Rev. Inst. Med. trop. São Paulo 30 (3):157-164, maio-junho, 1988
M A N U T E N Ç Ã O DE COLÔNIA DE
A N O P H E L E S D A R L I N G IROOT, 1926, EM
LABORATÓRIO (1)
Geraldo Magela BURALLI (2) & Eduardo Sterlino BERGO (2)
R E S U M O D e s c r e v e - s e a i n s t a l a ç ã o e m a n u t e n ç ã o i n i c i a l d e u m a c o l ô n i a d e A n . darlingi, n o m u n i c í p i o d e A r a r a q u a r a , S P , c o m o p a r t e d o p r o g r a m a d e p e s q u i s a s e m m a l á r i a d a S u p e r i n t e n d ê n c i a d e C o n t r o l e d e E n d e m i a s — S U C E N . P a r t i c i p a n d o - s e d e e x p e r i ê n c i a s e m e l h a n t e d e s c r i t a p o r C O R R Ê A n a d é c a d a d e 70, a p r e s e n t a as m o d i f i c a ç õ e s s u g e r i d a s p o r o u t r o s a u t o r e s e pela e x p e r i ê n c i a d e seis m e s e s de f u n c i o n a m e n t o . A p e r s p e c t i v a c d c d e s e n v o l v i m e n t o d e u m a c o l ô n i a c o m s i m p l i f i c a ç õ e s d e t é c n i c a s e e q u i p a m e n t o s . S ã o d a d a s i n f o r m a ç õ e s s o b r e a l i m e n t a ç ã o d e l a r v a s e a l a d o s , d u r a ç ã o d o s e s t á -d i o s l a r v a i s , m o r t a l i -d a -d e e a c a s a l a m e n t o . U N I T E R M O S ; A n o p neles darlingi — i n s e t á r i o . I N T R O D U Ç Ã O A c r i a ç ã o e m m a s s a d e a n o f e l i n o s e m l a b o r a t ó r i o é v i s t a a t u a l m e n t e c o m o c o n d i ç ã o p r e c í p u a a o d e s e n v o l v i m e n t o d e p e s q u i s a s e m m a l á r i a j á q u e g r a n d e p a r t e d o s e s t u d o s r e q u e r a m a -n u t e -n ç ã o d o c i c l o e s p o r o g o -n i o d e p l a s m ó d i o s . A e s c o l h a d a e s p é c i e a ser c o l o n i z a d a r e c a i , e m g e r a l , n a q u e l a s d e c o m p r o v a d a c a p a c i d a d e v e t o r i a l e p r e f e r e n c i a l m e n t e c o m a m p l a d i s t r i -b u i ç ã o g e o g r á f i c a , t a n t o p e l a d i s p o n i -b i l i d a d e d e e x e m p l a r e s p a r a i n í c i o e r e f o r ç o d o i n s e t á r i o q u a n t o p e l a f a c i l i d a d e , q u e se e s p e r a , n a r e p r o d u ç ã o d a s c o n d i ç õ e s a m b i e n t a i s , e m l a b o r a t ó r i o , e x i g i d a s p e l a e s p é c i e . E n t r e t a n t o , é f a t o c o -n h e c i d o d e q u a -n t o s t e -n h a m se d e d i c a d o a essa t a r e f a q u e c e r t a s e s p é c i e s , a p a r e n t e m e n t e p o u -c o e x i g e n t e s d e -c o n d i ç õ e s -c l i m á t i -c a s e s p e -c i a i s , n a v e r d a d e d e v e m t e r s e u d e s e n v o l v i m e n t o c o n d i c i o n a d o a a l t o g r a u de e s p e c i a l i z a ç ã o e c o l ó g i c a , e n v o l v e n d o b i o c e n o s e s e s s e n c i a i s e c o m p l e -x a s d e difícil r e p r o d u ç ã o4. N e s s e s e n t i d o , A n o p h e l e s darlingi t e m - s e c o n s t i t u í d o n u m d e s a f i o p a r a o s p e s q u i s a d o r e s b r a s i l e i r o s . P o r ser a e s p é c i e d e m a i o r i m p o r -t â n c i a n a v e i c u l a ç ã o d a s m a l á r i a s h u m a n a s n o p a í s , g r a ç a s á e l e v a d a s u s c e t i b i l i d a d e a P . v i v a x e P . f a l c i p a r u m , e n d o f i l i a e a n t r o p o f i l i a a c e n t u a d a s e o c o r r ê n c i a r e l a t i v a m e n t e f a r t a e m a m -b i e n t e s c o m d i f e r e n t e s g r a u s d e i n t e r f e r ê n c i a a n t r ó p i c a6, t e m - s e p r e s t a d o a v á r i a s t e n t a t i v a s d e c o l o n i z a ç ã o a r t i f i c i a l , e m g e r a l m a l s u c e -d i -d a s . E s s e i n s u c e s s o n a m a n u t e n ç ã o d a s c o l ô n i a s p r o v a v e l m e n t e t e m d e s e s t i m u l a d o a p u b l i c a ç ã o d e r e s u l t a d o s p a r c i a i s , q u e se v e r i f i c a p e l a es-(1) Auxílio financeiro d o C N P q - P o l o n o r o e s t e 7 0 0 3 4 9 / 8 5 .
