PERFIL BIOQUÍMICO DE RATOS WISTAR DO BIOTÉRIO CENTRAL DA UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ
(Biochemical profile of wistar rats of the central biotery of the Federal University of Ceará)
Francisco Evanir Gonçalves LIMA1; Maria Solange Nogueira dos SANTOS2; Tatiana Paschoalette Rodrigues BACHUR3; Manoel Odorico de Moraes FILHO1;
Maria Elisabete Amaral de MORAES1; Gislei Frota ARAGÃO3
1Dpto de Fisiologia e Farmacologia da Faculdade de Medicina da Universidade Federal do Ceará;
2Tecnologia e Inovação em Enfermagem-Universidade de Fortaleza; 3Curso de Medicina da Universidade Estadual do Ceará, Av. Dr. Silas Munguba, 1700. Campus Itaperi, Fortaleza, Ce, Brasil. CEP: 60.740-000. E-mail: solange.nogueira@aluno.uece.br
RESUMO
O objetivo do estudo foi estabelecer valores de referências dos principais parâmetros bioquímicos de ratos Wistar (fêmeas e machos) provenientes do Biotério Central da Universidade Federal do Ceará. Pesquisa aprovada sob o protocolo n° 62/2017. O experimento foi realizado no período de setembro de 2017 a janeiro de 2018, realizado no Biotério do Núcleo de Pesquisa e Desenvolvimento de Medicamentos, na Universidade Federal do Ceará. Foram utilizados ratos Wistar (200 a 250g) de ambos os gêneros, em que se coletou 3 mL de sangue a partir da aorta abdominal (rato Wistar). Após o procedimento os animais foram eutanasiados por aprofundamento do plano anestésico. A análise foi através da estatística descritiva. Os resultados deste trabalho visam estabelecer valores de homeostasia normal. Valores encontrados nos animais do biotério da UFC, para creatinina (0,33mg/dL), colesterol total (62,95mg/dL), bilirrubinas totais e frações (0,14mg/dL), e albumina (4,68g/dL). Os triglicerídeos (60,35mg/dL), TGP (54,95U/I) e TGO (104,35U/I) estão com valores inferiores em relação a outros estudos. Os ratos da linhagem Wistar machos apresentaram os valores dos eletrólitos. Na (136,35mEq/I), K (5,07mEq/I), Cl (100,84mEq/I), Ca (9,9235mEq/I). O magnésio apresentou uma média 2,44 mg/dL, não foi possível correlacionar com outros estudos. As ratas Wistar, apresentaram valores dos eletrólitos semelhantes aos dos machos, sendo o Na (136,33 mEq/I), K (4,62 mEq/I), Cl (99,49 mEq/I), Ca (9,70 mEq/I), Mg (2,27). Os resultados apresentados neste trabalho caracterizam alguns parâmetros relevantes para avaliação de condições clínicas dos ratos Wistar.
Palavras-chave: Biotério, parâmetros bioquímicos, ratos Wistar, valores de referência.
ABSTRACT
The objective of the study was to establish reference values of the main biochemical parameters of Wistar rats (females and males) from the Central Biotério of the Federal University of Ceará. Research approved under protocol no. 62/2017. The experiment was carried out from September 2017 to January 2018, at the Biotério do Centro de Pesquisa e Desenvolvimento de Medicamentos at the Federal University of Ceará. Wistar rats (200 to 250g) of both genders were used. 3 ml of blood was collected from the abdominal aorta (Wistar rat). After the procedure the animals were euthanized by deepening the anesthetic
plane. The analysis was through descriptive statistics. The results of this work aim to establish values of normal homeostasis. The values found in the animals of the UFC, for creatinine (0.33mg/dL), total cholesterol (62.95mg/dL), total bilirubin and fractions (0.14mg/dL), albumin (4.68g/dL). Triglycerides (60.35mg/dL), TGP (54,95U/I) and TGO (104,35U/I) are lower than in other studies. Male Wistar rats presented values of the electrolytes Na (136.35mEq/I), K (5.07mEq/I), Cl (100.84mEq/I), Ca (9.9235mEq/I).
Magnesium presented a mean of 2.44 mg/dL, it was not possible to correlate with other studies. The Wistar rats presented electrolyte values similar to those of males, with Na (136.33 mEq/I), K (4.62 mEq/I), Cl (99.49 mEq/I), Ca (9.70 mEq/I), Mg (2.27). The results presented in this work characterize some relevant parameters for the evaluation of clinical conditions of Wistar rats.
