R e v is ta d a S o c ie d a d e B r a s ile ir a d e M e d ic in a T ro p ic a l 17: 5 9 -6 5 , A b r-J u n , 1 9 8 4
A R T I G O S
C A R A C T E R Í S T I C A S E P I D E M I O L Ó G I C A S D A L E I S H M A N I O S E T E G U M E N T A R A M E R I C A N A E M U M A R E G I Ã O E N D Ê M I C A
D O E S T A D O D A B A H I A . I I L E I S H M A N I O S E C A N I N A
Air C. Barretto, Cesar Cuba Cuba, Júlio A. Vexenat,
Ana C. Rosa, Philip D. Marsden e Albino V. M agalhães
U m in q u é r ito e m c ã e s r e a liz a d o n a r e g iã o d e T r ê s B r a ç o s , B a h ia , m o s tr o u q u e 3 ,0 % d e 9 8 a n i m a i s t i n h a m a m a s t i g o t a s e m le s õ e s d e p e le . P a r a s i t o s n ã o f o r a m e n c o n tr a d o s e m p e l e n o r m a l d a o r e lh a . D e u m a a m o s t r a s e l e c io n a d a d e 1 3 c ã e s, p o r t a d o r e s d e le s ã o c u t â n e a a tiv a , n o v e ( 6 9 , 2 % ) d e l e s e s ta v a m c o m p r o v a d a m e n t e in fe c ta d o s . S e t e a m o s t r a s d e le s ã o p r o d u z i r a m in fe c ç ã o e m h a m s te r s . O e s tu d o b io ló g ic o ( c r e s c i m e n to e m m e io d e c u ltu r a , e v o lu ç ã o d a le s ã o e m h a m s t e r e d e s e n v o l v i m e n t o n o tu b o d ig e s tiv o d e L u tz o m y ia lo n g ip a lp is) id e n tifi c o u o p a r a s i t o c o m o p e r t e n c e n t e a o c o m p le x o L . b raz ilie n sis. A c a r a c te r iz a ç ã o b i o q u í m i c a ( m o b i l i d a d e e le tr o fo r é tic a d e e n z i m a s e m p l a c a s d e a c e ta to d e c e lu lo s e ) e o e s tu d o i m u n o t a x o n ô m i c o ( a n t i c o r p o s m o n o c l o n a i s ) d e f i n i r a m a s a m o s t r a s c o m o L . b ra z ilie n s is b razilien sis.
O p a p e l d o c ã o c o m o u m p o s s í v e l r e s e r v a tó r io d e L . b. b ra z ilie n s is n a r e g iã o d e T r ê s B r a ç o s é d is c u tid o .
P a la v ra s ch av es: L e ish m a n io se c a n in a . L . b r a z i l i e n s i s b r a z i l i e n s i s . C a ra c te riz a ç ã o d e c e p a s . E p id e m io lo g ia .
D e s d e o tra b a lh o de P e d r o s o ^ 6 , h á 7 0 an o s, até os d ia s a tu a is , o a c h a d o d e p a ra s ito s d o g ên ero L e i s h m a n i a em le sõ e s c u tâ n e a s d e c ã e s de á re a s en d ê m ic a s de le is h m a n io s e te g u m e n ta r te m sid o re la ta d o , co m fre q ü ê n c ia , em v á rio s p a ís e s d o c o n tin en -
t e 6 8 9 1 0 1 9 2 0 21 2 2 2 6 2 7 2 8 2 9 3 0 3 1 . E n tre ta n to , o p a p e l d e s se a n im a l co m o um p o ssív e l re s e rv a tó rio d e s s a s L e i s h m a n i a s d e rm o tró p ic a s n u n c a foi e s c la recid o . N a re a lid a d e , n e m m e sm o o p a ra s ito e ra ad e q u a d a m e n te id e n tific a d o d ev id o , p rin c ip a lm e n te , à p o b re z a d e c o n h e c im e n to s so b re as v á ria s e s p é c ie s e su b e sp é c ie s d e L e i s h m a n i a . S o m en te a p ó s tra b a lh o s re c e n te s d efin in d o o s C o m p le x o s d e L e i s h m a n i a e su a s su b e sp é c ie s , p e lo e m p re g o d e m o d e rn a s té c n ic a s q u e p e rm ite m a s e p a ra ç ã o d e s s e s p a ra s ito s , a tra v é s d e su as c a ra c te rís tic a s b i o l ó g i c a s ^ 1 3 s b io q u ím i c a s 11 2 4 2 5 e i m u n o l ó g i c a s 2 3 ; n o v o s ca m p o s fo ra m a b e rto s p a r a u m m e lh o r c o n h e c im e n to ta x o n ô m ic o d e s s e s flag e la d o s e u m m e lh o r e n te n d im e n to d a e c o lo g ia e ep id e m io lo g ia d a s le ish m a n io se s.
T r a b a lh o r e a liz a d o c o m o a u x ílio fin a n c eir o d o C o n s e lh o N a c io n a l d e D e s e n v o lv im e n to C ie n tífic o e T e c n o ló g ic o ( C N P q ) 4 0 3 6 9 0 / 8 2 U .S . P u b lic H e a lth S e rv ic e A I 1 6 2 8 2 e M in is té r io d a S a ú d e ( S U C A M ) .
E n d e r e ç o p a ra c o r r esp o n d ê n cia : F a c u ld a d e d e C iê n c ia s d a S a ú d e - N ú c le o d e M e d ic in a T r o p ic a l e N u tr iç ã o , U n iv e r s id a d e d e B r a sília , B r a sília , D F - 7 0 9 1 0 - B rasil. R e c e b id o p a ra p u b lic a ç ã o e m 9 / 3 / 8 4 .
M u ito re c e n te m e n te , tra b a lh o s p re lim in a re s a p re s e n ta d o s e m C o n g re s s o m o s tra ra m , p e la p rim e ira vez, q u e p a ra s ito s is o la d o s d e le sõ e s d e c ã o p ro v e n ie n te s d a B a h ia ^ 4 , R io d e J a n e ir o 17 e V e n e z u e la 1 fo ra m c a ra c te riz a d o s b io q u im ic a m e n te co m o L e i s h m a n i a b r a z i l i e n s i s b r a z i lie n s is .
A p re s e n ç a d e c ã e s p o rta d o re s d e ex te n sa s le sõ e s c u tâ n e a s e m u m a á r e a e n d ê m ic a d e le ish m a n io se te g u m e n ta r (T rê s B raç o s, B a h ia ) le v o u : n o s à re a liz a ç ã o d e s te tra b a lh o , v is a n d o a d e te rm in a ç ã o d a p re v a lê n c ia d e in fe c ç ã o n e s se a n im a l e a id e n tifica çã o do m a io r n ú m e ro p o ssív e l d e a m o s tra s is o la d a s de lesõ es.
