• Nenhum resultado encontrado

Expression of nicotinic acetylcholine receptors on human B-lymphoma cells

N/A
N/A
Protected

Academic year: 2017

Share "Expression of nicotinic acetylcholine receptors on human B-lymphoma cells "

Copied!
4
0
0

Texto

(1)

Åêñïðåñ³ÿ í³êî òè íî âèõ àöå òèë õîë³íî âèõ ðå öåï òîð³â

íà êë³òè íàõ Â-ë³ìôîì ëþ äè íè

Ä. Ì. Îìåëü ÷åí êî, Ì. Â. Ñêîê

²íñòè òóò á³îõ³ì³¿ ³ì. Î. Â. Ïàë ëàä³íà ÍÀÍ Óêðà¿ íè Âóë. Ëå îí òî âè ÷à, 9, Êè¿â, Óêðà¿ íà, 01601

skok@biochem.kiev.ua

Ìåòà. Âèç íà ÷è òè çâ’ÿ çîê ì³æ ð³âíåì åêñïðåñ³¿ í³êî òè íî âèõ àöå òèë õîë³íî âèõ ðå öåï òîð³â (íÀÕÐ) ³ ñòó ïå íåì äè ôå ðåíö³àö³¿ òà àê òè âàö³¿ Â-ë³ìôî öèò³â. Ìå òî äè. Åêñïðåñ³þ íÀÕÐ íà êë³òèí íèõ ë³í³ÿõ REH, Ramos ³ Daudi âèâ ÷à ëè ìå òî äîì ïðî òî êî âî¿ öè òîô ëó î ðè ìåò𳿠ç âè êî ðèñ òàí íÿì àí òèò³ë, ñïå öèô³÷íèõ äî ð³çíèõ ñóá îäè íèöü ðå öåï òî ðà; ïðîë³ôå ðàö³þ êë³òèí îö³íþ âà ëè çà äî ïî ìî ãîþ ÌÒÒòåñ -òó. Ðå çóëü òà òè. Ïî êà çà íî, ùî ð³âåíü åêñïðåñ³¿ a4b2/b4 òà a7 íÀÕÐ ï³äâè ùóºòüñÿ ïî ì³ð³ äèôå ðåíö³àö³¿ (Ramos > REH) ³ àê òè âàö³¿ Âë³ìôî öèò³â (Daudi > Ramos) òà çà ëå æèòü â³ä åêñïðåñ³¿ àí òè ãåíñïå öèô³÷íî ãî ðå öåï òî ðà. Ñòè ìó ëÿö³ÿ/áëî êó âàí íÿ íÀÕÐ íå âïëè âຠíà ³íòåí ñèâí³ñòü ïðîë³ôå -ðàö³¿ äîñë³äæå íèõ êë³òèí.

Êëþ ÷îâ³ ñëî âà: í³êî òè íî âèé àöå òèë õîë³íî âèé ðå öåï òîð, Â-ë³ìôî öè òè.

Âñòóï. ͳêî òè íîâ³ àöå òèë õîë³íîâ³ ðå öåï òî ðè (íÀÕÐ) îïî ñå ðåä êî âó þòü øâèä êó ñè íàï òè÷ íó ïå ðå äà ÷ó â ì’ÿ çàõ ³ àâ òî íîì íèõ ãàíãë³ÿõ òà ðå ãó ëþ -þòü êîãí³òèâí³ ïðî öå ñè â ìîç êó [1]. Âàæ ëè âó ðîëü õîë³íåðã³÷íî¿ ðå ãó ëÿö³¿ ó ïðî öå ñàõ êë³òèí íî¿ ïðîë³ôå ðàö³¿, àê òè âàö³¿ òà ³ìóí íî¿ â³äïîâ³ä³ âñòà íîâ ëå -íî ï³ñëÿ âè ÿâ ëåí íÿ íÀÕÐ ó êå ðà òè -íî öè òàõ øê³ðè, åï³òå볿 äè õàëü íèõ øëÿõ³â, åí äî òå볿 ñó äèí [2, 3], ë³ìôî öè òàõ ³ ìàê ðî ôà ãàõ [4, 5].