c a s s a l i t e r a t u r a d i s p o n í v e l , o q u e c o r u r i b u e a i n -d a m a i s p a r a as -d i f i c u l -d a -d e s q u e se e n f r e n t a n a s u a c r i a ç ã o . D e s d e os t r a b a l h o s p i o n e i r o s r e a l i z a d o s a t e 1950, p o r a u t o r e s n a c i o n a i s e e s t r a n g e i r o s , a p r i n c i p a l i n f o r m a ç ã o d i s p o n í v e l p r o v é m de c o m u n i c a ç õ e s p e s s o a i s d e t é c n i c o s q u e p a r t i c i p a r a m d e s s a s e x p e r i ê n c i a s o u d e r e l a t ó r i o s d e d i -v u l g a ç ã o r e s t r i t a1- 2 , 5 , 7 , 9 , n . D e q u a l q u e r f o r m a , p o d e - s e d i z e r q u e existe h o j e u m c o n h e c i m e n t o a c u m u l a d o r a z o á v e l q u e p e r m i t e d a r i n i c i o a u m a c o l ô n i a d e A n . darlingi e q u e a m a i o r difi-c u l d a d e se r e f e r e a s u a m a n u t e n ç ã o p o r l o n g o s p e r í o d o s . A a n á l i s e d a s e x p e r i ê n c i a s r e f e r i d a s n. o s t r a q¡..e a l g u n s p a r â m e t r o s f u n d a m e n t a i s e s -t ã o ber.. e s -t a b e l e c i d o s c o m o : n e c e s s i d a d e d e pc ru u í i r . p ; ; , d e o r i g e m n a t u r a l , p a r a m a n u t e n -T¿ . ca.) í a r \ a s : a l i m e n t o s m a i s a c e i t o s ; e x i g ê n -cia d e g a i o l a uc g r a n d e p o r t e p a r a p e r m i t i r a c o r t j e c o p u l a e o s r e c i p i e n t e s d e o vi p o s i ç ã o c a -p a z e s de s i m u l a r o c r i a d o u r o n a t u r a l d e g r a n d e pro? a n d i d a d e . E n t r e esses t r a b a l h o s d e s t a c a - s e o d e C O R R E A " 1 1 q u e c o n s e g u i u m a n t e r n o m u n i c í p i o d e A r a r a q u a r a , S P , p o r c e r c a d e d e z a n o s , u m a o l õ n i a c u j a p r o d tição d i á r i a d e a d u l t o s a t i n -g i u , n o á p i c e d a s u a a t i v i d a d e , a m é d i a d e 1.500 e x e m p l a r e s . A e x p e r i ê n c i a a t u a l d a S U C E N , b u s c a n d o a r e i n s t a l a ç ã o d a c o l ô n i a , s i g n i f i c a a s s i m u m a t e n t a t i v a d e r e s g a t a r o c o n h e c i m e n t o a c u m u l a -d o p o r a q u e l e a u t o r e p e l o s t é c n i c o s q u e o a c o m p a n h a r a m . E l a faz p a r t e d o p r o g r a m a d e p e s q u i s a e m m a l á r i a d a a u t a r q u i a q u e , n o m o -m e n t o p r e t e n d e -m a n t e r o c u l t i v o " i n v i u - o " d e f o r m a s h e p á t i c a s d o p a r a s i t a a p a r t i r d e e s p o r o -z o i l o s , a l é m d e t r a b a l h o s v o l t a d o s a o e s t u d o d a s u s e e t i b ü i d a d e às d r o g a s a n t i m a l á r i c a s . A n o v a c o l ô n i a t e v e i n í c i o e m m a i o d e 1 9 8 7 , q u a n d o se o p t o u p o r u t i j k a r a m e s m a m e t o d o l o g i a d e s e n v o l v i d a p o r C O R R E A e a pari ir d a i b u s c a r as a d a p t a ç õ e s q u e se m i g a r e m n e c e s s á r i a s . A d e s c r i ç ã o d e s s a s ai n i d a d a signi-fica o r e g i s t r o de e x p e r i ê n c i a prelimm:»! • njeii;» p o r t a n t o , â critica e a d a p t a ç ã o c o m - ' n i í s. M A T E R I A L E M É T O D O S I n s t a l a ç õ e s , m ó v e i s e e q u i p a m e n t o s : O p r é d i o q u e a b r i g a o i n s e í á r i o p r o j e t a d o e c o n s t r u í d o e s p e c i a l m e n t e p a r a esse f i m , e s t a s i t u a d o e m A r a r a q u a r a , S P , a 275 k m d a C a -p i t a l . A á r e a t o t a l c o n s t r u í d a é d e 55 rn c o m p o s -ta p o r u m l a b o r a t ó r i o , sala d e c r i a ç ã o d e l a r v a s , s a l a d e c r i a ç ã o d e a l a d o s , s a i a d e c r i a ç ã o d e c o e l h o s e d e p ó s i t o s , c o n f o r m e fig. 1. A s p a r e d e s s ã o r e v e s t i d a s d e a z u l e j o s e o p i s o d e c e r â -m i c a e s -m a l t a d a . O t e t o é d e laje d e c o n c r e t o , c o m c o b e r t u r a d e t e l h a s d e b a r r o . A e n t r a d a d o p r é d i o é p r o t e g i d a p o r d u p l a p o r t a , s e n d o u m a d e t e l a . i n