M A T E R I A L E M É T O D O S
In ic ia lm e n te foi re a liz a d o u m in q u é rito em cães, p relim in ar, c a s a /c a s a n a vila d e T rê s B raç o s e fa z en d a s a d ja c e n te s. E s s a re g iã o , e n d ê m ic a d e le ish m a n io se te g u m e n ta r, e s tá lo c a liz a d a n o s m u n ic íp io s d e C ra- v o là n d ia , U b a ír a e W e n c e s la u G u im a rã e s n o E s ta d o d a B a h ia e s itu a d a e n tre 12° 4 0 ’ la titu d e S ul e 3 9 ° 4 5 ’ lo n g itu d e O e s te . F o ra m e x a m in a d o s 9 8 c ã e s , dos q u a is e r a r e tira d o u m fra g m en to d a p o n ta d a o re lh a ou d a b o r d a d a le sã o , q u a n d o e x iste n te , p a r a c o n fe c ç ã o de esfreg a ç o s. A m o s tra s d e san g u e fo ra m c o le ta d a s em p a p e l d e filtro p a r a a r e a liz a ç ã o d e r e a ç ã o d e fix aç ã o d e c o m p le m e n to ( R F C ’) p a r a c a la z a r.
B a r re to A C , C u b a C C , V e x e n a tJ A , R o s a A C , M a r s d e n P D , M a g a lh ã e s A V . C a r a c te r ís tic a s e p id e m io ló g ic a s d a le is h m a n io s e te g u m e n ta r a m e ric a n a em u m a reg iã o e n d ê m ic a d o e s ta d o d a B a h ia . I I L e i s h m a n i o s e c a n in a . R e v is t a d a S o c ie d a d e B r a s ile ir a d e M e d ic in a T ro p ic a l 17: 5 9 -6 5 , A b r -J u n , 1 9 8 4
P o ste rio rm e n te , tre z e c ã e s p o rta d o re s d e le sã o ativ a, su sp eito s de le ish m a n io se fo ra m s e le c io n a d o s p a ra o segundo o b jetiv o d e s te tra b a lh o . A le s ã o e ra c u id ad o sam en te la v a d a c o m sa lin a a 0 ,8 % e d u a s am o stras era m re tira d a s. U m d o s fra g m e n to s e ra co lo ca d o em fo rm o l-z en k e r p a r a e s tu d o h is to p a to - lógico. A segunda a m o s tra e ra d e s tin a d a à fe itu ra d e esfregaços p o r ap o s iç ã o e, logo ap ó s, tr itu r a d a co m salin a e in o c u lad a em fo cin h o e p a ta s d e u m h a m s te r. A ten tativ a de iso la m e n to p rim á rio a tra v é s d e m e io d e cu ltu ra foi ev itad o d ev id o à c o n s ta n te c o n ta m in a ç ã o p o r fungos. O s h a m ste rs in o c u la d o s e ra m o b s e rv a d o s até um p erío d o m á x im o d e um an o . Q u a n d o h a v ia su sp eita de in fecção , p elo a p a re c im e n to d e le sã o cu tâ n e a ou e m a g re c im e n to p ro g re ssiv o d o a n im al, c a rac terística de v is c e ra liz a ç ã o d e p a ra s ito s is o la d o s n essa área, m a te ria l d e p ele e /o u v ís c e ra s (b a ç o , fígado) eram re tira d o s p a r a c o n fe c ç ã o d e e sfreg a ç o s, iso lam en to em m e io s d e c u ltu ra ( N N N , L IT , A g a r S angue D ifco ^ 3 ) e su b in o c u la ç õ e s e m n o v o s h a m s ters. C rio p re se rv a ç ã o d o s iso la d o s e r a ta m b é m re a lizada.
U m a v ez o b tid a a in fe c ç ã o e m h a m s te r, e x e m pla res d e L u t z o m y i a l o n g ip a l p is , p ro v e n ie n te s d a co lô n ia m a n tid a em n o sso la b o ra tó rio , e ra m a lim e n tad o s n a s le sõ e s c u tâ n e a s , u tiliz a n d o -s e u m a p a re lh o sim ples id e a liz a d o p o r V e x e n a t 3 2 . O s in s e to s e ra m d isseca d o s a p ó s a o v ip o siç ã o (4 a 5 d ia s d e p o is d o rep a sto ), co m a fin a lid a d e d e o b s e rv a r o p a d r ã o de d e sen v o lv im en to d o p a r a s ito n o tu b o d ig e stiv o (L a in - son e c o ls .1^ 15).
A c a ra c te riz a ç ã o b io q u ím ic a d o s is o la d o s foi re a liz a d a a p a rtir d e fo rm a s d e c u ltu ra , c o m as q u ais fo ram p re p a ra d o s o s lis a d o s. O e s tu d o e le tro fo ré tic o foi feito e m p la c a s de a c e ta to d e ce lu lo s e , e o p a d rã o iso e n z im á tic o foi d e te rm in a d o c o m as en z im a s A L A T , A S A T , G 6 P D e A C P ( L a b o ra tó rio d e M i- cro b io lo g ia e Im u n o lo g ia d a U n iv e rs id a d e d e B ra s ília - P ro f. Is a a c R o itm a n ).
U m a b a te ria d e se te a n tic o rp o s m o n o c lo n a is esp éc ie e s u b e sp é c ie e sp ec ífic o s p a r a L . b r a z i l i e n s i s e L . m e x ic a n a foi e m p re g a d a p a r a a a n á lis e d e sete e s to q u e s iso la d o s d e c ã es , a tra v é s d a té c n ic a de im u n o flu o rescê n c ia in d ire ta ( I F I ) . O s c lo n e s u tili za d o s foram : V I4 B 9 D 1 0 , X I I I 3 F 4 F 6 , X I I I 3 E 6 B 1 1, I X 1 F 9 D 8 , X I I I 2 A 5 A 1 0 , L X V I I 1 D 7 B 8 e L X V I I I 4 E 1 2 D 8 , se n d o u m esp e c ífic o p a r a L . b r a z i l i e n s i s , trê s su b e sp e c ífico s p a r a L . b. b r a z i l i e n s i s, u m p a r a L . m . a m a z o n e n s i s e d o is p a r a L . m . m e x i c a n a . O s a n tic o rp o s m o n o c lo n a is d e L . m e x i c a n a fo ra m di lu íd o s a 1 :1 .0 0 0 e o s d e L . b r a z i l i e n s i s , 1 :1 0 0 . O an
tí-g e n o e m p re tí-g a d o foi p ro m a s tití-g o ta s c u ltiv a d o s e m m e io d e S c h n e id e r a d ic io n a d o co m 2 0 % d e so ro b o v in o feta l e c ito c e n trifu g a d o e m lâ m in a s d e m ic ro s c ó p io (C ito c e n trífu g a S h a n d o n C y to s p in ). O c o n ju g a d o flu o re sc e n te (c o e lh o ) Ig G a n ti-c a m u n d o n g o F a b i 2 (C a p p e l L a b o ra to rie s ) foi u s a d o a u m a d ilu iç ã o 1 :2 0 . A s a m o s tra s u tiliz a d a s c o m o c o n tro le fo ra m L T B -3 6 3 ( L . b. b r a z i l i e n s i s ) L . 3. (L . m e x i c a n a a m a z o n e n s i s ) . A le itu ra foi re a liz a d a e m p re g a n d o -s e u m a e s c a la a rb itrá ria . P o sitiv id a d e : u m a c ru z ( + ) a trê s ( + + + ) . A flu o re s c ê n c ia d e m e m b ra n a s e fla g e lo s foi ta m b é m c o n s id e ra d a . N e g a tiv id a d e : o s o rg a n ism o s a p re s e n ta v a m -s e se m b rilh o e de c o r v e rm e lh a n a lu z u ltra v io le ta.