Ðàí³øå ìè ïî êà çà ëè, ùî Â-ë³ìôî öè òè ìè øåé åêñïðå ñó þòü äâà ñóá òè ïè íÀÕÐ, a4(a5)b2 ³ a7, ÿê³ âïëè âà þòü íà ñå ëåêö³þ/âè æè âàí íÿ Â-ë³ìôî öèò³â ó ïðî öåñ³ ðîç âèò êó òà ¿õíþ àê òè âàö³þ ó çð³ëî ìó ñòàí³ ³, ÿê íà ñë³äîê, íà ãó ìî ðàëü íó ³ìóí íó â³äïîâ³äü [6, 7]. a7âì³ñí³ íÀÕÐ, åêñïðå ñî âàí³ â êë³òè íàõ ã³áðè äî ìè, ðå ãó ëþ þòü ¿õíþ ïðîë³ôå ðàö³þ òà ïðî äó êó -âàí íÿ àí òèò³ë [8]. Îäíàê, ÷è ïî øè ðþ þòü ñÿ

çíàé-äåí³ åôåêòè íà ë³ìôî öè òè ëþ äè íè, çà ëèøàºòüñÿ

íåâ³äîìèì. Òàê³ äîñë³äæåí íÿ º âàæ ëè âè ìè äëÿ ðî -çóì³ííÿ âïëè âó í³êî òè íó íà ðîç âè òîê ïóõ ëèí Â-ë³ìôîöèòàðíîãî ïîõîäæåííÿ.

Ìåòà ïðåä ñòàâ ëå íî¿ ðî áî òè ïî ëÿ ãà ëà ó âèâ ÷åíí³ åêñïðåñ³¿ òà ïðî-ïðîë³ôå ðà òèâ íèõ ôóíêö³é íÀÕÐ íà êë³òè íàõ Â-ë³ìôîì ëþ äè íè.

Ìà òåð³àëè ³ ìå òî äè. Êë³òèíí³ ë³í³¿ REH, Ra-mos ³ Daudi îò ðè ìà íî â³ä Ñ. Ï. Ñè äî ðåí êî (²íñòè òóò åêñïå ðè ìåí òàëü íî¿ ïà òî ëî㳿, îíêî ëî㳿 ³ ðàä³îá³î-ëî㳿 ³ì. Ð. ª. Êà âåöü êî ãî ÍÀÍ Óêðà¿ íè). Êë³òè íè âèðî ùó âà ëè â ñå ðå äî âèù³ RPMI 1640 ç äî äà âàí íÿì 20 ìM HEPES, 40 ìêã/ìë ãåí òàì³öè íó òà 10 % åìáð³îíàëü íî¿ ñè ðî âàò êè òå ëÿ òè («Sigma», ÑØÀ). Êðî

-ëÿ÷³ àô³ííî î÷è ùåí³ àí òèò³ëà ïðî òè ñóá îäè íèöü

íÀÕÐ îäåð æà íî ðàí³øå [9, 10]. Àíòèò³ëà ïðî òè

CD19, ì³÷åí³ ôëó î ðåñ öå¿í³çîò³îö³àíà òîì (Ô²ÒÖ), òà àí òèò³ëà ïðî òè CD22, ì³÷åí³ ô³êî å ðèò ðè íîì (ÔÅ), âè ðîá ëå íî ô³ðìîþ «Immunotech» (Ôðàíö³ÿ),

509

ISSN 0233-7657. Biopolymers and Cell. 2009. Vol. 25. N 6

(2)

ñòðåï òàâ³äèí, ì³÷å íèé ÔÅ, – «Pharmingen» (BD), åï³áà òè äèí òà ìå òèëë³êà êîí³òèí (ÌËÀ) – «Sigma» (ÑØÀ).

