1 Recebido para publicação em 12.4.2009 e na forma revisada em 13.11.2009.
2 Engo-Agro., aluno do Programa de Pós-Graduação em Fitotecnia, Universidade Federal de Viçosa – DFT/UFV, 36570-000 Viçosa-MG, <siumar.tironi@ufv.br>; 3 Estudante de agronomia – DFT/UFV; 4 Engo-Agro., D.Sc., Prof. do Dep. de Microbiologia – DMB/ UFV; 5 Engo-Agro., D.Sc., Prof. do Dep. de Fitotecnia – DFT/UFV, Bolsista do CNPq; 6 Engo-Agro., Ph.D., Professor do Dep. de Informática – DPI/UFV, Bolsista do CNPq.
A
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OLUBILIZADORAS DEF
OSFATO DAR
IZOSFERA DEC
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DE-A
ÇÚCAR1Action of Herbicides on the Activity of Phosphate-solubilizing Bacteria Isolated from Sugarcane
Rhizosphere
TIRONI, S.P.2, REIS, M.R.2, GALON, L.2, FREITAS, M.A.M.3, COSTA, M.D.4, SILVA, A.A.5, BARBOSA, M.H.P.5 e PETERNELLI, L.A.6
RESUMO - Objetivou-se com este trabalho avaliar a ação de herbicidas na atividade e no crescimento de isolados bacterianos solubilizadores de fosfato, provenientes da rizosfera de plantas de cana-de-açúcar. Dois isolados bacterianos, Sac 4 e Sac 13, classificados como de alta e de baixa capacidade de solubilização de fosfato inorgânico, respectivamente, foram usados no experimento. O crescimento e a atividade dos isolados solubilizadores foram avaliados na presença dos herbicidas sodium, ametryn e trifloxysulfuron-sodium + ametryn, nas doses de 0, ½, ¾, 1 e 2 vezes a dose de referência (0,45, 60 e 0,74 + 30 mg L-1, respectivamente). O isolado Sac 4 teve seu crescimento reduzido na presença dos
herbicidas ametryn e trifloxysulfuron-sodium + ametryn, sendo a maior redução na presença da mistura (92,43%). Não se observaram efeitos dos herbicidas no crescimento do isolado bacteriano Sac 13. A atividade solubilizadora de fosfato inorgânico de ambos os isolados não foi alterada na presença dos herbicidas, indicando que esses compostos apresentam seletividade a algumas populações de microrganismos do solo.
Palavras-chave: trifloxysulfuron-sodium, ametryn, microrganismos do solo.
ABSTRACT - The objective of this work was to evaluate the effects of herbicides on the phosphate-solubilizing activity and growth of bacteria isolated from sugarcane rhizosphere. Two bacterial isolates, Sac 4 and Sac 13, classified as being of high and low capability of solubilizing inorganic phosphate, respectively, were used in the experiments. The growth and phosphate-solubilizing activities were evaluated in the presence of trifloxysulfuron-sodium, ametryn, and trifloxysulfuron-sodium + ametryn, at 0, ½, ¾, 1, and 2 times the reference dose (0.45, 60, 0.74 + 30 mg L-1, respectively). For Sac 4, the herbicides ametryn and trifloxysulfuron-sodium + ametryn
reduced growth, with the largest reduction being observed for trifloxysulfuron-sodium + ametryn, while for Sac 13, no effect of the herbicides was observed. The phosphate-solubilizing activity of both bacterial isolates was not affected by the herbicides tested; this indicates that the impact of these compounds on the soil microorganisms is selective to certain populations.
Keywords: trifloxysulfuron-sodium, ametryn, soil microorganisms.
INTRODUÇÃO
A disponibilidade de nutrientes é um dos fatores determinantes para o desenvolvimento vegetal, sendo o fósforo (P) considerado o mais
com íons Ca2+, Fe3+ e Al3+ ou adsorvidas à
super-fície de partículas minerais do solo (Moreira & Siqueira, 2006).
