã o , p e l a d i s p o n i b i l i d a d e , i n c e n t i v o e c o m p r e e n s ã o , m u i t o o b r i g a d o .

A t o d o s a q u e l e s q u e , d i r e t a o u i n d i r e t a m e n t e , p a r t i c i p a r a m d e s t e t r a b a l h o e n ã o f o r a m c i t a d o s .

A F o r ç a S u p e r i o r , q u e t o d o s o s d i a s g u i a m e u s p a s s o s e m e d á f o r ç a s p a r a t r i l h a r o c a m i n h o e s c o l h i d o .

(9)

“ N o s s a s d ú v i d a s s ã o t r a i d o r a s e n o s f a z e m p e r d e r o q u e , c o m f r e q u ê n c i a , p o d e r í a m o s g a n h a r , p o r s i m p l e s m e d o d e a r r i s c a r . ”

(10)

Li s t a d e F i g u r a s e T a b e l a s . . . X I I

Li s t a d e A b r e v i a t u r a s . . . X V I I

R e s u m o . . . X I X

1 . IN T R O D U Ç Ã O . . . 1

1 . 1 . H i s t ó r i c o . . . 2

1 . 2 . P r e v a l ê n c i a M u n d i a l . . . 6

1 . 3 . M o r f o l o g i a e B i o l o gi a d a E . h i s t o l y t i c a / E . d i s p a r . . . 7

1 . 3 . 1 . T r o f o z o í t o s d e E . h i s t o l y t i c a . . . 7

1 . 3 . 2 . P r é - c i s t o s . . . 9

1 . 3 . 3 . C i s t o s . . . 9 1 . 3 . 4 . M e t a c i s t o s . . . 1 0 1 . 3 . 5 . C i c l o B i o l ó g i c o . . . 1 0 1 . 3 . 6 . E n t a m o e b a d i s p a r . . . 1 1

1 . 4 . P a t o g e n i a e V i r u l ê n c i a . . . 1 4 1 . 5 . E s t u d o s E x p e r i m e n t a i s d e V i r u l ê n c i a . . . 2 1 1 . 5 . 1 . I n v i t r o . . . 2 1

1 . 5 . 1 . 1 . F a g o c i t o s e . . . 2 1 1 . 5 . 1 . 2 . E f e i t o C i t o p á t i c o . . . 2 3 1 . 5 . 1 . 3 . P r o t e a s e s . . . 2 3 1 . 5 . 2 . I n v i v o . . . 2 4

2 . J U S T IF IC A T IV A . . . 2 5

3 . O B J E T IV O S . . . 2 7 3 . 1 . O b j e t i v o G e r a l . . . 2 8 3 . 2 . O b j e t i v o s E s p e c í f i c o s . . . 2 8

(11)

4 . 2 . E s t u d o s d e v i r u l ê n c i a . . . 3 1 4 . 2 . 1 . E s t u d o s i n v i v o . . . 3 1

4 . 2 . 1 . 1 . P r e p a r o d o s i n ó c u l o s . . . 3 1 4 . 2 . 1 . 2 . In o c u l a ç ã o i n t r a - h e p á t i c a e m h a m s t e r . . . . 3 2 4 . 2 . 2 . E s t u d o s i n v i t r o . . . 3 3

4 . 2 . 2 . 1 . E r i t r o f a g o c i t o s e . . . 3 3 4 . 2 . 2 . 2 . A t i v i d a d e P r o t e o l í t i c a e m G é i s d e

P o l i a c r i l a m i d a . . . 3 4 4 . 2 . 2 . 3 . D e t e r m i n a ç ã o Q u a n t i t a t i v a d a A t i v i d a d e

P r o t e o l í t i c a c o m A z u r e e A z o c o l l . . . 3 5 4 . 2 . 2 . 4 . E f e i t o C i t o p á t i c o s o b r e C é l u l a s M D C K . . . 3 6 4 . 2 . 2 . 5 . M e d i d a d a R e s i s t ê n c i a T r a n s e p i t e l i a l ( R T e ) . . . 3 7 4 . 2 . 2 . 6 . P r e p a r o d e a n t i c o r p o s p o l i c l o n a i s a n t i

-E . d i s p a r e m c o e l h o s . . . 3 8

4 . 2 . 2 . 7 . Im u n o h i s t o q u í m i c a . . . 3 8 4 . 3 . E s t u d o s d e u l t r a e s t r u t u r a . . . 3 9 4 . 3 . 1 . M i c r o s c o p i a E l e t r ô n i c a d e T r a n s m i s s ã o . . . 3 9 4 . 3 . 2 . M i c r o s c o p i a E l e t r ô n i c a d e V a r r e d u r a . . . 4 0

5 . R E S U LT A D O S . . . 4 2 5 . 1 . E s t u d o s d e v i r u l ê n c i a . . . 4 3 5 . 1 . 1 . E s t u d o s i n v i v o - C i n é t i c a d a F o r m a ç ã o d a s Le s õ e s

H e p á t i c a s e m H a m s t e r s . . . 4 3 5 . 1 . 1 . 1 . C e p a IC B - A D O p o l i x ê n i c a (E . d i s p a r) . . . 4 3

5 . 1 . 1 . 2 . C e p a IC B - E G G m o n o x ê n i c a (E . h i s t o l y t i c a) . . . 5 4

5 . 1 . 1 . 3 . In o c u l a ç ã o d e m e i o d e c u l t u r a . . . 6 7 5 . 1 . 1 . 4 . In o c u l a ç ã o d e b a c t é r i a s d a c e p a IC B - A D O

p o l i x ê n i c a . . . 6 8 5 . 1 . 1 . 5 . In o c u l a ç ã o d e t r o f o z o í t o s f i x a d o s c o m

g l u t a r a l d e í d o . . . 6 8 5 . 1 . 2 . E s t u d o s i n v i t r o. . . 6 9

(12)

5 . 1 . 2 . 2 . A t i v i d a d e P r o t e o l í t i c a e m G é i s d e P o l i a c r i l a m i d a . . . 5 . 1 . 2 . 3 . D e t e r m i n a ç ã o Q u a n t i t a t i v a d a A t i v i d a d e P r o t e o l í t i c a c o m A z u r e e A z o c o l l . . .

7 0

7 3 5 . 1 . 2 . 4 . E f e i t o C i t o p á t i c o s o b r e C é l u l a s M D C K . . . 7 8 5 . 1 . 2 . 5 . M e d i d a d a R e s i s t ê n c i a T r a n s e p i t e l i a l ( R T e ) . . . 7 8 5 . 1 . 2 . 6 . Im u n o h i s t o q u í m i c a . . . 8 0 5 . 2 . E s t u d o s d e u l t r a e s t r u t u r a . . . 8 2 5 . 2 . 1 . M i c r o s c o p i a E l e t r ô n i c a d e V a r r e d u r a . . . 8 2 5 . 2 . 2 . M i c r o s c o p i a E l e t r ô n i c a d e T r a n s m i s s ã o . . . 8 7

6 . D IS C U S S Ã O . . . 9 0 6 . 1 . E s t u d o s i n v i v o - C i n é t i c a d a F o r m a ç ã o d a s Le s õ e s

H e p á t i c a s e m H a m s t e r s . . . 9 1 6 . 2 . E s t u d o s i n v i t r o . . . 9 5

6 . 2 . 1 . E r i t r o f a g o c i t o s e . . . 9 5 6 . 2 . 2 . A t i v i d a d e P r o t e o l í t i c a e m G é i s d e

P o l i a c r i l a m i d a e D e t e r m i n a ç ã o Q u a n t i t a t i v a d a A t i v i d a d e

P r o t e o l í t i c a c o m A z u r e e A z o c o l l . . . 9 6 6 . 2 . 3 . E f e i t o C i t o p á t i c o s o b r e C é l u l a s M D C K e

M e d i d a d a R e s i s t ê n c i a T r a n s e p i t e l i a l ( R T e ) . . . 9 9 6 . 2 . 4 . I m u n o h i s t o q u í m i c a . . . 1 0 1 6 . 3 . E s t u d o s d e U l t r a e s t r u t u r a . . . 1 0 2

7 . C O N C LU S Õ E S . . . 1 0 4

8 . R E F E R Ê N C IA S B IB L IO G R Á F IC A S . . . 1 0 6

(13)

F i g u r a 1 : C i c l o b i o l ó g i c o d a E . h i s t o l y t i c a/E . d i s p a r . . . 1 3

F i g u r a 2 : M o n t a g e m d a c â m a r a T r a n s w e l l® e m p o ç o d e p l a c a