R E S U L T A D O S
D e 9 8 c ã e s e x a m in a d o s d u ra n te o in q u é rito p re lim in a r, trê s ( 3 ,% ) m o s tra ra m a m a s tig o ta s em es fre g a ç o d e le s ã o c u tâ n e a . A s le s õ e s v a ria ra m d e s d e p e q u e n a s , c o m b o rd a s re g u la re s, a té a q u e la s e x te n s a s e m u tila n te s e q u e se lo c a liz a v a m e m to d a a o re lh a d o a n im a l (F ig . 1). N ã o fo ra m e n c o n tra d o s p a ra s ito s em p e le n o rm a l e a r e a ç ã o s o ro ló g ic a p a r a c a la z a r foi n e g a tiv a p a r a to d a s a s a m o s tra s , in c lu siv e p a r a os cã e s , p o rta d o re s d a d o e n ç a .
D e tre z e c ã e s se le c io n a d o s , p o rta d o re s d e le sõ e s a tiv a s n o fo cin h o , o re lh a s o u p a ta s , su s p e ita s d e le is h m a n io s e , n o v e ( 6 9 ,2 % ) e s ta v a m c o m p ro v a d a - m e n te in fe c ta d o s c o m p a ra s ito s d o g ê n e ro L e i s h m a -n i a . A p e n a s trê s m o s tra ra m ra ro s a m a s tig o ta s em es fre g a ç o s d e le s ã o e sete, in c lu in d o d o is p o sitiv o s p o r e s fre g a ç o , p ro d u z ira m in fe c ç ã o em h a m s te r. D e um o u tro c ã o , a a m o s tr a foi is o la d a a u a v é s de m e io d e c u ltu ra e a s fo rm a s p ro m a s tig o ta s n ã o in fe c ta ra m h a m s te r ( T a b e la 1). A s le sõ e s d e p a ta s o u fo c in h o d o s h a m s te rs in fe c ta d o s tiv e ra m c re s c im e n to le n to e re la tiv a m e n te p o u c a s fo rm a s a m a s tig o ta s em e s fr e g a ç o - u m a d a s c a ra c te rís tic a s d o c o m p le x o L . b r a z i l i e n s i s . T o d a s as a m o s tra s q u e in fe c ta ra m h a m s te rs e cu jo s a n im a is so b re v iv e ra m u m m a io r p e río d o d e te m p o p ro d u z ira m v is c e ra liz a ç ã o . E m d u a s a m o s tra s foi v e rific a d o a p e n a s v is c e ra liz a ç ã o , se m le sã o c u tâ n e a . E m n e n h u m c a s o h o u v e m e tá s ta s e , c o m o o c o rre fre q ü e n te m e n te c o m p a ra s ito s d o c o m p le x o L . m e x i c a n a ( T a b e la 1).
N e n h u m d o s is o la d o s c re s c e u e m m e io L IT , p o ré m , to d o s c re s c e ra m d e m o d o d is c re to e m N N N e re la tiv a m e n te a b u n d a n te e m D ifc o A g a r S a n g u e ( T a b e la 1). T a m b é m , q u a n d o c u ltiv a d o s e m m e io d e S c h n e id e r ( S c h n e id e r’s D r o s o p h ila M e d iu m ) c o m a fin a lid a d e d e p r e p a ra ç ã o d o a n tíg e n o , o p a ra s ito c re s c e u de fo rm a a b u n d a n te .
B a r r e to A C , C u b a C C , V e x e n a tJ A , R o s a A C , M a r s d e n P D , M a g a lh ã e s A V . C a ra c te r ís tic a s e p id e m io ló g ic a s d a le ish m a n io se te g u m e n ta r a m e r ic a n a em u m a reg iã o e n d ê m ic a d o e s ta d o d a B a h ia . I I L e is h m a n io s e c a n in a . R e v is ta d a S o c ie d a d e B ra sile ir a d e M e d ic in a T r o p ic a l 17: 5 9 -6 5 , A b r-J u n , 1 9 8 4
Ú lc e r a s le is h m a n ió tic a s em c ã e s n a tu ra lm en te in fe c ta d o s c o m L e is h m a n ia b r a z ilie n s is b r a z ilie n sis.
T a b e l a 1 - C a r a c t e r i z a ç ã o b i o l ó g i c a e b i o q u í m i c a d e a m o s t r a s d e L e i s h m a n i a i s o l a d a s d e l e s õ e s c u t â n e a s d e c ã e s d a r e g i ã o d e T r ê s B r a ç o s , B a h i a
C o m p o r t a m e n t o d a s a m o s t r a s A m o s tr a s es/re g a ç o M e io d e c u ltu ra H a m s te r
C r e s c im e n to T r o p is m o L I T N N N D I F C O L e n to R á p id o V is c e r a liz a ç ã o M e tá s ta s e
c u tâ n e a
T u b o d ig e s tiv o L u . lo n g ip a lp is
( P ó s / T o ta l )
Id e n tific a ç ã o ls o e n z im á ti c a ( A L A T , A S A T , G 6 P D e A C P * * * )
C T B -1 7 + - - + - + - P e r ip ilá r io ( 1 /4 6 ) L . b. b ra z ilie n s is
C T B -2 5 + - + + + + + + - + - P e r ip ilá r io ( 3 / 0 4 ) L . b. b ra z ilie n s is
C T B -3 1 - - + + + + + + - + - P e r ip ilá r io ( 7 /1 3 ) L . b. b ra z ilie n s is
C T B -3 9 - - + + + + + + - + - P e r ip ilá r io ( 1 /0 5 ) L . b. b ra z ilie n s is
C T B -I T A + N F N F N F N F N F
C T B -4 9 - - + + + + + + - + - P e r ip ilá r io ( 2 0 / 2 2 ) L . b. b r a z ilie n s is
C T B -5 2 - - + + + + + + - + - ( 0 / 0 2 ) L . b. b ra z ilie n s is
C T B -1 4 2 - - + + + + + - M * - P e r ip ilá r io ( 2 / 0 5 ) N F
C T B -1 4 7 N F - + + + ++ * * N F N F
* O h a m s ter m o rreu , n ã o s e o b s e r v a n d o m e tá s ta s e o u v is c e r a liz a ç ã o .