Êë³òè íè (1×106

ó 50 ìêë çà áó ôå ðå íî ãî ô³ç³îëî-ã³÷íî ãî ðîç ÷è íó ç 1 %-ì ñè ðî âàò êî âèì àëü áóì³íîì áèêà) îá ðîá ëÿ ëè á³îò èí³ëüî âà íè ìè àí òèò³ëà ìè ïðî òè a4-, a7-, b2- àáî b4ñóá îäè íèöü íÀÕÐ ïðî òÿ -ãîì 15 õâ çà ê³ìíàò íî¿ òåì ïå ðà òó ðè. Îïòè ìàëü íó êîíöåí òðàö³þ àí òèò³ë ï³äáè ðà ëè â³äïîâ³äíî äî ðå -çóëü òàò³â ³ìó íî ôåð ìåí òíî ãî òåñ òó ç àí òè ãåí íè ìè ôðàã ìåí òà ìè ñóá îäè íèöü. ϳñëÿ â³äìè âàí íÿ êë³òè

-íè ³íêó áó âà ëè ç³ ñòðåï òàâ³äè íîì, ì³÷å -íèì ÔÅ, óïðî äîâæ 15 õâ, ïîò³ì çíîâó â³äìè âà ëè òà àíàë³çó -âà ëè íà ïðîòî êî âî ìó öè òîô ëó î ðè ìåòð³ EPICS-XL («CoulterBeckman», Ôðàíö³ÿ) ç â³äïîâ³äíèì ïðî ãðàì íèì çà áåç ïå ÷åííÿì. ²íø³ ïî ðö³¿ êë³òèí ôàð áó -âà ëè Ô²ÒÖ-ì³÷å íèìè àí òèò³ëà ìè ïðî òè CD19 òà ÔÅì³÷å íè ìè àí òèò³ëà ìè ïðî òè CD22 ³ äîñë³äæóâà -ëè ïîä³áíèì ÷è íîì.

Êë³òè íè, ðîç ñàä æåí³ â 96-ëóí êîâ³ ïëàí øå òè (1,5 × 104 êë³òèí íà ëóí êó â 100 ìêë ñå ðå äî âè ùà), ³íêó áó âà ëè ç åï³áà òè äè íîì (1 òà10 ìêì) àáî ÌËÀ (25 òà 100 íÌ) çà òåì ïå ðà òó ðè 37 °C ïðî òÿ ãîì

48 ãîä. ʳëüê³ñòü æè âèõ êë³òèí âèì³ðþ âà ëè çà

âêëþ ÷åí íÿì ò³àçîë³ëó áëà êèò íî ãî [11].

Ðå çóëü òà òè ³ îá ãî âî ðåí íÿ. Àíòèò³ëà, îò ðè ìàí³ ïðî òè êî ðîò êèõ ôðàã ìåíò³â ñóá îäè íèöü íÀÕÐ ùó -ðà, ñïå öèô³÷íî çâ’ÿ çóþòü â³äïîâ³äí³ ñóá òè ïè íÀÕÐ íà íå é ðî íàõ àâ òî íîì íèõ ãàíã볿â ùó ðà ³ ìî ðñüêî¿ ñâèí êè [9, 10] òà íà Â-ë³ìôî öè òàõ ìèø³ [6–8]. Àí-òè ãåíí³ ôðàã ìåí Àí-òè ñóá îäè íèöü a4, b2 ³ b4 àá ñî ëþò

-íî ³äåí òè÷í³ ó íÀÕÐ ùó ðà ³ ëþ äè íè, ôðàã ìåíò a

7-ñóá îäè íèö³ ì³ñòèòü äâ³ êîí ñåð âà òèâí³ çàì³íè (Lys íà Arg ³ Ser íà Asn), òî ìó àí òèò³ëà ïî âèíí³ çâ’ÿ çó âà -òè â³äïîâ³äí³ íÀÕÐ ëþ äè íè. Ïåï -òèä, âè êî ðèñ òà íèé

äëÿ îäåð æàí íÿ a4-ñïå öèô³÷íèõ àí òèò³ë

(AVGT-YNTRKYEC), âè ñî êî ãî ìî ëîã³÷íèé â³äïîâ³äíî ìó

ôðàã ìåí òó a2-ñóá îäè íèö³ ÿê ùó ðà, òàê ³ ëþ äè íè

(ATGTYNSKKYDC). Çâà æà þ ÷è íà öå, çà äî ïî ìî -ãîþ àí òèò³ë ìîæ íà ³äåí òèô³êó âà òè a2-âì³ñí³ íÀÕÐ (UniProtKB (www.uniprot.org)).

