Fernando Antonio Simas Vaz

Métodos clássicos de

Métodos clássicos de

separação

separação

Fernando Antonio Simas Vaz

Doutorando

1 Introdução:

1. Introdução:

Na grande maioria dos problemas analíticos reais,

devemos identificar e quantificar um ou mais

t

d

i t

l

componentes de uma mistura complexa.

O principal interesse na separação de espécies

químicas surge quando estas apresentam

propriedades semelhantes frente a uma análise

propriedades semelhantes frente a uma análise

qualquer, e por outro lado, possuem funções

distintas num ambiente ou organismo.

1. Introdução:

„ Finalidades: „ Finalidades:

2. Classificação das técnicas de separação

Base da técnica Técnicas de separação

Tamanho - Filtração

Tamanho Filtração

- Diálise

- Cromatografia por exclusão de tamanho Massa e densidade - Centrifugação

Formação de complexo - Mascaramento Mudança no estado físico - Destilação

- Sublimação - Recristalização - Recristalização Mudança no estado químico - Precipitação - Eletrodeposição - Troca iônica

2.1- Separação baseada no tamanho

A propriedade física mais simples que pode ser explorada em uma separação é o tamanho. A separação é realizada através de um meio poroso, no qual somente o analito ou o interferente pode passar.

2.1.1 – Filtração

Processo de separação onde a gravidade, sucção ou g pressão é usado para passar

a amostra por um filtro poroso. É a mais comum poroso. É a mais comum

técnica de separação utilizada baseada no

tamanho tamanho.

2.1- Separação baseada no tamanho

2.1.2 - Diálise

Uma membrana semi-permeável é usada para separar o analitop p p do interferente. Membranas de diálise são usualmente feitas de celulose, com porosidade de 1-5 nm. A amostra é colocada dentro de uma bolsa ou tubo construído com a membrana A membrana de diálise uma bolsa ou tubo construído com a membrana. A membrana de diálise contendo a amostra é colocada em um container preenchido com solução, a qual a composição difere da composição da amostra.

2.1- Separação baseada no tamanho

2.1.3 – Cromatografia por exclusão de tamanho

P ã l

Permeação em gel ou

cromatografia por exclusão molecular.

Uma coluna é preenchida com partículas porosas de ~10 µm,

formadas por ligação

formadas por ligação

intercruzada de dextrina ou

poliacrilamida.

Quanto maior o grau de ligação intercruzada menor é o tamanho dos poros

2.2 - Separação baseada na massa ou densidade:

Centrifugação

U d d há dif d d id d t lit

Usada quando há diferença de massa ou densidade entre analito e interferente.

• Partículas mais “pesadas” experimentam grandes forças • Partículas mais pesadas experimentam grandes forças centrífugas (inércia) Î alta taxa de sedimentação e são acumuladas no fundo do tubo de centrifugação.

• Para partículas de densidades iguais, a separação é baseada na massa;

1 Centrifugação diferencial

2.2

2.2 –– Centrifugação

Centrifugação

1. Centrifugação diferencial. A separação é obtida A separação é obtida principalmente com base no tamanho das partículas. Este tipo de separação é geralmente tipo de separação é geralmente utilizado para obtenção parcialmente pura de organelas subcelulares e macromoléculas.

Condições para a separação de componentes celulares por Centrifugação.

Componentes Força centrífuga (x g) Tempo (min)

Células eucarióticas 1000 5

Membranas celulares núcleos 4000 10 Membranas celulares, núcleos 4000 10 Mitocôndrias, células bacterianas 15000 20 Lisossomos, membranas bacterianas 30000 30

2 C t if ã di t d d id d

2.2

2.2 –– Centrifugação

Centrifugação

2. Centrifugação por gradiente de densidade:

É o método preferido para purificar organelas subcelulares e É o método preferido para purificar organelas subcelulares e

macromoléculas.

Os gradientes de densidade podem ser gerados: 1) ao aplicar camada após camada do meio gradiente, tal como a sacarose ou 2) durante a centrifugação.

A amostra a ser separada é posta sobre a camada da solução ou ép p ç misturada e então centrifugada.

2.3 - Separação baseada em reações de

p

ç

ç

complexação (“mascaramento”)

• Técnica amplamente utilizada para prevenir a interferência nap p p determinação do analito.

