Influência de drogas administrativas durante o período neo natal sobre a aprendizagem em ratos quando adultos.

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UNIVERS IEÀBE EEDERAL DE SANTA CATÀRINÀ -=- UFSC

INFLUENc1à DE nxoaàs ànfiifixsmaânàsínuaâmmfl o Pââíono Nflo nâmâ;

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DE

BÉJEICINÀ ` [a'Ú'

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SOBRE Q

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¡›-| _na ÀGEM ga aÀ§os}QUÀfinø ÀBULTQS

FL 'U K oa1âNÓPoLIs 1977 _ ° . BLÂ1\ÉD INÊ. BELLI J \ r

"Os animais sãe capazes de lembrar muitas coisas, entre elas,o local onde estiveram previamente. Experimento com.ratos, sugg rem que essa espécie ãe mamária está localizaäo em uma regiãe

ão cérebre conhecido como hipecampo". (David S. Olton, Scienti

fic American, pag 82, jun l977)f _

`

"Em ga c+O U1 implañtados cronicamente, a administraçãe äe _cloridi

azepóxiâo, na dose de 5,0 mg por Kilo de peso, produziu _Siäni

ficante lentificeção de ativiäede elétrica de`amfäala¿hmocampo

e

'sepmm

mas nãø ae fzómex" (s‹ma11e1<; 11.1. âzaa. Sci 96

303, 1962). i '

» .

ÊÊQÊÊÊEÊÊQ

»

'

O presente traoalho foi realizado em.co1aboração com o

Dr. Ari Bertoldo Sell, professor da cadeira de Farmacologia

da UFSC, o qual desenvolve pesquisa em psicofarmacologia,_ so

bre a influência de drogas na infância, da qual participamos

como bolsista de Iniciação a Êesquisa'( _{Í ).»} u

Sell em conjunto com Fonseca-e Carllini (1975), demons

ue o Diazepan nas doses de _{QQ a 10 mg,} injetados do 59

‹.+É Q?

flê

i-Q

ao 459 dia de vida do rato, produzia efeito deletério sobre a

aprendizagem na idade adulta, quando comparados ao _{grupo con}

trole; no teste de aprendizagem realizado no labirinto tipo

Leashley III» :

Nosso objetivo seria o de observar dentro do periodode

O a 45 dias; qual o espaço de tempo no _{qual a injeção da drg}

ga ocasionaria mudanças mais significativas do comportamento destes animais, quando adultos. _

' `

_

O presente trabalho _é uma nota prévia sobre resultados obtidos na injeção da droga do G _ao 59 dia de vida do rato9

sendo que a pesquisa gngloba ainda os períodos de O ao 159

_/

dias, 152 ao 309 àias, 3oQ ao 452 àias e áõ 19 ao 45â'¢iaS¡

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3

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KD I ` _ EQ* °

Estudando a ontogênese dos sistemas defitransmissores ,

sabemos que apesarr das diferenças existentes entre cada espš

cie animal, temos certas características mais ou menos comum a todas elas.

Em

toda a escala animal temos periodo de organogš nese e multiplicação neuronal, periodo de crescimento cerebral

rápido, período maduro e período de envelhecimento. (*?) .~

Usando~se uma técnica histoqaimica de fluorescência,Q9

de-se deürminar, em _{ratos, que a} proliferação de axônios terni nais ocorre principalmente nos periodos: imediato antes do _nas

_ 9

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cimento e no pos~natal proximo. Para os neuronios noradrenergi

cos e serotonšrgicos a maior proliferação ocorre nas primeiras

três semanas aQ§s_o nascimento, enquanto que para os _dopaminág

gicos, nas primeiras 4 semanas. (**§

Tranquilizantes menores induzem sedação já em doses

~~

baixas, e lentificaçao do E E G cortical em doses elevadas _dlk sugerindo que essas substâncias diminuem a atividade Neuronal.