³äïîâ³äíî äî ë³òå ðà òóð íèõ äà íèõ [4] êë³òè íè Daudi åêñïðå ñó þòü ìÐÍÊ ñóá îäè íèöü a2, a5, a6 òà

a7, àëå íå a4 íÀÕÐ, ÷å ðåç öå çâ’ÿ çó âàí íÿ a4/a 2-ñïå öèô³÷íî ãî àí òèò³ëà, ïðè íàéìí³, íà ö³é

êë³òèí-í³é ë³í³¿ áó ëî â³äíå ñå íå äî a2-âì³ñíèõ íÀÕÐ.

Ìè ïîð³âíÿ ëè çâ’ÿ çó âàí íÿ íÀÕÐ-ñïå öèô³÷íèõ àí òèò³ë ç êë³òè íà ìè ë³ìôîì, ùî â³äïîâ³äà þòü

ð³ç-íèì ñòàä³ÿì äè ôå ðåíö³àö³¿ Â-ë³ìôî öèò³â:

ïðå-B-êë³òè íàì (REH), çð³ëèì B-ë³ìôî öè òàì (Ramos) òà Â-ë³ìôîá ëàñ òàì (Daudi) (êà òà ëîæí³ íî ìå ðè ÀÒÑÑ CRL-8286 (REH), CRL-1596 (Ramos), CCL-213 (Daudi) [13, 14]). ßê ïî êà çà íî íà ðèñ. 1, íà é ñèëüí³øå çâ’ÿ çó âàí íÿ àí òèò³ë ñïîñ òåð³ãà ëî ñÿ íà êë³òè íàõ Daudi, íàéñëàáøå – íà êë³òè íàõ REH, òîá òî àá -ñî ëþò íà ê³ëüê³ñòü íÀÕÐ çá³ëüøó âà ëà ñÿ ïî ì³ð³ äîçð³âàí íÿ ³ àê òè âàö³¿ Â-ë³ìôî öèò³â. Íàéá³ëüøó

510

ÎÌÅËÜ ×ÅÍ ÊÎ Ä. Ì., ÑÊÎÊ Ì. Â.

Ðèñ. 1. Çâ’ÿ çó âàí íÿ íÀÕÐ-ñïå öèô³÷íèõ àí òèò³ë ç êë³òè íà ìè Daudi (1), Ramos (2) òà REH (3) ó ïðî òî êîâ³é öè òîô ëó î ðè ìåòð³¿; *p < 0,005; **p < 0,0005 ïîð³âíÿ íî ç êë³òè íà ìè Daudi; #p <

Ðèñ. 2. Çâ’ÿ çó âàí íÿ CD19 òà CD20 àí òèò³ë ç êë³òè íà ìè Ramos (1) ³ REH (2) ó ïðî òî êîâ³é öè òîô ëó î ðè ìåòð³¿; *p < 0,0005

35

30

25

20

15

10

5

0

²í

ò

å

í

ñè

âí

³ñ

ò

ü

ô

ëó

î

ð

å

ñö

å

íö

³¿

.

î

.

CD19 CD22

(3)

ð³çíè öþ ó çâ’ÿ çó âàíí³ a4/a2-ñïå öèô³÷íî ãî àí òèò³-ëà âèç íà ÷å íî äëÿ êë³òèí REH ³ Ramos (ïðè áëèç íî ó 16 ðàç³â â óìîâ íèõ îäè íè öÿõ ôëó î ðåñ öåíö³¿). Çâ’ÿ -çó âàí íÿ a7-, b2- òà b4ñïå öèô³÷íèõ àí òèò³ë ó êë³òè -íàõ REH ³ Ramos âè ùå äëÿ ïåðøèõ ó 5, 4 òà 7 ðàç³â â³äïîâ³äíî. Íà â³äì³íó â³ä REH êë³òè íè Ramos åêñïðå ñó þòü çð³ëó ôîð ìó àí òè ãåíñïå öèô³÷íî ãî ðå -öåï òî ðà (BCR) òà aëàí öþã éî ãî ñèã íàëü íî ãî ìî

-äó ëÿ CD79 (DSMZ online Catalogue http:/www.

dsmz.de/human_and_animal_cell_lines).