Key words: Living room, biochemical parameters, Wistar rats, reference values.
INTRODUÇÃO
O uso de animais em experimentação científica é relevante para novas pesquisas e tem como finalidade à prevenção e cura de doenças, controle de produtos farmacêuticos, produção e desenvolvimento de vacinas, como também de novas técnicas em procedimentos cirúrgicos (CRISSIUMA e ALMEIDA, 2006).
Nos últimos anos se utiliza animais de várias espécies em pesquisas experimentais, entretanto, os roedores são os mais intensamente utilizados e profundamente conhecidos. A razão para que os ratos sejam escolhidos para a utilização em pesquisas está relacionada ao seu tamanho, pois por serem pequenos podem ser mantidos em lugares menores ocupando pouco espaço, além de se adaptarem rapidamente a novos ambientes (LIMA et al.,2014).
Os animais de laboratórios possuem um valor inestimável na contribuição de novos estudos, eles são fundamentais como modelos no estudo de doenças que ainda são consideradas um desafio para o homem, doenças do sistema nervoso central, diabetes, dentre tantas outras (FAGUNDES e TAHA 2004). Ainda contribuem para o controle de mais de dez mil produtos farmacêuticos em uso corrente no mundo e que testados quanto à eficácia, esterilidade, toxicidade e potência resultam na sobrevida de muitos pacientes.
(ANDRADE et al., 2012).
No Brasil busca-se o nível dos países desenvolvidos, em que a produção e a padronização dos animais de laboratório mais utilizados em pesquisa encontram-se em pleno aperfeiçoamento. Tudo converge para a aquisição de animais com boa sanidade, qualidade genética e ambientais definidas, que atenderão aos pré-requisitos das pesquisas biomédicas (MATOS, 2016).
De acordo com a necessidade das experimentações a serem realizadas em animais, antes de qualquer produto que seja aplicado ao homem - uma vez que este não pode ser transformado em cobaia e considerando, ainda, que a essência de nosso trabalho é salvar vidas humanas mediante a produção desses animais e sua posterior utilização - o bioterismo assume um papel de suma importância e deve ser encarado com total responsabilidade tanto por parte daqueles que desenvolvem tais atividades quanto por parte de nossos dirigentes (ANDRADE et al., 2012).
É relevante se obter os parâmetros bioquímicos em animais de laboratório oriundos de um biotério de produção, estabelecendo os critérios de padronização desses indicadores para os ensaios biológicos pré-clínicos e assim corroborar para a manutenção da saúde dos animais. No Brasil esses dados ainda se apresentam limitados, assim fica claro a importância em se determinar os perfis bioquímicos de animais provenientes de biotérios.
Entretanto, é necessário que cada laboratório ou biotério estabeleça um conjunto próprio de valores de referências dos animais, de acordo com linhagem, sexo e idade. O conhecimento destes parâmetros é importante na pré-seleção de animais, na avaliação e observação dos resultados, nos procedimentos experimentais e na análise das modificações induzidas por processos patológicos (WOLFORD et al., 1986). O objetivo do estudo foi estabelecer valores de referências dos principais parâmetros bioquímicos de Ratos Wistar (fêmeas e machos) provenientes do Biotério Central da Universidade Federal do Ceará.
MATERIAL E MÉTODOS Aprovação pelo Comitê de Ética
A metodologia adotada neste trabalho encontra-se em acordo com os preceitos da lei 11.794, de 8 de outubro de 2008, do decreto nº 6899 de 15 de julho de 2009, e com as normas editadas pelo Conselho Nacional de Controle de Experimentação Animal (CONCEA), tendo sido aprovada pela comissão de Ética no uso de Animais (CEUA) da Universidade Federal do Ceará, em reunião realizada em 17 de agosto de 2017 com o protocolo n° 62/2017.
Local de execução do trabalho
O experimento foi realizado no período de setembro de 2017 a janeiro de 2018. O estudo foi realizado no Biotério do Núcleo de Pesquisa e Desenvolvimento de Medicamentos (NPDM) situado no campus do Porangabussu da Universidade Federal do Ceará (UFC).
Os animais foram mantidos em sistema Individually Ventilated Cage (IVC), em que a ventilação é realizada em cada caixa individualmente proporcionando uma troca de ar mais eficiente. Os animais foram acondicionados em caixas confeccionadas em polisulfona, medindo 44x31x21 cm, com grade aramada em aço inoxidável, comedouro e encaixe para bebedouro. As tampas contêm filtros tipo Hepa e a sala de experimentação possui sistema de exaustão. A higienização e desinfecção das gaiolas foram realizadas a cada cinco dias em estação de troca/cabine de biossegurança. Os animais foram mantidos em condições controladas de temperatura (22±1 °C), com foto período de 12 horas de claro e 12 horas de escuro, e umidade relativa de 60% tendo acesso ad libitum à água filtrada e a ração comercial (Nuvilab®). Ademais, foram mantidos em cama com maravalha irradiada.