C o s t a r 3 5 2 4 . . . 3 8

F i g u r a 3 . A s p e c t o h i s t o p a t o l ó g i c o d e l e s õ e s e m f í g a d o d e h a m s t e r u m a h o r a p ó s - i n o c u l a ç ã o c o m 5 , 0 x 1 05 t r o f o z o í t o s d a c e p a IC B

-A D O p o l i x ê n i c a d e E . d i s p a r . . . 4 4

F i g u r a 4 . A s p e c t o h i s t o p a t o l ó g i c o d e l e s õ e s e m f í g a d o d e h a m s t e r t r ê s h o r a s p ó s - i n o c u l a ç ã o c o m 5 , 0 x 1 05 t r o f o z o í t o s d a c e p a IC B

F i g u r a 5 . A s p e c t o h i s t o p a t o l ó g i c o d e l e s õ e s e m f í g a d o d e h a m s t e r s e i s h o r a s p ó s - i n o c u l a ç ã o c o m 5 , 0 x 1 05 t r o f o z o í t o s d a c e p a IC B

F i g u r a 6 . A s p e c t o h i s t o p a t o l ó g i c o d e l e s õ e s e m f í g a d o d e h a m s t e r d o z e h o r a s p ó s - i n o c u l a ç ã o c o m 5 , 0 x 1 05 t r o f o z o í t o s d a c e p a IC B

F i g u r a 7 . A s p e c t o h i s t o p a t o l ó g i c o d e l e s õ e s e m f í g a d o d e h a m s t e r 2 4 h o r a s p ó s - i n o c u l a ç ã o c o m 5 , 0 x 1 05 t r o f o z o í t o s d a c e p a IC B

F i g u r a 8 . A s p e c t o h i s t o p a t o l ó g i c o d e l e s õ e s e m f í g a d o d e h a m s t e r 4 8 h o r a s p ó s - i n o c u l a ç ã o c o m 5 , 0 x 1 05 t r o f o z o í t o s d a c e p a IC B

(14)

F i g u r a 9 . A s p e c t o h i s t o p a t o l ó g i c o d e l e s õ e s e m f í g a d o d e h a m s t e r u m a h o r a p ó s - i n o c u l a ç ã o c o m 5 , 0 x 1 05 t r o f o z o í t o s d a c e p a IC B

-E G G m o n o x ê n i c a d e E . h i s t o l y t i c a . . . 5 5

F i g u r a 1 0 . A s p e c t o h i s t o p a t o l ó g i c o d e l e s õ e s e m f í g a d o d e h a m s t e r t r ê s h o r a s p ó s - i n o c u l a ç ã o c o m 5 , 0 x 1 05 t r o f o z o í t o s d a

c e p a IC B - E G G m o n o x ê n i c a d e E . h i s t o l y t i c a . . . 5 7

F i g u r a 1 1 . A s p e c t o h i s t o p a t o l ó g i c o d e l e s õ e s e m f í g a d o d e h a m s t e r s e i s h o r a s p ó s - i n o c u l a ç ã o c o m 5 , 0 x 1 05 t r o f o z o í t o s d a c e p a IC B

F i g u r a 1 2 . A s p e c t o h i s t o p a t o l ó g i c o d e l e s õ e s e m f í g a d o d e h a m s t e r d o z e h o r a s p ó s - i n o c u l a ç ã o c o m 5 , 0 x 1 05 t r o f o z o í t o s d a c e p a IC B

F i g u r a 1 3 . A s p e c t o h i s t o p a t o l ó g i c o d e l e s õ e s e m f í g a d o d e h a m s t e r 2 4 h o r a s p ó s - i n o c u l a ç ã o c o m 5 , 0 x 1 05 t r o f o z o í t o s d a c e p a IC B - E G G

m o n o x ê n i c a d e E . h i s t o l y t i c a . . . 6 2

F i g u r a 1 4 . A s p e c t o h i s t o p a t o l ó g i c o d e l e s õ e s e m f í g a d o d e h a m s t e r 4 8 h o r a s p ó s - i n o c u l a ç ã o c o m 5 , 0 x 1 05 t r o f o z o í t o s d a c e p a IC B - E G G

m o n o x ê n i c a d e E . h i s t o l y t i c a . . . 6 4

F i g u r a 1 5 . A s p e c t o h i s t o p a t o l ó g i c o d e l e s õ e s e m f í g a d o d e h a m s t e r s e t e d i a s p ó s - i n o c u l a ç ã o c o m 5 , 0 x 1 05 t r o f o z o í t o s a c e p a IC B - E G G

m o n o x ê n i c a . . . 6 6

F i g u r a 1 6 . D i s t r i b u i ç ã o d o s o m a t ó r i o d a s á r e a s d e n e c r o s e e i n f i l t r a d o i n f l a m a t ó r i o e m d i f e r e n t e s p e r í o d o s d e i n f e c ç ã o p o r c e p a s d e E . h i s t o l y t i c a ( IC B - E G G m o n o x ê n i c a ) e E . d i s p a r

(15)

F i g u r a 1 7 . F a g o c i t o s e d e e r i t r ó c i t o s h u m a n o s p o r c e p a s d e

E . h i s t o l y t i c a ( E . h . ) e E . d i s p a r ( E . d . ) . F o i u t i l i z a d a u m a r e l a ç ã o d e

u m t r o f o z o í t o p a r a 1 0 0 e r i t r ó c i t o s . . . 6 9

F i g u r a 1 8 . P o r c e n t a g e m d e t r o f o z o í t o s d e c e p a s d e E . h i s t o l y t i c a

( E . h . ) e E . d i s p a r ( E . d . ) q u e f a g o c i t a r a m e r i t r ó c i t o s h u m a n o s a p ó s

3 0 m i n u t o s d e i n t e r a ç ã o . . . 7 0

F i g u r a 1 9 . A t i v i d a d e p r o t e o l í t i c a d e e x t r a t o s t o t a i s d a c e p a H M 1 -IM S S d e E . h i s t o l y t i c a e e f e i t o d e i n i b i d o r e s d e p r o t e a s e s e m S D S

-P A G E a 1 2 % c o p o l i m e r i z a d o c o m 0 , 1 % d e g e l a t i n a d e p e l e p o r c i n a

e c o r a d o p e l o a z u l d e C o o m a s s i e . . . 7 1

F i g u r a 2 0 . A t i v i d a d e p r o t e o l í t i c a d e e x t r a t o s t o t a i s d a c e p a IC B -E G G m o n o x ê n i c a d e E . h i s t o l y t i c a e e f e i t o d e i n i b i d o r e s d e

p r o t e a s e s e m S D S - P A G E a 1 2 % c o p o l i m e r i z a d o c o m 0 , 1 % d e

g e l a t i n a d e p e l e p o r c i n a e c o r a d o p e l o a z u l d e C o o m a s s i e . . . 7 2

F i g u r a 2 1 . A t i v i d a d e p r o t e o l í t i c a d e e x t r a t o s t o t a i s d a c e p a IC B -A D O p o l i x ê n i c a d e E . d i s p a r e e f e i t o d e i n i b i d o r e s d e p r o t e a s e s e m

S D S - P A G E a 1 2 % c o p o l i m e r i z a d o c o m 0 , 1 % d e g e l a t i n a d e p e l e

p o r c i n a e c o r a d o p e l o a z u l d e C o o m a s s i e . . . 7 3

F i g u r a 2 2 . A t i v i d a d e p r o t e o l í t i c a d e e x t r a t o t o t a l d e t r o f o z o í t o s d e

E . h i s t o l y t i c a ( c e p a s IC B - E G G ) e E . d i s p a r ( c e p a s IC B - A D O ) c o m

s u b s t r a t o a z o c o l l . . . 7 4

F i g u r a 2 3 . A t i v i d a d e p r o t e o l í t i c a d e e x t r a t o t o t a l d e t r o f o z o í t o s d e

(16)

F i g u r a 2 4 . A t i v i d a d e p r o t e o l í t i c a d e m e i o c o n d i c i o n a d o d e

s u b s t r a t o a z o c o l l . . . 7 5

F i g u r a 2 5 . A t i v i d a d e p r o t e o l í t i c a d e m e i o c o n d i c i o n a d o d e

s u b s t r a t o a z u r e . . . 7 6

F i g u r a 2 6 . In i b i ç ã o d a a t i v i d a d e p r o t e o l í t i c a d e e x t r a t o s t o t a i s d e t r o f o z o í t o s d e E . h i s t o l y t i c a ( c e p a IC B - E G G m o n o x ê n i c a ) e E . d i s p a r ( c e p a IC B - A D O m o n o x ê n i c a ) , u t i l i z a n d o c o m o s u b s t r a t o

a z o c o l l . . . 7 7

F i g u r a 2 7 . In i b i ç ã o d a a t i v i d a d e p r o t e o l í t i c a d e e x t r a t o s t o t a i s d e t r o f o z o í t o s d e E . h i s t o l y t i c a ( c e p a IC B - E G G p o l i x ê n i c a ) e E . d i s p a r

