Universidade de São Paulo
Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia
Departamento de Patologia
Laboratório de Farmacologia e Toxicologia Laboratório de Neuroimunologia
Estudos pré-clínicos: desafios para a implementação
de laboratórios especializados no Brasil
Prof. Dr. Luiz Carlos de Sá-Rocha
lcsaroch@usp.br
Estratégia de apresentação:
- Conceitos básicos e rápidos sobre estudos
pré-clínicos.
- Desafios brasileiros na área.
- Estudo de caso:
CIALLYX -
Laboratórios & Consultorias
Abordagem inicial aos estudos de segurança (toxicidade).
- Aspectos científicos.
- Aspectos tecnológicos.
- O estado da arte no mundo atual.
- Limites e avanços.
- Limites e avanços.
- A revolução biotecnológica.
- A revolução nanotecnológica.
Principais critérios e elementos que devem nortear o
desenvolvimento de fármacos e medicamentos.
- Qualidade (*)
- Eficácia (*)
- Segurança (*)
(*) Estes critérios valem tanto para um fármaco ou medicamento humano como veterinário.
Principais critérios e elementos que devem nortear o
desenvolvimento de fármacos e medicamentos.
-Efícácia.
-Farmacodinâmica. -Farmacocinética.
-Estudos laboratoriais in vitro e in vivo. -Segurança.
-Consumidor (estudos toxicológicos abrangentes).
-Ocupacional (estudos abrangentes e segurança de operadores). -Ambiental (toxicologia ambiental / análise de risco).
Etapas no desenvolvimento de um novo fármaco de
Interesse médico humano ou veterinário.
-Empresas envolvidas na descoberta de novos medicamentos.
-Número de empresas com projetos para descoberta de novos fármacos e medicamentos.
-EUA / Canadá > 3800. -EUA / Canadá > 3800. -Outros países > 3400.
-Número de empresas que dão algum tipo de suporte. -EUA / Canadá > 3900.
Etapas no desenvolvimento de um novo fármaco de
Interesse médico humano ou veterinário.
-Empresas envolvidas na descoberta de novos medicamentos.
-Número de empresas com projetos para descoberta de novos fármacos e medicamentos. -EUA / Canadá > 3800. CIALLYX Prestadora de serviços: -EUA / Canadá > 3800. -Outros países > 3400.
-Número de empresas que dão algum tipo de suporte estrutural. -EUA / Canadá > 3900.
-Outros países > 3600.
• Agilidade
• Atendimento ao cliente • Foco no cliente e suas necessidades
Etapas no desenvolvimento de um novo fármaco de
Interesse médico humano ou veterinário.
-Depois de descobertos, quais as causas para interrupção do desenvolvimento de novos medicamentos.
- Toxicidade. - Baixa eficácia - Baixa tolerância. - Baixa tolerância.
- Baixa biodisponibilidade nos tecidos alvo.
Obs: Em seres humanos, é na Fase II, ou seja em pacientes, que ocorre o maior número de interrupções em projetos de novos medicamentos pois estes não apresentam-se tão eficientes quanto se avaliava.
Boas Práticas de Laboratório – BPL (“GLP”) para estudos
laboratoriais pré-clínicos.
-Tabela de conteúdos (FDA 21 CFR Part 58 / OECD) - Escopo.
- Definições.
- Aplicabilidade dos estudos.
- Inspeção das instalações e facilidades para a realização dos estudos.
- Manejo e gestão das instalações e facilidades para a realização dos estudos. - Pessoal.
- Diretor de estudo.
- Unidade de Garantia de Qualidade (UGQ).
- Instalações e facilidades para os cuidados com animais - Compatibilidade das diferentes áreas de laboratório.
- Documentação: Laboratórios, biotérios e instalações para espécies alvo. - Gestão da documentação gerada.
- Equipamentos.
Boas Práticas de Laboratório – BPL (“GLP”) para estudos
laboratoriais pré-clínicos.
-Tabela de conteúdos
- Procedimentos Operacionais Padrão – POPs. - Reagentes e soluções.
- Comissão de ética no uso de animais em experimentação. - Controle de amostras (cadeia de custódia).