Todos os critérios de alimentação e ambiência atenderam as recomendações do CONCEA.
Descrição dos animais
Utilizaram-se 19 Rattus norvergicus, linhagem Wistar, machos adultos (6 a 8 semanas e peso médio de 200 a 250g) e 19 Rattus norvergicusd, linhagem Wistar, fêmeas (6 a 8 semanas e peso médio de 200 a 250g), aplicou-se com a seguinte expressão:
2 2 GC 2
2 2 GC
z ) 1 N .(
N . . n z
onde zGC corresponde ao valor da variável normal padronizada (z)
associada ao grau de confiança adotado (95%; z=1,96), σ ao desvio padrão (1,30 mg/dl), N ao tamanho da população de ratos (400) e ε ao erro tolerável (0,40 mg/dl).
Assim, para que tais requisitos fossem satisfeitos, foi necessária uma amostra composta por 38 ratos, estratificada em 19 machos e 19 fêmeas (de 6 a 8 semanas de idade e peso médio de 200 a 250g). Esse tamanho de amostra também foi suficiente para estimar a média da concentração de creatinina, com 95% de confiança, erro da estimação que não ultrapassou 0,06 mg/dl, considerando-se um desvio padrão estimado em 0,19 mg/dl, situação essa em que foram necessários 36 animais. Amostras de sangue provenientes dos ratos Wistar foram obtidas de animais sob plano anestésico com Cloridrato de Quetamina (90 mg/Kg) via intraperitoneal (i.p), associado ao Cloridrato de Xilasina 10 mg/Kg intraperitoneal.
Método de coleta e análise
Foram coletados 3 mL de sangue a partir da aorta abdominal (rato Wistar). Após este procedimento, os animais foram eutanasiados por aprofundamento do plano anestésico com administração de três vezes da dose anestésica da associação de Cloridrato de Xilazina e Cloridrato de Quetamina. As amostras de sangue foram distribuídas em tubos sem anticoagulante e com acelerador de coágulo para a determinação dos parâmetros bioquímicos.
O material biológico foi encaminhado ao Laboratório de Toxicologia e Exames Laboratoriais, do Núcleo de Pesquisa e Desenvolvimento de Medicamentos, da Universidade Federal do Ceará para processamento e análise. Na avaliação dos parâmetros bioquímicos dos animais, utilizou-se o Analisador Bioquímico Automático Labmax Plenno, modelo standard (Labtest, Brasil).
Foram utilizadas técnicas para as dosagens bioquímicas reagentes, tais quais:
Glicose pelo método GOD-Trinder; Triglicerídeos (Colorimétrica (Reação de Trinder); Colesterol Total (Colorimétrico Enzimático de Trinder); Colesterol HDL (Colorimétrico Precipitação com ácido fosfotúngstico e cloreto de magnésio); Proteínas totais (Colorimétrica (Biureto); LDH Liquiform (UV - Método Piruvato-Lactato); Aspartato Transaminase (Cinética UV-IFCC); Alanina Transaminase (Cinética UV-IFCC); Fosfatase Alcalina (Colorimétrica - Bowers e Mc Comb modificado); Gama GT (Szasz modificado);
Bilirrubina total e direta (Colorimétrico - Labtest DCA); Ureia (Enzimático UV); Albumina (Colorimétrico - Verde de Bromocresol); Creatinina (Colorimétrico - Picrato alcalino - Jaffé); TGP e TGO (Cinética UV-IFCC); Cálcio (Colorimétrico – CPC, cresolftaleína); Magnésio (Colorimétrica – Labtest, Magon sulfonado); Sódio Enzimático (Enzimática); Potássio Enzimático (Enzimática) e Cloro Enzimático (Tiocianato de Mercúrio). Optou-se por trabalhar com os parâmetros supracitados para se conhecer o equilíbrio eletrolítico da colônia de animais. O sangue coletado em microtubos contendo acelerador de coagulação foi centrifugado a 3500 rpm, por 10 minutos, para a obtenção do soro, o qual foi separado em tubos tipo Eppendorf, para a análise bioquímica.
