Diversidade e estrutura genética de populações de Mangabeira (Hancornia speciosa Gomes) na Zona da Mata de Pernambuco

Universidade Federal Rural de Pernambuco Programa de Pós-Graduação em Agronomia

Área de Concentração em Melhoramento Genético de Plantas

Diversidade e estrutura genética de populações de

Georgia Vilela Martins

Orientador: Prof. Dr. Edson Ferreira da Silva Co-orientador: Dr. Ildo Eliezer Lederman

Diversidade e estrutura genética de populações de

Mangabeira (Hancornia speciosa Gomes)

Roteiro de apresentação

Introdução

Justificativa

Objetivos

Material e métodos

Material e métodos

Resultados esperados

Cronograma

Orçamento

Introdução

Classificação botânica

Família Apocinaceae Genero Hancornia

Espécie Hancornia speciosa Gomes.

A mangabeira é uma espécie nativa do Brasil.

Introdução

Região Nordeste

Região Nordeste

Látex, casca e raízes

Frutos

Medicina popular Fonte de renda

Mangabas

Frutos com ampla aceitação no mercado

(Sorvetes, sucos, polpas, além de xaropes e vinagre).

Introdução

Segundo Silva Junior (2006) o processamento só não é maior

por que a produção não é suficiente.

Situação das mangabeiras em Pernambuco

Degradação das áreas nativas Atividade antóropica

Justificativa

Atividade antóropica

Redução das populações naturais

Justificativa

Em Pernambuco

Silva Junior et al. (2008) mapearam 11 populações de mangabeira.

mangabeira.

Justificativa

Justificativa

Aspecto socioeconômico

Fonte de renda catadoras

Potencial para agricultura familiar

• Ministério do Desenvolvimento Agrário (MDA) prevê a inserção tecnológica da cultura da mangaba, com a multiplicação de pomares nos assentamentos da região litorânea do Nordeste (EMATER, 2006).

Introdução

Importância para a fruticultura tropical

Potencial de expansão para novos mercados como Sul e

Sudeste de país (Ferreira, 2006).

Está entre as dez espécies selecionadas como de altíssima

prioridade pelo programa Plantas do Futuro do CNPq/World

Bank/GEF/MMA/Probio, com maior potencial de uso

Recursos genéticos desconhecidos

Necessita-se de conservação, caracterização e pesquisas para a utilização e aproveitamento do potencial da espécie.

Justificativa

Preservação das populações naturais

Fontes de germoplasma;

Justificativa

A máxima quantidade dos recursos genéticos é fundamental para a preservação de uma espécie (Moran e Hopper, 1987 )

Programas aproveitamento e conservação da espécie é essencial o conhecimento da variabilidade genética existente nas populações.

Justificativa

Estudos de diversidade e estrutura genética

Quantificar a variabilidade genética entre e dentro e entre

populações.

Frequências alélicas

Heterozigosidade

Endogamia

Número de alelos por locos

Taxa de fluxo gênico

Estrutura genética

É a distribuição da variabilidade genética entre e dentro

de populações.

Justificativa

de populações.

Justificativa

Marcadores bioquímicos

Isoenzimas

co-dominantes

Muito utilizados para análise de diversidade genética em

populações naturais

Objetivo Geral

Caracterizar a variabilidade genética de populações de

mangabeira na Zona da Mata de Pernambuco visando à

preservação desses recursos genéticos.

Objetivos Específicos

Analisar a divergência genética entre e dentro de 11

populações de mangabeira na Zona da Mata de Pernambuco;

Estimar os níveis de endogamia das populações de

mangabeira na Zona da Mata de Pernambuco; mangabeira na Zona da Mata de Pernambuco;

Avaliar a diversidade genética nas populações remanescentes

de mangabeira no Estado de Pernambuco.

Propor estratégias adequadas para a conservação de tais

Coleta

Material e métodos

• Tecido foliar

• Identificação dos indivíduos

11 populações naturais em PE

utilizando o GPS

•Armazenamento do material a -20 °C

Extração e eletroforese

Extração das enzimas

Maceração 300mg tecido foliar

1ml tampão extrator (n° 1 Alfenas et al., 1998)

Material e métodos

1ml tampão extrator (n° 1 Alfenas et al., 1998)

Eletroforese horizontal gel de amido (13%)

Condições de corrida

200- 260 V 15-20 mA 6:00-6:30 h

Material e métodos

Eletroforese horizontal

Sistemas tampão gel/eletrodo

TC (Tris Citrato, pH 7,5), TCB (Tris Citrato Borato, pH 7,5) e LB (Lítio Borato, pH 8,5)

Material e métodos

Identificação dos sistemas isoenzimáticos

Corantes específicos

Obtenção bandas visíveis a olho nu

Obtenção bandas visíveis a olho nu

16 sistemas isoenzimáticos

GDH, ACP, SOD, LAP, POX, ADH, CAT, MDH, EST, GOT, GTDH, AKP, ALA, PGI, PGM e ACO.