- Registro de manuseio e pesagem das amostras. - Protocolos.
- Plano de estudos para a condução de estudos pré-clínicos. - Relatórios dos estudos pré-clínicos.
Boas Práticas de Laboratório – BPL (“GLP”) para estudos
laboratoriais pré-clínicos.
-Porque Boas Práticas de Laboratório – BPL.
- Histórico de falsificação de dados pelas empresas de pesquisa contratadas (CRO`s).
- Reposição de animais que haviam morrido durante o teste. - “Elaboração” dos resultados dos estudos (fábrica de laudos).
- Exclusão de resultados “não interessantes” para a viabilização dos produtos. - Em laboratórios norte americanos:
- 25% de todos os resultados eram “fajutados”. - 13% dos dados de hematologia eram ruins.
- 18% dos dados imunotoxicológicos estavam errados ou não tinham “pé nem cabeça”.
Boas Práticas de Laboratório – BPL (“GLP”) para estudos
laboratoriais pré-clínicos.
-Histórico do BPL.
- 1973 / Nova Zelândia / Ato de registro para testes em laboratórios.
- 1979 / Estados Unidos / FDA / Regulamentação das Boas Práticas de Laboratório. - 1980 / Em vários países surgem diretrizes sobre BPL.
- 1981 / Europa / OECD / Princípios das Boas Práticas de Laboratório.
- 1986 / OECD / As diretrizes da OECD são adotadas pela Comunidade Européia. - 1997 / OECD / Revisão das Diretrizes e Princípios da BPL.
Boas Práticas de Laboratório – BPL (“GLP”) para estudos
laboratoriais pré-clínicos.
-Os estudos pré-clínicos realizados hoje no Brasil exigem:
- Observação aos “Princípios de Boas Práticas de Laboratório – BPL” para a condução de estudos pré-clínicos.
- Certificação, dentro do possível, de instituições nacionais e/ou internacionais que verificam os aspectos éticos e de qualidade ligados ao uso de animais em
experimentação (AAALAC, COBEA, etc.).
- Gestão de Qualidade (GQ), com Unidades de Garantia de Qualidade (UGQ) próprias que “enfrentem” auditorias internas (necessárias), de clientes e
patrocinadores (comuns) e externas (agências governamentais nacionais e internacionais, como exemplo: ANVISA, In METRO, MAPA, FDA, etc.).
Boas Práticas de Laboratório – BPL (“GLP”) para estudos
laboratoriais pré-clínicos.
-Papel da Unidade de Garantia de Qualidade (UGQ):
- Revisão do Plano de Estudos e Relatórios visando que estes estejam de acordo com as necessidades regulatórias exigidas.
- Revisão dos Relatórios visando que os resultados apresentados estejam de acordo com os resultados brutos obtidos.
acordo com os resultados brutos obtidos.
- Proceder no local dos testes inspeções das fases críticas do BPL.
- Proceder no local dos testes inspeções nos diferentes departamentos
participantes do estudo para assegurar o cumprimento dos Princípios de BLP. - Reportar suas observações para: Diretor de Estudos, Investigador Principal e
Cientistas Responsáveis para que medidas corretivas sejam tomadas.
- Prevenir eventuais problemas através do treinamento, esclarecimento e da persuasão gentil.
Boas Práticas de Laboratório – BPL (“GLP”) para estudos
laboratoriais pré-clínicos.
-Papel da Unidade de Garantia de Qualidade (UGQ):
- Estudos realizados em diferentes locais (multi centros - multi-site).
Os Princípios de BLP devem ser seguidos em todos os locais e não apenas onde encontra-se o Diretor de Estudo.
- Diretor de Estudo.
- É o individuo responsável pela condução de todos os estudos pré-clínicos. - Investigador Principal.
- É o indivíduo que, num teste realizado em lugares distintos, atua em nome do Diretor de Estudos e define responsabilidades para as diferentes fases do estudo.
Boas Práticas de Laboratório – BPL (“GLP”) para estudos
laboratoriais pré-clínicos.
-Papel da Unidade de Garantia de Qualidade (UGQ):
- Estudos realizados em diferentes locais (multi centros - multi-site).