A liberação do P insolúvel na forma orgâni-ca geralmente envolve a ação de enzimas deno-minadas, de maneira geral, como fosfatases. Quando na forma inorgânica, a liberação do fosfato feita por fatores estritamente físico-químicos e alterações nesses fatores promo-vem o deslocamento do equilíbrio para um ou outro compartimento (Novais et al., 2007). O deslocamento do equilíbrio no sentido dos produtos solúveis é obtido pelas alterações de fatores como o potencial hidrogeniônico (pH) do solo, em que menores valores de pH favore-cem a solubilização do fosfato inorgânico e a quelação de cátions por ácidos orgânicos. Desse modo, a maior solubilização de fosfato inorgâ-nico ocorre na rizosfera das plantas, devido à acidificação, em decorrência da liberação de prótons pela planta e de ácidos orgânicos pelos microrganismos, sendo estes denominados de microrganismos solubilizadores de fosfato inorgânico (MSFI) (Rodríguez & Fraga, 1999).
Vários trabalhos têm demonstrado a importância dos MSFI do solo rizosférico das culturas no suprimento de P e também na promoção de crescimento de plantas (Freitas et al., 1997; Gyaneshwar et al., 2002; Sundara et al., 2002). A efetividade dos MSFI depende da interação destes com a planta hospedeira e de sua microbiota associada. Vários fatores influenciam a capacidade de solubilização desses microrganismos, a exemplo da fonte de carbono e nitrogênio disponíveis (Nautiyal et al., 2000), da espécie cultivada (Grayston et al., 1996), da fonte de fosfato a ser solubi-lizado (Nahas, 1996; Barroso & Nahas, 2005), entre outros, como a presença de agrotóxicos – inseticidas, fungicidas e herbicidas (Das & Mukherjee, 1998; Debnath, 2002; Das, 2003; Reis et al., 2008a).
A utilização de herbicidas em cultivos comerciais tem grande importância no manejo das plantas daninhas, as quais competem com as culturas por água, luz e nutrientes, ocasio-nando perdas de produtividade. Além disso, quando não controladas adequadamente em canaviais, as plantas daninhas podem redu-zir a qualidade do produto colhido e a longe-vidade destes (Negrisoli et al., 2004). Para o manejo das plantas daninhas em lavouras de
cana-de-açúcar no Brasil, o uso da mistura comercial dos herbicidas ametryn e trifloxysulfuron-sodium, desde 2001, tem-se expandido em razão do amplo espectro de ação e do controle eficiente da tiririca (Cyperus
rotundus), considerada uma espécie daninha
de difícil controle (Reis et al., 2008c). No entanto, o ametryn, o trifloxysulfuron-sodium e a mistura de ambos podem interferir na atividade microbiana da rizosfera de plantas de cana-de-açúcar quando cultivadas em casa de vegetação (Reis et al., 2008a). O trifloxysulfuron-sodium apresenta ação sistêmica, sendo translocado por todas as partes da planta (Silva et al., 2007). Ao contrá-rio, o ametryn apresenta somente translocação acrópeta nas plantas, sendo, portanto, pouco provável sua presença nos exsudatos radicu-lares. No entanto, acredita-se que este herbi-cida possa atingir a rizosfera pela percolação no solo. De acordo com Law (2001), cerca de 70% do herbicida atinge o solo no momento da sua aplicação. O ametryn e o trifloxysulfuron-sodium apresentam alta mobilidade no perfil do solo, principalmente em solos arenosos e com baixo teor de matéria orgânica (Vivian et al., 2007); por isso, podem atingir com facilidade a rizosfera das plantas cultivadas.
Na literatura foram encontrados poucos relatos de trabalhos realizados para avaliar a toxicidade in vitro de herbicidas sobre bac-térias solubilizadoras de fosfato inorgânico. De acordo com Alves et al. (1998), os estudos
in vitro têm a vantagem de expor ao máximo o
microrganismo à ação do agrotóxico, fato que não ocorre em condições de campo, onde vários fatores servem de obstáculo a essa exposição. Desse modo, a não toxicidade de um produto ao microrganismo em laboratório confirma a sua seletividade no campo. Todavia, a alta toxicidade de um composto in vitro nem sempre indica a sua elevada toxicidade em campo, mas sim a possibilidade da ocorrência de danos dessa natureza. Nóbrega et al. (2004) acrescentam que os testes in vitro são rápidos e de custo relativamente baixo.
MATERIAL E MÉTODOS
Amostras de solo rizosférico de cinco lavouras de cana-de-açúcar foram coletadas e caracterizadas quimicamente (Tabela 1). Todas as lavouras localizam-se no município de Viçosa-MG e não apresentavam histórico de aplicação de herbicidas.