** I s o la m e n to p rim á rio em m e io de cu ltu ra, p r o m a stig o ta s n ã o in fec ta r a m h a m ster. *** P erfil e n z im á tic o in d is tin g u ív e l d a a m o stra p a d r ã o M 2 9 0 4 (L . b. b r a z ilie n s is ).
N F N ã o feito .
B a r re to A C , C u b a C C , V e x e n a t J A , R o s a A C , M a r s d e n P D , M a g a lh ã e s A V. C a r a c te r ís tic a s e p id e m io ló g ic a s d a le is h m a n io s e t e g u m e n ta r a m e r ic a n a em u m a reg iã o e n d ê m ic a d o e s ta d o d a B a h ia . I I L e i s h m a n i o s e c a n in a . R e v is ta d a S o c ie d a d e B ra sile ira d e M e d ic in a T r o p ic a l 17 : 5 9 -6 5 , A b r -J u n , 1 9 8 4
T a b e la 2 - R e a t i v i d a d e d e p r o m a s t i g o t a s d e a m o s t r a s d e L e is h m a n ia is o l a d a s d e c ã e s d e T r ê s B r a ç o s , B a h ia . B r a s il, a a n tic o r p o s m o n o c l o n a i s te s ta d o s p e l a i m u n o flu o r e s c ê n c ia in d ir e ta .
C ó d ig o d o C lo n e* E s p e c ific id a d e A m o s tr a s d e L e i s h m a n i a
C T B -1 7 C T B -2 5 C T B -3 1 C T B -3 9 C T B -4 9 C T B -1 4 2 C T B -1 4 7 L T B -363** 1^ 3***
V I 4 B 9 D 1 0 L . b r a z ilie n s is + + + + + + + + + + + + + + + + +
-X I I I 3 F 4 F 6 L . b. b r a z ilie n s is + + + + + + + + + + + + + +
-X I I I 3 E 6 B 1 1 L . b. b r a z ilie n s is + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + +
-X I I I 2 A 5 A 1 0 L . b. b r a z ilie n s is + + + + + + + + + + + + + + + + + + + +
-I X 1 F 9 D 8 L . m . a m a z o n e n s is - - - + + +
L X V I I 1 D 7 B 8 L . m m e x ic a n a - - - - - - - - + + +
L X V I I I 4 E 1 2 D 8 L . m . m e x ic a n a - - - - - - - -
-* V er M c M a h o n P r a t e D a v i d ^ .
** C o n tro le: a m o s tr a h u m a n a d e L . b. b r a z ilie n s is
*** C o n tro le: a m o s tr a h u m a n a d e L . m . a m a z o n e n s i s (J o s e fa ).
S eis d o s is o la d o s q u e p ro d u z ira m in fe c ç ã o em h a m s te r tiv e ra m c o m p o rta m e n to tip o p e rip ilá rio em L u . lo n g ip a l p is , is to é: o s flag e la d o s c re s c e ra m n o triâ n g u lo p o s te rio r d o tu b o d ig e stiv o d o in se to . U m d o s iso la d o s n ã o in fe c to u o s in se to s e em d o is e s s a p e s q u is a n ã o foi r e a liz a d a ( T a b e la 1).
O q u a d r o h is to p a to ló g ic o d a s le sõ e s d e c ã e s co n s istiu b a s ic a m e n te d e in filtra d o s h isto lin fo p la s - m o c itá rio s co m a u s ê n c ia d e a m a s tig o ta s , se m e lh a n te ao q u e o c o rre em le s õ e s d e p a c ie n te s d a á r e a d e e stu d o .
O p a d r ã o iso e n z im á tic o de se is a m o s tra s foi in d istin g u ív e l d a a m o s tra p a d r ã o M 2 9 0 4 (L . b. b r a z i l i e n s i s ) ( T a b e la 1).
A s a m o s tra s C T B -1 7 , C T B -2 5 , C T B -3 1 , C T B -3 9 , C T B -5 2 , C T B -1 4 2 e C T B -1 4 7 is o la d a s de cã e s e a a m o s tra L T B -3 6 3 ( L . b. b r a z i l i e n s i s), de o rig em h u m a n a , u s a d a c o m o c o n tro le , re a g ira m p o si tiv a m en te ao s a n tic o rp o s m o n o c lo n a is e sp é c ie e su b es- p ecífico s de L . b r a z i lie n s is , n ã o c ru z a n d o co m a q u e le s de L . m e x i c a n a . A a m o s tra L .3 ( L . m . a m a z o n e n s is ) , d e o rig e m h u m a n a , ta m b é m u s a d a c o m o co n tro le , tev e u m p ro c e d im e n to in v erso . U m d o s a n tic o rp o s m o n o c lo n a is d e L . m . m e x i c a n a falh o u em rea g ir c o m q u a lq u e r a m o s tra ( T a b e la 2).
D I S C U S S Ã O
T o d a s a s a m o s tra s is o la d a s d e le sõ e s a tiv a s de c ã e s d a re g iã o d e T rê s B ra ç o s tiv e ra m o m e sm o c o m p o rta m e n to b io ló g ico , b io q u ím ic o e im u n o ló g ico . O c re sc im e n to p o b re em m e io d e c u ltu ra N N N e a e v o lu ç ã o le n ta d a s le sõ e s c u tâ n e a s , se m a fo rm a ç ã o de
h is tio c ito m a s , s u g e rira m a id e n tific a ç ã o d o p a ra s ito c o m o p e rte n c e n te a o c o m p le x o L . b r a z i lie n s is . A v isc e ra liz a ç ã o d e to d a s as a m o s tra s em h a m s te rs foi u m a c o n s ta n te , se m e lh a n te a o q u e o c o rre c o m a m o s tra s d e o rig em h u m a n a d a á re a ( C u b a ^ e C u b a e c o ls4 ). E s te fa to foi ta m b é m a s s in a la d o p o r D ia s e co l.6 , co m L e i s h m a n i a is o la d a d e c ã e s d a á re a d e C a ra tin g a e n ã o foi m e n c io n a d o p o r L a in s o n e S h a w 13 15 n o s se u s e s tu d o s so b re L . b r a z i l i e n s i s b r a z i l i e n s i s de o rig em h u m a n a .