Ìè ïîð³âíÿ ëè ö³ êë³òè íè çà åêñïðåñ³ºþ CD19 (êî-ðå öåï òîð BCR) òà CD22 (íå ãà òèâ íèé ðå ãó ëÿ òîð

ñèã íàë³íãó BCR). Äàí³, ïðåä ñòàâ ëåí³ íà ðèñ. 2,

ñâ³ä÷àòü ïðî òå, ùî êë³òè íè Ramos åêñïðå ñó þòü

á³ëüøå CD19 ³ çíà÷ íî á³ëüøå CD22, í³æ REH. Öå îçíà ÷àº, ùî äè ôå ðåíö³àö³ÿ Â-ë³ìôî öèò³â ëþ äè íè, ïî â’ÿ çà íà ç åêñïðåñ³ºþ àí òè ãåíñïå öèô³÷íî ãî ðå -öåï òî ðà, ñóï ðî âîä æóºòüñÿ ïî ñè ëåí íÿì åêñïðåñ³¿

ïå ðå âàæ íî a4/a2-âì³ñíî ãî íÀÕÐ, òîá òî ñà ìå öåé

ñóá òèï, ñêîð³ø çà âñå, â³äïîâ³äຠçà ðå ãó ëÿö³þ ïðî öåñ³â, îïî ñå ðåä êî âà íèõ BCR. Âèùåíàâåäåíå ïî ãîä æóºòüñÿ ç ðå çóëü òàòoì, îò ðè ìà íèì íà Âë³ìôî öè

-òàõ ìèø³, äå ê³ëüê³ñòü a4âì³ñíèõ íÀÕÐ ñÿ ãຠìàê

-ñè ìó ìó â çð³ëèõ Â-ë³ìôî öè òàõ ê³ñòêî âî ãî ìîç êó ï³ñëÿ åêñïðåñ³¿ ïî âíîö³ííî ãî BCR [6].

Êë³òèíí³ ë³í³¿ Ramos ³ Daudi, ùî íà ëå æàòü äî îä íî ãî òè ïó ïóõ ëèí (ë³ìôî ìà Áåðê³òòà), áó ëè íå-³äåí òè÷ íè ìè çà ê³ëüê³ñòþ åêñïðå ñî âà íèõ íÀÕÐ. ²íòåí ñèâí³ñòü ôó î ðåñ öåíö³¿ çâ’ÿ çà íî ãî a4/a2ñïå -öèô³÷íî ãî àí òèò³ëà âè ÿ âè ëà ñÿ ìàé æå îäíà êî âîþ,

a7- ³ b2-ñïå öèô³÷íèõ àí òèò³ë – âòðè÷³, à b4-ñïå -öèô³÷íèõ àí òèò³ë – ó 7 ðàç³â á³ëüøå íà êë³òè íàõ Daudi ïîð³âíÿ íî ç Ramos (ðèñ. 1). Îñê³ëüêè ñòàä³ÿ äè ôå ðåíö³àö³¿ êë³òèí ë³í³¿ Daudi â³äïîâ³äຠàê òè âî âà -íèì Â-ë³ìôî öè òàì (ë³ìôîá ëàñ òàì) (ATTC: The glo- bal bioresource center (www.atcc.org)), îäåðæàí³ äàí³ ï³äòâåð äæó þòü, ùî àê òè âàö³ÿ Âêë³òèí ñóï ðî âîä -æóºòüñÿ ïî ñè ëåí íÿì åêñïðåñ³¿ a7-, b2- òà b

4-âì³ñ-íèõ, àëå íå a4/a2-âì³ñíèõ íÀÕÐ. Öå óçãîä æóºòüñÿ ç

íà øèìè ðå çóëü òà òàìè ïðî òå, ùî àê òè âàö³ÿ Â-ë³ì-ôî öèò³â ìèø³ àí òèò³ëà ìè ïðî òè CD40 ïðè çâî äèòü äî ïî ñè ëåí íÿ åêñïðåñ³¿ a7-âì³ñíèõ íÀÕÐ [12].