Para obtenção dos isolados bacterianos solubilizadores de fosfato, foram preparadas diluições seriadas até a 10-5, a partir da
sus-pensão de 10 g de solo rizosférico de plantas de cana-de-açúcar em 90 mL de solução salina (NaCl 0,85%), com três repetições. Alíquotas de 0,1 mL das diluições 10-3, 10-4 e
10-5 foram inoculadas na superfície do meio
glicose-extrato de levedura (GEL), suplemen-tado com fosfato de cálcio. Após sete dias de incubação a 30 oC, as bactérias solubilizadoras
de fosfato inorgânico foram selecionadas pela presença de halos de solubilização em torno da colônia.
Cada isolado foi inoculado e reinoculado na superfície do meio GEL, e ambas as ino-culações incubadas por sete dias a 30 oC.
Posteriormente, foi determinado o índice de solubilização (IS) de fosfato de cálcio, obtido pela razão entre o diâmetro do halo e o diâ-metro da colônia, conforme descrito por Kumar & Narula (1999), sendo a capacidade de solubi-lização de fosfato classificada em baixa (IS < 2), média (2 < IS < 3) e alta (IS > 3), de acordo com Silva Filho & Vidor (2000).
Vinte isolados bacterianos solubilizadores de fosfato inorgânico foram obtidos (Tabela 2). Esses isolados diferiram quanto à capacidade de solubilizar fosfato de cálcio in vitro, apre-sentando índices de solubilização (IS) entre 1,26 e 3,66 (Tabela 2).
Para avaliação de crescimento, foram selecionados dois isolados bacterianos, o Sac 4 e o Sac 13, classificados como de alta e baixa capacidade de solubilização, respectivamente (extremos das amostras coletadas). O experi-mento foi realizado em delineaexperi-mento intei-ramente casualizado, com seis repetições. Os tratamentos foram dispostos em esquema fato-rial (3 x 5 x 48) para cada isoldado bacteriano, sendo o fator A composto pelos herbicidas Envoke® (trifloxysulfuron-sodium – 0,45 mg L-1),
Metrimex 500 SC® (ametryn – 60 mg L-1) e
Krismat® (ametryn + trifloxysulfuron-sodium –
30 + 0,74 mg L-1); o fator B, pelas doses de 0, ½,
¾, 1 e 2 vezes a de referência (correspondente às doses comerciais recomendadas); e o fator C, pelos períodos de avaliação, com intervalo de uma hora durante 48 horas. O ensaio foi conduzido em placas de Elisa contendo 150 µL
de meio caldo nutriente, suplementado com as doses de herbicidas, onde foram inoculados isolados Sac 4 e Sac 13, previamente cultiva-dos por 24 h a 30 ºC em meio caldo nutriente. As placas foram incubadas a 30 ºC por 48 h, sendo as taxas de crescimento dos isolados avaliadas em intervalos de uma hora, por meio de leituras em espectrofotômetro com filtro de 560 nm. O crescimento relativo dos isolados foi comparado nos tratamentos com os herbicidas na dose de referência, con-siderando o tratamento com a dose zero como o crescimento-padrão (100%). As demais avaliações foram realizadas comparando o crescimento dos isolados bacterianos em cada tratamento com herbicidas e doses ao longo do tempo.
Também foi avaliado o potencial de solubi-lização de fosfato dos isolados bacterianos, perfazendo um tratamento fatorial (2 x 4), em que o primeiro fator foi composto pelos isolados bacterianos Sac 4 e Sac 13 e o segundo, pelos herbicidas ametryn, ametryn + sodium e trifloxysulfuron-sodium, nas doses de referência, além de um tratamento sem aplicação de herbicidas. Ambos os isolados foram inoculados em erlenmeyers contendo 50 mL de meio NBRIP líquido (Nautiyal, 1999), com adição de fosfato de cálcio (Ca5P3HO13) em quantidade
equiva-lente a 5 g L-1 de P, suplementado com os
herbicidas. Os erlenmeyers contendo os tratamentos foram submetidos à agitação (200 rpm) por três dias, a 30 oC (três repetições
por tratamento).
Os dados foram submetidos à análise de variância (F); sendo eles significativos, os fatores qualitativos foram comparados por meio de contrastes ortogonais (Tabela 3), utilizando o software estatístico SAS. Os fatores quantitativos foram avaliados por regressão, e a escolha dos modelos foi baseada na sig-nificância estatística (F e R2) e na explicação
biológica, conforme o modelo utilizado por Massenssini et al. (2008). As regressões foram comparadas pelo teste de identidade de mode-los, onde os completos foram comparados com o modelo reduzido (Regazzi & Silva, 2004). Em todos os testes utilizou-se o nível de 5% de significância.