É

sabido que os benzodiazeçínicos diminuem a atividade da amidala e _{hinocamro, esta} áltima envolvida com o prooessode

memdria (9~), quesito fundamentad para haver aprendizagem G,¶@8,lO)

QO äíš «T1

Já em doses elevadas, produzem lentificação cortical ,

por atuar sobre a atividade noradrenérgica dorsal, Essa via se

origina no Locus Coeruleus e inerva o Esso cortex, o Neo cortes

e a formação hipocampal _(52).

Dobbing Çâf \../ em 1968; discute a vulnerabilidade do _pg

'Ó

riodo neo natal a agentes externos, provocando efeitos físicos e¿eomportamentais, que persistem na idade adulta, apesar de me nos óbvias do que as grosseiras deformações provocadas por in

terferência na organogeneseõ _'

_

Baseados nessas afirmações, e no estudo de _{vários auto}

. _ . . I .

res sobre a influência de _{diversas drogas em varios períodos} (152, 4), resolvemos partir para experiência laboratorial, em

ratos; de drogas usadas habitualmente no período neo natal do

-2

.z

, .Tendo em vista experiências de vários autores coníi

mando a hipotese de alterações comportamentais em ratos expos

ltos.a _{agentes externos} no _{período de} G _{aÍ45 dias (i,,2;} 4), re

solvemos verificar o período mais significativo para que tais mgâifioaçoes ocorram.1

*Como o diazepan relaciona~se com a área hipocampal Qlb

responsável pelo mecanismo da memoria ( _;9 ),estudamosssus

efeitos através de testes-de aprendizagem.

. \

taââaaêêê

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asiâsâ

~ _/

A Ratos Wistar, fêmeas, de 3 meses de idade, foram _co1Q

cados em caixas individuais, 15 dias após _{o cruzamento; Apos} o

nascimento, a ninhada foi reduzida áara 6 «"8 filhotes. Os _ao;

mais foram desmamados~aos 25 dias de vida, quando se fez a se

paração por sexo. Foram então colocados em gaiolas de arame,em grupo de 3 elementos, de acordo com o sexo e tratamento.o

Foram mantidos em.laborat§rio com ar condicionado, em

temperatura de 22°C

_Í

_1, com ciclo noite/dia de 12 horas.Cuida

dos diários dos animais foram feitos.entre as 8 ~ ₉ horas V e

consistem da_kimpeza da gaiola suprimento de água e comida ad

iibiâumâ ~ '~.

Não houve manuseio dos animais até a idade adulta,qua§

do foram realizados os testes. -

a) Tratamento por drogas OO f

i os`filhotes de 8 mães-foram utilizados nessa fase da expo riêneis, âiviâiaos em;

~ _{grupo controle}

à grupo droga

o grupo droga recebeu, doiO (zero) aô 59 dia de _{vida,diári§} mente, injeções subcutâneas do Diazepan na dosagem de 5,0

mg/Kg de pëso, dissolvido em saliva e tween.80,

O grupo controle recebeu saliva + solventeo As _in$ções

foram feitas no dorso dos amimais, num volume de O,l ml.

. M. _ 3 Frocedimento: - ' › 22

b.l) Teste de _{aprendizagem:} foi utilizado labirinto simples e e labirinto tipo Lashíey III para essa experiência. flatos em

jejum de 22

h

foram colocados 2 vezes ao dia, 2 vezes por sena na, nnma pista reta, para aprenderem a fazer o percurso entre

uma caixa de saída até uma de chegada que continha alimentos .

Foram realizados 19 dias de treino (20 treinos);

Apos este treino preliminar, os animais foram colocados em um aparelho Lashley III, 2 vezes por semana, com ₂ ctreinos

diários, num total de 20 sessõest' * - '

.

_ O tempo permitido para permanecer no Lashley III foi de 3

minutos e o reforço consistiu.da permanência durante 30 segan dos na caixa que continha alimento, Hegistrou-se em 15 sessões o número de erros e o tempo de corrida desde a caixa de ,saída

iv 5+ .ak_U W caixa-de chegada.