O d e s e n v o lv im e n to tip o p e rip ilá rio d a s a m o s tr a s n o tu b o d ig e stiv o d e L u . lo n g ip a l p is c o n firm o u a id e n tific a ç ã o d e s se flag e la d o co m o p e rte n c e n te ao C o m p le x o L . b r a z i l i e n s i s . E s s a té c n ic a , d e m o n s tro u s e r d e g ra n d e v a lia n a s e p a r a ç ã o d o s c o m p le x o s i. m e x i c a n a e L . b r a z i l i e n s i s .
O e s tu d o b io q u ím ic o d e se is a m o s tra s d efin iu a id e n tific a ç ã o d o p a r a s ito c o m o s e n d o L . b. b r a z i l ie n s is , se m e lh a n te ao p a r a s ito is o la d o d e le sõ e s c u tâ n e a s e m u c o s a s d o h o m e m d a re g iã o 4 5 . O p a d rã o is o e n z im á tic o m o stro u -se in d istin g u ív e l d a a m o s tra M 2 9 0 4 (L . b. b r a z i l i e n s i s ) . O e s tu d o e le tro fo ré tic o d a s a m o s tra s e m p la c a s d e a c e ta to d e c e lu lo se, u tiliz a n d o -s e a p e n a s q u a tro e n z im a s ( D e S á e co l.7 ), p a re c e sa tis fa tó rio p a r a d is tin ç ã o d o s c o m p le x o s L . b r a z i l i e n s i s e L . m e x i c a n a ( A L A T e A S A T ) e p a ra a s e p a r a ç ã o d a s su b e s p é c ie s L . b. b r a z i l i e n s i s e L . b. g u y a n e n s i s ( G 6 P D ) e L . m . a m a z o n e n s i s e L . m . m e x i c a n a (A C P ) .
-B a rr e to A C , C u b a C C , V e x e n a tJ A , R o s a A C , M a r s d e n P D , M a g a l h ã e s A V . C a r a c te r ís tic a s e p id e m io ló g ic a s d a le is h m a n io s e te g u m e n ta r a m e r ic a n a em u m a reg iã o e n d ê m ic a d o e s ta d o d a B a h ia . I I L e i s h m a n i o s e ca n in a . R e v is ta d a S o c ie d a d e B ra sile ira d e M e d ic in a T r o p ic a l 17: 5 9 -6 5 , A b r -J u n , 1 9 8 4
cia e id e n tific a ra m a a m o s tra C -2 5 ( = C T B - 2 5 ) de T rê s B ra ç o s, co m o Z ,. b. b r a z i l i e n s i s . T a m b é m M a r- zochi e c o l . 1 ^ , re c e n te m e n te ,.id e n tif ic a r a m co m o L . b. b r a z i l i e n s i s u m p a r a s ito is o la d o d e g ân g lio lin fá tico d e u m c ã o q u e n ã o a p re s e n ta v a le s ã o c u tâ n e a , p ro v e n ie n te de u m a á re a e n d ê m ic a d e le ish m a n io se v isc e ra l e te g u m e n ta r. A s se te a m o s tra s , is o la d a s d e le sõ e s c u tâ n e a s d e c ã e s d a re g iã o d e T rê s B ra ç o s, B a h ia , fo ra m c o n firm a d a s c o m o L . b. b r a z i lie n s is , em p re g a n d o -se u m a b a te r ia d e a n tic o rp o s m o n o - c lo n ais e s p é c ie e s u b e sp é c ie e s p e c ífic o s d e L . b r a z i lie n s is e L . m e x i c a n a , c o m o re a g e n te s d a té c n ic a de im u n o flu o re s c ê n c ia in d ire ta ( T a b e la 2).
N a reg iã o d e T rê s B ra ç o s, B a h ia , B rasil, e n d ê m ic a d e le is h m a n io s e te g u m e n ta r a m e ric a n a , cu jas p rin c ip a is c a ra c te rís tic a s fo ra m p u b lic a d a s a n te rio r m e n te 2 , o p a ra s ito a lta m e n te p re d o m in a n te n o h o m e m é a L . b. b r a z i l i e n s i s , d e a c o rd o c o m o s e s tu d o s b io ló g ico s, b io q u ím ic o s e d e im u n o ta x o n o m ia 4 5 . E m m a is d e 3 0 0 c a s o s d e le is h m a n io s e h u m a n a v e ri fica d o s n a reg iã o n e s te s ú ltim o s o ito a n o s d e tra b a lh o s in in te rru p to s, n e n h u m p a c ie n te d e c a la z a r foi o b s e r vad o . R e s e rv a tó rio s p rim á rio s d e L . b r a z i l i e n s i s n a re g iã o a in d a n ã o fo ra m id e n tific a d o s a d e s p e ito de m a is de 6 0 0 a n im a is s ilv e stre s te re m sid o e x a m in a d o s . A p e n a s trê s ro e d o re s ( P r o e c h y m i s i n h e r in g d e n i-g r a t u s ) fo ra m e n c o n tra d o s in fe c ta d o s c o m L . m e x i c a n a s p ( d a d o s n ã o p u b lic a d o s ). O c ã o é e n c o n tra d o co m le sõ e s c u tâ n e a s , às v e z e s e x te n s a s , p rin c ip a l m e n te n a s o re lh a s e fo cin h o , s e n d o R F C ’ n eg a tiv a p a r a c a la z a r. A h is to p a to lo g ia d a s le s õ e s é c o m p a tív e l co m a q u e la o b s e rv a d a e m le s õ e s h u m a n a s p ro d u z id a s p o r L . b. b r a z i l i e n s i s . O in q u é rito c a n in o r e a liz a d o n a á re a m o stro u u m a p re v a lê n c ia b a ix a d e c ã e s in fe c ta d o s (3 ,0 % ), m a s q u a n d o u m a a m o s tra d e a n im ais, p o rta d o re s d e le sõ e s, fo i s e le c io n a d a , o ín d ic e d e p o sitiv id a d e foi b a s ta n te e le v a d o , s e m e lh a n te a o q u e o c o rre u em C aratin g a® . N a re g iã o d e T rê s B ra ç o s, o c ã o é u tiliz a d o n a c a ç a , p rin c ip a lm e n te d e p a c a s e ta tu s e , e m u m a m e s m a re s id ê n c ia , o c ã o e o h o m e m , in c lu siv e c ria n ç a s q u e n ã o fre q ü e n ta m a m a ta , p o d e m s e r e n c o n tra d o s c o m le sõ e s le is h m a n ió tic a s .
P a r a alg u n s a u to r e s 16 22^ 0 Cã o é a p e n a s um h o s p e d e iro c irc u n s ta n c ia l, o u v ítim a ta l q u a l o h o m e m . N a re a lid a d e , se p o r u m la d o a in d a n ã o e x is te m d a d o s c o n c re to s p a r a in c rim in a r es se a n im a l co m o um re s e rv a tó rio se c u n d á rio d e L . b. b r a z i l i e n s i s , p ro v a s q u e p e rm ita m d e s c a rta r o seu p a p e l n a e p id e m io lo g ia d a d o e n ç a ta m b é m a in d a n ã o fo rá m co n seg u id a s.
