APRESENTAÇÃOFLÁVIA 27 08 2010

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LABORATÓRIO DE TECNOLOGIA FARMACÊUTICA LABORATÓRIO DE TECNOLOGIA FARMACÊUTICA

PROGRAMA DE PÓS

PROGRAMA DE PÓS--GRADUAÇÃO EM GRADUAÇÃO EM

PRODUTOS NATURAIS E SINTÉTICOS BIOATIVOS PRODUTOS NATURAIS E SINTÉTICOS BIOATIVOS

LABORATÓRIO DE PSICOFARMACOLOGIA

Flávia Negromonte Souto Maior

Doutoranda / LTF / UFPB

Prof. Dr. Reinaldo Nóbrega de Almeida

Orientador

LABORATÓRIO DE PSICOFARMACOLOGIA

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Introdução

Uso de óleos aromáticos para fins medicinais Uso de óleos aromáticos para fins medicinais

AROMATERAPIA AROMATERAPIA Tratamento de dores crônicas, depressão,

Tratamento de dores crônicas, depressão, insônia, doenças relacionadas ao estresse. insônia, doenças relacionadas ao estresse.

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PovosPovos primitivosprimitivos

Egito,Egito, ChinaChina ee ÍndiaÍndia

Grécia

Grécia ee RomaRoma antigaantiga

GréciaGrécia ee RomaRoma antigaantiga

UsoUso dede ervaservas parapara finsfins::

curativoscurativos religiososreligiosos estéticosestéticos

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Encontrados

Encontrados emem plantasplantas aromáticasaromáticas

Estruturas

Estruturas molecularesmoleculares complexascomplexas Estruturas

Estruturas molecularesmoleculares complexascomplexas

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Pele

Vias respiratórias

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Dois

Dois caminhos

caminhos::

Pulmões,

Pulmões, via

via traquéia

traquéia

Sistema

Sistema Nervoso

Nervoso Central

Central

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CavidadeCavidade nasalnasal LaringeLaringe TraquéiaTraquéia PulmãoPulmão

PenetraPenetra nosnos brônquios,brônquios,

bronquíolos

bronquíolos ee alvéolosalvéolos

AtingeAtinge aa correntecorrente sangüíneasangüínea

a

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Sem

Sem barreirasbarreiras

Atinge

Atinge diretamentediretamente oo sistema

sistema límbicolímbico..

AmígdalasAmígdalas AmígdalasAmígdalas HipocampoHipocampo TálamoTálamo HipotálamoHipotálamo

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Influência

emoçõesemoções comportamento comportamento comportamentocomportamento memóriamemória humorhumor

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Linalol

Monoterpeno

Principal componente volátil de

OEs Encontrados em várias Encontrados em várias espécies de plantas aromáticas

UsadasUsadas nana aromaterapiaaromaterapia Ex

Ex.:.: sedativas,sedativas, analgésicas,analgésicas, hipnóticas

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Objetivos

Investigar

Investigar os

os efeitos

efeitos do

do linalol

linalol inalado

inalado sobre

sobre::

aa ansiedade,ansiedade, comportamentocomportamento agressivoagressivo ee interaçãointeração socialsocial

em

em camundongoscamundongos;; em

em camundongoscamundongos;;

aa fasefase dede aquisiçãoaquisição dada memóriamemória nana tarefatarefa dede esquivaesquiva

inibitória inibitória..

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MATERIAL E MÉTODOS

Animais

CamundongosCamundongos albinosalbinos

Machos,Machos, adultosadultos

22 meses,meses, 4040 -- 5050gg

FundaçãoFundação EstadualEstadual dede

Produção

Produção ee PesquisaPesquisa

2222 ±± 22°°CC

CicloCiclo claro/escuroclaro/escuro-- 1212hh

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Drogas

Linalol e Diazepam Sigma Aldrich

Linalol

(1 e 3 %) Em 1% de Tween 80(v/v)

Diazepam

(0,5 e 1mg/kg) Em 10% de PEG (v/v) Em 1% de Tween 80(v/v) _{Em 10% de PEG (v/v)}

Grupos controle

•Tween 80 1% inalado •Salina intraperitoneal

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Aparelho de Inalação

CâmeraCâmera dede vidrovidro cilíndricacilíndrica

Diâmetro interno Diâmetro interno –– 15 cm15 cm

Dois vaporizadores na Dois vaporizadores na

parte superior parte superior parte superior parte superior

Contínua liberação do Contínua liberação do

odor. odor.

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Cromatografia Gasosa

Determinação da concentração real de linalol de linalol

Sistema GC/MSShimadzu QP5050A

Coluna HP-5 (30m 0,25 mm 0,25 mm) + Análise isotérmica a 120ºC

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Resultado da análise

O sistema necessitou de 15 min para saturar a atmosfera e

estabilizar o piso.

Tempo zero – quando os animais eram colocados no aparelho após os 15 min de estabilização.

Experimentos pilotos

indicaram 60 min como período de inalação adequado para obter os efeitos esperados

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Análises Estatísticas

Claro-Escuro, Interação Social e Agressividade Territorial

ANOVA seguido de teste Duncan (p<0,05)

Esquiva inibitória Esquiva inibitória

Teste não-paramétrico de Kruskal-Wallis

Teste de Mann-Whitney, bibi--caudalcaudal –– para comparar para comparar

tratamentos tratamentos

Teste de Wilcoxon – diferenças entre latências de mesmos

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Teste do Claro

Teste do Claro--Escuro

Escuro

Cx retangular

(46x27x30cm) Aparato 60W 60W

2 compartimentos

Passagem central.

