Salmonella Enteritidis
COMPARISON OF TWO DIAGNOSTIC METHODS OF Salmonella
Enteritidis
SIMONE ROSA DIDONÉ1, CAROLINA DE OLIVEIRA FREITAS1,
AMANDA FERNANDES NUNES¹, MARISTELA LOVATO1.
1 Laboratório Central de Diagnóstico em Patologia Aviária, Universidade
Federal de Santa Maria.
Resumo
Doenças transmitidas por alimentos são um problema mundial, inclusive as causadas por Salmonella, o que justifica o controle desse patógeno em alimentos. O objetivo desta pesquisa foi avaliar a eficácia de um kit comercial de detecção rápida de Salmonella Enteritidis comparado ao bioquímico padrão. Uma cultura pura de Salmonella Heidelberg foi incubada 24 horas em água peptonada, diluída em água salina 10 vezes e aplicadas em ágar XLD e no kit teste. O kit teve resultado positivo para as diluições 1, 2 e 3. Na contagem bacteriana em placas as diluições 1 a 5 tiveram incontáveis colônias de S. Heidelberg, enquanto que na diluição 6 contou-se 17 UFC e nas demais diluições (7, 8, 9 e 10) não houve crescimento bacteriano. Logo, o resultado obtido nos mostra que o kit consegue detectar salmonelas somente em altas doses, ao contrário do bioquímico padrão. Logo, mesmo o kit tendo a grande vantagem de resultado entre 24 e 48 horas, o teste bioquímico é mais seguro.
Palavras-chave: saúde pública, sanidade avícola, avicultura e Salmonella Heidelberg.
Abstract
Foodborne illness is a global problem, including those caused by Salmonella, which justifies the control of this pathogen in food. The objective of this research was to evaluate the effectiveness of a commercial kit for rapid detection of Salmonella Enteritidis compared to standard biochemical. A pure culture of Salmonella Heidelberg was incubated 24 hours in peptone water, diluted 10 times in saline water and applied on XLD agar and the test kit. The kit was positive dilutions for 1, 2 and 3. In bacterial plate count at dilutions 1 to 5 had countless colonies of S. Heidelberg, while the dilution 6 a number of 17CFU were counted and the other dilutions (7, 8 , 9 and 10) there was no bacterial growth. Therefore, the result shows that the kit can detect Salmonella only in high doses, in contrast to biochemical standard. Therefore, even if the kit has the great advantage results between 24 and 48 hours, the biochemical test is safer.
Key-words: public health, poultry health, aviculture, and Salmonella Heidelberg.
Introdução
Doenças transmitidas por alimentos são um problema mundial de saúde pública, inclusive as causados pelo gênero Salmonella, e isso
alimentos (Rodrigues, 2002). Diversos são os produtos que correm o risco de serem contaminados por Salmonella, inclusive produtos de origem animal como produtos cárneos. Além de representarem uma ameaça à saúde pública, também causam preocupação à toda cadeia avícola (Terra, 2001). Tendo isso em vista, o objetivo desta pesquisa foi avaliar a eficácia de um kit de detecção rápida de Salmonella spp. comercial.
Material e métodos
Para realização da pesquisa utilizou-se um kit comercial de detecção rápida de Salmonella Enteretidis. Buscou-se avaliar a sensibilidade e eficácia do kit comparado com o teste bioquímico padrão recomendado pela Organização Mundial de Saúde Animal. A amostra utilizada foi uma cultura pura de Salmonella Heidelberg, na qual foi incubada por 24 horas em água peptonada e posteriormente diluída 10 vezes em água salina estéril. Alíquotas de 100 µL das diluições foram subsequentemente plaqueadas em ágar XLD para contagem de Unidades Formadoras de Colônias (UFC) e outra alíquota foi utilizada no diagnóstico através do kit comercial.
Resultados
A análise de sensibilidade do kit de detecção rápida, que teve com finalidade a averiguação da concentração mínima de detecção de Salmonella Enteritidis, encontrou positividade nas diluições 1, 2 e 3. Já na contagem bacteriana em placas evidenciou-se que nas diluições 1 a 5 houve incontáveis colônias de S. Heidelberg, na diluição 6 pôde-se contar 17 UFC, nas demais diluições (7, 8, 9 e 10) não houve crescimento bacteriano.
Discussão
Trabalhos semelhantes foram realizados comparando métodos de diagnóstico, como o feito por Dickel (2014) onde comparou o diagnóstico através do microbiológico convencional, uma técnica de ELISA e outra técnica de reação em cadeia pela polimerase (PCR). O resultado obtido foi de 56,67% de positividade quando utilizado o microbiológico convencional, 71% com ELISA e 75% utilizando PCR. Tapchaisri et al. (1999) também utilizaram essas três técnicas de diagnóstico em amostras de alimentos de origem avícola e suinícola. Das 200 amostras analisadas, sendo 100 de aves e 100 de suínos, 7% e 20%, 7% e 23% e 9% e 33% foram positivas para Salmonella no diatnóstico através do microbiológico convencional, PCR e ELISA, respectivamente. Ou seja, o teste ELISA demonstrou ser o mais simples, rápido, sensível, específico, e apresentar baixo custo comparado aos outros.
Por sua vez, Fujiwara (1999) comparou o diagnóstico pela técnica microbiológica padrão e o BIND teste rápido, e comprovou a concordância entre os resultados em amostras de alimentos, porém enfatizando que cada técnica tem pontos positivos e negativos.
Conclusão
O resultado obtido neste trabalho nos mostra que o kit de detecção rápida para Salmonella Enteritidis estudado consegue detectar salmonelas somente em altas doses, ao contrário do bioquímico padrão. O kit tem a grande vantagem de conseguir resultado entre 24 e 48 horas, de acordo com o tipo de amostra, diferentemente da metodologia oficial na qual são necessários cinco dias.
Como se pôde identificar, diversos produtos estão no mercado para detecção de patógenos e mesmo eles tendo a técnica de
cautela ao comparar esses produtos avaliando o custo benefício oferecido.
Bibliografia
Dickel et al. Análise comparativa entre microbiologia convencional, ELISA e PCR para detecção de Salmonella enteritidis, S. typhimurium, S. gallinarum e S. pullorum em carne de frango contaminada artificialmente. R. bras. Ci. Vet., v. 12, n. 1/3, p. 5-10, jan./dez. 2005. Fujiwara et. al. Comparação entre o método cultural clássico e o bind test rápido para pesquisa de salmonella sp em alimentos. Boletim Centro de Pesquisa de Processamento de Alimentos. v. 17, n. 1. 1999. RODRIGUES, L.B. Levantamento sorológico e detecção de Salmonella em granjas de postura comercial de pequeno porte em um município do Estado do Rio Grande do Sul. 2002. 88 f. Dissertação (Mestrado) – Faculdade de Veterinária – Universidade Federal do Rio Grande do Sul, 2002.
TERRA, C. Avicultura de postura na virada do milênio. Revista Rural, ano. IV, p. 50, 2000. [on line] Disponível em URL: http://www.megaagro. com.br. Acesso em: 5 jun. 2015.
Tapchaisri, P.; Wangroongsarb, P.; Panbangred, W.; kalambaheti, T.; Chongsa-nguan, M.; Srimanote, P.; Kurazono, H.; Hayashi, H.; Chaicumpa, W. Detection of Salmonella contamination in food samples
by dot-ELISA, DNA amplification and bacterial culture. Asian Pac J Allergy Immunol, Mar., v. 17, n. 1, p. 41-51, 1999.