Análises estatísticas
Utilizou-se a estatística descritiva para os parâmetros bioquímicos, no qual envolveu o cálculo da média, desvio padrão, mediana e valores mínimo e máximo.
Determinaram-se, ainda, o intervalo de confiança de 95% da média e o intervalo interquartil, cujos limites inferior e superior são definidos, respectivamente, pelo percentil 25 e pelo percentil 75. Os intervalos de referência foram determinados conforme as recomendações da American Society for Veterinary Clinical Pathology (ASVCP), que, por seu turno, baseiam-se nas orientações do Clinical and Laboratory Standard Institute (CLSI).
Tais recomendações estabelecem que o intervalo de referência deve englobar os 95% dos valores centrais das medidas delimitados pelos limites de referência (CLSI, 2010;
FRIEDRICHS, 2012). Para tanto, podem-se empregar métodos estatísticos paramétricos e não paramétricos, sendo os últimos os recomendados, considerando o tamanho da amostra e o tipo de distribuição dos dados (FRIEDRICHS, 2012).
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Os resultados dos parâmetros dos ratos Wistar provenientes do Biotério da Universidade Federal do Ceará visam estabelecer valores de homeostasia normal que permitam a comparação entre diversas pesquisas. Tem como finalidade avaliar as funções metabólicas desempenhadas pelos órgãos e tecidos, bem como evidenciar patologias
ocultas (FELDMAN et al., 2000). O conhecimento desses parâmetros para cada espécie em cada biotério é uma ferramenta essencial, entretanto esses valores podem variar dependendo do equipamento de análise. A partir da obtenção desses resultados de valores de referência é possível traçar a condição clínica da colônia de animais mantida em cada laboratório. Os parâmetros bioquímicos dos ratos Wistar de ambos os gêneros realizados por este estudo são apresentados nas Tabs. 1, 2, 3 e 4, representando a média ± desvio padrão (D.P) e mínima/máximo.
Tabela 01: Parâmetros bioquímicos de ratos machos da linhagem Wistar oriundos do Biotério Central da UFC. Os dados correspondem à análise das medidas efetuadas em 20 animais.
Ref. 1: Universidade Federal de Sergipe, 2014 UNIT; Ref. 2: Laboratório Charles River (2008); Ref. 3: Melo et al. (2012); Ref. 4: Centro de Bioterismo da FMUSP (2008). Valores não realizados (---).
Parâmetro (unidade)
Média±
D.P.
Mín./Máx.
Média± D.P.
Mín./Máx.Ref.
1
Mín./Máx.
Ref.2
Mín./Máx.R ef.3
Mín./Máx.R ef.4 Glicose
(mg/dl)
187,35±38,0 (110-258)
138,72±30,17 (72–193)
---- (70–208)
104,0±17,8 (79–144)
(150-207,5) Creatinina
(mg/dl)
0,33±0,15 (0,15-0,85)
0,58±0,24 (0,24–1,20)
--- (0,2–0,5)
0,5±0,05 (0,44-0,64)
(0,3–0,6) Ureia (mg/dl) 53,15±11,77
(34-70)
39,97±6,78 (26–58)
---- (12,3–24,6)
35,9±3,58 (30–42)
(41,0–44,6) Colesterol
total (mg/dl)
62,95±14,23 (36-89)
60,68±6,51 (45–76)
--- (37–85)
67,4±8,72 (55-79)
(98,9–110,) Colesterol
HDL (mg/dl)
23,1±4,12 (15-31)
---- ----
---- ----
---- ---
--- ---- Triglicérides
(mg/dl)
60,35±11,86 (38-95)
46,87±18,73 (22–100)
--- (20–114)
89,9±29,16 (42–160)
---- (110–174,8) Proteínas
totais (g/dl)
5,81±0,56 (5,14-6,9)
5,75±0,87) (4,0-6,9
--- (5,2–7,1)
6,2±0,26 (5,4–6),
--- (5,5–10,4) Albumina
(g/dl)
4,68±0,54 (3,9-5,7)
2,65±0,30 (2,0–3,5)
--- (3,4–4,8)
3,0±0,12 (2,7-3,2)
--- (2,8–6,1) TGO (U/l) 104,35±12,8
(80-125)
131,3±43,98 (61–210)
---- (18–45)
132±23,09 (81-180)
--- (129,0–148) TGP (U/l) 54,95±9,89
(40-80)
57,55±11,95 (38–82)
---- (74–143)
48,4±6,46 (36–58)
--- (114,0–300) BT (mg/dl) 0,14±0,05
(0,03-0,25)
0,08±0,04 (0,02–0,18)
--- (0,01–0,12)
0,07±0,02 (0,07–0,08)
---- (0,3–0,7) BD (mg/dl) 0,02±0,01
(0,01-0,05)
0,03±0,02
(0,01–0,10) (0,03–0,05)
0,03±0,02 (0,01 – 0,03)
--- (0,2–1,9) BI (mg/dl) 0,12±0,05
(0,02-0,21)
0,06±0,05 (0,00–0,30)
--- (0,05–0,15)
0,01 ± 0, (0,01 – 0,01)
--- (0,9–2,3) FA (U/l) 368,75±33,9