- ¬

Consideróu-se como critério satisfatório , de a Prendiza em 8 para rato, quando ele, em 2 treinos consecutivos não efetuasse

nv

mais de ₃ erros e o tempo de corrida nao ultrapassasse 25 _se

gundos. '

_; 1

b,2) Teste _de Í `

: Apšs o término da experiência b.l, os

a

_____ ,memoria V _

nimais foram submetidos a um teste de memoria a curto prazo,no Shuttle box; O teste constitui do seguinte: cada animal foi _eo looado na parte iliminada deste aparelho, sendo que lOsegundos

apás, era aberto uma passagem-para-o lado _{escuro (local preíe} rido por estes animais), e medido o tempo-transcorrido Q). ct-.¡./› que

o animal chegasse a esse lado. t

2

_

Quando o animal chegava.ac lado escuro, recebia nas patas,

um choque, através de grade eletrifioada. Era em seguida retis

. ' I _

rado e _{colocado em sua gaiola, para 24 horas apos, _repetir»se} o mesmo procedimento, sem.nc _{entanto, haver o choque. O regis}

tro de tempo tlevado para entrar na caixa escura no 29 _{dia de}

teste š.que foi considerado como medida de memoria,

1

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D O S ` -.--....».~-ú--u›1‹-41.-' ` .

Experiência 1: Lashey III '

_

os resultados podem ser vistos nas figuras 1, 2, 3 e 4 na tabe

la I. _

'

“ `

3 A análise dos gráficos não revelou diferenças significa tivas enãre os grupos, sendo desnecessária a aplicação de _tes

I b tes estatisticos. 1 ~ to d 1 '

axgeràênzia 2: shuttle box. '

os resultados podem ser observados nos gráficos 5 e 6. Pela aná lise dos gráficos, igualmente não se observam diferença entre

os dois os; _ - ` z OQ ›- _.fã

ÊEÊÊÊÊÊÃQ

, Sabemos através de tecnicas histoqušmicas de_fluorescê§ cia, que principalmente durante o período de O a 45 dias de _Yi

da, os aíveis de metabálitos e precursores _{dos neurotransmissg}

res cerebrais devem ser elevar ate atingir um plato o qual per

siste`então`aü§ a fase adulta, 4 ~

_' `

Sabe~se ainda, que ratos expostos a agentes externos

_/

tais como fenobarbital, diazepam, haloperidol e` _{clorpromazina,} entre outros, durante o período neoenatal, apresentarão tmodiíi

caç5es_comportamentais na fase adulta ( 5)»

d '

-

Os exatos inibricamentos entre esses diversos .sistemas

não

se encontra totalmente estabelecido. -No _{caso 'específico da}

memoria, sabemos que eofire influência da via Eoradrenšrgica, a qual age sobre via hipocampal (5_, ), ' '

.

.M O diazepam, como droga pertencente.ao grupo dos tranqqi lizantes menores (5 ), provoca, nas doses utilizadas, lentifica

ção da atividade elétrica da amídala, hipocampo e septum, . por

\ ›. ~ L ` 5 E1) 8__._ :s ` .

ossa experiência observamos atraves de testes de

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' 9 _' _au

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prend1zagem,fos quals requáš memdrla íntegra,-nao haver dlfereg

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W .

ça significante entre os ratos submetidos a injeções diárias de

Diazepan ea dosagem de 5,0 mg/Kg de peso, durante o período de

6 a 5 dias de vida, e o grupo controle.¡ _ A'

Comprovandê esse resultado e conhecedores da opiniäo<kfi

diversos autores citados, çodemos propor: A '

li» o tempo de exposição a droga não foi _{suficiente. ea}

ra produzir alterações rindeléveis no amadurecimento neuronal;

2%; Esse período compreendido entre O'a 5 dias de vida não š impörtante'para o amadurecimento do _{sistema Noradrenšrgâ}

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§í3...äšãlÊ

» Besquisamos a influência da droga Diazepan na dosagem de 5,9 mg injetadas no período de O a15 dias de vida em ratos, onde observamos não provocar alteraçšes comportamentais quando

adultos. ' ~ ` \ v 1

QÃBELá I ~ N9 total äe rates que atingiram ô Çritšria na Lashley'II§

nã total de animais, em 15 sessões.

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