Ïðîë³ôå ðàö³ÿ êë³òèí îò ðè ìà íî¿ íà ìè ã³áðè äî ìè 1D6 (ùî ïðî äó êóº àí òèò³ëà ïðî òè ñóá îäè íèö³

íÀÕÐ) òà ïðå-Â-ë³ìôî ìè êóð ÷àò DT40 [13] áëî

-êóºòüñÿ a-êîá ðà òîê ñè íîì ³ ÌËÀ, ñïå öèô³÷íè ìè

àí òà ãîí³ñòà ìè a7-âì³ñíèõ íÀÕÐ [8, 14], òîá òî

ôóíêö³îíó âàí íÿ öüî ãî ñóá òè ïó íÀÕÐ º íå îáõ³äíèì äëÿ ï³äòðèì êè êë³òèí íî ãî ïðîë³ôå ðà òèâ íî ãî ïî -òåíö³àëó. Íà òîì³ñòü êë³òè íè REH, Ramos i Daudi âè ÿ âè ëè ñÿ íå ÷óò ëè âè ìè äî a7-ñïå öèô³÷íèõ ë³ãàí-ä³â: í³ åï³áà òè äèí (àãîí³ñò øè ðî êî ãî ñïåêòðà íÀÕÐ), í³ ÌËÀ íå âïëè âà ëè íà ê³ëüê³ñòü æè âèõ êë³òèí ï³ñëÿ 3 ä³á ³íêó áàö³¿ (äàíèõ íå íà âå äå íî).

Çà ãà ëîì, îäåð æàí³ äàí³ ñâ³ä÷àòü ïðî òå, ùî êë³-òè íè Â-ë³ìôî¿ äíî ãî ïî õîä æåí íÿ ëþ äè íè ïîä³áíî äî â³äïîâ³äíèõ êë³òèí ìèø³ ³ êóð ÷à òè ì³ñòÿòü

äå-ê³ëüêà ñóá òèï³â íÀÕÐ. гâåíü ¿õíüî¿ åêñïðåñ³¿

ï³äâè ùóºòüñÿ ïî ì³ð³ äè ôå ðåíö³àö³¿ Â-ë³ìôî öèò³â. гçí³ ñóá òè ïè íÀÕÐ, â³ðîã³äíî, âè êî íó þòü ð³çí³

ôóíêö³¿, îñê³ëüêè çðîñòàííÿ åêñïðåñ³¿ a4/a

2-âì³ñíèõ íÀÕÐ ñóï ðî âîä æóº ïðî öåñ ôîð ìó âàí íÿ çð³ëî ãî àí òè ãåí-ñïå öèô³÷íî ãî ðå öåï òî ðà (BCR), à

çá³ëüøåí íÿ åêñïðåñ³¿ a7-âì³ñíèõ íÀÕÐ – ïå ðåõ³ä

â³ä ñòà䳿 çð³ëî ãî ë³ìôî öè òà äî ë³ìôîá ëàñ òà. Çâ’ÿ -çó âàí íÿ ñïå öèô³÷íèõ ë³ãàíä³â íÀÕÐ (ÿê àãîí³ñò³â,

òàê ³ àí òà ãîí³ñò³â) íå âïëè âຠíà ³íòåí ñèâí³ñòü

ïðîë³ôå ðàö³¿ äîñë³äæå íèõ êë³òèí.

Ðî áî òó ï³äòðè ìà íî ãðàí òà ìè êîì ïàí³é «Philip Morris USA» òà «Philip Morris Int».

D. M. Omelchenko, M. V. Skok

Expression of nicotinic acetylcholine receptors on human B-lymphoma cells

Summary

Aim. To find a correlation between the level of nicotinic acetylcholine receptor (nAChR) expression and B lymphocyte differentiation or activation state. Methods. Expression of nAChRs in the REH, Ramos and Daudi cell lines was studied by flow cytometry using nAChR subunit-specific antibodies; cell prolife-ration was studied by MTT test. Results. It is shown that the level of

a4b2/b4 and a7 nAChRs expression increased along with B lymphocyte differentiation (Ramos > REH) and activation (Daudi > > Ramos) and depended on the antigen-specific receptor exp-ression. The nAChR stimulation/blockade did not influence the intensity of cell proliferation.