t e r n a m e n t e e x i s t e m c o r t i n a s d e a l g o -d ã o i s o l a n -d o o h a l l -d e e n t r a -d a e a q u e l e q u e -d á a c e s s o às s a l a s d e c r i a ç ã o . T o d a s as j a n e l a s s ã o t e i a d a s . O l a b o r a t ó r i o é e q u i p a d o c o m m ó v e i s e a p a r e l h o s c o n v e n c i o n a i s . A s a l a d e c r i a ç ã o d e l a r v a s a p r e s e n t a p e q u e n a b a n c a d a c o m p i a e es-t a n es-t e s d e m a d e i r a r e v e s es-t i n d o as p a r e d e s . A s a l a d e m a n u t e n ç ã o d e a l a d o s c o n t é m d u a s g a i o l a s p a r a m o s q u i t o s e u m a m e s a d e m a n i p u l a ç ã o . A s d u a s s a l a s d e c r i a ç ã o e s t ã o e q u i p a d a s c o m a q u e c e d o r e s e l é t r i c o s e u m i d i f i c a d o r e s . O c o n -t r o l e d a -t e m p e r a -t u r a e u m i d a d e r e l a -t i v a é fei-to p o r t e r m ô m e t r o s e t e r m o h i g r ó g a f o . A i l u m i n a ç ã o a r t i f i c i a l é feita p o r l â m p a -d a s f l u o r e s c e n t e s . C o l e t a d e a l a d o s e p r o d u ç ã o d e o v o s : F ê m e a s s e l v a g e n s d e A n . d a r l i n g i s ã o c a p t u r a d a s n o s p e r í o d o s c r e p u s c u l a r e s , n o M u n i c í p i o d e D o u r a d o , S P , d i s t a n t e 50 k m d o i n s e t á r i o , às m a r g e n s d o R i o J a c a r é P e p i r a . O s e x e m -p l a r e s s ã o c o l e t a d o s i n d i v i d u a l m e n t e , c o m isca h u m a n a , e m f r a s c o s d e v i d r o v a s a d o s d e 2x5 c m , c o m d e d a i s d e t e l a e m a m b a s as e x t r e m i d a -d e s ( t u b o s C o r r ê a ) . A s f ê m e a s s ã o a l i m e n t a -d a s c o m a l g o d ã o e m b e b i d o e m s o l u ç ã o d e s a c a r o s e a 1 0 % e t r a n s p o r t a d a s a o l a b o r a t ó r i o , o n d e s ã o i d e n t i f i c a d a s c o l o c a n d o - s e d i r e t a m e n t e o t u b o s o b o m i c r o s c ó p i o . A p ó s a i d e n t i f i c a ç ã o s ã o c o l o c a d a s , e m g r u p o s d e 10, e m c o p o s p l á s t i c o s d e 500 m l , t e la d o s , c o m f u n d o d e a l g o d ã o e p a p e l filtro ú m i -d o p a r a o vi p o s i ç ã o . O i n t e r i o r -d o s c o p o s é lixa-d o p a r a p e r m i t i r o r e p o u s o n a s l a t e r a i s . A s f ê m e a s s ã o a l i m e n t a d a s d i a r i a m e n t e , c o m s a n g u e h u m a n o , d i r e t a m e n t e n o b r a ç o . R e c e n t e m e n t e este t i p o d e a l i m e n t a ç ã o v e m s e n -d o s u b s t i t u í -d o p o r c a m u n -d o n g o s a n e s t e s i a -d o s e c o l o c a d o s d i r e t a m e n t e s o b r e os c o p o s . O s o v o s s ã o c o l e t a d o s a c a d a d o i s d i a s , p o r l a v a g e m d o p a p e l filtro n a s b a n d e j a s d e c n a ç ã o d e l a r v a s .
A R C O N D I C I O N A D O 3 A Q U E C E D O R E S N A S 2 S A L A S o o 2 , 0 0 x 1 , 2 0 1 , 1 0 2 , 0 0 x 1,20 3 , 0 0 1,10 3 . 0 0 O co X O 00 O* o 0 , 8 0 x 2 , 1 0 ° . ' 0 , 7 0 2 , 0 0 6,10 a • 1.30, COELHOS 3 , 2 0 4 , 5 0 1.30, - - -- - o CO - - o CO O o ro ESTOCAGEM c DE t 0. 8 0 X 2. . 0 RAÇÃO 4 7 m2 1.50 x 1,20 1,20 l , 5 0 x 1,20 1.20 0 , 8 0 x 2 , 1 0 4 . 5 0 ¡ i ! ! GARAGEM •! _ j j _ 1 i C r i a ç ã o de l a r v a s : A s l a r v a s s ã o c r i a d a s e m b a n d e j a s d e p l á s -t i c o , c i r c u l a r e s , c o m 25 c m d e b o c a e 10 c m d e a l t u r a . E s s a s b a n d e j a s , t i p o b a c i a , s ã o d e b a i x o c u s t o e f a c i l i t a m a l i m p e z a . A á g u a é p r o v e n i e n t e d e f o n t e n a t u r a l e p e r m a n e c e e m g a l õ e s p l á s t i c o s n o i n t e r i o r d a s a l a p a r a e q u i l í b r i o d a t e m -p e r a t u r a . A t r o c a d e á g u a é f e i t a d i a r i a m e n t e p e l o s e g u i n t e p r o c e s s o : d e s p e j a - s e a á g u a c o m a s l a r v a s e m u m a b a n d e j a l i m p a ; n e s t a , p r o v o c a - s e u m m o v i m e n t o c i r c u l a r n a á g u a c o m u m a p e r a d e b o r r a c h a d e b i c o l o n g o p a r a q u e o s e d i m e n t o r e s t a n t e ( a l i m e n t o , e x ú v i a s e