( c e p a IC B - A D O p o l i x ê n i c a ) , u t i l i z a n d o c o m o s u b s t r a t o a z o c o l l . . . 7 7

F i g u r a 2 8 . E f e i t o d e t r o f o z o i t o s d e E . d i s p a r ( IC B - A D O

m o n o x ê n i c a ) e E . h i s t o l y t i c a ( IC B - E G G m o n o x ê n i c a ) n a r e s i s t ê n c i a

t r a n s e p i t e l i a l d e c é l u l a s M D C K e m m o n o c a m a d a s . . . 7 9

F i g u r a 2 9 . E f e i t o d e t r o f o z o i t o s d e E . d i s p a r ( IC B - A D O p o l i x ê n i c a )

e E . h i s t o l y t i c a ( IC B - E G G p o l i x ê n i c a ) n a r e s i s t ê n c i a t r a n s e p i t e l i a l

d e c é l u l a s M D C K e m m o n o c a m a d a s . . . 7 9

F i g u r a 3 0 . In t e r a ç ã o i n v i v o e m d i f e r e n t e s t e m p o s p ó s - i n o c u l a ç õ e s

d e t r o f o z o í t o s d e E . d i s p a r ( c e p a IC B - A D O p o l i x ê n i c a ) c o m

h e p a t ó c i t o s d e h a m s t e r s , u t i l i z a n d o p e r o x i d a s e m a r c a d a c o n t r a

a n t i c o r p o s p o l i c l o n a i s d e E . d i s p a r . . . 8 1

F i g u r a 3 1 . M i c r o s c o p i a e l e t r ô n i c a d e v a r r e d u r a d e t r o f o z o í t o s d a c e p a IC B - A D O p o l i x ê n i c a (E . d i s p a r) , a p r e s e n t a n d o d e l g a d o s

(17)

F i g u r a 3 2 . M i c r o s c o p i a e l e t r ô n i c a d e v a r r e d u r a d e t r o f o z o í t o s d a

c e p a IC B - E G G p o l i x ê n i c a (E . h i s t o l y t i c a) . . . 8 4

c e p a IC B - A D O m o n o x ê n i c a (E . d i s p a r) . . . 8 5

c e p a IC B - E G G m o n o x ê n i c a (E . h i s t o l y t i c a) . . . 8 6

F i g u r a 3 5 . E l e t r o m i c r o f o t o g r a f i a d e t r o f o z o í t o s d a c e p a IC B - A D O

p o l i x ê n i c a (E . d i s p a r) . . . 8 7

F i g u r a 3 6 . E l e t r o m i c r o f o t o g r a f i a d e t r o f o z o í t o s d a c e p a IC B - A D O

m o n o x ê n i c a (E . d i s p a r) . . . 8 8

F i g u r a 3 7 . E l e t r o m i c r o f o t o g r a f i a d e t r o f o z o í t o s d a c e p a IC B - E G G

p o l i x ê n i c a (E . h i s t o l y t i c a) . . . 8 8

F i g u r a 3 8 . E l e t r o m i c r o f o t o g r a f i a d e t r o f o z o í t o s d a c e p a IC B - E G G

m o n o x ê n i c a (E . h i s t o l y t i c a) . . . 8 9

(18)

A H A – a b c e s s o h e p á t i c o a m e b i a n o c f – C r i t h i d i a f a s c i c u l a t a

C H O - c h i n e s e h a m s t e r o v a r y c e l l s ( c é l u l a s )

C IN V E S T A V – C e n t r o d e In v e s t i g a ç ã o e E s t u d o s A v a n ç a d o s C P – c i s t e í l - p r o t e i n a s e s

D A B – d i a m i n o b e n z i d i n a

E - 6 4 - L - t r a n s - e p o x y s u c c i n y l - l e u c y l a m i d e - ( 4 - g u a n i d o ) - b u t a n e

E . d . – E n t a m o e b a d i s p a r

E . h . – E n t a m o e b a h i s t o l y t i c a

E D T A – á c i d o e t i l e n o d i a m i n o t e t r a c é t i c o f e – f o r m a ç õ e s e s f e r o i d a i s

f i – f i l o p ó d i o s

G a l / G a l N a c - g a l a c t o s e / N - a c e t i l - g a l a c t o s a m i n a G P I – g l i c o s e f o s f a t o i s o m e r a s e

g – g r a m a ( p e s o )

H E – h e m a t o x i l i n a - e o s i n a H K – h e x o q u i n a s e

IC B – In s t i t u t o d e C i ê n c i a s B i o l ó gi c a s I g A – i m u n o gl o b u l i n a A

I g G – i m u n o gl o b u l i n a G k D a – q u i l o d á l t o n s k g – q u i l o g r a m a M – m o l a r

m a – e s t o m a d e m a c r o p i n o c i t o s e

M D C K - M a d i n - D a r b y c a n i n e k i d n e y c e l l s ( c é l u l a s )

M E – e n z i m a m á l i c a

M E M – m e i o e s s e n c i a l m í n i m o

(19)

m i – e s t o m a d e m i c r o p i n o c i t o s e m i n – m i n u t o

m L – m i l i l i t r o s m M – m i l i m o l a r n m – n a n ô m e t r o

P B S – s o l u ç ã o s a l i n a t a m p o n a d a P G M – f o s f o g l i c o m u t a s e

p H – p o t e n c i a l h i d r o g e n i ô n i c o

P H M B – á c i d o p - h i d r o x i m e r c u r i o b e n z ó i c o P M N - p o l i m o r f o n u c l e a r e s

P M S F – f l u o r e t o d e f e n i l m e t i l s u f o n i l S D S – d o d e c i l s u l f a t o d e s ó d i o

S D S - P A G E – s o d i u m d o d e c i l s u l p h a t e – p o l y a c r y l a m i d e g e l e l e c t r o p h o r e s i s

S F B – s o r o f e t a l b o v i n o T C A – á c i d o t r i c l o r o a c é t i c o T E R – r e s i s t ê n c i a t r a n s e p i t e l i a l

T r i s - O H – t r i s m a b a s e – t r i s ( h i d r o x i m e t i l ) a m i n o m e t a n o U F M G – U n i v e r s i d a d e F e d e r a l d e M i n a s G e r a i s

U F R J – U n i v e r s i d a d e F e d e r a l d o R i o d e J a n e i r o V – v o l t

V E R O – A f r i c a n g r e e n m o n k e y k i d n e y e p i t h e l i a l c e l l s ( c é l u l a s )

W H O – O r g a n i z a ç ã o M u n d i a l d e S a ú d e µ g – m i c r o g r a m a

(20)

RESUMO

N e s t e t r a b a l h o , a s p e c t o s d a p a t o g e n i c i d a d e e v i r u l ê n c i a d a c e p a IC B - A D O p o l i x ê n i c a d e E n t a m o e b a d i s p a r f o r a m a b o r d a d o s , v i s a n d o u m

m e l h o r c o n h e c i m e n t o d o s m e c a n i s m o s d e a g r e s s ã o q u e e s s a c e p a a p r e s e n t a .

C o n s i d e r a d a u m a e s p é c i e n ã o - p a t o g ê n i c a , E . d i s p a r t e m s i d o

i s o l a d a d e p a c i e n t e s b r a s i l e i r o s c o m c o l i t e n ã o d i s e n t é r i c a e d e m o n s t r a d o c a p a c i d a d e d e o c a s i o n a r l e s õ e s e m a n i m a i s d e e x p e r i m e n t a ç ã o , q u a n d o a s s o c i a d a à f l o r a d a m i c r o b i o t a i n t e s t i n a l d e s e u s h o s p e d e i r o s .

E s t u d o s i n v i v o u t i l i z a n d o h a m s t e r s c o m o m o d e l o e x p e r i m e n t a l ,

v e r i f i c a r a m d i f e r e n ç a s n a c i n é t i c a d a s l e s õ e s h e p á t i c a s o c a s i o n a d a s p e l a c e p a IC B - A D O p o l i x ê n i c a d e E . d i s p a r, d i f e r i n d o s u b s t a n c i a l m e n t e d o

o b s e r v a d o p a r a a s c e p a s IC B - E G G e H M 1 - IM S S d e E . h i s t o l y t i c a.