(303-428)
91,63±28,70 (56–153)
---- (62–230)
127±35,55 (79–196)
---- (56–153) GGT (U/l) 2,50±1,19
(1-5)
3,47±1,74 (1–6)
--- ---
---- ----
---- --- LDH (U/l) 1325,1±144
(1056-1585)
---- ----
--- ---
---- ---
--- ---
Os eletrólitos têm um papel importante na manutenção da homeostase no organismo. Nos mamíferos, os líquidos e eletrólitos estão distribuídos nos compartimentos intracelular e extracelular, cuja manutenção de volume e composição é essencial para os processos metabólicos fundamentais à vida. Por serem moléculas ionizadas, os eletrólitos adquirem cargas negativas (ânions) ou positivas (cátions) sendo responsáveis por regular a pressão osmótica. É necessário manter essa dosagem equilibrada, para que se evite a desidratação (STIVANIN, 2014).
Observou-se que alguns resultados dos parâmetros bioquímicos não apresentaram valores similares com outros biotérios, esse fato pode ter ocorrido devido ao analisador bioquímico ser diferente. Os valores da glicose e ureia estavam elevados, e os da creatinina, colesterol total, bilirrubinas totais e frações e albumina mais próximos aos obtidos com os resultados desse estudo (Tab.01). Neste estudo foram obtido resultados do colesterol LDH e HDL, mas esses parâmetros não são evidenciados na literatura. Os valores encontrados nos animais do biotério da UFC para os parâmetros triglicerídeos AST e ALT estão com valores inferiores quando comparados ao Centro de Bioterismo da FMUSP (2008), porém, tem valor aproximado dos demais biotérios, que utilizamos como comparativo.
Já na Tab. 02, foi observado que os valores de sódio, potássio e cloro foram diferentes em relação aos encontrados em outros centros: no Laboratório Charles River e no Centro de Bioterismo da FMUSP (MELO et al., 2012).
Tabela 02: Dados dos eletrólitos verificados em ratos machos da linhagem Wistar oriundos do Biotério Central da UFC (n=20).
Ref. 1: Universidade Federal de Sergipe, 2014 UNIT; Ref. 2: Laboratório Charles River (2008); Ref. 3: Melo et al. (2012); Ref. 4: Centro de Bioterismo da FMUSP (2008). Valores não realizados (---).
Os valores de cálcio encontrados nos animais do biotério da UFC estão aproximadamente iguais aos valores encontrados nos biotérios da Universidade Federal de Sergipe (2014), no Laboratório Charles River (2008) e no trabalho de Melo et al. (2012).
Por outro lado, no Centro de Bioterismo da Universidade de Medicina, da Universidade de São Paulo encontrou-se valores um pouco abaixo dos resultados deste trabalho.
Encontramos valores de média 2,44 mg/dL para o Magnésio, porém não há estudos publicados na literatura para se comparar com os valores deste trabalho.
Parâmetro (unidade)
Média±D.P.
Mín./Máx.
Média±D.P.
Mín./Máx. Ref.1
Mín./Máx.
Ref.2
Mín./Máx.
Ref.3
Mín./Máx.
Ref.4 Sódio
(mEq/l)
136,35±2,32 (130-140)
134,03±4,67 (125–143)
---- (142–151)
138,7±3,06 (135–144)
---- --- Potássio
(mEq/l)
5,07±0,6 (4,3-6,9)
5,41±1,15 (3,9–7,9)
---- (3,8–5,5)
4,7±0,53 (4,2–6,4)
---- ---- Cloro
(mEq/l)
100,84±2,78 (94-105,9)
102,75±1,75 (101–106)
--- (100–106)
--- ---
(73,62–100) Cálcio
(mg/dl)
9,92±0,35 (9,5-10,7)
8,19±1,63 (4,8–9,8)
(9,5–11,5) --- ---
(2,73–5,71) Magnésio
mg (mg/dl)
2,44±0,19 (2,18-3,02)
---- ---
--- ----
--- ---
--- ----
Os resultados da Tab. 03 mostram que os valores encontrados para a glicose neste estudo, apresentaram altos valores nos ratos fêmeas, da mesma forma que já tinha sido observado em ratos machos, diferindo dessa forma, de resultados publicados por outros biotérios e que foram utilizados como comparativo. Ainda não se tem explicação para este fato, mas acredita-se que estes valores possam ser realmente os valores de referência dos animais, porém não pode ser excluída a possibilidade de uma hiperglicemia devido a uma ração rica em açúcar. (ROBERTO et al., 2018).