• Consiste na formação de um complexo solúvel entre o interferente e um agente mascarante

agente mascarante.

• Mascaramento pode ser considerado como pseudo-separação.

• Uma ampla variedade de íons e moléculas têm sido utilizados comoUma ampla variedade de íons e moléculas têm sido utilizados como agentes mascarantes, dependendo da aplicação.

Agente mascarante Espécies que podem ser mascaradas

CN- _{Ag, Au, Cd, Co, Cu, Fe, Hg, Mn, Ni, Pd, Pt, Zn}

SCN- _{Ag, Cd, Co, Cu, Fe, Ni, Pd, Pt, Zn}

NH₃₃ Ag, Co, Cu, Fe, Pd, Ptg, , , , , F- _{Al, Co, Cr, Mg, Mn, Sn, Zn}

2.3 - Separação baseada em reações de

complexação (“mascaramento”)

„Exemplo:

Sugira um agente mascarante para análise de Al na presença de Fe.

2.4 - Separação baseada na mudança de estado

2.4 Separação baseada na mudança de estado

U lit i t f t l t tã

Uma vez que analito e interferente usualmente estão na mesma fase, a separação pode ser efetuada pela indução da mudança de estados físico ou químico de um deles.

• Mudanças no estado físico têm propósitos de separação que envolvem transições líquido-gás ou sólido-gás.

2.4

2.4 -- Separação baseada na mudança de estado

Separação baseada na mudança de estado

2 4 1 Mudança no estado físico

2.4.1. Mudança no estado físico

A) Amostra líquida:

Quando o analito e o interferente são líquidos

miscíveis, a separação baseada na destilação pode ser

possível se os pontos de ebulição são

possível se os pontos de ebulição são

2 4 1 Mudança no estado físico

2.4

2.4 -- Separação baseada na mudança de estado

Separação baseada na mudança de estado

2.4.1. Mudança no estado físico

A) Amostra líquida:

Destilação Simples

• Não produz separação

muito eficiente;

• É útil somente para

separação de líquidos

lát i

i t

d

voláteis misturados com

não-voláteis ou para

separações de líquidos com

separações de líquidos com

pontos de ebulição que

2.4

2.4 -- Separação baseada na mudança de estado

Separação baseada na mudança de estado

2 4 1 Mudança no estado físico 2.4.1. Mudança no estado físico

A) Amostra líquida:

Destilação Fracionada

• Destilação mais eficiente;

A

l

d

d til ã

é

• A coluna de destilação é

preenchida com materiais

de

grandes

áreas

de

grandes

áreas

superficiais (esponja de aço

ou gota de vidro).

• Com isso, o líquido de

maior PE terá dificuldade

para atravessar a coluna,

resultando na separação.

2.4

2.4 -- Separação baseada na mudança de estado

Separação baseada na mudança de estado

2.4

2.4 -- Separação baseada na mudança de estado

Separação baseada na mudança de estado

2 4 1 Mudança no estado físico 2.4.1. Mudança no estado físico

B) Amostra sólida:

Sublimação:

A

t

é

id

t

d t

t

ã

A amostra é aquecida em torno da temperatura e pressão

abaixo do ponto triplo.

O ólid

i

l

d lí id

O sólido vaporiza sem passar pelo estado líquido.

O vapor é então condensado para recuperar o sólido

purificado.

2.4

2.4 -- Separação baseada na mudança de estado

Separação baseada na mudança de estado

2 4 1 Mudança no estado físico 2.4.1. Mudança no estado físico

Liofilização ou criodessecação:

Liofilização ou criodessecação:

•É um processo de desidratação (remoção de água, por sublimação) usado para preservar a integridade de alimentos perecíveis (frutas,

) i í i ti b té i d õ líti

ovos, carnes), princípios ativos, bactérias, padrões analíticos.

•A amostra contendo água é congelada, a pressão do sistema é diminuída (vácuo) e a temperatura é gradativamente elevada

diminuída (vácuo) e a temperatura é gradativamente elevada. •A água é retirada, restando apenas amostra seca.

2.4

2.4 -- Separação baseada na mudança de estado

Separação baseada na mudança de estado

2 4 1 Mudança no estado físico 2.4.1. Mudança no estado físico

B) Amostra sólida:

Recristalização:

A amostra é dissolvida gradativamente em um mínimo volume de A amostra é dissolvida gradativamente em um mínimo volume de solvente.