A p e s a r d e o c a s i o n a r l e s õ e s e x t e n s a s a p ó s s e t e d i a s d e i n o c u l a ç ã o , a c e p a IC B - A D O d e m o n s t r a u m a c a p a c i d a d e d e l e s a r m a i s l e n t a m e n t e o s t e c i d o s .

E s t u d o s i n v i t r o d e m o n s t r a r a m s e r a c e p a IC B - A D O d e E . d i s p a r

c a p a z d e o c a s i o n a r a d e s t r u i ç ã o e a q u e d a d a m e d i d a d a r e s i s t ê n c i a t r a n s e p i t e l i a l d e c é l u l a s M D C K e m m o n o c a m a d a s , e m b o r a d e f o r m a m a i s l e n t a e g r a d u a l q u e c e p a s d e E . h i s t o l y t i c a. A c e p a IC B - A D O

p o l i x ê n i c a a p r e s e n t o u t a m b é m u m a m a i o r a t i v i d a d e d e p r o t e a s e s q u a n d o c o m p a r a d a c o m a c e p a H M 1 - IM S S d e E . h i s t o l y t i c a, d e v e n d o a r e l a ç ã o

(21)

(22)

1 . 1 . H i s t ó r i c o

D e a c o r d o c o m a O r g a n i z a ç ã o M u n d i a l d e S a ú d e ( W H O , 1 9 9 7 ) a m e b í a s e é a p r e s e n ç a d o p r o t o z o á r i o E n t a m o e b a h i s t o l y t i c a

( S c h a u d i n n , 1 9 0 3 ) n o o r g a n i s m o h u m a n o c o m o u s e m m a n i f e s t a ç õ e s c l í n i c a s .

A a m e b í a s e é u m a p a r a s i t o s e q u e a t i n g e c e r c a d e 1 0 % a 2 0 % d a p o p u l a ç ã o m u n d i a l , s e n d o m a i s c o m u m e m r e g i õ e s t r o p i c a i s e s u b t r o p i c a i s , o n d e a p o p u l a ç ã o é m a i s c a r e n t e , c o m b a i x o n í v e l s ó c i o -e c o n ô m i c o -e h i g i ê n i c o s a n i t á r i o ( S t a n l -e y, 2 0 0 3 ; S t a u f f -e r & R a v d i n , 2 0 0 3 ) . C a r a c t e r i z a - s e c o m o u m a d o e n ç a c o m u m e n t e c r ô n i c a e a f e b r i l q u e e n v o l v e a p a r e d e d o i n t e s t i n o g r o s s o , p o d e n d o e s t e n d e r - s e a o u t r o s ó r g ã o s e t e c i d o s d o o r g a n i s m o h u m a n o ( M u ñ o z e t a l . , 1 9 8 5 ) .

E m 1 8 6 0 La m b l p u b l i c o u a i d e n t i f i c a ç ã o d e u m m i c r o o r g a n i s m o q u e e n c o n t r o u a o e s t u d a r a s f e z e s d e u m g a r o t o c o m d i s e n t e r i a ; p o r é m , c o n s i d e r o u q u e e s t e p r o t o z o á r i o n ã o e r a p a t o g ê n i c o , e m b o r a a p a r e c e s s e a s s o c i a d o a c a s o s d e p a t o l o g i a i n t e s t i n a l c o m o a d o g a r o t o e m r e f e r ê n c i a . C u n n i n g h a m , e m 1 8 7 1 , a o i s o l a r o p r o t o z o á r i o d a s f e z e s d e p a c i e n t e s q u e a p r e s e n t a v a m d i a r r é i a p o r c a u s a d a c ó l e r a e s t a b e l e c e u q u e e r a u m o r g a n i s m o a s s o c i a d o a e s t a e n f e r m i d a d e .

(23)

p r o t o z o á r i o e n c o n t r a d o c o m o A m o e b a c o l i, p o r é m n ã o a t r i b u i u a e l e a

v e r d a d e i r a c a u s a d a d i s e n t e r i a .

P o r s u a v e z , K a r t u l i s ( 1 8 8 6 ) e K ö c h ( 1 8 8 7 ) , a t r a v é s d e e s t u d o s c o m p a c i e n t e s a p r e s e n t a n d o q u a d r o s d e d i s e n t e r i a t r o p i c a l , a t r i b u í r a m p a t o g e n i c i d a d e à s a m e b a s , r e s p o n s a b i l i z a n d o - a s p e l o s q u a d r o s o b s e r v a d o s .

C o u n c i l m a n & La f l e u r , e m 1 8 9 1 , d e n o m i n a r a m o p a r a s i t o c a u s a d o r d a a m e b í a s e c o m o E n t a m o e b a d y s e n t e r i a e, s e n d o o s p r i m e i r o s a

e m p r e g a r e m o s t e r m o s “ d i s e n t e r i a a m e b i a n a ” e “ a b s c e s s o h e p á t i c o a m e b i a n o ” , s u g e r i n d o t a m b é m a e x i s t ê n c i a d e u m a o u t r a a m e b a , q u e n ã o s e r i a p a t o g ê n i c a .

E m 1 8 9 3 Q u i n c k e e R o o s i d e n t i f i c a r a m a e x i s t ê n c i a d e d i f e r e n t e s e s p é c i e s d e a m e b a s q u e p o d i a m v i v e r n o c ó l o n h u m a n o e d e s c r e v e r a m o c i c l o b i o l ó g i c o d o q u e a g o r a c o n h e c e m o s c o m o E n t a m o e b a h i s t o l y t i c a,

i n c l u s i v e a i d e n t i f i c a ç ã o d a f o r m a i n f e c t a n t e d o p a r a s i t o e a d e m o n s t r a ç ã o d a s u a c a p a c i d a d e d e i n f e c ç ã o a o s e r i n g e r i d o o c i s t o . O n o m e d e f i n i t i v o d e s t e p r o t o z o á r i o f o i d a d o e m 1 9 0 3 p o r S c h a u d i n n , q u e v e r i f i c o u a e x i s t ê n c i a d e d o i s t i p o s d e a m e b a s n o i n t e s t i n o h u m a n o : u m a p a t o g ê n i c a , q u e d e n o m i n o u d e E . h i s t o l y t i c a, e o u t r a n ã o

p a t o g ê n i c a , c h a m a d a e n t ã o d e E n t a m o e b a c o l i.

P r o w a z e k ( 1 9 1 2 ) d e s c r e v e u u m a a m e b a m o r f o l o g i c a m e n t e s e m e l h a n t e à E . h i s t o l y t i c a, e m b o r a m e n o r , d e n o m i n a n d o - a E n t a m o e b a h a r t m a n n i.

E m 1 9 1 3 W a l k e r & S e l a r d s c o n f i r m a r a m q u e c i s t o s o r i u n d o s d e p e s s o a s s e m s i n t o m a s d i s e n t é r i c o s p o d e r i a m p r o d u z i r i n f e c ç õ e s a s s i n t o m á t i c a s o u c a u s a r d i s e n t e r i a , a o p a s s o q u e a m e b a s p r o v e n i e n t e s d e d i s e n t e r i a a g u d a e r a m c a p a z e s d e o c a s i o n a r i n f e c ç õ e s a s s i n t o m á t i c a s .

C r a i g e m 1 9 1 7 e p o s t e r i o r m e n t e D o b e l l e m 1 9 1 9 f o r m u l a m a T e o r i a U n i c i s t a , n a q u a l a E . h i s t o l y t i c a c o n s t i t u i u m a ú n i c a e s p é c i e ,

(24)

c o m s e u h o s p e d e i r o , o n d e a s l e s õ e s o c a s i o n a d a s p o r a q u e l e p o d e m s e r r e g e n e r a d a s , n ã o h a v e n d o a s s i m m a n i f e s t a ç õ e s c l í n i c a s .

P o r é m , o u t r a t e o r i a s u r g i u e m 1 9 2 5 ( B r u m p t ) q u e p r o c u r a e x p l i c a r a s d i f e r e n ç a s g e o g r á f i c a s n a s f o r m a s c l í n i c a s d a d o e n ç a e o g r a n d e n ú m e r o d e i n d i v í d u o s i n f e c t a d o s a s s i n t o m á t i c o s . E s t a t e o r i a f o i d e n o m i n a d a D u a l i s t a e p r o p õ e a e x i s t ê n c i a d e d u a s e s p é c i e s m o r f o l o gi c a m e n t e i n d i s t i n g u í v e i s : E . d i s p a r, u m o r g a n i s m o n ã o

p a t o g ê n i c o e E . d y s e n t e r i a e ( = E . h i s t o l y t i c a) , q u e s e r i a a f o r m a

p a t o g ê n i c a . C o m o n ã o e x i s t i a m m e i o s d e d i s t i n g u i r o s d o i s o r g a n i s m o s , a s i d é i a s d e B r u m p t t i v e r a m p o u c a a c e i t a ç ã o .