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Os resultados demonstraram que o isolado bacteriano Sac 13 apresentou maior cresci-mento relativo, em relação ao Sac 4, em todos os tratamentos (Tabela 4). Observou-se estí-mulo ao crescimento com os tratamentos para o Sac 13 (101,46%), enquanto o Sac 4 foi prejudicado pelos herbicidas.
Comparando os tratamentos com herbi-cidas com a testemunha, para o isolado Sac 4, não se observaram efeitos dos tratamentos no crescimento bacteriano. Contudo, entre os herbicidas, observou-se maior crescimento quando tratado com o trifloxysulfuron-sodium. Comparando os tratamentos com ametryn e a mistura de trifloxysulfuron-sodium + ametryn, não se observou diferença (Tabela 4). Reis et al. (2008a), ao avaliarem os efeitos de herbi-cidas sobre atividade microbiana da rizosfera de plantas de cana-de-açúcar, verificaram que o trifloxysulfuron-sodium não foi prejudicial
aos microrganismos do solo, ao passo que o ametryn, o 2,4-D e a mistura comercial de trifloxysulfuron-sodium + ametryn influencia-ram negativamente a microbiota do solo.
A interferência do ametryn e do trifloxysulfuron-sodium + ametryn nos microrganismos do solo é atribuída, em parte, não aos ingredientes ativos, mas de outros compostos presentes nas formulações. Alguns autores associam os efeitos dos herbicidas sobre os microrganismos aos solventes, surfatantes e agentes molhantes presentes nas formulações (Malkones, 2000; Santos et al., 2004).
Na avaliação do crescimento relativo do isolado bacteriano Sac 13, não foram observa-das diferenças ao se comparar a testemunha sem herbicida com os tratamentos com herbicidas (Tabela 4). Também não foram observadas diferenças quando comparados os tratamentos herbicidas entre si (Tabela 4). Desse modo, evidencia-se a menor influência dos herbicidas no crescimento do Sac 13. Esses resultados corroboram os encontrados por Massenssini et al. (2008), os quais verifi-caram que as formulações de glyphosate reduziram, in vitro, o crescimento relativo em 50 e 14% de bactérias de alta e baixa capaci-dade de solubilização de fosfato inorgânico, respectivamente.
Houve diferença na atividade de solubili-zação de fosfato inorgânico ao se contrastarem os dois isolados bacterianos entre si; em todos os tratamentos, os maiores valores foram observados no Sac 4, comprovando assim o maior potencial de solubilização de fosfato inorgânico desse isolado (Tabela 4).
Tabela 1 - Características químicas das amostras (0-10 cm) de solo coletadas em lavouras canavieiras do município de Viçosa, Minas Gerais. Viçosa-MG, 2008
1/ Análises realizadas nos Laboratórios de Análises Físicas e Químicas de Solo do Departamento de Solos da UFV; 2/ Local de coleta:
01) Fazenda Bom Sucesso; 02) Fazenda Hipoteca; 03) Fazenda Morro Grande; 04) Fazenda Recanto de Maria; e 05) Viveiro Jurandir. T: capacidade da troca de cátions (pH 7); V: saturação de bases; m: saturação de alumínio; MO: matéria orgânica.
Característica química1/
pH P K+ H+Al Al3+ Ca2+ Mg2+ T V m MO
Local2/
(H2O) (mg dm-3) (cmolcdm-3) (%) (dag kg-1)
01 5,9 3,4 52 3,47 0,0 1,7 1,0 6,30 45 0,0 1,9
02 6,5 10,9 126 1,98 0,0 4,9 1,5 8,70 77 0,0 2,6
03 6,4 9,6 58 1,32 0,0 2,0 1,2 4,67 72 0,0 1,1
04 5,4 10,4 138 5,78 0,1 2,4 0,8 9,33 38 3,0 1,7
Para o isolado Sac 4 não foram observadas diferenças entre a testemunha e os trata-mentos com herbicidas no potencial de solu-bilização de fosfato inorgânico (Tabela 4). No entanto, maior valor foi observado no tratamento com trifloxysulfuron-sodium em
relação aos demais herbicidas. Não se cons-tatou distinção na variável estudada ao compa-rar os tratamentos com ametryn e a mistura sobre o isolado Sac 4 (Tabela 4). Esse resultado está de acordo com o encontrado por Reis et al. (2008b), que observaram redução do potencial de solubilização de fosfato inorgânico pela microbiota do solo rizosférico de cana-de-açúcar após a aplicação do ametryn isolado ou em mistura com o trifloxysulfuron-sodium. Madhaiyan et al. (2006) relataram que o atrazine (mesmo grupo químico do ametryn), inibidor do fotossistema II, reduziu pela metade a atividade solubilizadora de fosfato inorgânico da bactéria Gluconoacetobacter diazotrophicus. Para o Sac 13, não foram observadas dife-renças quando comparados os tratamentos com aplicação dos herbicidas com a testemu-nha, nem entre os tratamentos com herbicidas entre si, para a variável potencial de solubili-zação de fosfato inorgânico (Tabela 4), demons-trando assim a menor sensibilidade desse isolado aos herbicidas testados.