Observou-se também que, os valores encontrados nos animais do biotério da UFC para creatinina, ureia, bilirrubina e frações, TGP, TGP, albumina, GGT, proteínas totais, triglicerídeos e colesterol total encontra-se semelhante aos demais biotérios utilizados como comparação, porém destacam-se algumas pequenas variações para mais ou para menos. A maioria dos valores utilizados como referência, pelo Laboratório de Controle de Qualidade Sanitária Animal do CBFMUSP, encontra-se marcadamente divergente com as demais referências e com os valores deste estudo. Assim sendo não foi considerado se discutir estes valores como parâmetro comparativo.
Constatou-se que os valores da fosfatase alcalina, dos animais do biotério da UFC, estão com valores altos se comparados com o trabalho de Lima et al., (2014). Apesar de sabermos que algumas doenças podem elevar essa enzima orgânica, acreditamos que um dos fatores que pode vir a explicar o alto valor desse parâmetro é o fato de ter sido utilizado um kit reagente para a medição na espécie humana, visto que no mercado não há disponibilidade para um kit veterinário. Também foi possível registrar que diferentes valores em parâmetros laboratoriais de animais fêmeas podem estar associados à diferentes estágios do ciclo hormonal.
Tabela 03: Parâmetros bioquímicos de Ratos fêmeas da linhagem Wistar oriundos do Biotério Central da UFC (n=21).
Parâmetro (unidade)
Média± D.P.
Mín./Máx.
Média± D.P.
Mín./Máx.-Ref.
1
Média± D.P.
Ref.2
Média± D.P.
Mín./Máx.-Ref.3 Glicose
(mg/dl)
201,38±27,43 (152,00-235,0)
114,57±36,15 (53–172)
110±6,13 ---
106,2±20,2 (61-147) Creatinina
(mg/dl)
0,47±0,15 (0,10-0,75)
0,57±0,19 (0,28–1,10)
0,39±0,08 ---
0,5±0,07 (0,4-0,7) Ureia
(mg/dl)
49,76±6,01 (39,00-58,0)
39,17±6,43 (24–49)
45,90±5,5 ---
43,7±7,42 (30–57) Colesterol
total (mg/dl)
55,86±10,53 (42,00-72,00)
64,86±11,17 (54–96)
73,60±4,45 ---
75,1±12,29 (46–101) Colest.HDL
(mg/dl)
20,52±3,03 (17,00-29,00)
---- ---
14,40±2,50 ---
--- --- Triglicerídeos
(mg/dl)
51,57±8,08 (43,00-73,00)
54,21±35,5 (23–138)
59,60±18,52 ---
69,8±20,75 (39–130) Prot. totais
(g/dl)
5,78±0,22 (5,32-6,28)
6,07±0,83 (5,0–7,7)
82,32±2,49 ---
6,5±0,29 (6,1-7,4) Albumina
(g/dl)
4,79±0,19 (4,50-5,16)
2,41±0,76 (1,3–3,8)
19,66±1,84 ---
3,1±0,16 (2,6-3,4)
Universidade Federal do Ceará (2018); Ref. 1: Universidade Federal de Sergipe, 2014 UNIT; Ref.2 Laboratório de controle de qualidade Sanitária Animal do CBFMUSP, (2012); Ref. 3: Melo et al. (2012).
Valores não realizados (--).
Ao analisar a Tab. 04, observou-se que os valores de eletrólitos encontrados nas ratas do biotério da UFC encontram-se semelhante aos valores publicados no biotério da Universidade Federal de Sergipe (2014), do Laboratório de Controle de Qualidade Sanitária Animal do CBFMUSP e no trabalho desenvolvido por MELO et al., 2012.