C o m o a d v e n t o d o c u l t i v o d e a m e b a s p o r B o e c h & D r b o h l a v e m 1 9 2 5 n o v o s e s t u d o s f o r a m r e a l i z a d o s , c o m i m p o r t â n c i a m a r c a n t e n a h i s t ó r i a d a a m e b í a s e .

U m a n o v a t e o r i a f o i p r o p o s t a p o r H o a r e e m 1 9 6 1 q u e a f i r m a v a e x i s t i r c e p a s d e E . h i s t o l y t i c a c o m d i f e r e n t e s g r a u s d e v i r u l ê n c i a ,

c a u s a n d o d e s d e i n f e c ç õ e s a s s i n t o m á t i c a s a t é f o r m a s m a i s g r a v e s d a d o e n ç a . E s s a t e o r i a f i c o u c o n h e c i d a c o m o T e o r i a P l u r a l i s t a . E n t r e t a n t o , e l a n ã o e x p l i c a o f a t o d e s e r a a m e b í a s e i n v a s i v a m a i s f r e q u e n t e e m p a í s e s d e c l i m a t r o p i c a l d o q u e n a q u e l e s d e c l i m a t e m p e r a d o o u f r i o .

N a d é c a d a d e 7 0 , u t i l i z a n d o c o n c a n a v a l i n a A ( C o n A ) , M a r t í n e z -P a l o m o e t a l . ( 1 9 7 3 ) e T r i s s l e t a l . ( 1 9 7 7 ) d e m o n s t r a r a m d i f e r e n ç a s n a a g l u t i n a ç ã o e n t r e c e p a s d e E . h i s t o l y t i c a i s o l a d a s d e i n d i v í d u o s

s i n t o m á t i c o s e a q u e l e s c o m i n f e c ç ã o a s s i n t o m á t i c a .

O c o n c e i t o d e B r u m p t d e d u a s e s p é c i e s m o r f o l o g i c a m e n t e i d ê n t i c a s f o i r e t o m a d o 5 0 - 6 0 a n o s m a i s t a r d e , q u a n d o a t e c n o l o g i a t o r n o u p o s s í v e l i n v e s t i g a r e s s a t e o r i a .

A p r o v a d e f i n i t i v a o c o r r e u e m 1 9 7 8 q u a n d o S a r g e a u n t e t a l . r e v e l a r a m q u e E . h i s t o l y t i c a p o d e r i a s e r d i v i d i d a e m d o i s g r u p o s

(25)

E s t e s a u t o r e s d e m o s t r a r a m e x i s t i r p e r f i s d i s t i n t o s d e b a n d a s e n t r e c u l t u r a s d e a m e b a s p r o v e n i e n t e s d e i n d i v í d u o s s i n t o m á t i c o s e a s s i n t o m á t i c o s , q u a n d o s u b m e t i d a s à e l e t r o f o r e s e d e i s o e n z i m a s f o s f o g l i c o m u t a s e ( P G M ) , g l i c o s e f o s f a t o i s o m e r a s e ( G P I) , e n z i m a m á l i c a ( M E ) e e n z i m a h e x o q u i n a s e ( H K ) . F o r a m d e s c r i t o s m a i s d e 2 1 z i m o d e m a s e , d e u m m o d o g e r a l , a a u s ê n c i a d a b a n d a e a p r e s e n ç a d a b a n d a e m P G M , a s s i m c o m o a s b a n d a s d e c o r r i d a r á p i d a e m H K , s ã o c o n s i d e r a d o s m a r c a d o r e s d e p a t o g e n i c i d a d e p a r a E . h i s t o l y t i c a

( S a r g e a u n t , 1 9 8 5 ) .

E s t a d i v i s ã o t e v e s u p o r t e c o m a d e s c o b e r t a e m 1 9 8 8 d e d i f e r e n ç a s a n t i g ê n i c a s e n t r e o s i s o l a d o s d e d o i s g r u p o s ( S t r a c h a n e t a l . , 1 9 8 8 ) e e m 1 9 8 9 p e l a s d i f e r e n ç a s s u b s t a n c i a i s d o s n í v e i s d e D N A ( T a n n i c h e t a l . , 1 9 8 9 ) .

O p r o b l e m a s u r g i d o p e l a c l a s s i f i c a ç ã o d a E . h i s t o l y t i c a e m f o r m a s

“ p a t o g ê n i c a s ” e f o r m a s “ n ã o - p a t o g ê n c i a s ” p o r d i v e r s o s p e s q u i s a d o r e s f o i r e v i s a d o p o r S p i c e & A c k e r s ( 1 9 9 2 ) . E l e s f o r a m o s p r i m e i r o s a i n d a g a r s e a a m e b a r e s p o n s á v e l p o r u m a i n f e c ç ã o a s s i n t o m á t i c a d e v e r i a s e r c o n s i d e r a d a c o m o u m a e s p é c i e d i f e r e n t e , c o m h á b i t o s e x c l u s i v a m e n t e d e c o m e n s a l .

P o s t e r i o r m e n t e , a c l a s s i f i c a ç ã o e n t r e f o r m a s “ p a t o g ê n i c a s ” e “ n ã o - p a t o g ê n i c a s ” p ô d e s e r e f e t u a d a a n í v e l m o l e c u l a r , l e v a n d o v á r i o s p e s q u i s a d o r e s e a O r g a n i z a ç ã o M u n d i a l d e S a ú d e a a p o i a r e m a t e o r i a d u a l i s t a ( S a r g e a u n t , 1 9 8 6 ; D i a m o n d , 1 9 9 2 ; D i a m o n d & C l a r k , 1 9 9 3 ; W H O , 1 9 9 7 ) . A a c e i t a ç ã o d a E . h i s t o l y t i c a e E . d i s p a r c o m o e s p é c i e s

d i s t i n t a s t r o u x e m u d a n ç a s g r a d u a i s , p o r é m p r o f u n d a s , n o e n t e n d i m e n t o d a e p i d e m i o l o g i a , c o n t r o l e e t r a t a m e n t o d a a m e b í a s e .

(26)

1 . 2 . P r e v a l ê n c i a M u n d i a l

A a m e b í a s e é c o n s i d e r a d a u m a i n f e c ç ã o d e d i s t r i b u i ç ã o c o s m o p o l i t a . W a l s h ( 1 9 8 6 ) r e l a t a q u e , e m e s c a l a m u n d i a l , c e r c a d e 5 0 0 m i l h õ e s d e p e s s o a s e s t ã o i n f e c t a d a s , c o m 8 a 1 0 % a p r e s e n t a n d o f o r m a s c l í n i c a s s i n t o m á t i c a s c o m o c o l i t e , d i a r r é i a e a b c e s s o h e p á t i c o , e n t r e o u t r o s . C o m a a c e i t a ç ã o d a e x i s t ê n c i a d a E . d i s p a r, a d m i t e - s e q u e a

m a i o r i a d a s i n f e c ç õ e s a s s i n t o m á t i c a s s e j a d e v i d a a e s s a e s p é c i e ( C l a r k , 1 9 9 8 ; E s p i n o s a - C a n t e l l a n o & M a r t i n e z - P a l o m o , 2 0 0 0 ) .