O analito deve ser solúvel no solvente aquecido e minimamente solúvel no solvente frio.

2.4

2.4 -- Separação baseada na mudança de estado

Separação baseada na mudança de estado

2.4.2. Mudança no estado químico

A reatividade química pode ser usada como meio de

A reatividade química pode ser usada como meio de

separação através do efeito de mudança de estado

químico do analito ou interferente.

Precipitação

Eletrodeposição

Troca iônica

2.4

2.4 -- Separação baseada na mudança de estado

Separação baseada na mudança de estado

Precipitação

2.4.2. Mudança no estado químico

Precipitação:

Separações por precipitação requerem grandes diferenças de solubilidade entre analito e interferentes

solubilidade entre analito e interferentes.

Controle do pH: utilizam-se ácidos e bases fortes ou tampões. Íons metálicos.

Adição de precipitantes inorgânicos (sulfetos, hidróxidos, fosfatos, carbonatos, oxalatos, cloretos e sulfatos) e precipitantes orgânicos (dimetilglioxima, 8-hidroxiquinolina).

2.4

2.4 -- Separação baseada na mudança de estado

Separação baseada na mudança de estado

El t d

i ã

2.4.2. Mudança no estado químico

Eletrodeposição:

Método altamente útil para separações de metais.

A espécie reduzida mais facilmente (analito ou interferente) é isolada como fase separada, precipitada no mercúrio. fase separada, precipitada no mercúrio. As separações se tornam efetivas

quando se controla o potencial do eletrodo de trabalho.

2.4

2.4 -- Separação baseada na mudança de estado

Separação baseada na mudança de estado

T

iô i

2.4.2. Mudança no estado químico

Troca iônica:

Particularmente efetiva

quando as cargas do analito e do(s) interferente(s) são e do(s) interferente(s) são opostas.

Também utilizada para concentração.

2.5 - Separação baseada na partição entre fases

p

ç

p

ç

Extração

A mais importante classe de técnicas de separação é baseada na partição seletiva do analito ou interferente entre duas fases

imiscíveis. Quando a fase contendo o soluto S é mantida em contato com uma segunda fase, o soluto particiona entre as duas fases.g p

S

_fase1

S

_fase2

A constante de equilíbrio para a reação: A constante de equilíbrio para a reação:

[ ]

[ ]

2 1 fase fase D S S K =

é chamada constante de distribuição ou coeficiente de partição.

S K é d ã l d f 1 f 2

[ ]

fase2

Se K_D é grande, então o soluto se move da fase 1 para a fase 2 com facilidade.

Se uma fase contendo dois solutos é colocada em contato com uma Se uma fase contendo dois solutos é colocada em contato com uma

2.5

2.5 -- Extração

Extração

A) Extração em fase sólida

A) Extração em fase sólida

A amostra passa através de um cartucho contendo um material adsorvente. Para amostras líquidas o sólido adsorvente é isolado ou entre adsorvente. Para amostras líquidas o sólido adsorvente é isolado ou entre um cartucho em forma de disco ou cartucho em forma de coluna. A escolha do adsorvente depende das propriedades do analito e da matriz.

Adsorventes para Extração em Fase-Sólida de amostras líquidas. Adsorvente Estrutura da

superfície

Propriedades e usos superfície

Sílica Retém espécies de polaridade baixa

a moderada de matrizes orgânicas. Vitaminas lipossolúveis e esteróides.

Al i R é é i hid fíli d

Alumina Retém espécies hidrofílicas de

matrizes orgânicas.

Cianopropil Pesticidas e peptídeos hidrofóbicos.

Diol Proteínas peptídeos e fungicidas

Diol Proteínas, peptídeos e fungicidas.

Octadecil (C-18)

Retém espécies hidrofóbicas de matrizes aquosas.

2.5

2.5 -- Extração

Extração

B) Extração sólido-gás

A amostra gasosa é passada por um compartimento contendo um adsorvente sólido

adsorvente sólido.