l a r v a s m o r t a s ) se a c u m u l e n o c e n t r o d o f u n d o d a b a n d e j a ; a s p i r a - s e o r e s í d u o e a á g u a , p e l o f u n d o , a t é r e d u z i r o v o l u m e a u m a l â m i n a d e á g u a ; c o m p l e t a - s e o v o l u m e c o m á g u a l i m p a . P a r a a a l i m e n t a ç ã o u t i l i z o u s e u m a m i s t u -r a d e p a -r t e s i g u a i s d e f a -r i n h a d e m i l h o , -r a ç ã o p a r a a v e s d e c o r t e , r a ç ã o p a r a p á s s a r o s e ferm e n t o p a r a b i s c o i t o d e p o l v i l h o , ferm o í d o s e p e -n e i r a d o s . C o m p l e m e -n t a - s e a a l i m e -n t a ç ã o c o m f e r m e n t o F l e i s c h m a n n . A p ó s e x p e r i m e n t o s c o m d i f e r e n t e s r a ç õ e s , o p t o u s e p o r a q u e l a p r o -p o s t a -p o r S A N T O S1 0 q u e se c o n s t i t u i n a m i s t u r a d e u m a p a r t e d e f a r i n h a d e p e i x e p a r a d u a s d e p ã o t o r r a d o e m o í d o e d u a s d e g e r m e d e t r i g o . N ã o é u t i l i z a d o q u a l q u e r t i p o d e l e v e d u r a v i v a . A r a ç ã o é o f e r e c i d a d i a r i a m e n t e n a q u a n t i d a d e a p r o x i m a d a d e 0 , 3 a 0 , 6 m g / l a r v a d e a c o r d o c o m o e s t á d i o l a r v a l p r e d o m i n a n t e n a b a n -d e j a , s e g u n -d o o p r o p o s t o p o r G E R B E R G8. O n ú m e r o m é d i o d e l a r v a s p o r b a n d e j a é d e 2 0 0 e x e m p l a r e s . A d i s p o s i ç ã o s e q ü e n c i a l d a s b a n d e j a s e m p r a t e l e i r a s p e r m i t e v i s u a l i z a r a e v o l u ç ã o d a s l a r v a s p e l a d i s t r i b u i ç ã o d o s d i f e r e n t e s e s t á d i o s l a r v a i s e m d i f e r e n t e s a l t u r a s d a e s t a n t e . A c o l e t a d e p u p a s é feita d i a r i a m e n t e p e l a a s p i r a ç ã o i n d i v i d u a l c o m p i p e t a P a s t e u r . E s t a s p u p a s s ã o c o n t a d a s e c o l o c a d a s p a r a e c l o s ã o e m f r a s c o s c o m t a m p a a d a p t a d a e m " f u n i l i n -v e r t i d o " . I s t o i m p e d e a e n t r a d a d e a l a d o s n o f r a s c o d e p u p a s . M a n u t e n ç ã o de a l a d o s : A s g a i o l a s d e a l a d o s m e d e m , c a d a u m a , 1 m d e l a r g u r a p o r 1 m d e a l t u r a p o r 0 , 6 0 m d e l a d o . A b a s e e o t e t o s ã o d e m a d e i r a m a c i ç a s u -p o r t a d o s -p o r s a r r a f o s . A s l a t e r a i s e o f u n d o s ã o f e i t o s d e t e c i d o d e a l g o d ã o . A f r e n t e é d e t e l a d e n y l o n , m a l h a 2 0 , e a p r e s e n t a d u a s a b e r t u r a s p r o t e g i d a s p o r m a n g a d e m a l h a d e a l g o d ã o : u m a s u p e r i o r , p e q u e n a , e u m a r e n t e à b a s e , c o m 0 , 3 0 m d e b o c a . A a b e r t u r a s u p e r i o r p e r -m i t e a -m a n i p u l a ç ã o d e -m o s q u i t o s e d a s f o n t e s d e a l i m e n t a ç ã o n ã o s a n g u í n e a . A a b e r t u r a i n f e -r i o -r p e -r m i t e a l i m p e z a d o f u n d o d a g a i o l a e a c o l o c a ç ã o d a f o n t e d e a l i m e n t a ç ã o s a n g u í n e a . O p r i m e i r o a l i m e n t o c i t a d o c o m p õ e - s e d e b o l a s d e a l g o d ã o e m b e b i d a s e m s o l u ç ã o d e s a -c a r o s e a 1 0 % e f a t i a s d e m a ç ã o u b e t e r r a b a s , p e n d u r a d a s n o t e t o . A a l i m e n t a ç ã o s a n g u í n e a é feita s o b r e o d o r s o d e c o e l h o s c o m á r e a d e p i l a d a . O s c o e l h o s p e r m a n e c e m i m o b i l i z a d o s e m c a i x a s de c o n t e n ç ã o . E s t a c a i x a c o m p õ e s e d e u m a b a s e de m a -d e i r a e m c u j a e x t r e m i -d a -d e e x i s t e u m a c e l a c o m a b e r t u r a e m g u i l h o t i n a , o n d e o a n i m a l fica p r e -so p e l o p e s c o ç o . E s t a c a i x a visa p r o t e g ê - l o d e p i c a d a s n o f o c i n h o e o r e l h a s q u e s ã o á r e a s m u i -t o s e n s í v e i s . A