A l g u m a s r e g i õ e s s e d e s t a c a m n o c e n á r i o m u n d i a l n a p r e v a l ê n c i a d a a m e b í a s e , s e n d o q u e a p r o p o r ç ã o d e i n d i v í d u o s q u e m a n i f e s t a m a d o e n ç a n ã o é u n i f o r m e n a s d i f e r e n t e s á r e a s g e o g r á f i c a s : n a s A m é r i c a s e s t i m a - s e q u e e x i s t a m 9 5 m i l h õ e s d e i n f e c t a d o s , 1 0 m i l h õ e s d e e n f e r m o s e 1 0 a 3 0 m i l m o r t e s a n u a i s ( W H O , 1 9 9 7 ) . O M é x i c o é u m d o s p a í s e s d o m u n d o q u e m a i s s o f r e c o m a e n f e r m i d a d e , a p r e s e n t a n d o u m a a l t a i n c i d ê n c i a d e f o r m a s i n t e s t i n a i s e a s s i n t o m á t i c a s , s e n d o q u e o a b c e s s o h e p á t i c o c h e g o u a o c u p a r o 4 º l u g a r e n t r e a s c a u s a s d e m o r t e s n o H o s p i t a l d a C i d a d e d o M é x i c o ( C r e v e n n a e t a l . , 1 9 7 2 ) . A i n d a n a A m é r i c a La t i n a , C o l ô m b i a e V e n e z u e l a ( C o r t e z - M e n d o n z a , 1 9 5 6 ) a p r e s e n t a m u m a m a i o r f r e q u ê n c i a d a f o r m a i n v a s i v a . N a Á s i a , o n d e o p r o b l e m a é g r a v e , e x i s t e m 3 0 0 m i l h õ e s d e i n f e c t a d o s , 2 0 a 3 0 m i l h õ e s d e e n f e r m o s e 2 0 a 5 0 m i l m o r t e s , s e n d o o c o n t i n e n t e q u e a p r e s e n t a o m a i o r n ú m e r o d e p e s s o a s i n f e c t a d a s p e l a E . h i s t o l y t i c a ( W H O , 1 9 9 7 ) ;

n a Ín d i a ( S u b r a m a n i a n , 1 9 6 8 ) , T a i l â n d i a , S i n g a p u r a e In d o c h i n a ( E l s d o n - D e w , 1 9 6 8 ) a s f o r m a s g r a v e s d a a m e b í a s e s ã o f r e q u e n t e s . A Á f r i c a , p o r s u a v e z , a p r e s e n t a u m a a l t a i n c i d ê n c i a d a a m e b í a s e i n v a s i v a n a r e g i ã o s u b s a h a r i a n a c o m c e r c a d e 8 5 m i l h õ e s d e i n f e c t a d o s , 1 0 m i l h õ e s d e e n f e r m o s e 1 0 a 2 0 m i l m o r t e s . F a t o r e s c o m o p r e c á r i a s c o n d i ç õ e s d e h i g i e n e e s a n e a m e n t o b á s i c o , e d u c a ç ã o d e f i c i e n t e e e x i s t ê n c i a d e l i n h a g e n s v i r u l e n t a s d o p a r a s i t o c o n t r i b u e m p a r a t o r n a r a a m e b í a s e u m p r o b l e m a s o c i a l e d e s a ú d e p ú b l i c a ( G u e r r a n t , 1 9 8 6 ; M a r t i n e z - P a l o m o , 1 9 8 8 ) .

(27)

p o r p r o t o z o á r i o s a n í v e l m u n d i a l , c o m c e r c a d e 1 0 0 m i l c a s o s f a t a i s p o r a n o . A l é m d i s s o , a d o e n ç a é r e s p o n s á v e l p o r p r o l o n g a d o s p e r í o d o s d e i n c a p a c i d a d e d a s p e s s o a s a f e t a d a s , n e c e s s i t a n d o a s s i s t ê n c i a m é d i c a e , à s v e z e s , a t é m e s m o h o s p i t a l i z a ç ã o .

N o B r a s i l , o n ú m e r o d e i n f e c t a d o s p o r E . h i s t o l y t i c a v a r i a d e

r e g i ã o p a r a r e g i ã o , a p r e s e n t a n d o p e r c e n t u a i s e x t r e m a m e n t e v a r i á v e i s ( S i l v a e t a l . , 1 9 9 7 ; B r a g a e t a l . , 1 9 9 8 ; P i n h e i r o e t a l . , 2 0 0 4 ; A r a u j o & F e r n a n d e z , 2 0 0 5 ; B e n e t t o n e t a l . , 2 0 0 5 ) . O b s e r v a - s e a l t a p r e v a l ê n c i a n a s r e g i õ e s n o r t e e n o r d e s t e e b a i x a p r e v a l ê n c i a n a s r e g i õ e s s u l e s u d e s t e , s e n d o q u e e s t e s c a s o s n ã o a p r e s e n t a m a g r a v i d a d e e i n t e n s i d a d e d a q u e l e s o b s e r v a d o s n o M é x i c o e e m a l g u n s p a í s e s d a Á f r i c a e d a Á s i a . N a r e g i ã o a m a z ô n i c a , o s c a s o s d e a m e b í a s e s i n t o m á t i c a o u i n v a s i v a s ã o m a i s f r e q u e n t e s e g r a v e s q u e n a s d e m a i s

r e g i õ e s d o B r a s i l ( C u n h a e t a l . , 1 9 7 7 ; d e M e n e z e s , 1 9 8 6 ; C h a v e s , 1 9 9 1 ) .

1 . 3 . M o r f o l o g i a e B i o l o g i a d a E . h i s t o l y t i c a/E . d i s p a r

O c i c l o b i o l ó g i c o d a E . h i s t o l y t i c a/E . d i s p a r é m o n o x ê n i c o , n ã o

n e c e s s i t a n d o a s s i m d e u m h o s p e d e i r o i n t e r m e d i á r i o p a r a o s e u d e s e n v o l v i m e n t o . C o n s i s t e d e q u a t r o e s t á g i o s e v o l u t i v o s : t r o f o z o í t o s , p r é - c i s t o s , c i s t o s e m e t a c i s t o s .

D a s q u a t r o f a s e s d o c i c l o d a s a m e b a s , o s t r o f o z o í t o s e o s c i s t o s c o n s t i t u e m f a s e s b e m d e f i n i d a s d o p a r a s i t o . O s p r é - c i s t o s e m e t a c i s t o s s ã o , p o r o u t r o l a d o , f a s e s i n t e r m e d i á r i a s o u t r a n s i t ó r i a s : a p r i m e i r a , a n t e s d a d i f e r e n c i a ç ã o c o m p l e t a e m c i s t o s e a s e g u n d a , a n t e s d a f o r m a ç ã o d o s t r o f o z o í t o s m a d u r o s .

1 . 3 . 1 . T r o f o z o í t o s d e E . h i s t o l y t i c a

(28)

d e p H , o s m o l a r i d a d e e p o t e n c i a l d e ó x i d o - r e d u ç ã o . O s p a r a s i t o s o b t i d o s d e f e z e s d i s e n t é r i c a s o u d e l e s õ e s h e p á t i c a s o u i n t e s t i n a i s t ê m s o m e n t e u m n ú c l e o , s ã o p l e o m ó r f i c o s , m e d i n d o e n t r e 2 0 a 4 0µm . A s a m e b a s e m c u l t i v o s m e d e m e n t r e 7 a 3 0µm , e m b o r a e m a l g u m a s o c a s i õ e s p o d e m o s o b s e r v a r t r o f o z o í t o s m e d i n d o a t é 5 0µm . S e m o v e m c o m r e l a t i v a r a p i d e z m e d i a n t e a f o r m a ç ã o d e p s e u d ó p o d e s ( l o b o p ó d i o s ) q u e a p a r e c e m b r u s c a m e n t e e m q u a l q u e r á r e a d a s u p e r f í c i e d o c o r p o e c o m m a i o r f r e q u ê n c i a n a z o n a a n t e r i o r d o s t r o f o z o í t o s .

E m s u a s u p e r f í c i e n o t a m - s e p s e u d ó p o d e s , e s t o m a s / c i t ó s t o m a s e u m u r ó i d e p o s t e r i o r ( G o n z á l e z - R o b l e s & M a r t í n e z - P a l o m o , 1 9 8 3 ) . D e n t r e a s p r o p r i e d a d e s d e s u p e r f í c i e m a i s i m p o r t a n t e s q u e a p r e s e n t a m a s a m e b a s , e n c o n t r a m - s e a a g l u t i n a ç ã o c o m a l e c i t i n a c o n c a n a v a l i n a A ( M a r t í n e z - P a l o m o e t a l . , 1 9 7 3 ) e a c a p a c i d a d e d e f o r m a r “ c a p p i n g ” , q u e é a r e d i s t r i b u i ç ã o d o s c o m p o n e n t e s m e m b r a n o s o s e o a c ú m u l o d e s t e s c o m p o n e n t e s e m u m p ó l o d a s u p e r f í c i e a m e b i a n a ( o u r ó i d e ) . E s t a p r o p r i e d a d e p e r m i t e a a m e b a l i b e r a r a n t i c o r p o s u n i d o s à s u a m e m b r a n a ( C a l d e r ó n e t a l . , 1 9 8 0 ) o u r e a l i z a r a s u a e n d o c i t o s e ( K e t t i s & S u n d q v i s t , 1 9 7 8 ) . A l é m d o m a i s , a p r e s e n t a m e m s u a s u p e r f í c i e g l i c o p r o t e í n a s ( c o n s i d e r a d a s c o m o f a t o r e s d e v i r u l ê n c i a ) c o m o a l e c t i n a G a l / G a l N a c 2 6 0 k D a ( P e t r i & R a v d i n , 1 9 9 1 ) , a l e c t i n a d e 2 2 0 k D a ( R o s a l e s - E n c i n a e t a l . , 1 9 8 7 ) e a a d e s i n a d e 1 1 2 k D a ( A r r o yo & O r o z c o , 1 9 8 7 ) .

