Aula 3 - 04.06

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Controle do crescimento

microbiano

Esterilização

Desinfecção

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Controle do crescimento microbiano

Objetivo Principal:

Limitar o crescimento

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Algumas Definições Importantes:

• Esterilização:

 Processo físico ou químico, através do qual são destruídas todas as formas microbianas

 Agentes:

 Físicos: calor úmido (autoclave), calor seco(forno), incineração, “flambagem”. Radiação x,

 Químicos: óxido de etileno, glutaraldeído

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Taxa de morte microbiana

• Descreve o número de microrganismos mortos em relação ao tempo de ação do agente antimicrobiano:

População inicial: 1.000.000 bactérias

Tratamento durante 1 min

100.000 bactérias (90% de morte)

Tratamento durante 1 min

10.000 bactérias (+90% de morte)

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• Taxa de morte microbiana

–Descreve o número de microrganismos

mortos em relação ao tempo de ação

do agente antimicrobiano:

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• Desinfecção:

• Processo físico ou químico que destrói

micro-organismos presentes em objetos inanimados

(- esporos).

• Agentes:Desinfetantes

• Químicos: Substâncias químicas como etanol a

70%, isopropanol, quaternário de amônio,

formaldeído entre 4 e 8%.

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• Anti-sepsia ou assepsia:

– Destruição ou eliminação de micro-organismos presentes em tecidos vivos através de agentes antimicrobianos

– Agentes: Anti-sépticos (etanol, álcool iodado)

• Sanitização:

– Redução das contagens microbianas em utensílios alimentares a níveis seguros de saúde pública, minimizando as chances de transmissão de doenças de um usuário para outro.

– Agentes: Lavagem em altas temperaturas, uso de desinfetantes

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O Controle da população microbiana

objetiva:

• Evitar transmissão de doenças

• Aumentar a vida útil de alimentos,

tecidos (têxteis), fármacos

• Evitar contaminações de processos

industriais

• Diminuir a contaminação ambiental:

• Solos • Água • Ar

• Meios

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Fatores que influenciam a efetividade dos agentes antimicrobianos

 Natureza do item a ser desinfetado:

 Quanto maior a porosidade do item, maior o tempo requerido para eliminar a população

 Quanto a concentração de lipídeos no equipamento  Número de micro-organismos presentes:

 Em geral, quanto maior o número de micro-organismos, maior o tempo requerido para eliminar a maioria da população.

 Natureza da população:

 Esporos; Estágio de vida e composição das Bactérias, fungos  Concentração do agente microbicida

 Tempo de Exposição ao agente

 Condições Ambientais : pH, dureza da água, umidade, temperatura

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Resistência do organismo:

Ordem descendente genérica de resistência aos agentes antimicrobia nos: Príons Esporos bacterianos Micobactéria

Vírus hidrofílicos ou pequenos

Fungos

Bactéria vegetativa

Vírus lipofílicos ou médios

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Métodos de controle do crescimento

microbiano

• Físico

• Químico

• Escolha do método:

– depende do que se quer: equipamento, ar, meio – Temolábil ou não

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Métodos físicos

• Calor:

– Úmido:Fervura, Autoclave;

– Seco: Chama direta, Ar quente, Incineração

• Pasteurização. • Filtração:

– HEPA: Retém partículas > 0,3 m diâmetro – ULPA: Retém partículas > 0,1 m diâmetro

Membrana: Utilizado em indústrias e laboratórios.

Espessura= 0,1 mm; Poros= 0,22-0,45 m. • Frio: – Refrigeração; – Congelamento; – Liofilização. • Pressão Osmótica • Radiação:

– Ionizante : Raios Gama, raios X (alta Energia; l baixo )

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Químico: Agentes esterilizantes

• Autorizados pelo Ministério da Saúde:

- Aldeídos (Glutaraldeído, Formaldeído);

- Óxido de Etileno;

- Ácido Peracético;

- Peróxido de Hidrogênio;

- Brometo de Lauril Dimetil Benzil Amônio

(BLDBA).

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Químico: Agentes esterilizantes

• Aldeídos:

Glutaraldeído:

- Altera os ácidos nucléicos e síntese de

proteínas;

- Utilizado a 2% por 8-12 horas;

- O material a ser esterilizado deve estar em recipiente fechado e ou completamente submerso;

- Cuidados ao enxaguar ( com água destilada esterilizada);

- Necessário o uso de gorro, máscara, avental, luvas; - Indicado para uso em artigos críticos termossensíveis

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Formaldeído:

- Altera os ácidos nucléicos e as

proteínas;

- É um gás encontrado na forma líquida;

- Aplicações:

. 8-10% por 18 horas, para esterilização; . 4% por 30 min, para desinfecção;

. 18 mL formalina + 35 mL água/m3_{, para fumigação (hoje proibido em}

ambientes sociais);

- Necessário o uso de gorro, máscara, avental, luvas;

- Indicado para uso em , biotérios, salas de envase de

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Óxido de Etileno:

- Gás inflamável, explosivo e carcinogênico_;

- Altera as proteínas microbianas, impede a replicação; - Requer uma câmara especial para uso;

- Altamente penetrante;

- Utilizado a 450 mg/mL em umidade de 20-40% a

49-60o_{C, ou 30-38}o_{C por 4 a 8 horas;}

- Após esterilização, deve ser submetido a aeração prolongada (12 horas) ;

- Necessário o uso de gorro, máscara, avental, luvas; - Indicado para uso em artigos críticos termossensíveis

(catéteres)

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Ácido Peracético:

- Atua na desnaturação das proteínas; - Requer uma câmara especial para uso;

- Utilizado a 10.000 ppm por 20 min (p/ inativar esporos); - É misturado a anticorrosivo e detergente;

- O processo deve ser totalmente automatizado;

- O operador não entra em contato com o agente químico;

- Possui uma vida de uso de 24 horas;

Indicado para uso em artigos críticos termossensíveis passíveis de imersão em meio líquido, principalmente médico-hospitalares

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Peróxido de Hidrogênio:

- Atua na membrana lipídica;

- Apresentado nas formas líquida, gasosa e

plasma;

- Utilizado de 3 a 25% na forma líquida por

tempo variado (poucos minutos);

- É altamente oxidante, tóxico, irritante à pele e

aos olhos;

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Químico: Agentes Desinfetantes

• Álcoois;

• Fenol e Compostos Fenólicos;

• Compostos de Cloro;

• Iodóforos;

• Compostos de Amônio Quarternário (Quats);

• Surfactantes.

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Álcoois

• Atua na desnaturação das proteínas, rompimento de membranas e dissolução de lipídios;

• Não formam resíduos; • Mais utilizados:

. Etanol (77% v/v ou 70% p/v);

. Isopropanol (92% p/v), mais efetivo;

• Não possuem atividade sobre endosporos;

• Indicado para descontaminação de superfícies de bancadas, equipamentos, anti-sepsia das mãos.

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Fenol e compostos fenólicos

• Atua na desnaturação das proteínas,

rompimento da membrana plasmática e

inativação de enzimas;

• Utilizados em concentrações acima de 1%;

• Permanecem ativos na presença de compostos

orgânicos;

• Indicado para desinfetar pus, saliva e fezes;

• Utilizado junto a alguns sabões, sprays, pastas de

dentes.

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Compostos de Cloro

• Atua na inibição de reações enzimáticas essenciais;

• Mais utilizado: Hipoclorito de Sódio;

• Utilizado nas concentrações de 0,5-5% / 10-30 min; • Água Sanitária: 5,25%

• Instáveis na presença de luz; • São corrosivos e tóxicos;

• Indicado para desinfetar objetos e superfícies inanimadas, recipientes de descarte de materiais, águas de piscinas, alimentos.

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Iodóforos

• Combinação entre o Iodo e um solubilizante;

• Atua na ruptura das estruturas protéicas e ácidos nucléicos, e inibe a síntese de proteínas;

• Mais utilizado: Polivinilpirrolidona-iodo (PVP-I);

• Utilizado a 1% de iodo disponível em base alcoólica;

• Dependendo da concentração, elimina até endosporos; • Indicado principalmente para uso anti-séptico. Na

desinfecção de termômetros, vidros, ampolas.

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Compostos de Amônio Quaternário (Quats)

• Combinação entre o Iodo e um solubilizante;

• Alteram a permeabilidade da membrana plasmática; • Mais utilizado: Cloreto de benzalcônio;

• São apresentados de forma concentrada, diluídos de acordo com o fabricante;

• Não elimina endosporos.

• Pseudomonas são resistentes (cetrimide);

• São incolores, inodoros, insípidos, estáveis, diluídos e atóxicos;

• Indicado para desinfecção de pisos, paredes, mobiliário, equipamentos.

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Surfactantes

• Reduzem a tensão de superfície entre as moléculas de um líquido;

• Promovem a emulsificação;

• Compreendem os sabões e detergentes; • Possuem ação rápida;

• Indicado para lavagem de vidrarias, artigos não-críticos.

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Propriedades antimicrobianas de alguns

agentes químicos

Bactérias Vírus lipofílicos Vírus hidrofílicos

Micobactérias Fungos Esporos bacterianos Etanol Formaldeído Glutaraldeído Comp. de Cloro Fenóis Quaternários Iodóforos + + + + + + + + + + + + + + - + + + - + + + + + + + - - v + + + + + + - + + + - - - (+) atividade (-) ausência de atividade

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Características importantes de alguns agentes químicos Corrosi vo Resíduo Inativo Mat. org. Irritante olhos Irritante pele Irritante Ap. resp. Etanol Formaldeído Glutaraldeído Comp. de Cloro Fenóis Quaternários Iodóforos - - - + + - + - + + + + - + + - - + - + + + + + + + + + - + + + + + + - + + + - - - (+) presença da característica (-) ausência da característica