Keywords: nicotinic acetylcholine receptor, B- lymphocytes. Ä. Í. Îìåëü ÷åí êî, Ì. Â. Ñêîê

Ýêñïðåñ ñèÿ íè êî òè íî âèõ àöå òèë õî ëè íî âèõ ðå öåï òî ðîâ íà êëåò êàõ Â-ëèì ôîì ÷å ëî âå êà

Ðå çþ ìå

Öåëü. Îïðå äå ëèòü ñâÿçü ìåæäó óðîâíåì ýêñ ïðåñ ñèè íè êî òè íî âèõ àöå òèë õî ëè íî âèõ ðå öåï òî ðîâ (íÀÕÐ) è ñòå ïåíüþ äèô ôå -ðåí öè à öèè è àê òè âà öèè Â-ëèì ôî öè òîâ. Ìå òî äû. Ýêñïðåñ ñèþ

511

(4)

íÀÕÐ íà êëå òî÷ íûõ ëè íè ÿõ REH, Ramos è Daudi èç ó÷à ëè ìå òî äîì ïðî òî÷ íîé öè òîô ëó î ðè ìåò ðèè ñ èñ ïîëü çî âà íè åì àí òè -òåë, ñïå öè ôè÷ íûõ ê ðàç íûì ñóá ú å äè íè öàì ðå öåï òî ðà; ïðî-ëè ôå ðà öèþ êëå òîê îöå íè âà ïðî-ëè ïî ðå çóëü òà òàì ÌÒÒ-òåñ òà. Ðå -çóëü òà òû. Ïî êà çà íî, ùî óðî âåíü ýêñ ïðåñ ñèè a4b2/b4 è a7 íÀÕÐ ïî âû øà åò ñÿ ïî ìåðå äèô ôå ðåí öè à öèè (Ramos > REH) è àê òè -âà öèè Â-ëèì ôî öè òîâ (Daudi > Ramos) è çà âè ñèò îò ýêñ ïðåñ ñèè àí òè ãåíñïå öè ôè ÷å ñêî ãî ðå öåï òî ðà. Ñòè ìó ëÿ öèÿ/áëî êè ðî âà íèå íÀÕÐ íå âëè ÿ åò íà èí òåí ñèâ íîñòü ïðî ëè ôå ðà öèè èñ ñëå äî -âàí íûõ êëå òîê.

Êëþ ÷å âûå ñëî âà: íè êî òè íî âèé àöå òèë õî ëè íî âèé ðå öåï òîð, Â-ëèì ôî öè òû.

ÏÅÐÅË²Ê Ë²ÒÅÐÀÒÓÐÈ

1. Paterson D., Nordberg A. Neuronal nicotinic receptors in the human brain // Prog. Neurobiol.–2000.–61, N 1.–P. 75–111. 2. Conti-Fine B. M., Navaneetham D., Lei S., Maus A. D. Neuro-

nal nicotinic receptors in non-neuronal cells: new mediators of tobacco toxicity? // Eur. J. Pharmacol.–2000.–393, N 1– 3.–P. 279–294.

3. Grando S. A. Cholinergic control of epidermal cohesion in norm and pathology // Exp. Dermatol.–2006.–15, N 4.– P. 265–282.

4. Kawashima K., Fujii T. Expression of non-neuronal acetyl-choline in lymphocytes and its contribution to the regulation of immune function // Front. Biosci.–2004.–9.–P. 2063– 2085.

5. Wang H., Yu M., Ochani M., Amella C. A., Tanovic M., Su-sarla S., Li J. H., Yang H., Ulloa L., Al-Abed Y., Czura C. J., Tracey K. J. Nicotinic acetylcholine receptor alpha7 subunit is an essential regulator of inflammation // Nature.–2003.– 421, N 6921.–P. 384–388.