O c i t o p l a s m a a p r e s e n t a d u a s á r e a s q u e n ã o e s t ã o c l a r a m e n t e s e p a r a d a s . O e c t o p l a s m a é e m g e r a l h i a l i n o , l i v r e d e e s t r u t u r a s m e m b r a n o s a s o u v a c u o l a r e s e e s t á a s s o c i a d o a o s p s e u d ó p o d e s e a o u t r a s e x t e n s õ e s c i t o p l a s m á t i c a s c o m o o s f i l o p ó d i o s . N o e n d o p l a s m a s e e n c o n t r a m m ú l t i p l o s v a c ú o l o s o u v e s í c u l a s d e d i f e r e n t e s t a m a n h o s r o d e a d a s d e u m a m a t r i z c i t o p l a s m á t i c a r e l a t i v a m e n t e h o m o g ê n e a .

U m a g r a n d e p a r t e d o v o l u m e c i t o p l a s m á t i c o e s t á o c u p a d a p o r v a c ú o l o s m e m b r a n o s o s , e m s u a m a i o r i a e s f é r i c o s , c o m u m a g r a n d e v a r i a ç ã o d e t a m a n h o .

(29)

p o l i x ê n i c o s p o s s u e m p o u c o s v a c ú o l o s , e n q u a n t o a m e b a s c u l t i v a d a s a x e n i c a m e n t e m o s t r a m u m a m a i o r q u a n t i d a d e d e l e s .

T r o f o z o í t o s o b t i d o s d e b i ó p s i a d e p a c i e n t e c o m a m e b í a s e c o n t ê m n o s v a c ú o l o s e r i t r ó c i t o s , c é l u l a s i n f l a m a t ó r i a s e c é l u l a s d o t e c i d o q u e i n v a d i r a m ( G r i f f i n & J u n i p e r , 1 9 7 1 ; P i t t m a n e t a l . , 1 9 7 3 ) ; o m e s m o o c o r r e c o m a s a m e b a s r e c u p e r a d a s d e a n i m a i s e x p e r i m e n t a l m e n t e i n f e c t a d o s ( T a k e u c h i & P h i l l i p s , 1 9 7 5 ) .

O s p r i m e i r o s e s t u d o s s o b r e a u l t r a e s t r u t u r a d o s t r o f o z o í t o s d e

E . h i s t o l y t i c a m o s t r a r a m q u e e s t e s p a r a s i t o s n ã o a p r e s e n t a m o r g a n e l a s

t í p i c a s b e m d i f e r e n c i a d a s c o m o m i t o c ô n d r i a s , a p a r e l h o d e G o l g i , r e t í c u l o e n d o p l a s m á t i c o r u g o s o , c e n t r í o l o s e m i c r o t ú b u l o s . P o r é m , c o m o a p r e s e n t a s e u D N A c o n f i n a d o p o r u m a m e m b r a n a n u c l e a r , é c o n s i d e r a d a u m a c é l u l a e u c a r i ó t i c a .

1 . 3 . 2 . P r é - c i s t o s

O s p r e c i s t o s s ã o f o r m a s i n t e r m e d i á r i a s e n t r e o s t r o f o z o í t o s e o s c i s t o s , s e n d o o v a i s o u l i g e i r a m e n t e a r r e d o n d a d o s e m e n o r e s q u e o s t r o f o z o í t o s .

1 . 3 . 3 . C i s t o s

O s c i s t o s s ã o e s t r u t u r a s e s f é r i c a s o u o v a i s c o m a p a r e d e c í s t i c a r í g i d a , c o n t e n d o i n i c i a l m e n t e s o m e n t e u m n ú c l e o , q u e a p ó s u m a s é r i e d e d i v i s õ e s n u c l e a r e s s e t r a n s f o r m a m e m c i s t o s t e t r a n u c l e a d o s . T ê m , e m

m é d i a , 1 2 µm d e d i â m e t r o , c o m v a r i a ç õ e s e n t r e 8 a 2 0µm ( C h a v e z e t a l . , 1 9 7 8 ) . S o m e n t e o s c i s t o s t ê m i m p o r t â n c i a n o p r o c e s s o

d e t r a n s m i s s ã o d a d o e n ç a , s e n d o a s ú n i c a s f o r m a s i n f e c t a n t e s .

(30)

v a c u o l a r c o m c o r p o s c r o m a t ó i d e s d e c o r a z u l e s c u r o , e m f o r m a d e b a r r a s c i l í n d r i c a s ( P r o c t o r & G r e g o r y, 1 9 7 3 ) .

1 . 3 . 4 . M e t a c i s t o s

O s c i s t o s a p ó s i n ge s t ã o e p o r u m p r o c e s s o a i n d a n ã o t o t a l m e n t e e l u c i d a d o , l i b e r t a m u m a a m e b a t e t r a n u c l e a d a d e n o m i n a d a m e t a c i s t o q u e i r á o r i g i n a r , a t r a v é s d e u m a s é r i e d e d i v i s õ e s n u c l e a r e s e c i t o p l a s m á t i c a s , p r i m e i r o a q u a t r o e f i n a l m e n t e a o i t o a m e b a s u n i n u c l e a d a s , d e n o m i n a d a s t r o f o z o í t o s m e t a c í s t i c o s .

1 . 3 . 5 . C i c l o b i o l ó g i c o

O c i c l o g e r a l m e n t e s e i n i c i a c o m a i n g e s t ã o d e á g u a o u a l i m e n t o s c o n t a m i n a d o s c o m c i s t o s m a d u r o s , p r o v e n i e n t e s d e f e z e s d e i n d i v í d u o s p a r a s i t a d o s . A t r a n s m i s s ã o h o m e m a h o m e m r e a l i z a - s e h a b i t u a l m e n t e a t r a v é s d e m ã o s s u j a s c o n t a m i n a d a s e t a m b é m a t r a v é s d e p r á t i c a s s e x u a i s .

O s c i s t o s p a s s a m e n t ã o p e l o e s t ô m a g o r e s i s t i n d o à a ç ã o d o s u c o g á s t r i c o e a t i n g e m o f i n a l d o i n t e s t i n o d e l g a d o o u i n í c i o d o i n t e s t i n o g r o s s o , o n d e o c o r r e o d e s e n c i s t a m e n t o e a s a í d a d o m e t a c i s t o a t r a v é s d e u m a p e q u e n a f e n d a n a p a r e d e c í s t i c a . E m s e g u i d a , o m e t a c i s t o s o f r e s u c e s s i v a s d i v i s õ e s n u c l e a r e s e c i t o p l a s m á t i c a s o r i g i n a n d o q u a t r o e p o s t e r i o r m e n t e o i t o t r o f o z o í t o s m e t a c í s t i c o s q u e m i g r a m p a r a o i n t e s t i n o g r o s s o o n d e s e f i x a m . E m c e r t a s c i r c u n s t â n c i a s n ã o m u i t o b e m c o n h e c i d a s , d e s p r e e n d e m - s e d a m u c o s a i n t e s t i n a l e t r a n s f o r m a m - s e e m p r é - c i s t o s e p o s t e r i o r m e n t e c i s t o s q u e s e r ã o e l i m i n a d o s j u n t a m e n t e c o m a s f e z e s f o r m a d a s ( f i g u r a 1 ) .

A l g u m a s c e p a s d e E . h i s t o l y t i c a p o d e m v i v e r c o m o c o m e n s a i s n a

(31)

A p e s a r d a a l t a m o r t a l i d a d e ( c e r c a d e 1 0 0 . 0 0 0 p e s s o a s / a n o ) , m u i t o s c a s o s d e i n f e c ç ã o a s s i n t o m á t i c a s ã o r e g i s t r a d o s . T e m - s e o b s e r v a d o q u e a g r a n d e m a i o r i a d a s i n f e c ç õ e s p o r E . h i s t o l y t i c a é c o m p l e t a m e n t e

a s s i n t o m á t i c a .

1 . 3 . 6 . E n t a m o e b a d i s p a r

C o m r e l a ç ã o a E . d i s p a r, a d m i t e - s e q u e s e j a m o r f o l o g i c a m e n t e

i n d i s t i n g u í v e l d a E . h i s t o l y t i c a, p e l o m e n o s à m i c r o s c o p i a d e l u z .