Existe uma limitação nos estudos para se obter e analisar os parâmetros eletrólitos das ratas da linhagem Wistar. No estudo realizado obteve-se os valores dos eletrólitos, porém comparando com os da Universidade Federal de Sergipe (2008), do Laboratório de Controle de Qualidade Sanitária Animal do CBFMUSP e de Melo et al., 2012 foi observado uma pequena diferença nos resultados. O que corrobora com a necessidade gritante de se determinar os valores de referência específicos para cada biotério.
Tabela 04: Dados dos eletrólitos verificados em Ratos fêmeas da linhagem Wistar oriundos do Biotério Central da UFC (n=21).
TGO(U/l) 109,10±13,07 (94,00-140,00)
107,87±53,96 (51–211)
22,60±2,92 ---
132,7±27,2 (83–184) TGP(U/l) 31,95±8,59
(18,00-53,00)
45,47±9,23 (32–63)
20,20±2,92 ---
41,0±7,63 (26–60) BT(mg/dl) 0,17±0,07
(0,02-0,28)
0,24±0,3 (0,10–0,89)
0,54±0,22 ---
0,08±0,01 (0,07–0,09) BD(mg/dl) 0,03±0,02
(0,01-0,12)
0,02±0,01 (0,01–0,04)
0,46±0,22 ---
0,02±0,01 (0,01–0,03) BI(mg/dl) 0,16±0,05
(90,03-0,25)
0,00±0,10 (0,01–0,01)
0,07±0,01 ---
0,01±0, (0,01–0,01) FA(U/l) 250,10±36,50
(185,00-322,00)
75,95±19,07 (51–116)
--- ---
106,9±20,6 (63–138) GGT(U/l) 1,75±1,07
(1,00-5,00)
3,29±0,9 (2–5)
--- ---
--- --- LDH (U/l) 1311,1±163,87
(1018,00-1587,00)
--- ---
112,66±42 ---
--- ---
Parâmetro (unidade)
Média± D.P.
Mín./Máx.
Mín./Máx.
Ref. 1
Mín./Máx.
Ref. 2
Mín./Máx.
Ref. 3 Sódio (mEq/l) 136,33±2,67
(131,00-141)
134,57±3,78 (125–141)
--- ----
137,8±3,34 (132–146) Potássio (mEq/l) 4,62±0,28
(4,00-5,10)
4,79±1,95 (3,6–6,7)
--- ---
4,2±0,46 (3,7–5,7) Cloro (mEq/l) 99,49±3,85
(91,20-105,90)
105,11±1,62 (103–108)
--- ----
--- --- Cálcio (mg/dl) 9,70±0,41
(8,90-10,40)
8,96±1,13 (6,7–11,0)
12,52±0,89 ----
--- --- Magnésio (mg/dl) 2,27±0,15
(1,93-2,59)
--- ---
2,98±0,0 ---
--- ----
Universidade Federal do Ceara. Biotério Central. (2018). Ref. 1: Universidade Federal de Sergipe, 2014 UNIT; Ref. 2: Laboratório de controle de qualidade Sanitária Animal do CBFMUSP. (2012); Ref. 3:
Melo et al. (2012). Valores não realizados (---).
CONCLUSÃO
Os resultados apresentados neste trabalho caracterizaram alguns parâmetros relevantes para a avaliação das condições clínicas dos ratos Wistar utilizados em pesquisas experimentais, permitindo aos pesquisadores identificar desvios de critérios provenientes do Biotério da Universidade Federal do Ceará. Desta forma, houve uma contribuição para se estabelecer valores de referência do biotério da UFC, configurando- se como uma fonte bibliográfica potencial para diversos outros projetos de pesquisas envolvendo animais na instituição e garantindo qualidade nas pesquisas.
REFERÊNCIAS
ANDRADE, A.; PINTO, S.C.; OLIVEIRA, R.S. Animais de Laboratório: criação e experimentação [online]. Rio de Janeiro: Editora FIOCRUZ, 2002. 388 p.ISBN: 85-7541- 015-6. Available from SciELO Books <http://books.scielo.org
(COBEA), Boletim informativo, v.3, p.1-10, 2008.
CENTRO DE BIOTERISMO DA FMUSP. Parâmetros bioquímicos de ratos do centro de
Bioterismo da FMUSP, 2008. Disponível em:
http://www.biot.fm.usp.br/index.php?mpg=03.00.00&tip=RATO&id_ani=17¶metros
=sim. Acessado em: 05/11/2010. 10.
CLINICAL LABORATORY STANDARDS INSTITUTE. How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory. Document C 28-A2 (2000).