6. Skok M., Grailhe R., Agenes F., Changeux J. P. The role of nicotinic acetylcholine receptors in lymphocyte development // J. Neuroimmunol.–2006.–171, N 1–2.–P. 86–98.

7. Skok M. V., Grailhe R., Agenes F., Changeux J. P. The role of nicotinic receptors in B-lymphocyte development and acti-vation // Life Sci.–2007.–80, N 24–25.–P. 2334–2336. 8. Skok M. V., Kalashnik E. N., Koval L. N., Tsetlin V. I., Utkin

Y. N., Changeux J. P., Grailhe R. Functional nicotinic acetyl-choline receptors are expressed in B lymphocyte-derived cell lines // Mol. Pharmacol.–2003.–64, N 4.–P. 885–889. 9. Skok M. V., Voitenko L. P., Voitenko S. V., Lykhmus E. Y.,

Kalashnik E. N., Litvin T. I., Tzartos S. J., Skok V. I. Alpha su- bunit composition of nicotinic acetylcholine receptors in the rat autonomic ganglia neurons as determined with subunit-specific anti-alpha(181–192) peptide antibodies // Neurosci-ence.–1999.–93, N 4.–P. 1427–1436.

10. Koval O. M., Voitenko L. P., Skok M. V., Lykhmus E. Y., Tset-lin V. I., Zhmak M. N., Skok V. I. The b-subunit composition of nicotinic acetylcholine receptors in the neurons of the guinea pig inferior mesenteric ganglion // Neurosci. Lett.– 2004.–365, N 2.–P. 143–146.

11. Carmichael J., DeGraff W. G., Gazdar A. F., Minna J. D., Mitchell J. B. Evaluation of a tetrazolium-based semiautoma-ted colorimetric assay: assessment of radiosensitivity // Cancer Res.–1987.–47, N 4.–P. 943–946.

12. Koval L. M., Lykhmus O. Yu., Omelchenko D. M., Komisaren- ko S. V., Skok M. V. The role of alpha7 nicotinic acetylcholine receptors in B lymphocyte activation // Ukr. Biochem. J.– 2009.–81, N 4.–P. 5–11.

13. Buerstedde J. M., Reynaud C. A., Humphries E. H., Olson W., Ewert D. L., Weill J. C. Light chain gene conversion conti-nues at high rate in an ALV-induced cell line // EMBO J.– 1990.–9, N 3.–P. 921–927.

14. Omelchenko D. M., Kalashnik O. M., Koval L. M., Komisa-renko S. V., Skok M. V. Analysis of signaling pathways acti-vated by nicotinic acetylcholine receptors in b-lymphocyte-derived cells // Ukr. Biochem. J.–2009.–81, N 1.–Ñ. 59–66.

ÓÄÊ 577.27 Íàä³éøëà äî ðå äàêö³¿ 14.09.09

512

Referências

Documentos relacionados

Como não há influência significativa da temperatura, pode-se definir que os melhores resultados são os apresentados para o ensaio realizado a temperatura de 25ºC, sem agitação e com

Durante todo este período de ins- talação do modo de produção manufactu- reira, os ((trabalhadores da fábrica)) irão ocupar o lugar, de maneira progressiva e

In the present research it was compared the concomitant expression of CD9 and CD44 by flow cytometry. Staining for CD9 was obtained in less than 2% and for CD44

Surpri- singly, we found that Fas expression positively correlates to spontaneous lymphoproliferation in  vitro ( Figure  6A ), which might imply that the observed defect

The effect of miR-483-5p on proliferation was evaluated by MTT assay, cell invasion was evaluated by trans-well invasion assays, and target protein expression was determined

We studied the expression and function of individual T cell LPA receptors in naı¨ve and activated CD4 + cells using in vitro migration assays and adoptive transfer strategies..

Methodology: We downregulated MUC1 expression in a gastric carcinoma cell line by RNA interference and studied the effects on cellular proliferation (MTT assay), apoptosis

(A) Single cell suspensions of the indicated cell populations or tissues were analyzed by flow cytometry for RON expression using a monoclonal antibody specific for murine RON