P o r é m , c o m a a x e n i z a ç ã o d e u m a c e p a d e E . d i s p a r p o r C l a r k ( 1 9 9 5 ) ,

a s p e c t o s u l t r a - e s t r u t u r a i s d e s s a a m e b a p u d e r a m s e r c o m p a r a d o s c o m a q u e l e s d a E . h i s t o l y t i c a ( E s p i n o s a - C a n t e l l a n o e t a l . , 1 9 9 8 ) , s e n d o

o b s e r v a d a s d i f e r e n ç a s n a e s t r u t u r a d a m e m b r a n a n u c l e a r e n o a s p e c t o d a s u p e r f í c i e d a s d u a s a m e b a s , o n d e s e d e s t a c a u m n o t á v e l u r ó i d e ( r e g i ã o d e a l t a a d e s i v i d a d e g e r a l m e n t e l o c a l i z a d a n a r e g i ã o o p o s t a à d a d i r e ç ã o d o p s e u d ó p o d o , o b s e r v a n d o - s e r e s t o s c e l u l a r e s e b a c t é r i a s , o s q u a i s s ã o p a r c i a l m e n t e e l i m i n a d o s n o s u b s t r a t o – M a r t i n e z - P a l o m o , 1 9 8 2 ) , r a r a m e n t e p r e s e n t e e m E . h i s t o l y t i c a.

A t r a v é s d a m i c r o s c o p i a e l e t r ô n i c a d e t r a n s m i s s ã o o b s e r v a - s e n u m e r o s o s v a c ú o l o s q u e t e n d e m a c o n c e n t r a r e m d e t e r m i n a d a s á r e a s d o c i t o p l a s m a d a E . d i s p a r, e n q u a n t o á r e a s l i v r e s d e v a c ú o l o s a p r e s e n t a m

m e t a c r o m a s i a q u a n d o c o r a d a s c o m a z u l d e t o l u i d i n a d e v i d o à p r e s e n ç a

d e l a r g o s d e p ó s i t o s d e g l i c o g ê n i o , r a r a m e n t e e n c o n t r a d o e m

E . h i s t o l y t i c a. N a E . h i s t o l y t i c a e s t e s v a c ú o l o s s ã o m e n o r e s e e s t ã o

d i s t r i b u í d o s d e f o r m a u n i f o r m e n o c i t o p l a s m a ( E s p i n o s a - C a n t e l l a n o e t a l . , 1 9 9 8 ) .

D i f e r e n ç a s e n t r e t r o f o z o í t o s d e E . h i s t o l y t i c a e E . d i s p a r s ã o

e v i d e n c i a d a s q u a n d o o b s e r v a d o s a t r a v é s d e m i c r o s c o p i a ó p t i c a c o m t e c n o l o g i a N O M A R S K I. A f o r m a d o s t r o f o z o í t o s d e E . d i s p a r é

a l o n g a d a , c o m u m p s e u d ó p o d e a n t e r i o r p r o e m i n e n t e e l a r g o e u m n o t á v e l u r ó i d e p o s t e r i o r . E m c o n t r a s t e , t r o f o z o í t o s d e E . h i s t o l y t i c a

(32)

u m a n e l c r o m á t i c o m a i s d e n s o q u e o o b s e r v a d o e m E . d i s p a r ( E s p i n o s a

-C a n t e l l a n o e t a l . , 1 9 9 8 ) .

P r o v a v e l m e n t e a d i f e r e n ç a m a i s a c e n t u a d a e n t r e e s t e s d o i s p a r a s i t o s é q u e a m e m b r a n a c e l u l a r d e E . d i s p a r m o s t r a u m a c a m a d a

m a i s d e l g a d a e e m a l g u m a s o c a s i õ e s i n t e r r o m p i d a , d i f e r e n t e m e n t e d a

E . h i s t o l y t i c a q u e p o s s u i u m a m e m b r a n a m a i s g r o s s a e u n i f o r m e

( E s p i n o s a - C a n t e l l a n o e t a l . , 1 9 9 8 ) .

A o m i c r o s c ó p i o e l e t r ô n i c o , C h á v e z - M u n g u í a e t a l . ( 2 0 0 0 ) d e s c r e v e r a m a p r e s e n ç a d e e s t r u t u r a s s e m e l h a n t e s a o c o m p l e x o d e G o l g i e m E . d i s p a r.

E . d i s p a r p a r e c e s e r m e n o s c a p a z d e o b t e r n u t r i e n t e s p o r

p i n o c i t o s e d o q u e a E . h i s t o l y t i c a, o q u e p o d e e x p l i c a r s u a d i f i c u l d a d e

e m c r e s c e r e m m e i o a x ê n i c o ( C l a r k , 1 9 9 8 ) . A l é m d i s s o , E . d i s p a r

(33)

(34)

1 . 4 . P a t o g e n i a e V i r u l ê n c i a

P é r e z - T a m a yo ( 1 9 8 6 ) u t i l i z o u a p a l a v r a p a t o g e n i a p a r a s e r e f e r i r a o s m e c a n i s m o s p a r t i c i p a n t e s n a i n i c i a ç ã o , e v o l u ç ã o e r e s u l t a d o f i n a l d o p r o c e s s o p a t o l ó g i c o . N a a m e b í a s e t a i s m e c a n i s m o s n ã o e s t ã o l i m i t a d o s a o h o s p e d e i r o o u a o p a r a s i t o , p o r é m s ã o u m a c o n s e q u ê n c i a d a i n t e r r e l a ç ã o d e a m b o s e s u a e x p r e s s ã o c o n j u n t a n o p r o c e s s o p a t o l ó g i c o .

A p a t o g e n i c i d a d e é a c a p a c i d a d e d o p a r a s i t o d e p r o d u z i r o u n ã o e n f e r m i d a d e e m u m a r e l a ç ã o p a r a s i t o - h o s p e d e i r o e s p e c í f i c a . A v i r u l ê n c i a é o g r a u c o m o q u a l s e e x p r e s s a a p a t o ge n i c i d a d e , q u e t a m b é m d e p e n d e t a n t o d o h o s p e d e i r o c o m o d o p a r a s i t o .

A v a r i a d a e x p r e s s ã o d e v i r u l ê n c i a d a E . h i s t o l y t i c a é u m d o s m a i s

i n t e r e s s a n t e s a s p e c t o s d a a m e b í a s e h u m a n a , o n d e o b s e r v a m o s d e s d e f o r m a s a s s i n t o m á t i c a s a t é f o r m a s i n v a s i v a s l e t a i s , a p r e s e n t a n d o a i n d a g r a n d e d i v e r s i d a d e d e m a n i f e s t a ç õ e s c l í n i c a s .

E x p l i c a r a m e n o r i n c i d ê n c i a d a d o e n ç a i n v a s i v a e m h u m a n o s i n f e c t a d o s c o m E . h i s t o l y t i c a t e m o c u p a d o a a t e n ç ã o d e g e r a ç õ e s d e

i n v e s t i g a d o r e s c l í n i c o s e n ã o - c l í n i c o s . W a l s h ( 1 9 8 6 ) e s t i m o u q u e m e n o s d e 1 0 % ( 3 6 m i l h õ e s ) d a s p e s s o a s i n f e c t a d a s c o m E . h i s t o l y t i c a ( 4 8 0

m i l h õ e s d e p e s s o a s ) d e s e n v o l v e m s i n t o m a s c l í n i c o s , d a s q u a i s 1 0 0 m i l m o r r e m a n u a l m e n t e .

A a m e b í a s e i n t e s t i n a l a f e t a e é m a i s l e t a l n o s e x t r e m o s d a v i d a , e n q u a n t o o a b c e s s o h e p á t i c o é m a i s f r e q u e n t e e m h o m e n s e n t r e 3 0 e 4 5 a n o s , t e n d o u m a a l t a m o r t a l i d a d e .

A m e b í a s e i n v a s i v a d e v i d o a E . h i s t o l y t i c a é m a i s c o m u m e m

p a í s e s e m d e s e n v o l v i m e n t o , o n d e c o n d i ç õ e s v a r i a d a s ( s ó c i o - e c o n ô m i c a s e h i g i ê n i c o - s a n i t á r i a s ) f a v o r e c e m a t r a n s m i s s ã o f e c a l - o r a l d o p a r a s i t o .

A p e s a r d e s e c o n h e c e r a g r a n d e c a p a c i d a d e d e s t r u t i v a d o s t r o f o z o í t o s d e E . h i s t o l y t i c a e q u e e s t a c a r a c t e r í s t i c a s e o b s e r v a