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Teste do Claro

Teste do Claro--Escuro

Escuro

Aversão dos roedores por

lugares iluminados;

Fundamento

Exploração espontânea

em ambiente novo.

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Cada camundongo

-compartimento claro

Procedimento Experimental

Teste do Claro

Teste do Claro--Escuro

Escuro

compartimento claro

Exploração por 5 min.

• Sala escura e silenciosa • 4 caixas ao mesmo tempo

• Software The Observers XT5.0 • Gravação em vídeo

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Latência para 1º cruzamento

Tempo gasto no compartimento

Parâmetros avaliados

Teste do Claro

Teste do Claro--Escuro

Escuro

Tempo gasto no compartimento

claro

Numero de cruzamentos entre os

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Teste da Esquiva Inibitória

Caixa plástica (30x30x40cm) Aparato

Piso = grade

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Teste da Esquiva Inibitória

A punição de um animal normal com um

choque após a realização de um

Fundamento

choque após a realização de um determinado comportamento, leva a inibição desse comportamento

pelo animal (memória-aprendizagem).

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Duas Sessões:

Treinamento

Teste da Esquiva Inibitória

Teste

Camundongo – Plataforma

Registrada a latência para descer

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Sessão de Treinamento

Choque nas patas (0.3mA, 15s)

Teste da Esquiva Inibitória

Sessão de Teste

90 min depois (memória de curta

duração; STM)

24 h depois - (memória de longa

duração; LTM)

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CaixaCaixa acrílicaacrílica transparentetransparente

sem

sem coberturacobertura

Aparato

sem

sem coberturacobertura

NoNo cantocanto dada sala

sala--Lâmpada

Lâmpada vermelhavermelha dede 40

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AnimaisAnimais expostosexpostos aa

ambientes

ambientes novosnovos -- reduzirreduzir

Fundamento

ambientes

ambientes novosnovos -- reduzirreduzir ou

ou atéaté suprimirsuprimir suasua interação

interação comcom outrosoutros animais

animais..

(LEITE & SIQUEIRA, 2006) (LEITE & SIQUEIRA, 2006)

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AnimaisAnimais climatizadosclimatizados emem ciclociclo

claro

claro--escuroescuro reversoreverso (início(início dada fase

fase claraclara ((2020hh0000))

Procedimento

fase

fase claraclara ((2020hh0000))

SeparadosSeparados emem gruposgrupos dede 88/cx/cx -- 22

semanas

semanas antesantes dosdos experimentosexperimentos

AnimaisAnimais aosaos parespares nana arenaarena

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Cheirar e limpar o parceiro. Cheirar e limpar o parceiro.

Perseguir, montar ou Perseguir, montar ou

Parâmetros

Perseguir, montar ou Perseguir, montar ou

empurrar o outro. empurrar o outro.

NãoNão registrouregistrou--sese interaçãointeração

social

social passivapassiva

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Animais residentes

Experimentais e controle Individualmente colocados

em cxs plásticas

Intrusos

Alojados em grupos de 6 animais

Aparato

Caixas plásticas dos animais residentes

Iluminação da sala – Lâmpada vermelho-escuro 25W Focos difuso para minimizar sombras

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Fundamento

Roedores , como outras espécies de animais, tendem a defender seus tendem a defender seus

territórios de intrusos.

Testa possíveis efeitos de uma droga sobre o

comportamento agressivo de animais.

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Pares de camundongos (N=8)Pares de camundongos (N=8)

1 residente e 1 visitante 1 residente e 1 visitante

Procedimento

1 residente e 1 visitante1 residente e 1 visitante

Pesos correspondentesPesos correspondentes

Gravação do comportamento Gravação do comportamento

em vídeo (10 min). em vídeo (10 min).

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Latência para 1Latência para 1°° ataqueataque

Parâmetros

Número de ataquesNúmero de ataques

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LinalolLinalol inaladoinalado apresentouapresentou indicativosindicativos dede efeitoefeito

ansiolítico

ansiolítico emem camundongoscamundongos nono testeteste dodo claroclaro--escuro,escuro, corroborado

corroborado comcom osos testestestes dodo comportamentocomportamento agressivoagressivo e

e interaçãointeração social,social, semelhantesemelhante aoao DZPDZP;; e

e interaçãointeração social,social, semelhantesemelhante aoao DZPDZP;;

ComoComo esperadoesperado porpor drogasdrogas ansiolíticas,ansiolíticas, oo linalollinalol 33%%

provocou

provocou efeitoefeito amnésicoamnésico nono testeteste dada esquivaesquiva inibitória,

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EstesEstes dados,dados, associadosassociados aa trabalhostrabalhos anteriores,anteriores, sugeremsugerem

que

que oo linalollinalol apresentaapresenta efeitoefeito sedativosedativo ee ansiolítico

ansiolítico emem roedoresroedores ee humanoshumanos;;

A soma destes resultados aos obtidos anteriormente

(Linck et al., 2009) representamrepresentam úteisúteis informaçõesinformações

(Linck et al., 2009) representamrepresentam úteisúteis informaçõesinformações para

para oo desenvolvimentodesenvolvimento dede incensosincensos ee outrosoutros tipos

tipos dede aromatizadoresaromatizadores dede ambienteambiente parapara minimizar

minimizar ansiedadeansiedade semsem induzirinduzir sedaçãosedação marcantemarcante ouou déficit

déficit motormotor;;

EsteEste trabalhotrabalho complementacomplementa estudosestudos préviosprévios queque

caracterizam

caracterizam osos efeitosefeitos psicofarmacológicospsicofarmacológicos dodo linalollinalol ee de

de óleosóleos ricosricos emem linalollinalol,, inalados,inalados, dandodando suportesuporte para

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