e s -t r u -t u r a e m e d i d a s d a c a i x a d e c o n t e n ç ã o p o d e m ser v i s t a s n a f i g u r a 2 . A a l i m e n t a ç ã o s a n g u í n e a , e m c o e l h o s , é o f e r e c i d a d i a r i a m e n t e a o s m o s q u i t o s p o r c e r c a d e t r ê s h o r a s . A l é m d a s a b e r t u r a s f r o n t a i s e x i s t e u m a o u -t r a , l a -t e r a l , d e s -t i n a d a à o v i p o s i ç ã o . A m e -t a d e i n f e r i o r d e u m a l a t e r a l n ã o t e m t e c i d o e se e s -t e n d e n a f o r m a d e -t ú n e l d e filó a -t é a b o c a d e u m c r i s t a l i z a d o r d e v i d r o , d e 30 c m d e d i â m e t r o p o r 30 c m d e a l t u r a . E s s a m a n g a d e filó é p r e s a p o r s a r r a f o s d e m a d e i r a n a g a i o l a e a m a r r a d a à b o -ca d o c r i s t a l i z a d o r . E s t e , c o m á g u a a t é 2 / 3 d e a l t u r a , p e r m a n e c e d e n t r o d e u m a q u á r i o , c o m f u n d o e s c u r e c i d o . E s t e c o n j u n t o s i m u l a , p a r a a s f ê m e a s g r á v i d a s , u m c r i a d o u r o a m p l o e d e g r a n d e p r o f u n d i d a d e . D i a r i a m e n t e , o c r i s t a l i z a d o r é d e s c o b e r t o e s ã o c o l e t a d o s o s o v o s c o m t i r a s d e p a p e l f i l t r o . O s o v o s c o l e t a d o s s ã o s e m e a d o s e m b a n d e j a s i d e n t i f i c a d a s , as q u a i s s ã o l e v a d a s p a r a a s a l a d e c r i a ç ã o d e l a r v a s . O a c o m p a n h a m e n t o d a p o p u l a ç ã o d e a l a -d o s n a g a i o l a é feito p e l o r e g i s t r o -d i á r i o -d e t r ê s d a d o s : n? d e p u p a s v i v a s q u e e n t r a m , n? d e p u p a s m o r t a s r e t i r a d a s e n? d e a l a d o s m o r t o s . E s -tes ú l t i m o s s ã o c o l e t a d o s a p a r t i r d a l i m p e z a d o f u n d o d a g a i o l a , c o m o a u x í l i o d e u m a s p i r a -d o r , e -d a q u e l e s q u e m o r r e m n a s u p e r f í c i e -d o c r i s t a l i z a d o r d e o v i p o s i ç ã o . Q u a n t o às c o n d i ç õ e s c l i m á t i c a s , p r o c u r a -se m a n t e r a t e m p e r a t u r a d a s s a l a s e n t r e 25 a 2 7 ° C e a u m i d a d e r e l a t i v a d o a r a c i m a d e 7 0 % . O f o t o p e r í o d o é d e a p r o x i m a d a m e n t e 12 h o r a s l u z , 12 h o r a s s o m b r a . D u r a n t e o d i a , a l u m i n o -s i d a d e m a n t é m - -s e r e d u z i d a à p e n u m b r a , g r a ç a -s às t e l a s e s c u r a s d a s j a n e l a s ( s o m b r i t e ) e p e r s i a -n a s h o r i z o -n t a i s . R E S U L T A D O S E C O M E N T Á R I O S N a i n s t a l a ç ã o d e s s e i n s e t á r i o o p t o u s e , c o -m o j á foi d i t o , p o r i n i c i a r a c o l ô n i a p a r t i n d o - s e d a m e t o d o l o g i a d e s e n v o l v i d a p o r C O R R E A , m e s m o q u e a l g u m a s t é c n i c a s já tivessem s i d o tes-t a d a s c o m s u c e s s o p o r o u tes-t r o s a u tes-t o r e s . E s tes-t a s ser i a m i n c o ser p o ser a d a s p a u l a t i n a m e n t e . A i n d a c o
-m o o p ç ã o d e t r a b a l h o p r o c u r o u - s e d e s e n v o l v e r u m i n s e t á r i o d e p r o d u ç ã o e m m a s s a d e m o s q u i -t o s , s e m p r i v i l e g i a r p r o c e d i m e n -t o s q u e , e m b o r a f o r n e c e d o r e s d e d a d o s s o b r e a b i o l o g i a d a e s p é -c i e , v i e s s e m s o b r e -c a r r e g a r o t r a b a l h o -c o m o , c o n t a g e m d e o v o s e l a r v a s n o s d i f e r e n t e s e s t á d i o s , d e t e r m i n a ç ã o d e t a x a s d e e c l o s ã o , s o b r e -v i -v ê n c i a , e t c . E s t a s o b s e r -v a ç õ e s d e -v e r ã o ser feitas e m e x p e r i m e n t o s p a r a l e l o s , u t i l i z a n d o - s e g r u p o s d e i n s e t o s r e s t r i t o s . Q u a n t o a t e n t a t i v a d e r e p e t i ç ã o d a e x p e r i ê n c i a o r i g i n a l v e r i f i c o u s e u m f a t o j á e s p e r a -d o , q u a l s e j a , o s r e s u l t a -d o s o b t i -d o s p o r a q u e l e a u t o r , n u m a