Ocorrência de infecção viral mista em pimentão no estado de São Paulo

17 0 Summa Phytopathol., Botucatu, v. 38, n. 2, p. 170, 2012

Ocorrência de infecção viral mista em pimentão no estado de São Paulo

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Monika Fecury Moura,

Denise Nakada Nozaki,

Fausto Zafallon Ferreira,

MArcelo Agenor Pavan,

Renate Krause-Sakate.

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FCA/UNESP – Depto. de Produção Vegetal / Defesa Fitossanitária.

Autor para correspondência: Renate Krause-Sakate (renatekrause@fca.unesp.br) Data de chegada: 31/01/2012. Aceito para publicação em: 13/04/2012.

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Figura 1. (a) Folha de pimentão infectada com Pepper yellow mosaic virus, Tomato severe rugose virus e Pepper mild mottle virus. (b) Folha de pimentão infectada com tobamovirus e begomovirus. (c) Visualização em gel de agarose 0,8% do PCR e RT-PCR para a identificação de infecções mistas entre begomovirus, tobamovirus e potyvirus. (1) Marcador 1 kb plus; (2) Pimentão infectado com begomovirus, (3) Controle positivo, (4) Controle negativo, (5) Pimentão infectado com tobamovirus, (6) Controle positivo, (7) Controle negativo, (8) Pimentão infectado com potyvirus, (9) Controle positivo, (10) Controle negativo. (d) Visualização em Gel de agarose 0,8% do PCR e RT-PCR para a identificação de infecções mistas entre begomovirus e tobamovirus. (1) Marcador 1 kb plus; (2) Pimentão infectado com begomovirus, (3) Controle positivo, (4) Controle negativo, (5) Pimentão infectado com tobamovirus, (6) Controle positivo, (7) Controle negativo.

O pimentão (Capsicum annuum) é uma das 10 hortaliças economicamente mais importantes no país. Existem cerca de vinte vírus q ue infectam essa espécie, sen do os mais importan tes pertencentes aos gêneros Begomovirus, Potyvirus, Tobamovirus, Tosp o viru s e Cu cu mo viru s . Os sintomas ocasion ados pelas diferentes espécies de vírus são variados e a diagnose no campo é extremamente difícil, prin cipalmen te qu an do h á in fecções mistas. Em 2011, dez plantas de pimentão foram coletadas no Estado de São Paulo, região de Reginópolis, com sintomas de mosaico intenso, deformação foliar, necrose e amarelecimento.

O objetivo foi identificar os vírus presentes nestas plantas. A iden tifica ção fo i feita realizan do a extra ção de RNA t otal (Bertheau et al. In: Perombelon, M.C.M.; Van Der Wolff, J.M.

Me th od s fo r th e de te ct io n an d q u an tifica tion o f E rwi n i a ca r o to vo ra su bs p. a t ro se p tic a on pota toes. Scott ish C rop Research Institute Occasion al Pu blication. 19 98 ) e de DNA total (Dellaporta et al. Plant Molecular Biology Reporter, v.1, p.19-21, 1983) de todas as amostras coletadas. Para a etapa de RT- P C R e P C R f o r a m u t iliz a d o s o s s e g u in t e s p a r e s d e oligonucleotídeos iniciadores universais para tospovirus (BR60- C C C GGAT C C T G C AGAGC AAT T GT G T C A e B R 6 5 - ATCAAGCCTT CTGAAAGT CAT) (E iras et al. Fitopatologia Brasileira, v.26, p.170-175, 2001); para tobamovirus (TobUNI 1 - AT T TAAGT G GAGGG AAAAC C AC T e To b U N I 2 - GT YGTTGAT GAGTT CGTGGA) (Letsch ert et al. J ou rnal of Virological Methods, v.106, p.1-10, 2002.); para cucumovirus ( 0 3 5 -3 - GC C GTAAGT G GAT GG AC AA e 0 3 8 -8 -

TATGATAAGAARCTTGTTTCGCG) (Boari et al. Fitopatologia Brasileira, v.25, p.49-58, 2000) e para begomovirus (PAL1v1978- GCATCTGCAGGCCCACATYGTCTT YCCNGT e PAR1c49 6- AATAC T GC AGGGC T T Y C T RTAC AT R GG) ( R o ja s e t a l.

Plant Disease, v.77, p.340-347, 1993). Na detecção de potyvirus foram u tilizados os oligon u cleotídeos in iciadores (P epNib- GWT S GY Y GM M T T GGAT G AT G e P e pUT R- AGTAGTACAGGAAAAGCC), desenhados para Pepper yelow mosaic virus (PepYMV) e Potato virus Y (PVY) (Moura et al.

European Journal of Plant Pathology, v.131, 2011). Os produtos

de RT-PCR e PCR foram submetidos ao sequenciamento direto de

nucleotídeos para confirmação das espécies virais. As 10 amostras

de plantas de pimentão estavam infectadas com begomovirus. Uma

delas apresentou infecção dupla de potyvirus e begomovirus. Três

am ostr as apre sen tara m in fec ção du pla de toba mov iru s e

begomoviru s. Uma amost r a a p re s e n to u in f e c çã o t rip la d e

potyvirus, begomoviru s e tobamovirus. As espécies de vírus

encon tradas foram: Pep per yello w mosaic virus - P epYMV

( p o t yv ir u s ) , To m a t o s e v e r e r u g o s e v i r u s - To S RV

( b e g o m o v i r u s ) e P e p p e r m i l d m o t t l e v i r u s - P M M o V

(tobamovirus). Esta é a primeira detecção de infecção tripla

ocorrida n atu ralmen te em pimen tão. E m n en h u ma amostra

a n alis a da f o i d e t ec t a d a c u cu m o v ír u s e t o s po v ír u s . E st e s

re su ltad os in d ica m q u e n as plan t açõ es de pim en t ão est ão

ocorrendo infecções virais mistas entre vírus transmitidos por

d if e r e n t e s m a n e ir a s ( v e t o r e s e t r a n s m is s ã o m e c â n i ca ),

ocasionando sintomas distintos e drásticos na cultura.