De acordo com o teste de identidade de modelos, observou-se que a aplicação dos herbicidas nas diferentes doses alterou a taxa de crescimento dos isolados bacterianos de forma diferenciada, o que foi verificado pela não sobreposição das curvas de presença e ausência dos herbicidas (Figura 1 e 2).
Para o isolado bacteriano Sac 4, verificou-se que o crescimento na preverificou-sença dos her-bicidas foi afetado em todas as doses testadas (Figura 1B, C), com exceção do trifloxysulfuron-sodium (Figura 1A). Apesar de bactérias possuírem a enzima acetolactato sintase (ALS), o trifloxysulfuron-sodium, inibidor dessa enzima, não se mostrou prejudicial. As curvas dos tratamentos com ½, ¾ e 1 vez a dose de ametryn não diferiram entre si, porém foram diferentes da curva sem aplicação do herbicida e da curva de dose 2 vezes, evidenciando-se que a metade da dose apre-senta o mesmo potencial de risco da dose de referência, mas menor que o dobro da dose (Figura 1B). O trifloxysulfuron-sodium + ametryn apresentou efeito negativo no cres-cimento desse isolado em todas as doses testadas (Figura 1C). Na dose de referência, nenhum dos herbicidas afetou a taxa de crescimento, em relação ao tratamento sem herbicida (Figura 1D).
Tabela 2 - Isolados bacterianos solubilizadores de fosfato inorgânico, índice de solubilização (IS) e procedência (local de coleta). Viçosa-MG, 2008
Número Isolado IS Local de coleta
01 Sac 8 3,22 Fazenda Bom Sucesso 02 Sac 20 1,26 Fazenda Bom Sucesso 03 Sac 1 2,31 Fazenda Hipoteca 04 Sac 6 2,02 Fazenda Hipoteca 05 Sac 7 3,28 Fazenda Hipoteca 06 Sac 9 1,67 Fazenda Hipoteca 07 Sac 3 2,90 Fazenda Morro Grande 08 Sac 5 3,17 Fazenda Morro Grande 09 Sac 11 2,44 Fazenda Morro Grande 10 Sac 17 2,37 Fazenda Morro Grande 11 Sac 13 1,44 Fazenda Recanto de Maria 12 Sac 2 3,23 Viveiro Jurandir
13 Sac 4 3,66 Viveiro Jurandir 14 Sac 10 1,32 Viveiro Jurandir 15 Sac 12 2,57 Viveiro Jurandir 16 Sac 14 3,00 Viveiro Jurandir 17 Sac 15 1,33 Viveiro Jurandir 18 Sac 16 3,42 Viveiro Jurandir 19 Sac 18 3,23 Viveiro Jurandir 20 Sac 19 3,00 Viveiro Jurandir
Tabela 3 - Estimativa dos contrastes ortogonais de crescimento relativo (%) e potencial de solubilização de fosfato inorgânico dos isolados bacterianos, tratados com a dose de referência dos herbicidas
1/ HA: trifloxysulfuron-sodium, marca comercial Envoke®; 2/ HB:
ametryn, marca comercial Metrimex 500 SC®; 3/ HC:
trifloxysulfuron-sodium + ametryn, marca comercial Krismat®.