s i t u a ç ã o d e c o l ô n i a b e m e s t a b e l e -c i d a , n e m s e m p r e s ã o r e p r o d u t í v e i s n o i n í -c i o d a c o l ô n i a , m e s m o se m a n t e n d o r i g o r o s a m e n t e as t é c n i c a s u t i l i z a d a s . I s t o se d e v e p r o v a v e l m e n t e a o " s t a t u s " g e n é t i c o d a s p o p u l a ç õ e s s e g u r a -m e n t e c o -m d i f e r e n t e s g r a u s d e a d a p t a ç ã o às c o n d i ç õ e s d e l a b o r a t ó r i o . E m v i s t a d i s s o o b s e r v a - s e q u e a c o l ô n i a , n e s s e p r i m e i r o a n o d e e x i s t ê n c i a , a i n d a a p r e s e n -t a g r a n d e d e p e n d ê n c i a d a i n -t r o d u ç ã o d e o v o s p r o v e n i e n t e s d a p o p u l a ç ã o s e l v a g e m . A m a i o r d e n s i d a d e d e i n d i v í d u o s a c o m p a n h o u a s s i m as v a r i a ç õ e s s a z o n a i s d a p o p u l a ç ã o n a t u r a l , c u j o á p i c e o c o r r e n o p e r í o d o d e m a i o a a g o s t o . O e s q u e m a d e m a n u t e n ç ã o d a c o l ô n i a d i f e riu d a d e C O R R Ê A ? q u a n d o se p r o c u r o u t r a b a -l h a r c o m d u a s p o p u -l a ç õ e s d i s t i n t a s . P a r a isso f o r a m u t i l i z a d a s d u a s g a i o l a s , u m a d a s q u a i s r e c e b i a a p e n a s o s a d u l t o s (Fj) n a s c i d o s d a g e r a ç ã o d o c a m p o ( p a r e n t a l ) . E s s a g e r a ç ã o , p o r t a n -t o F2, e r a c o l o c a d a e m b a n d e j a s s e p a r a d a s e o s a l a d o s r e s u l t a n t e s e r a m c o l o c a d o s n a s e g u n d a g a i o l a . D e s t a f o r m a e s p e r a v a - s e c o n t a r c o m u m a g a i o l a d e F , , c o m i n t r o d u ç ã o p e r m a n e n t e d e i n d i v í d u o s s e l v a g e n s , e o u t r a , o n d e se t e r i a u m a p o p u l a ç ã o m a i s a d a p t a d a à s c o n d i ç õ e s d e l a b o r a t ó r i o . O s o v o s c o l h i d o s n e s s a s e g u n d a
T A B E L A i P r o d u ç ã o de e x e m p l a r e s de A n . darlingi (geração E {) n o p e r í o d o de j u n h o a n o v e m b r o de 1 9 8 7 . Mês P u p a s (ent.) P u p a s Mortas Mortas a d u l t o s Vivos ( e n t j d ó A d u l t o s M o r t o s 9 9 1 J u n 3.316 346 10.4 2.970 809 1.219 2.028 Jul 7 . 4 1 2 6 7 8 9 a 6 . 7 3 4 1.535 1.360 2.895 Ago 1 5 . 9 6 9 751 4.7 1 5 . 2 1 8 5 . 0 3 8 5.032 1 0 . 0 7 0 Set 1 5 . 0 1 2 1.306 8.7 13.706 5.646 5.006 1 0 . 6 5 2 O u t 3 . 2 3 5 135 4.2 3 . 1 0 0 2.351 2.480 4 , 8 3 1 Nov 5.516 5 4 0 9.8 4 . 9 7 6 1.658 1.488 3.146 T o t a l 5 0 . 4 6 0 3.756 7.4 4 6 . 7 0 4 17.037 1 6 . 5 8 5 3 3 . 6 2 2 Mês J u n Jul Ago Set O u t Nov T A B E L A 2
Produçá"o de e x e m p l a r e s de A n . darlingi (geração 12) n o p e r í o d o de j u n h o a n o v e m b r o de 1 9 8 7 .
Pupas (ent.) 5 112 2 9 9 977 78 Pupas Mortas 9 17 30 3 Mortas 8.0 5.7 3.1 3 . 8 A d u l t o s Vivos (ent.) 103 282 947 75 óó 36 99 3 9 7 A d u l t o s M o r t o s 9 9 6 8 74 4 1 9 92 104 173 816 1 6 9 T o t a l 1.471 59 4.0 1.41 ; 6 0 9 6 5 3 . 2 6 2 g a i o l a g e r a r i a m a d u l t o s q u e v o l t a r i a m a i n t e -g r a r e s s a m e s m a p o p u l a ç ã o . E s s e e s q u e m a foi s e g u i d o n o s seis p r i m e i -r o s m e s e s d e t -r a b a l h o e n ã o p o d e se-r m a n t i d o d e v i d o a q u e d a n a p o p u l a ç ã o F , . C o n s e q ü e n t e -m e n t e o n ú -m e r o d e i n d i v í d u o s F? n ã o foi s u f i c i e n t e p a r a p e r m i t i r c ó p u l a e o v i p o s i ç à o . O s d a d o s d a s t a b e l a s 1 e 2 m o s t r a m o s r e s u l t a d o s o b -t i d o s n e s s e p e r í o d o . C o m o se v e r i f i c a , as m a i o r e s d e n s i d a d e s o b t i d a s n a g a i o l a d e F , o c o r r e r a m n o s m e s e s d e a g o s t o e s e t e m b r o c o m o c o n s e q ü ê n c i a d o e l e v a d o n ú m e r o d e o v o s c o l h i d o s n o s m e s e s a n t e r i o r e s a p a r t i r d e f ê m e a s d o c a m p o . E s s e f a t o se r e -p e t e e m F2 c o m m a i o r p r o d u ç ã o e m s e t e m b r o e o u t u b r o . O s d a d o s