Os Princípios de BLP devem ser seguidos em todos os locais e não apenas onde encontra-se o Diretor de Estudo.
CIALLYX
Formação de RH na área:
- Diretor de Estudo.
- É o individuo responsável pela condução de todos os estudos pré-clínicos de saúde ou de segurança ambiental.
- Investigador Principal.
- É o indivíduo que, num teste realizado em lugares distintos, atua em nome do Diretor de Estudos e define responsabilidades para as diferentes fases do estudo.
• Atividade constante.
• Micro empresas tecnológicas são formadoras de RH
especializados.
• Atividades muito
especializadas (ex:patologia toxicológica – experiência ACVP / EUA)
Boas Práticas de Laboratório – BPL (“GLP”) para estudos
laboratoriais pré-clínicos.
-Objetivos: -Credibilidade. -Integridade. -Qualidade do trabalho. -Qualidade do trabalho. -Vantagens:-Aceitação de resultados obtidos.
-Ferramentas para comprovação da excelência dos laboratórios e pessoal envolvidos.
Boas Práticas de Laboratório – BPL (“GLP”) para estudos
laboratoriais pré-clínicos.
-Objetivos: -Credibilidade. -Integridade. -Qualidade do trabalho. CIALLYX Desafio de qualidade e relacionamento: -Qualidade do trabalho. -Vantagens:-Aceitação de resultados obtidos.
-Ferramentas para comprovação da excelência dos laboratórios e pessoal envolvidos.
relacionamento:
• Produto = CONFIANÇA • Conquistar a confiança do cliente
Testes toxicológicos que fazem parte da garantia de
segurança para um produto farmacêutico.
Programas básicos de estudos toxicológicos:
- In vitro (triagem)
- Aguda (mínimo necessário)
- Aguda (mínimo necessário)
- Dose repetida - Sub-crônica - Genotoxicidade
- Crônica (podem ser requisitados)
Testes toxicológicos que fazem parte da garantia de
segurança para um produto farmacêutico.
Programas básicos de estudos toxicológicos:
- In vitro (triagem)
- Aguda (mínimo necessário)
CIALLYX
Desafio em C&T:
- Aguda (mínimo necessário)
- Sub-crônica - Genotoxicidade
- Crônica (podem ser requisitados)
- Testes especial
• Implementação de novos protocolos.
• Validação de protocolos • Experiência crescente
Testes toxicológicos que fazem parte da garantia de
segurança para um produto farmacêutico.
OECD Guidelines for the Testing of Chemicals Section 4: Health Effects - EXEMPLOS
401-Acute oral toxicity 402-Acute dermal toxicity 403-Acute inhalation toxicity
404-Acute dermal irritation/corrosion 404-Acute dermal irritation/corrosion 405-Acute Eye irritation/corrosion 406-Skin sensitisation
407-Repeated dose 28-days oral toxicity study in rodents 408-Repeated dose 90-days oral toxicity study in rodents 410-Repeated dose dermal toxicity: 21/28 day study 411-Subchronic dermal toxicity: 90 day study
412-Repeated dose inhalation toxicity 414-Prenatal development toxicity study
421-Reproduction/Development toxicity screening test 424-Neurotoxicity study in rodents
451-Carcinogenicity studies 452-Chronic toxicity studies
Testes toxicológicos que fazem parte da garantia de
segurança para um produto farmacêutico.
Testes primários básicos:
-Diferentes protocolos para toxicidade aguda -Safety Pharmacology
-Estudos de genotoxicidade – Bateria de testes (Ames; micronúcleo; outros) -Estudo de 28 dias, via oral, para roedores (roedor / ratos)
-Estudo de 28 dias, via oral, para não roedores (não roedor / Mini Pigs) Testes especiais:
-Imunotoxicidade - IMUNOTOX -Efeitos hormônais.
-Estudo de 90 dias, via oral, para roedores (ratos).
-Estudo de 90 dias, via oral, para não roedores (Mini Pigs). -Teratogenicidade. -Neurotoxicidade. -Carcinogenicidade. -Reprodução – REPROTOX -OUTROS Importância do teste 28 dias em roedores e não roedores.