Análise dos padrões de bandas

Material e métodos

Materiais e métodos

Análise dos dados

Variabilidade genética

Freqüências alélicas
Freqüências alélicas

Heterozigose esperada (He) e Heterozigose observada (Ho)

∑

∑

−

=

−

=

P

H

p

H

1

ˆ

ˆ

1

ˆ

Ho: diversidade observada m: número de alelos

P_ii: freqüência observada de homozigotos para o alelo i p_i: freqüência do alelo i

Porcentagem de locos polimórficos (P)

Materiais e métodos

ST

S

T

H

D

H

=

+

Materiais e métodos

Índice de fixação alélica

Onde,

Ho –estimativa da heterozigose observada

Ho –estimativa da heterozigose observada

Material e métodos

FIT – índice de fixação alélica para o conjunto das populações; FIS - índice médio de fixação alélica dentro das populações; FST - divergência genética entre populações.

Material e métodos

Por meio do Biosys-l será obtida uma matriz de

distância/similaridade genéticas e um representação gráfica da análise de agrupamento através de um dendrograma-UPGMA.

Dendrograma esquemático Dendrograma esquemático

Material e métodos

Para estimar o fluxo gênico (N_m) entre as populações será

utilizada a forma indireta, segundo o modelo proposto por Crow e Aoki (1984)       1

1 Nm = número de migrantes por geração

        −         = 1 ˆ 1 ) 4 1 ( ST F Nm

α

N_m = número de migrantes por geração

n= número de populações

FST = divergência genética entre populações, que será calculado para a

combinação das populações duas a duas utilizando-se também o programa BIOSYS 1.

Resultados esperados

• Espera-se ao final desse projeto, divulgar estudos sobre a

variabildade e estrutura genética das populações de

mangabeira do Estado de Pernambuco, disponibilizar

informações sobre riscos e/ou cuidados para com a erosão informações sobre riscos e/ou cuidados para com a erosão genética nessa espécie visando dar subsídio para se estabelecer estratégias de coservação dos recursos genético da espécie.

• Divulgar, pelo menos um, artigo científico em periódico indexado –A - qualis Capes ou de circulação internacional.

Cronograma

de amido

x x de amido

Teste de sistemas isoenzimáticos x x Coleta de materiais p/ eletroforese e obtenção

dos dados

x x

Tabulação dos dados x x x Apresentação de resultados parciais em

congresso

x x

Analise dos dados x x Redação de trabalhos científicos e de relatório

final

x Defesa de dissertação x

Orçamento

Descrição Quantidade Valor

N-(3 Aminopropyl – Morpholine) Cod. Sigma: 9028 500ml 958,00

NAD Cod. Sigma N-7004 5g 1.443,00

Tris Base Cod. Sigma: T-1503 – VETEC 1Kg 666,00 α-Naftil Acetato Cod. Sigma: N-8505 25g 1.008,00 Isocitric Acid, Na_3, Cod. Sigma: I-1252 5g 973,00 α_{-Naftil Fosfato Ácido de Sódio, Cod. Sigma: N-7000 10g} 725,00 Fast Black K-Salt, Cod. Sigma: F-7253 25g 142,00 Fast Garnet GBC Salt, Cod. Sigma: F-8761 5g 615,00

MTT, Cod. Sigma: M-2128 3g 1.476,00

MTT, Cod. Sigma: M-2128 3g 1.476,00

L-Malic Acid, Na, Salt Cod. Sigma: M-1125 25g 518,00

PMS, Cod. Sigma: P-9625 5g 853,00

Ferrocianato de Potássio Cod. Sigma: P-9387 100g 142,00 PVP, Cod. Sigma: PVP-40 100g 296,00

Sacarose – VETEC 500g 9,70

NADP+_{, Na}

2 Cod. Sigma: N-0505 2g 3.458,00

Tris Citrato de Sódio Trisódico – VETEC 500g 14,10

Ácido cítrico – VETEC 500g 12,50

NaOH- VETEC 500g 14,80

Fast Blue BB Salt 80%- Sigma 25g 1.038,00

Ácido indobultírico 5g 60,20

Georgia Vilela Martins Mestranda em Melhoramento Genético de Plantas

Fˆ _{Melhoramento Genético de Plantas}

georgiavm@gmail.com