Contraste ortogonal Tratamento
C1 C2 C3 C4 C5 C6 C7
1. Sac 4 Testemunha + +
2. Sac 4 HA1/ + - +
3. Sac 4 HB2/ + - - +
4. Sac 4 HC3/ + - -
-5. Sac 13 Testemunha - +
6. Sac 13 HA1/ - - +
7. Sac 13 HB2/ - - - +
-Tabela 4 - Crescimento relativo e fósforo liberado pelos isolados bacterianos da rizosfera de cana-de-açúcar cultivados em meio líquido NBRIP, suplementado com os herbicidas trifloxysulfuron-sodium, ametryn e trifloxysulfuron-sodium + ametryn, na dose de referência, por 48 horas a 30 ºC e por três dias a 30 ºC, respectivamente. Viçosa-MG, 2008
* Contrastes significativos a 5% de probabilidade. 1/ Tratamentos: 1 e 5 - sem aplicação de herbicidas; 2 e 6 - trifloxysulfuron-sodium; 3 e
7 – ametryn; 4 e 8 - trifloxysulfuron-sodium + ametryn, avaliados respectivamente sobre os isolados bacterianos Sac 4 e Sac 13.
Contraste ortogonal1/
C1 C2 C3 C4 C5 C6 C7
Variável avaliada
(1 a 4) x (5 a 8)1/ (1) x (3 a 4) (2) x (3 + 4) (3) x (4) (5) x (6 a 8) (6) x (7 +8) (7) x (8)
98,00* 100 103,50* 96,09 100,00 101,09 102,32
Crescimento (%)
101,46 97,33 94,25 92,40 101,95 102,28 102,45
29.459,62* 29.523,33 30.231,85* 28.947,40 19.189,99 18.851,85 18.887,40 P liberado (m g L-1)
18.981,29 29.438,39 29.041,66 29.135,92 18.911,72 18.941,66 18.995,92
(A) HA
Tempo (h)
0 10 20 30 40 50
Ab s 5 6 0 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 0 1/2 3/4 1 2 0,99 = R )); e . (505622 + 0,9667/(1 =
Yˆ -0,2116X 2
Tempo (h)
0 10 20 30 40 50
0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 0,99 = R )); e . (5,5139 + 0,9364/(1 =
Yˆ -0,2393X 2
0,99 = R )); e . (5,7683 + 0,9671/(1 =
Yˆ -0,2108X 2
0,99 = R )); e . (6,3331 + 0,9531/(1 =
Yˆ -0,2417X 2
0,99 = R )); e . (6,1526 + 0,9363/(1 =
Yˆ -0,2449X 2
0,99 = R )); e . (5,0640 + 0,9647/(1 =
Yˆ -0,2329X 2
0 1/2 3/4 1 2 Tempo (h)
0 10 20 30 40 50
0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 HT HA HB HC 0,99 = R )); e . (5,4902 + 0,9615/(1 =
Yˆ -0,2251X 2
Tempo (h)
0 10 20 30 40 50
Ab s 5 6 0 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 0,99 = R )); e . (5,7683 + 0,9671/(1 =
Yˆ -0,2108X 2
0,99 = R )); e . (4,6764 + 0,9443/(1 = Y =
Yˆ -0,2355X 2
0,99 = R )); e . (4,4683 + 0,9358/(1 = Y =
Yˆ -0,2317X 2
0 1/2 3/4 1 2 (B) HB
(C) HC (D) HI
A bs 560 A bs 560
Figura 1 - Curvas de crescimento do isolado bacteriano (Sac 4) da rizosfera de cana-de-açúcar, cultivado em meio caldo nutriente por
48 h a 30 °C, na presença dos herbicidas trifloxysulfuron-sodium (HA), ametryn (HB) e trifloxysulfuron-sodium + ametryn (HC), nas doses de 0, ½, ¾ , 1 e 2 vezes a dose de referência, e de todas as formulações na dose de referência (HI). Viçosa-MG, 2008.
Verificou-se que o crescimento do isolado Sac 13 na presença dos herbicidas foi afetado em todas as doses testadas (Figura 2A, B, C), com exceção de ¾ e 1 vez a dose de referência de trifloxysulfuron-sodium, sendo represen-tadas por único modelo (Figura 2A). O ametryn
indicando que esse isolado é mais sensível aos herbicidas, comparado ao Sac 4 (Figura 2 D).