Exemplo:p

Análise de compostos orgânicos. A amostra é queimada em um fluxo de O₂, e os gases produzidos pela combustão são passados através de uma série de adsorventes de fase sólida que removem através de uma série de adsorventes de fase sólida que removem

2.5

2.5 -- Extração

Extração

C) Extrações exaustivas ou contínuas

C 1) Extrator de Soxhlet (extração líquido sólido) C.1) Extrator de Soxhlet (extração líquido-sólido)

A extração exaustiva permite a A extração exaustiva permite a separação de componentes de uma mistura que tem razão de distribuição mistura que tem razão de distribuição relativamente desfavorável (<1).

Utiliza-se um sistema no qual o solvente q orgânico é automaticamente destilado,

condensado e forçado a passar ç p continuamente pela amostra.

2.5

2.5 -- Extração

Extração

C) Extrações exaustivas ou contínuas

C 2) Extração líquido gás C.2) Extração líquido-gás

• Esta técnica é utilizada para separar analitos voláteis de amostras líquidas nas quais os analitos serão subsequentemente líquidas, nas quais os analitos serão subsequentemente “aprisionados” em um adsorvente sólido.

•

Compostos orgânicos voláteis podem ser quantitativamentep g p q removidos de amostras líquidas mediante extração líquido-gás.

2.5

2.5 -- Extração

Extração

C) Extrações exaustivas ou contínuas

C 3) Extração com fluido supercrítico C.3) Extração com fluido supercrítico

Quando uma substância é aquecida acima da temperatura e pressão crítica se forma um fluido supercrítico com propriedades intermediárias ao gás e ao líquido. Fluidos supercríticos são melhores solventes que os gases, tornando-se melhores reagentes para solventes que os gases, tornando se melhores reagentes para extrações. Adicionalmente, a viscosidade do fluido é significativamente menor que a do solvente líquido, permitindo maior contato com as partículas da amostra

2.5

2.5 -- Extração

Extração

D) Extrações Líquido-Líquido

A extração líquido-líquido é uma das mais importantes técnicas de separação usada em laboratórios ambientais, clínicos e industriais.

Em uma extração líquido-líquido simples o soluto é particionado entreç q q p p 2 fases imiscíveis. Na maioria dos casos uma fase é aquosa e a outra fase é um solvente orgânico.

A fase de maior densidade fica embaixo. O soluto, inicialmente presente na fase aquosa, após a extração estará presente nas duas fases.

2.5

2.5 -- Extração

Extração

A fi iê i d ELL é d t

i d

t t d

D) Extrações Líquido-Líquido

A eficiência da ELL é determinada por uma constante de

equilíbrio do soluto entre as fases. A eficiência também é

influenciada por reações secundárias envolvendo o soluto

influenciada por reações secundárias envolvendo o soluto,

como por exemplo: reações ácido-base e equilíbrio de

complexação.Î

p

ç

2.5

2.5 -- Extração

Extração

D) Extrações Líquido-Líquido

Coeficiente de distribuição (K

_D

) e Razão de distribuição (D)

S

_(aq)

S

_(org)

[ ]

[ ]

aq org D

S

S

K

=

Quanto

MAIOR

K

_D

_{extração do soluto}

Mais favorável a

q

ç

2.5

2.5 -- Extração

Extração

Para uma avaliação da eficiência de extração, deve ser considerada a

t ã TOTAL ( líti ) d l t d f D fi R ã

D) Extrações Líquido-Líquido

concentração TOTAL (analítica) do soluto em cada fase. Define-se Razão

de distribuição, D, como:

[ ]

S

Quando o soluto existe em somente uma forma em cada fase:

[ ]

[ ]

S org_{aq Total}Total S

D

− −

=

Quando o soluto existe em somente uma forma em cada fase:

D

K D =

Se, no entanto, o soluto existe em mais de uma forma em uma das fases, então D e K_D possuem valores diferentes:

[ ]

S

2.5

2.5 -- Extração

Extração

D.1) Extrações Líquido-Líquido - Sem reação secundária

[ ]

S

[ ]

S

[ ]

[ ]

[ ]

[ ]

D aq org Total aq Total org _K S S S S D = = = − − 1 ) ( 1 ) ( 0 ) (aq n aq n org n = + (1) (2) ) ( 1 ) ( ] [ aq aq aq V n S = = = ) ( 1 ) ( ] [ org org org V n S ) ( 1 ) ( 0 ) ( org aq aq V n n − (3) (4) Substituindo (3) e (4) em (1): ) ( 1 ) ( ) ( 1 ) ( ) ( 0 ) ( ) ( 1 ) ( ) ( 1 ) ( 0 ) ( ] [ ] [ ] [ org aq aq aq aq aq aq aq org aq aq aq org V n V n V n V n V n n S S D = = − = − (5) ] [DV V n V n + = (aq)₁ (aq)