a p r e s e n t a d o s n a s t a b e l a s a c i m a d e v e m ser v i s t o s a p e n a s c o m o r e g i s t r o d e p r o -d u ç ã o , v i s t o q u e n ã o p e r m i t e m c o n c l u i r s o b r e t a x a s d e m o r t a l i d a d e g e r a l o u p o r s e x o . A p e n a s c h a m a - s e a a t e n ç ã o p a r a a e l e v a d a m o r t a l i d a d e d e p u p a s . A c a u s a p r i n c i p a l é a c o n t a m i n a ç ã o p o r f u n g o s q u e c r e s c e m n o s f r a s c o s o n d e as p u -p a s s ã o -p o s t a s a e c l o d i r d e n t r o cias g a i o l a s d e a l a d o s . E s s e s f u n g o s e s t ã o s e n d o e s t u d a d o s vi-s a n d o a a d o ç ã o d e vi-s u b vi-s t â n c i a vi-s i n i b i d o r a vi-s n o m e i o s e m p r e j u í z o p a r a o s i n s e t o s . A t é o m o -m e n t o s a b e - s e q u e o c o r r e -m d u a s e s p é c i e s filam e n t o s a s e u filam a l e v e d u r a , q u e e n v o l v e filam as p u -p a s d i f i c u l t a n d o a s u a m o b i l i d a d e . Q u a n t o a m o r t a l i d a d e d e a d u l t o s , e m b o r a n ã o se d i s p o n h a d e a v a l i a ç ã o d a s o b r e v i v ê n c i a d i á r i a , d e v e - s e r e g i s t r a r q u e p e r i o d i c a m e n t e o c o r r e m g r a n d e s b a i x a s n a p o p u l a ç ã o . A c r e d i t a s e q u e i s t o o c o r r a e m v i r t u d e d e a l t e -r a ç õ e s b -r u s c a s n a u m i d a d e -r e l a t i v a n a s a l a d e m a n u t e n ç ã o d e a l a d o s . A t e m p e r a t u r a n e s t a s a l a t e m s i d o m a n t i d a a b a i x o 2 7 ° C e a u m i d a d e r e l a t i v a a c i m a d e 7 0 % . E n t r e t a n t o , t e m - s e r e g i s t r a d o e l e v a ç õ e s d e t e m p e r a t u r a a o r e d o r d e 3 0 ° C , p r i n c i p a l m e n t e n o s d i a s m a i s q u e n t e s , c o m difícil m a n u t e n ç ã o d a u m i d a d e r e l a t i v a e l e v a d a . O s a p i ' r e -l h o s c o n v e n c i o n a i s d e c o r r e ç ã o d e s s a s v a r i á v e i s
t e m s e m o s t r a d o i n e f i c a z e s . O u s o d e a r c o n d i -c i o n a d o m o s t r o u - s e t o t a l m e n t e i n a d e q u a d o . A t u a l m e n t e e s t ã o s e n d o feitas a d a p t a ç õ e s n a e s t r u t u r a d o p r é d i o v i s a n d o m a i o r i s o l a m e n -t o -t é r m i c o c o m o e x -t e r i o r . A i n d a c o m r e l a ç ã o a m a n u t e n ç ã o d e a l a d o s , p o d e s e d i z e r q u e a a l i m e n t a ç ã o n ã o s a n g u í n e a t e m s e m o s t r a d o s a t i s f a t ó r i a . A i n t r o d u ç ã o d e b e t e r r a b a , j u n t a m e n t e c o m m a ç ã s e s o -l u ç ã o d e s a c a r o s e , a -l é m d e a t r a t i v a p a r a os m o s q u i t o s , f a c i l i t a a o p e r a ç ã o d a d a a s u a m a i o r r e s i s t ê n c i a a d e s s e c a ç ã o e p r o l i f e r a ç ã o d e m i c r o o r g a n i s m o s f e r m e n t a d o r e s . O m e s m o n ã o se o b s e r v a n a a l i m e n t a ç ã o s a n g ü í n e a . A o f e r t a d e c o e l h o n ã o t e m d a d o r e s u l t a d o s t ã o s a t i s f a t ó r i o s c o m o f o r a m c o n s e -g u i d o s p o r C O R R Ê A1! . A p r o p o r ç ã o d e f ê m e a s e n g u r g i t a d a s é b a i x a , o q u e d e v e e x p l i c a r a b a i x a p r o d u ç ã o d e o v o s . E s t a f o n t e d e r e p a s t o s a n -g ü í n e o v e m s e n d o s u b s t i t u í d a , c o m r e s u l t a d o s p r o m i s s o r e s , p o r r a t o s b r a n c o s d e l a b o r a t ó r i o . O s a n i m a i s s ã o a n e s t e s i a d o s , c o l o c a d o s n u m a r e d e d e filó e p e n d u r a d o s n o t e t o d a g a i o l a . Q u a n t o a o a c a s a l a m e n t o p o d e - s e d i z e r q u e é u m a d a s p r i n c i p a i s b a r r e i r a s a s e r e m v e n c i d a s n a c o l o n i z a ç ã o d e A n . d a r l i n g i8. O u s o d e g a i o las p e q u e n a s , q u e d ã o g r a n d e a g i l i d a d e n o m a n e j o d e e s p é c i e s e s t e n o g â m i c a s n ã o t e m s e m o s -t r a d o a d e q u a d a s p a r a a c r i a ç ã o d e s s a e s p é c i e . A g a i o l a u t i l i z a d a , c o m 1 m x 1 m x 0 , 6 m , m o s -t r o u q u e p e r m i -t e o v ô o n u p c i a l , c o m c ó p u l a , q u a n d o a p o p u l a ç ã o u l t r a p a s s a 2 . 