A c re d ita m o s , e n tre ta n to , d e a c o rd o c o m os c o n h e c im e n to s a tu a is , q u e o c ã o p o s s a te r alg u m a
im p o rtâ n c ia c o m o re s e rv a tó rio s e c u n d á rio de L . b. b r a z i l i e n s i s em T rê s B ra ç o s. A s e v id ên c ia s são: 1) o p a r a s ito c irc u la n d o n o h o m e m e n o c ã o n a reg ião se c o m p o rta m c o m o L . b. b r a z ilie n s is ', 2 ) c ria n ç a s q ue n ã o fre q ü e n ta m a m $ ta a d q u ire m a d o e n ç a , a p a re n te m e n te , e m s u a s c a s a s ; 3) a n im a is q u e fre q ü e n ta m o p e rid o m ic ílio (R a t t u s r a ttu s , D i d e l p h i s ) n ã o tê m sid o e n c o n tra d o s in fec ta d o s ; 4 ) L u . w h i t m a n i , a ltam en te p re d o m in a n te n o d o m ic ilio e se u s a rre d o re s , é an tro - p o fílico , se n d o ta m b é m a tra íd o p e lo cã o ; 5 ) es sa es p é c ie d e fle b o to m ín e o , o riu n d o d a reg iã o e c ria d o em la b o ra tó rio , in fe c ta -se e x p e rim e n ta lm e n te em lesõ es d e c ã e s p a ra s ita d o s c o m L . b. b r a z i l i e n s i s d e orig em c a n in a , ta m b é m d a reg ião .
S U M M A R Y
D u r i n g a s u r v e y o f d o m e s t i c a n d h u n t i n g d o g s c o n d u c t e d in t h e T r ê s B r a ç o s re g io n , S t a t e o f B a h ia , 3 , 0 % o f 9 8 d o g s h a d a m a s t i g o t e s in s k i n le s io n s . P a r a s i t e s w e re n o t f o u n d in n o r m a l e a r s k in . I n a n o n r a n d o m l y s e le c te d s a m p l e o f 1 3 d o g s w ith a c tiv e c u t a n e o u s le s io n s , i n fe c t io n w a s c o n f i r m e d in n in e ( 6 9 ,2 % ) . T is s u e b io p s i e s f r o m s e v e n d o g le s io n s p r o d u c e d in fe c t io n in h a m s te r s . T h e b io lo g i c a l b e h a v i o u r o f th e p a r a s i t e ( r a te o f g r o w th in c u ltu r e m e d ia , e v o lu ti o n o f le s io n s in h a m s t e r s a n d d e -v e l o p m e n t in th e g u t o /L u tz o m y ia longipalpis,) id e n -ti f i e d i t to th e L e is h m a n ia b ra z ilie n sis c o m p le x . C h a r a c t e r i z a t i o n b y b i o c h e m i c a l m e a n s ( e le tr o p h o -r e tic m o b i l i t y o f e n z y m e s in c e llu l o s e a c e ta te p l a t e s ) a n d i m m u n o t a x o n o m i c s t u d i e s ( m o n o c l o n a l a n ti-b o d ie s ) d e f i n e d t h e s t r a i n s a s L . b ra z ilie n sis b ra z i liensis.
T h e r o le o f d o g s a s a p o s s i b l e r e s e r v o ir h o s t o f L . b. b ra z ilie n s is in T r ê s B r a ç o s r e g io n is d is c u s s e d .
K e y w o rd s: C a n in e L e ish m a n ia sis . L . b r a z i l ie n s is b r a z i lie n s is . S tra in C h a ra c te riz a tio n . E p i- d em io lo g y .
R E F E R Ê N C I A S B I B L I O G R Á F I C A S
1. A g u illa r C M , M o m e n H , G r im a ld i G , D e a n e L M .
L e is h m a n ia b r a z ilie n s is b r a z ilie n s is in d o n k ey s ( E q u u s a s in u s ) in ce n tra l V e n e z u e la . In: R e s u m o s d a I X R e u n iã o A n u a l P e s q u is a b á s ic a e m d o e n ç a s d e C h a g a s, (c o m u n ic a ç ã o 1 2 9 ), C a x a m b u , M in a s G e r a is , p. 1 0 6 ,
1 9 8 2 .
2 . B a rretto A C , C u b a C u b a C , M a r s d e n P D , V e x e n a t J A , D e B e ld e r M . C a r a c te r ís tica s e p id e m io ló g ic a s d a
B a rre to A C , C u b a C C , V e x e n a tJ A , R o s a A C , M a r s d e n P D , M a g a l h ã e s A V . C a r a c te r ís tic a s e p id e m io ló g ic a s d a le is h m a n io s e te g u m e n ta r a m e r ic a n a em u m a reg iã o e n d ê m ic a d o e s ta d o d a B a h ia . I I L e i s h m a n i o s e c a n in a . R e v is t a d a S o c ie d a d e B r a s ile ir a d e M e d ic in a T r o p ic a l 1 7: 5 9 -6 5 , A b r-J u n , 1 9 8 4
le is h m a n io s e teg u m e n ta r a m e r ic a n a e m u m a reg iã o e n d ê m ic a d o E s ta d o d a B a h ia . B ra sil. I L e is h m a n io s e h u m an a. B o le tin d e la O f ic in a S a n itá r ia P a n a m e r ic a n a 9 0: 4 1 5 - 4 2 4 , 1 9 8 2 .
3 . B a rretto A C , C u b a C u b a C , M a r s d e n P D , V e x e n a t J A , M a g a lh ã e s A V . I d e n tific a ç ã o d e L e i s h m a n i a b r a z i lie n s is b r a z ilie n s is e m c ã e s n a tu r a lm e n te in fe c ta d o s e m u m a reg iã o e n d ê m ic a d e le is h m a n io s e c u tà n e a -m u c o s a . In: R e s u m o s d a I X R e u n iã o A n u a l P e s q u is a b á s ic a e m d o e n ç a d e C h a g a s , (c o m u n ic a ç ã o 1 3 5 ), C a x a m b u , M i n a s G e r a is , p . 1 0 9 , 1 9 8 2 .
4 . C u b a C A C , M ile s M , V e x e n a t J A , M a r s d e n P D , B ar retto A C , J o n e s A C . B io lo g ic a l an d is o e n z y m e id en ti-fic a tio n o f L e is h m a n i a s to c k s fro m p a tien ts a n d d o g s w ith A m e r ic a n M u c o c u ta n e o u s le is h m a n ia s is . In: R e s u m o s d a I X R eu n iã o A n u a l P e s q u is a b á s ic a e m d o e n ç a d e C h a g a s, (c o m u n ic a ç ã o n.° 9 7 ) , C a x a m b u , M in a s G e r a is , p. 8 9 , 1 9 8 2 .