( )

q V n = = (7) Rearranjando, ] [

( )

_q (7)

2.5

2.5 -- Extração

Extração

E

U

l

S

K

á

l

fó

i i

l 5 U

D.1) Extrações Líquido-Líquido - Sem reação secundária

Ex.: Um soluto S, tem K

_D

para água e clorofórmio igual a 5. Uma

porção de 50,00 mL de solução aquosa a 0,05M é extraída com

15 00 mL de clorofórmio

15,00 mL de clorofórmio.

A) Qual a eficiência da separação? (60%)

B) Qual a concentração final do soluto em cada fase?

) Q

ç

([S]aq = 0,02 M; [S]org = 0,1 M)

C) Qual o volume de clorofórmio é necessário para uma extração

de 99,9% do soluto? (9990 mL =

~10 L

)

2.5

2.5 -- Extração

Extração

D.2) Extrações sucessivas Líquido-Líquido -

Sem reação secundária

( )

n(aq)₁ V(aq) q = =

( )

) ( ) ( 0 ) ( 1 aq org aq aq V DV n q + = =

( )

n( ) V( )

( )

) ( ) ( ) ( 1 ) ( 2 ) ( 2 aq org aq aq aq aq V DV V n n q + = =

( )

( ) ( )

_{1 2} 0 ) ( 2 ) ( 2 aq aq aq aq aq q q n n Q = = ⋅

( )

2 ) ( ) ( ) ( 2        + = aq aq V DV V Q ) ( ) (   DV org +V aq

( )

_ V n 60% 40% 16%

_{( )}



2.5

2.5 -- Extração

Extração

Ex : Para o exemplo descrito anteriormente determine:

D.2) Extrações sucessivas Líquido-Líquido -

Sem reação secundária

Ex.: Para o exemplo descrito anteriormente, determine:

a) A eficiência de extração para 2 extrações. (84%)

b) A eficiência de extração para 3 extrações. (93,6%)

c) O número de extrações requerida para uma eficiência de

)

ç

q

p

99,9% de extração do soluto. (mínimo = 8 Î 120,0 mL)

2.5

2.5 -- Extração

Extração

D.3) Extrações Líquido-Líquido - Envolvendo equilíbrio ácido - base

Se o soluto participa de uma reação de equilíbrio na

Se o soluto participa de uma reação de equilíbrio na

fase aquosa, então a razão de distribuição, D, e o

coeficiente de partição, K

_D

, não são iguais:

Fase aquosa Fase orgânica

2.5

2.5 -- Extração

Extração

D.3) Extrações Líquido-Líquido - Envolvendo equilíbrio ácido - base

[ ]

HA

[ ]

HA

[ ]

HA

[ ]

[ ]

aq org D K HA HA =

[ ]

_{[ ]}

_{[ ]}

[ ]

[ ]

aq aq org Total aq Total org D -A HA HA HA HA + = = − − (1) (2)

[ ]

aq aq aq aq aq aq K K ] O H HA ] A HA ] A ] O H 3 a -3 a ₊ + = ⇒ = [ [ ] [ [ [ ₍₃₎ Substituindo 3 em 2, temos:

[ ]

HA ₌

[ ]

org D HA

[ ]

org D HA

[ ]

[ ]

aq aq aq org K D ] [ ] [ + + = O H HA HA HA 3 a

[ ]

        + = + aq aq K D ] [ 1 O H HA 3 a

[ ]

[ ]

_       + = + aq aq org K D ] [ 1 O H HA 3 a   O H K K [ +]

2.5

2.5 -- Extração

Extração

D.3) Extrações Líquido-Líquido - Envolvendo equilíbrio ácido - base

Ex.: Um soluto ácido, HA, tem Ka = 1,00 . 10-5 _{e um coeficiente de partição (K} D)

entre água e benzeno igual a 3,00. Calcule a eficiência da extração quandog g ç q 50,00 mL a 0,025M de solução aquosa de HA é extraída com 50,00 mL de benzeno em:

a) pH 3,00 (75%) b) pH 5 00 (60%) b) pH 5,00 (60%) c) pH 7,00 (3%)

2.5

2.5 -- Extração

Extração

D.3) Extrações Líquido-Líquido - Envolvendo equilíbrio ácido - base

Dever de casa:

Prove que para bases, temos:

Onde: K_a é a constante de dissociação do ácido conjugado da base.