5 0 0 e x e m p l a -r e s . Q u a n d o a p o p u l a ç ã o d e a l a d o s cai a b a i x o d e s s e v a l o r , a p r o d u ç ã o d e o v o s t o r n a s e i n t e r -m i t e n t e . D o s r e s u l t a d o s o b t i d o s a t é o m o m e n t o o s m a i s c o n s i s t e n t e s r e f e r e m s e a c r i a ç ã o d e l a r v a s . T a n t o n a p a r t e o p e r a c i o n a l ( u s o d e b a n d e j a s , t r o c a d e á g u a , e t c ) c o m o n o q u e d i z r e s p e i t o a o d e s e n v o l v i m e n t o l a r v a r i o a c o l ô n i a é s a -t i s f a -t ó r i a . E m e x p e r i m e n t o s p a r a l e l o s o n d e f o r a m a c o m p a n h a d o s g r u p o s d e 100 l a r v a s m a n t i d a s i n d i v i d u a l m e n t e , p o r é m n a s m e s m a s c o n d i ç õ e s c l i m á t i c a s e d e a l i m e n t a ç ã o d a c o l ô n i a foi p o s sível m e d i r o t e m p o d e d e s e n v o l v i m e n t o l a r v a -r i o b e m c o m o a m o -r t a l i d a d e , p e l o m é t o d o d e d e t e r m i n a ç ã o d o e s t a d i o m e d i a n o , c o m o s e g u e : e s t a d i o d u r a ç ã o ( d i a s ) m o r t a l i d a d e ( % ) I 2 , 7 2 , 4 II 1,7 — I I I 2 , 2 — IV 4 , 5 1,03 V ( p u p a ) 1,7 3,03 I-V 12,8 6 , 1 0 A i n d a q u e estes d a d o s se r e f i r a m a l a r v a s m a n t i d a s i s o l a d a m e n t e , p o r t a n t o livres d a c o m -p e t i ç ã o e x i s t e n t e n a s b a n d e j a s , eles c o n f i r m a m a o b s e r v a ç ã o d i á r i a o n d e se c o n s t a t a r e d u z i d a m o r t a l i d a d e d e l a r v a s . A r a ç ã o o r a e m u s o m o s t r o u v a n t a g e n s s o -b r e a q u e l a u t i l i z a d a p o r C O R R Ê A5 q u a n t o a o t e m p o d e d e s e n v o l v i m e n t o l a r v á r i o . Q u a n t o à m o r t a l i d a d e o s d a d o s s ã o s e m e l h a n t e s . R e s s a l t a - s e a i n d a q u e e s s a r a ç ã o d i s p e n s a a c o m p l e m e n t a ç ã o a l i m e n t a r c o m l e v e d u r a s , c o m s e u s i n c o n v e n i e n t e s , e é feita a p a r t i r d e p r o d u -t o s f a c i l m e n -t e e n c o n -t r a d o s n o m e r c a d o . E m v i s t a d e s s a s c o n s i d e r a ç õ e s , v á r i a s a d a p t a ç õ e s e s t ã o s e n d o feitas n a m e t o d o l o g i a d e m a n u t e n ç ã o d a c o l ô n i a , s e m p r e n u m a p e r s p e c t i v a d e s i m p l i f i c a ç ã o t a n t o d o s e q u i p a m e n -t o s q u a n -t o d a s -t é c n i c a s u -t i l i z a d a s . S U M M A R Y M a i n t e n a n c e o f A n o p h e l e s d a r l i n g i , R o o t , 1926, in l a b o r a t o r y T h e a u t h o r s d e s c r i b e t h e i n s t a l l a t i o n a n d t h e i n i t i a l e f f o r t s t o m a i n t a i n A n o p h e l e s darlingi l a b o r a t o r y c o l o n i e s in A r a r a q u a r a — S P , as p a r t o f t h e M a l a r i a R e s e a r c h P r o g r a m — S U C E N . B a s e d o n o t h e r i n v e s t i g a t o r s ' s u g g e s t i o n s a n d o n t h e i r o w n e x p e r i e n c e in t h e first six m o n t h s o f w o r k , t h e a u t h o r s p r e s e n t s o m e m o d i f i c a t i o n s t o t h e o r i g i n a l m e t h o d s o f i n s e c t r e a r i n g , d e s c r i b e d by C O R R E A in t h e 7 0 \ s . T h e a i m is t o m a i n t a i n insect c o l o n i e s , u s i n g s i m p l e t e c h n i q u e s a n d e q u i p m e n t . I n f o r m a t i o n o n l a r v a l a n d a d u l t f e e d i n g , d u r a t i o n o f l a r v a l i n s t a r s , i n s e c t m o r t a l i t y a n d m a t i n g a r e p r o v i d e d . A G R A D E C I M E N T O S A g r a d e c e m o s a o s t é c n i c o s A n t e n o r S e i s d e -d o s , L u i z Z a i a , J o ã o M a u r i c i o N . -d a S i l v a , J o s é A n t o n i o Z u a n o n e J o s é C a r l o s G a b a r r o n .
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