5 . C u b a C A C . L e is h m a n io s e te g u m e n ta r e m á r e a en d ê m ic a d o E s ta d o d a B a h ia , B r a sil. C a r a c te r iz a ç ã o e c la s s if ic a ç ã o d e L e is h m a n i a d o h o m e m e d o c ã o d o m é s tic o e a s p e c t o s c o m p o r ta m e n ta is d e L . b r a z ilie n s is b r a z ilie n s is . T e s e d e D o u to r a d o , U n iv e r s id a d e F e d e r a l d e M in a s G e r a is , B e lo H o r iz o n te , 1 9 8 3 .
6 . D ia s M , M a y r in k W , D e a n e L M , C o s t a C A , M a g a lh ã e s P , M e lo M N , B a tis ta S M , A r a ú jo F G , C o e lh o M V , W illia m s P . E p id e m io lo g ia d a le is h m a n io s e teg u m e n ta r a m e r ic a n a I. E s tu d o d e r e se r v a tó r io s e m á rea e n d ê m ic a n o E s ta d o d e M in a s G e r a is . R e v is t a d o I n s titu to d e M e d ic in a T r o p ic a l d e S ã o P a u lo 1 9 : 4 0 3 - 4 1 0 , 1 9 7 7 .
7 . D e S á M H P , L im a L M P , R o itm a n I. T h e Identification
o i L e is h m a n i a b y is o e n z y m e s In: R e s u m o s d a I X R e u n iã o A n u a l P e s q u is a b á s ic a e m d o en ças d e C h a g a s (c o m u n ic a ç ã o n.° 9 9 ) , C a x a m b u , M in a s G e r a is , p . 9 0 , 1 9 8 2 .
8 . H errer A . N o t a p relim in a r s o b re le is h m a n ia s is n a tu ra l e n p erros. R e v is t a d e M e d ic in a E x p e r im e n t a l( L im a ) 7 : 6 2 -6 9 , 1 9 4 8 .
9 . H errer A . E s tú d io s s o b re le is h m a n ia s is teg u m e n ta r ia en el P eru . V L e is h m a n ia s is n a tu ra l e n p erro s p r o c e d e n te s d e lo c a lid a d e s u tó g e n a s . R e v is ta d e M e d ic in a E x p e rim en ta l (L im a ) 8: 8 7 - 1 1 8 , 1 9 4 9 /5 1 .
1 0 . H errer A , C h r iste n se n H A . N a tu r a l c u ta n e o u s le is h m a n ia s is a m o n g d o g s in P a n a m á . T h e A m e r ic a n J ou rn a l o f T ro p ic a l M e d ic in e an d H y g ie n e 2 5 : 5 9 - 6 3 , 1 9 7 6 .
1 1 . K r eu tzer R D , C h r is te n s en H A . C h a r a c te r iz a tio n o f
L e is h m a n ia s p ., b y is o e n z y m e e le c tr o p h o r e s is . T h e A m e r ic a n J o u r n a l o f T r o p ic a l M e d ic in e a n d H y g ie n e 2 9 :
1 9 9 -2 0 8 , 1 9 8 0 .
1 2 . L a in s o n R S h a w JJ. L e is h m a n ia a n d le is h m a n ia s is o f th e N e w W o rld : ta x o n o m ic p r o b le m s . B ritis h M e d ic a i B u lle tin 2 8: 4 4 - 4 8 , 1 9 7 2 .
1 3 . L a in s o n R , S h a w JJ. L e is h m a n ia a n d le is h m a n ia s is o f the >New W o r ld w ith p a rticu la r r e fer e n ce to B ra z il. B u lle tin o f t h e P a n A m e r ic a n H e a lth O r g a n iza tio n 7 : 1 - 1 9 , 1 9 7 3 .
1 4 . L a in s o n R W a r d R D , S h a w JJ. L e is h m a n ia in fleb o -to m id s a n d flie s . V I . Im p o r ta n c e o f h in d g u t d e v e lo p m e n t in d is tin g u is h in g b e t w e e n p a r a s ite s o f th e L e is h m a n i a m e x ic a n a a n d L . b r a z ilie n s is c o m p le x e s . P r o c e e d in g s o f th e R o y a l S o c ie t y , L o n d o n . 1 9 9 : 3 0 9 - 3 2 0 , 1 9 7 7 .
1 5 . L a in s o n R , S h a w J J . T h e r o le o f a n im a is in e p id e m io lo g y o f S o u th A m e r ic a L e is h m a n ia s is . In: L u m s d e n , W H R & E v a n s , D A (e d s ) B io lo g y o f th e K in eto p la s tid a . V II. L o n d o n an d N e w Y o rk . A c a d e m ic P r e s s pp. 1 -1 1 6 , 1 9 7 9 .
1 6 . L a in s o n R . L eis h m a n ia l p a ra s ite s o f m a m m a ls in re la tio n to h u m a n d is e a s e . S y m p o s iu m Z o o lo g y , L o n d o n 5 0 : 1 3 7 - 1 7 9 , 1 9 8 2 .
1 7 . M a r z o c h i M C A , S o u z a W J S , C o u tin h o S G , T o le d o L M , G r im a ld i G , M o m e n H . E v a lu a tio n o f d ia g n o stic c r iter ia in h u m a n a n d c a n in e m u c o c u t a n e o u s le is h m a n ia s is in a R io d e J a n e ir o d is trict w h ere L e is h m a n i a b r a z ilie n s is o c c u r s. In: R e s u m o s d a I X R e u n iã o A n u a l P e s q u is a b á s ic a e m d o e n ç a d e C h a g a s, (c o m u n ic a ç ã o n.° 4 6 ) C a x a m b u , M in a s G e r a is , p . 6 3 , 1 9 8 2 .
1 8 . M a r z o c h i M C A , G rim a ld i Jr G , M o m e n H , M c M a h o n P r a tt D . V is c e r a l L e is h m a n i a b r a z ilie n s is b r a z ilie n s is
in a d o g in R io d e J a n e ir o (B r a z il) In: R e s u m o s d a X R e u n iã o A n u a l P e s q u is a b á s ic a e m d o e n ç a d e C h a g a s,
(c o m u n ic a ç ã o B I 3 0 ) C a x a m b u , M in a s G e r a is ,
pp. 3 - 1 5 , 1 9 8 3 .
1 9 . M a z z a S . E x is t ê n c ia d e la le is h m a n ia s is c u ta n e a e n e l p erro e n la R e p u b lic a A rg e n tin a . B o le tin d e i I n s titu to d e C lin ic a y Q u iru rg ia (B u e n o s A ir e s ) 2: 1 4 7 - 1 4 9 , 1 9 2 6 .