Toxicologia – Ciência e segurança.
Conceitos chave para a compreensão de resultados toxicológicos: -Crônicidade. -Absorção. -Distribuição. -Reversibilidade. -Reversibilidade. -Dose-resposta. -Tempo-resposta -Suscetibilidade.
-Evidências estatísticas x biológicas. -Metabolismo e biotransformação.
Toxicologia – Ciência e segurança.
Manifestações toxicológicas. -Letalidade.
-Corrosão e intolerância de tecidos locais. -Efeitos imunes.
-Efeitos sobre a reprodução. -Efeitos sobre a reprodução.
-Efeitos sobre o desenvolvimento. -Neurotoxicidade.
-Efeitos sobre os órgãos alvo. -Carcinogenicidade.
-Lesões anatonopatológicas. -Lesões histopatológicas.
Toxicologia – Ciência e segurança.
Manifestações toxicológicas. -Citotoxicidade.
-Perda da capacidade de regulação da célula. -Ruptura da capacidade de reparo celular.
-Efeitos sobre a membrana celular. -Efeitos sobre a membrana celular. -Efeitos sobre receptores.
-Efeitos sobre organelas celulares. -Efeitos bioquímicos / metabólicos.
Princípios básicos dos testes de toxicidade.
Espécies animais (não alvo) mais utilizadas.
Roedores:
-Ratos
-Camundongos.
-Camundongos geneticamente modificados. -Camundongos geneticamente modificados. -outros.
Não roedores:
-Cães. -Minipigs.
-Primatas não humanos: -Cynomolgus.
-Sagüis. -Rhesus.
Vantagens do minipig:
-Similaridade com o ser humano.
-É animal de criação não de companhia.
-Sistemas digestório, cardiovascular, outros são semelhante ao do ser humano
-Em estudos de imunotoxicidade são melhores que ratos.
-A pele é excelente para estudos de irritação e sensibilização.
Princípios básicos dos testes de toxicidade.
Espécies animais (não alvo) mais utilizadas.
Roedores:
-Ratos
-Camundongos.
-Camundongos geneticamente modificados. CIALLYX
Desafio em C&T: -Camundongos geneticamente modificados. -outros.
Não roedores:
-Cães. -Minipigs.
-Primatas não humanos: -Cynomolgus.
-Sagüis.
• Qualificação do mini pig, no Brasil, como animal de
experimentação.
• Qualificação de outros sistemas testes (ex:
Princípios básicos dos testes de toxicidade.
Fatores animais a serem padronizados -Espécie.
-Raça / Linhagem. -Idade.
-Peso corpóreo / Superfície corpórea. -Peso corpóreo / Superfície corpórea. -Gestação. -Sexo. -Influências genéticas. -Condições de saúde. -Condições imunológicas. -Condições endócrinas.
Princípios básicos dos testes de toxicidade.
Fatores ambientais padronizáveis -Alimentação (ração, verde, outras).
-Condição nutricional (restrições, dietas ou ad libitum).
-Administrar a substância teste sempre após a alimentação.
-Temperatura, umidade e pressão do ar nas salas e locais de alojamento. -Temperatura, umidade e pressão do ar nas salas e locais de alojamento. -Intensidade da luz.
-Ciclo de luz.
-Tamanho da caixa ou baia. -Possibilidade de exercícios. -Solitário ou em grupo. -Ciclo do dia. -Estação do ano. -Barulhos e ruídos. -Período de aclimatação.
Princípios básicos dos testes de toxicidade.
Fatores ambientais padronizáveis -Alimentação (ração, verde, outras).
-Condição nutricional (restrições, dietas ou ad libitum).
-Administrar a substância teste sempre após a alimentação.
-Temperatura, umidade e pressão do ar nas salas e locais de alojamento. CIALLYX
Desafio funcional:
-Temperatura, umidade e pressão do ar nas salas e locais de alojamento. -Intensidade da luz.
-Ciclo de luz.