Conclui-se que, independentemente do herbicida avaliado, o crescimento relativo e a taxa de crescimento in vitro das bactérias provenientes da rizosfera de cana-de-açúcar são afetados de forma diferenciada. No entanto, a atividade solubilizadora de fosfato inorgânico foi pouco influenciada pela presença dos herbicidas. Entre os herbicidas testados e as características avaliadas, o trifloxysulfuron-sodium demonstrou ser pouco tóxico às bacté-rias solubilizadoras de fosfato inorgânico.
AGRADECIMENTOS
Ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq), pela conces-são de bolsas e pelo apoio financeiro para a realização da pesquisa.
LITERATURA CITADA
ALVES, S. B.; MOINO Jr., A.; ALMEIDA, J. E. M.
Produtos fitossanitários e entomopatógenos. In: ALVES, S. B. (Eds.). Controle microbiano de insetos. São Paulo:
FEALQ, 1998. p. 217-238
BARROSO, C. B.; NAHAS, E. The status of soil phosphate fractions and the ability of fungi to dissolve hardly soluble phosphates. Appl. Soil. Ecol.,v. 29, n. 1, p. 73-83, 2005.
BRAGA, J. M.; DEFELIPO, B. V. Determinação espectrofotométrica de fósforo em extratos de solos de plantas. R. Ceres, v. 21, n. 113, p. 73-85, 1974.
DAS, A. C.; DEBNATH, A.; MUKHERJEE, D. Effect of the herbicidesoxadiazon and oxyfluorfen on phosphates solubilizing microorganisms and their persistence in rice fields. Chemosphere, v. 53, n. 3, p. 217-221, 2003.
DAS, A. C.; MURKHERJEE, D. Insecticidal effects on soil microorganisms and their biochemical processes related to soil fertility. World J. Microbiol. Biotechnol.,v. 14, n. 6, p. 903-909, 1998.
Figura 2 - Curvas de crescimento do isolado bacteriano (Sac 13) da rizosfera de cana-de-açúcar, cultivado em meio caldo nutriente por 48 h a 30 °C, na presença dos herbicidas sodium (HA), ametryn (HB) e trifloxysulfuron-sodium + ametryn (HC), nas doses de 0, ½, ¾ , 1 e 2 vezes a dose de referência, e de todas as formulações na dose de referência (HI). Viçosa-MG, 2008.
Tempo (h)
0 10 20 30 40 50
A bs 560 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 0 1/2 3/4 1 2 0,98 = R )); e . (5,7106 + 0,9921/(1 =
Yˆ -0,1512X 2
0,99 = R )); e . (4,8441 + 0,9960/(1 =
Yˆ -0,1299X 2
0,99 = R )); e . (4,5562 + 0,9795/(1 =
Yˆ -0,1319X 2
0,99 = R )); e . (4,6234 + 0,9910/(1 =
Yˆ -0,1306X 2
Tempo (h)
0 10 20 30 40 50
Ab s 5 6 0 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 0 1/2 3/4 1 2 0,98 = R )); e . (5,7106 + 0,9921/(1 =
Yˆ -0,1512X 2
0,99 = R )); e . (3,4639 + 1,0904/(1 =
Yˆ -0,0959X 2
0,96 = R X)); + (0,0566 + 0,0825X/(1
Yˆ= 2
0,97 = R2 X)); + (0,0438 + 0,0688X/(1 =
Yˆ=0,0873X/(1+(0,0612+X));R =0,97
Yˆ 2
Tempo (h)
0 10 20 30 40 50
A bs 560 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 0 1/2 3/4 1 2 0,98 = R )); e . (5,7106 + 0,9921/(1 =
Yˆ -0,1512X 2
0,99 = R )); e . (4,6143 + 0,9772/(1 =
Yˆ -0,1305X 2
0,99 = R )); e . (4,8771 + 0,9803/(1
Yˆ -0,1218X 2
= 0,99 = R )); e . (4,5730 + 0,9939/(1 =
Yˆ -0,1237X 2
0,99 = R )); e . (4,5071 + 1,0117/(1 =
Yˆ -0,1150X 2
Tempo (h)
0 10 20 30 40 50
A bs 560 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 HT HA HB HC 0,98 = R )); e . (5,7106 + 0,9921/(1 =
Yˆ -0,1512X 2
0,98 = R )); e . (4,5045 + 0,9844/(1 =
Yˆ -0,1306X 2
0,97 = R X)); + (0,0612 + 0,0873X/(1 =
Yˆ 2
0,99 = R )); e . (4,5071 + 1,0117/(1 =
Yˆ -0,1150X 2
(A) HA (B) HB
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