Fase Orgânica Fase Aquosa

2.5

2.5 -- Extração

Extração

D.4) Extrações Líquido-Líquido - Envolvendo complexação

Os compostos iônicos são dificilmente extraídos de soluções aquosas por solventes orgânicos em virtude da grande energia eletrostática de solvatação envolvida

solvatação envolvida.

A forma mais comum de se extrair uma espécie iônica da água é neutralizando a sua carga, através da formação de um complexo metálico neutralizando a sua carga, através da formação de um complexo metálico neutro.

Quanto maior e mais hidrofóbico for a espécie molecular resultante, melhor será a extração.

2.5

2.5 -- Extração

Extração

D.4) Extrações Líquido-Líquido - Envolvendo complexação

HQ = ligante não dissociado Q- _{= base conjugada do ligante}

Fase Orgânica 2HQ MQ₂ j g g Mn+ _{= metal} MQ_n = complexo metal-ligante 2HQ K_D1 K_D2 Fase Aquosa 2HQ K_a K 2H+ _{+ 2Q}- _{+ M}2+ _MQ 2 K_f

2.5

2.5 -- Extração

Extração

D.4) Extrações Líquido-Líquido - Envolvendo complexação

HQ_(aq) HQ_(org)

[ ]

_{[ ]}

(1) aq org D K HQ HQ = 1 HQ_(aq) + H₂O H+ (aq) + Q-(aq)

[ ]

(2) aq aq a K HQ ] [Q ] [H+ -= Mn+ ( ) + nQ-( ) MQ ( ) (3)

[ ]

HQ aq n] [MQ _aq f K =

M _(aq) + nQ _(aq) MQ_{n(aq) n - n} (3)

] [Q ] [M _{aq aq} f K ₊ ] [MQ MQ_n(aq) MQ_{n (org)} (4) aq org D K ] [MQ ] [MQ n n = 2

2.5

2.5 -- Extração

Extração

Q Q

D.4) Extrações Líquido-Líquido - Envolvendo complexação

aq org aq aq org aq org C C D ] [M ] [MQ ] [MQ ] [M ] [MQ n n n n n + + ₊ ≈ = = (5) Rearranjando as equações (2) e (3): (2) n n_{- n} ] [Q ] [MQ ] [M aq f aq aq K = +

[ ]

aq aq a aq K ] [H HQ ] [Q -+ ⋅ =

[ ]

_n aq n aq n a n aq K ] [H HQ ] [Q -+ ⋅ = (3) substituindo q f aq aq n ] [H ] [MQ ] [MQ +

2.5

2.5 -- Extração

Extração

D.4) Extrações Líquido-Líquido - Envolvendo complexação

[ ]

n

[ ]

_nnorg aq K HQ HQ = (1) (4) [MQ_n]_org = K_D2[MQ_n]_aq Rearranjando as equações (1) e (4): Substituindo (4) e (6) em (5):

[ ]

_n D aq K ₁ g q

[ ]

n aq n aq n a f D n aq aq aq D aq org K K K K D ] [H HQ ] [H ] [MQ ] [MQ ] [M ] [MQ n n n n + + + = = ⋅ ⋅ ⋅ ≈ 2 _{2 (7)}

[ ]

n aq n a f K K ⋅ ⋅ HQ S b tit i d (1) (7)

[ ]

n n K K K ⋅ ⋅ HQ Substituindo (1) em (7):

[ ]

K K K HQ

2.5

2.5 -- Extração

Extração

Para a escolha do solvente de extração adequado:

• Razão de distribuição elevada para os solutos e baixa para as impurezas;

impurezas;

• Fases orgânica e aquosa imiscíveis; • Viscosidade suficientemente baixa; • Viscosidade suficientemente baixa;

• Diferença de densidade em relação à fase aquosa, a fim de evitar formação de emulsões;ç ;

• Toxidez e inflamabilidade baixas;

• Facilidade de recuperação do soluto no solvente para oFacilidade de recuperação do soluto no solvente para o processamento analítico subseqüente.