-Tamanho da caixa ou baia. -Possibilidade de exercícios. -Solitário ou em grupo. -Ciclo do dia. -Estação do ano. -Barulhos e ruídos. -Período de aclimatação. • Implementar um Lab. Experimentação Animal (Biotério).
• Equacionar Estrutura física / Procedimentos / Saúde animal • Garantir integridade dos sistemas teste
Princípios básicos dos testes de toxicidade.
Considerações éticas sobre o uso de animais em experimentação.
-Estudos em animais dificilmente serão substituídos em breve espaço de tempo para a área de medicamentos (já na área de cosméticos...).
- Incorporação de novas espécies
- Incorporação de sistema in vitro (fator humano!) - Incorporação de sistema in vitro (fator humano!) - Incorporação de sistema in silico (triagem)
-É necessária a redução no número de animais utilizados (dados BPL são importantes).
Ciallyx
Ciallyx
Oportunidade:
O desenvolvimento de novos
fármacos e medicamentos faz parte da política de desenvolvimento
científico, tecnológicos e industrial do Brasil.
do Brasil.
Existem projetos inovadores, no Brasil, para o desenvolvimento de novo fármacos e medicamentos. Cresce, no mundo, a busca por laboratórios especializados em
Ciallyx
A CIALLYX tem:
Equipe multidisciplinar.
Formação técnico-científica qualificada Parcerias fortes nas diferentes etapas Parcerias fortes nas diferentes etapas de desenvolvimento.
Experiência acumulada na
realização, análise de resultados e elaboração de laudos técnicos visando atender as Agências Reguladoras.
Ciallyx
Equipe:
Articulada, competente e motivada! Os sócios são profissionais com
mestrado e doutorado em áreas afins como :Patologia, Clínica e Cirurgia como :Patologia, Clínica e Cirurgia
Veterinária, Farmacologia e Toxicologia. Possuem experiência
profissional no desenvolvimento de protocolos internacionais.
A CIALLYX conta também com
consultores científicos e tecnológicos ligados a diferentes
Ciallyx
Nossa Equipe é:
Articulada, competente e motivada! Os sócios são profissionais com
mestrado e doutorado em áreas afins como :Patologia, Clínica e Cirurgia
CIALLYX
Desafio no mercado:
como :Patologia, Clínica e Cirurgia
Veterinária, Farmacologia e Toxicologia. Possuem experiência
profissional no desenvolvimento de protocolos internacionais.
A CIALLYX conta também com
consultores científicos e tecnológicos ligados a diferentes
Universidades Brasileiras.
• Testes “pré-clínico” x “provas de conceito”. • Adaptação rápida. • Desenvolvimento de Plataformas Tecnológicas. • Antiinflamatórios • Antimicrobianos • Antineoplásicos • Outras
Projetos inovadores - Medicamentos
• Desenvolvimento de
medicamentos Veterinário nanoestruturados.
Projetos inovadores – Serviços:
• Biologia celular e molecular voltada para a avaliação de voltada para a avaliação de
segurança e eficácia de produtos. • Uso de células tronco humanas e murinas, diferenciadas em
hepatócitos e neurônios,para uso em estudos de segurança e
Laboratórios & Consultoria
Ciallyx
Onde estamos?
• Uma empresa incubada no CIETEC.
• CIETEC - Centro Incubador de Empresas de Base Tecnológica, com sede na cidade de São Paulo. Tecnológica, com sede na cidade de São Paulo.
Laboratórios & Consultoria
Ciallyx
O CIETEC tem como parceiros principais:
Serviço Brasileiro de Apoio às Pequenas e Médias Empresas-SEBRAE. Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares-IPEN.
Instituto de Pesquisas Tecnológicas do Estado de São Paulo-IPT / SP. Instituto de Pesquisas Tecnológicas do Estado de São Paulo-IPT / SP. Universidade de São Paulo-USP.
Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de São Paulo-FAPESP. Conselho Nacional de Pesquisa-CNPq.
CIALLYX, por dentro da vida,
para sua segurança
Contatos:
Fabiano Moron / Diretor Administrativo Roberto Foz / Pesquisador Principal Thiago Salles Gomes / Diretor de Unidade Thiago Salles Gomes / Diretor de Unidade