CRISSIUMA, A.L.; ALMEIDA, E.C.P. Experimentação e bem-estar animal – artigo de revisão. Saúde & Ambiente em Revista, Duque de Caxias, v.1, n.2, p.1-10, 2006
FAGUNDES, D.J.; TAHA, M.O. Modelo animal de doença: critérios de escolha e espécies de animais de uso corrente. Acta Cirurgica Brasileira, [s.l.], v. 19, n. 1, p.59-65, jan.
2004. FapUNIFESP (SciELO). http://dx.doi.org/10.1590/s0102-86502004000100010 FRIEDRICHS, K.R. ASVCP reference interval guidelines: determination of de novo reference intervals in veterinary species and other related topics. Veterinary Clinical Pathology, [s.l.], v.41, n.4, p.441-453, 2012. http://dx.doi.org/10.1111/vcp.12006
HARKNESS, J.E.; WAGNER, J.E. Biologia e clínica de coelhos e roedores. 3ªed, Editora Roca, São Paulo (1993).
LIMA, C.M.; LIMA, A.K.; MELO, M.G.D.; DÓRIA, G.A.A.; LEITE, B.L.S.; SERAFINI, M.R.; ALBUQUERQUE-JÚNIOR; R.L.C.; ARAÚJO, A.A.S. Valores de referência hematológicos e bioquímicos de ratos (Rattus norvegicus linhagem Wistar) provenientes do biotério da Universidade Tiradentes. Scientia Plena, v.10, p.1-9, 2014.
MATOS, L.B. Biotério Central do Inpa reúne especialistas em Simpósio de Experimentação Animal do AM. Quarta, 31 de agosto de 2016.
http://portal.inpa.gov.br/portal/index.php/ultimas-noticias/2597-bioterio-central-do-inpa- reune-especialistas-em-simposio-de-experimentacao-animal-do-amazonas. Acesso em 18.03.2018.
MELO, M.G.D.; DÓRIA, G.A.A.; SERAFINI, M.R.; ARAÚJO, A.A.S. Valores de referência Hematológicos e Bioquímicos de Ratos (Rattus norvergicus linhagem Wistar) provenientes do biotério central da Universidade Federal de Sergipe. Scientia Plena, v.8, p.1-6, 2012.
NUNES, D.C.S.; FAVALI, C.B.F.; SOUZA-FILHO, A.A.; DA SILVA, A.C.M.;
FILGUEIRAS, T.M.; SILVA LIMA, M.G. Evaluation of cellular profile and main constituents of the rat and mouse blood from the animal house of the Federal University of Ceará, Brazil. Revista Medicina UFC, v.34. n.1-2, p. 21-29, 1994.
SILVERSTEIN, A.; SILVERSTEIN, V. Mice aill about them, São Paulo: Harper and Row, 1980, 84p.
PAIVA F.P.; MAFFILI V.V.; SANTOS A.C.S. Curso de Manipulação de Animais de Laboratório. Fundação Oswaldo Cruz- Fiocruz. Salvador: Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz, p.1-21. 2005.
http://www.bioteriocentral.ufc.br/arquivos/apostilha_manipulacao.pdf
POLITI, F.A.S.; MAJEROWICZ, J.; CARDOSO, T.A.O.; PIETRO, R.C.L.R.;
SALGADO, H.R.N. Caracterização de biotérios, legislação e padrões de biossegurança.
Revista Ciência Farmacológica Básica Aplicada, v.29, n.1, p.17-28, 2008.
ROBERTO, J.V.B.; NASCIMENTO, C.S.; SOUZA.E.S.A.; MARTINS, R.A.; ARAÚJO, E.R.; BARROS, M.M.A. Parâmetros Bioquímicos de Referência de Ratos Wistar de diferentes faixas de peso, provenientes do Biotério das Faculdades Nova Esperança – PB.
Revista De Ciências da Saúde Nova Esperança, v.16, n.1, p.81-85.2018.
SILVERSTEIN, A.; SILVERSTEIN, V. Mice aill about them, São Paulo: Harper and Row, 1980, 84p.
STIVANIN, S.C.B. Desequilíbrio eletrolítico: sódio, potássio e cloro. Seminário apresentado na disciplina Transtornos Metabólicos dos Animais Domésticos, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, 2014. 10p.
WOLFORDS, T.; SCHROER, R.A.; GHSF, X.; GALLO, P.P.; BRODECK, M.; FLAK, H.B.; RUHREN, R. Reference range data base for serum chemistry and hematology values in laboratory animals. Journal of Toxicology and Environmental Health, v.18, p.161-188, 1986.