2 0 . M a z z a S . L e is h m a n ia s is te g u m e n ta r ia v is ce r a l. B o le tin d e i In stitu to d e C lin ic a y Q u iru r g ia (B u e n o s A ir e s ) 2: 2 0 9 - 2 1 6 , 1 9 2 6 .
2 1 . M a z z a S . L e is h m a n ia s is c u ta n e a e n e l c a b a llo y n u e v a o b s e r v a c ió n d e la m is m a e n e l p erro . B o le t in d e i I n s titu to d e C lin ic a y Q u iru rg ia (B u e n o s A ir e s ) 3 : 4 6 2 - 4 6 4 , 1 9 2 7 .
2 2 . M a y r in k W , W illia m s P , C o e lh o M V , D ia s M , V ia n n a M a r tin s S A , M a g a lh ã e s P , C o s t a C A , F a lc ã o A R M e lo M N , F a lc ã o A L . E p id e m io lo g y o f d er m a l le is h m a n ia s is in th e R io D o c e V a lle y , S ta te o f M in a s G e r a is , B ra zil. A n n a ls o f T r o p ic a l M e d ic in e an d P a r a s ito lo g y 7 3 : 1 2 3 -1 3 7 , -1 9 7 9 .
B a rre to A C , C u b a C C , V e x e n a t J A , R o s a A C , M a r s d e n P D , M a g a l h ã e s A V . C a r a c te r ís tic a s e p id e m io ló g ic a s d a le ish m a n io s e te g u m e n ta r a m e r ic a n a em u m a re g iã o e n d ê m ic a d o e s ta d o d a B a h ia . I I L e i s h m a n i o s e c a n in a . R e v is ta d a S o c ie d a d e B ra sile ir a de M e d ic in a T r o p ic a l 1 7: 5 9 -6 5 , A b r-J u n , 1 9 8 4
2 3 . M c M a h o n P ra tt D , D a v id J R . M o n o c lo n a l a n tib o d ie s th at d is tin g u is h b e tw e e n N e w W o r ld s p e c ie s o fL e is h m a -nia. N a tu r e 2 9 1 : 5 8 1 - 5 8 3 , 1 9 8 1 .
2 4 . M ile s M A , P o v o a M , S o u z a A A , L a in s o n R , S h a w JJ. S o m e m e th o d s for e n z y m ic c h a r a c te r iz a tio n o f L a tin A m e r ic a n L e is h m a n ia , w ith p a rticu la r re fe re n c e to
L e is h m a n ia m e x ic a n a a m a z o n e n s i s an d s u b - s p e c ie s o f
L e is h m a n i a h ertig i. T r a n s a c tio n s o f th e R o y a l S o c ie t y o f T r o p ic a l M e d ic in e an d H y g ie n e 7 4 : 2 4 3 - 2 5 2 , 1 9 8 0 .
2 5 . M ile s M A , L a in s o n R , S h a w JJ, P o v o a M , S o u z a A A . L e is h m a n ia s is in B r a z il. X V . B io c h e m ic a l d is tin c tio n o f
L e is h m a n ia m e x ic a n a a m a z o n e n s i s , L . b r a z ilie n s is b r a z ilie n s is an d L . b r a z ilie n s is g u y a n e n s is a e tio lo g ic a l ag en ts o f c u ta n e o u s le is h m a n ia s is in th e A m a z o n B a s in o f B r a z il. T r a n s a c tio n s o f th e R o y a l S o c ie t y o f T r o p ic a l M e d ic in e an d H y g ie n e 7 5: 5 2 4 - 5 2 9 , 1 9 8 1 .
2 6 . P e d r o s o A M . L e is h m a n ia lo c a l d e c ã o . A n n a is P a u lis ta s d e M e d ic in a e C iru rg ia 1: 3 3 - 4 0 , 1 9 1 3 .
2 7 . P e d r o s o A M . I n f e c ç ã o d e c ã o p e la L e is h m a n i a tr o p i ca l. R e v is ta d e M e d ic in a d e S ã o P a u lo 2 3 : 4 2 - 4 5 , 1 9 2 3 . 2 8 . P ifa n o F . L a le is h m a n ia s is teg u m e n ta r ia e n e l e s ta d o Y a r a cu y , V e n e z u e la . R e v is t a P o lic lin ic a (C a r a c a s ) 9: 3 6 3 9 - 3 6 5 8 , 1 9 4 0 .
2 9 . P o n s A R , L o n d r e s H . L eis h m a n ia s is te g u m e n ta r ia a m e rica n a e n e l a s e n ta m ie n to c a m p e s in o d e Z ip a y a re. A s p e c to s e p id e m io ló g ic o s , c lin ic o s e in m u n o ló g ic o s . Su im p o rta n c ia e n la R efo r m a A g ra ria . K a s m e r a 3: 5 -5 9 , 1 9 6 8 .
3 0 . R o m a n a C , N a je r a L M , C o n e jo s M , A b a lo s J W I. L e is h m a n ia s is teg u m e n ta ria e n p erro s d e T u c u m a n . II. F o c o d o m é s t ic o d e le is h m a n ia s is . A n a le s d e i In s titu to de M e d ic in a R e g io n a l (T u c u m a n ) 2: 2 8 3 - 2 9 2 , 1 9 4 9 .
3 1 . S h e r lo c k I, A lm e id a S P . N o ta s so b r e le is h m a n io s e c a n in a n o E s ta d o d a B a h ia . R e v is ta B ra sileira d e M a -la r io lo g ia e D o e n ç a s T r o p ic a is 2 1: 5 3 5 - 5 3 9 , 1 9 6 9 .
3 2 . V e x e n a t J A , C u b a C C , L la n o s E A , R o s a A C , B arretto A C , M a r sd e n P D . D e s c r iç ã o d e u m d is p o s itiv o para c o le ta , in f e c ç ã o e x p er im e n ta l e m a n u te n çã o d e fleb o -to m ín e o s a d u l-to s (L u tz o m y ia , D ip te r a , P s y c h o d id a e ) In: R e s u m o s d a I X R eu n iã o A n u a l P e s q u is a b á s ic a em d o e n ç a d e C h a g a s, (c o m u n ic a ç ã o n.° 2 3 0 ) , C a x a m b u , M in a s G e r a is , p . 1 5 7 , 1 9 8 2 .
3 3 . W a lt o n B C , S h a w J J , L a in so n R . O b se r v a tio n s o n in v itro c u ltiv a tio n o f L e i s h m a n i a b ra z ilie n s is . Jo u rn a l o f P a r a s ito lo g y 6 3 : 1 1 1 8 - 1 1 1 9 , 1 9 7 7 .
