_Programa Nacional de Avaliação Externa da Qualidade. Parasitologia 1, 2010

_Programa Nacional de Avaliação

Externa da Qualidade

Parasitologia -

1/10

Agradecemos a participação no 1º ensaio do Programa de Avaliação Externa da Qualidade em Parasitologia de 2010.

Foram distribuídas amostras a 104 participantes.

Recebemos 89 resultados para a serologia da Toxoplasmose e 81 respostas para a morfologia, o que representa 86% e 78% de retorno da informação, respectivamente.

Amostras

O ensaio incluía uma amostra para a pesquisa de anticorpos para

Toxoplasma gondii (amostra nº 1110 – Soro obtido no âmbito da

“vigilância da infecção toxoplásmica – prevenção da infecção congénita”); fezes formolizadas (amostra nº 1610 – Doente com bronquite crónica) e um esfregaço de sangue (amostra nº 1710 - Viajante da Costa do Marfim com hipereosinofilia).

Amostras C110, C210, C310 – Fezes de crianças que ingeriram águas contaminadas com oocistos de Cryptosporidium spp.

Resultados Amostra nº 1110

Pesquisa de anticorpos para Toxoplasma gondii

O resultado da pesquisa de anticorpos (IgG e IgM) para Toxoplasma

gondii foi negativo, aconselha-se a vigilância serológica da grávida.

Amostra nº 1610

Fezes formolizadas - A amostra de fezes continha larvas de Strongyloides

stercoralis embora com uma baixa concentração de parasitas, podendo

nalguns casos ser considerada negativa.

A B

Figura 1 – Larva rabditoide de Strongyloides stercoralis em preparação a fresco (ampliação de 400x e 1000x); A – Larva rabditoide, seta azul – esófago; seta vermelha – poro genital; B – Larva rabditoide, seta vermelha – região bucal; seta azul – esófago.

(http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/HTML/ImageLibrary/Strongyloidiasis_il.htm) 2010-06-28 Relatório de Avaliação Parasitologia, 1/10 O relatório de avaliação contém:

- Avaliação individual para cada parâmetro.

- Relatório geral de performance (Relatório de desempenho global) . Pedidos de correcção Dados recebidos nos formulários de resposta com

erros, são da

responsabilidade do laboratório. O PNAEQ só se responsabiliza por erros de transcrição para o sistema informático e de processamento de resultados

Os pedidos deverão ser efectuados por escrito até 30 de Julho de 2010.

Instituto Nacional de Saúde Dr. Ricardo Jorge Avenida Padre Cruz 1649-016 Lisboa Telefones: 21 751 9250 / 21 751 9350 FAX 21 752 6470 pnaeq@insa.min-saude.pt

Ciclo de Vida - Strongyloides stercoralis

Amostra nº 1710

Esfregaços de Sangue - Amostra de sangue contendo duas espécies de microfilárias - Loa loa e

Mansonella prestans.

A B

Figura 2 – Microfilária da espécie Loa loa, A – Esfregaço de sangue corado por Giemsa com microfilária (ampliação 1000x); B – Esfregaço corado por Giemsa com microfilária com núcleo terminal na região caudal (ampliação 1000x).

Ciclo de Vida – Loa loa

A B

Figura 3 - Microfilária da espécie Mansonella perstans; A - Esfregaço de sangue corado por Giemsa com microfilária (ampliação 1000x); B – Esfregaço corado por Giemsa com microfilária com núcleos até ao final da região caudal (ampliação de 1000x).

Filárias

Existem várias espécies de filarias que parasitam o Homem, encontrando-se no sistema circulatório, sistema linfático, músculos ou cavidades serosas. São nemátodos vivíparos, isto é dão origem a embriões - as microfilárias. Estas encontram-se no sangue ou na pele. Os parasitas adultos apresentam dimorfismo sexual. As filarias necessitam de um artrópode como hospedeiro intermediário, o que condiciona a sua distribuição geográfica.

As filarioses diferenciam-se por:

− Espécie de filaria em causa;

− Localização do adulto e das microfilárias; − Modo de transmissão;

− Patologia.

Quadro 1 – Epidemiologia e patologia das espécies de microfilária.

Parasita Localização do Adulto Localização da Microfilária Modo de Transmissão Sintomas Distribuição Geográfica Wuchereria bancrofti Sistema

linfático Linfa e Sangue Picada de Culex, Aedes

Linfagite, orquite, edema África, Ásia, América, Oceania

Brugia malayi Sistema _linfático Linfa e Sangue

Picada de Mansonia, Anopheles, Armigeres Linfagite, orquite, edema Ásia Mansonela perstans Cavidade

peritoneal Sangue Picada de Culicoides

Pouco

patogénica África Tropical, América do Sul

Mansonella ozzardi Cavidade _peritoneal Sangue Picada de

Culicoides

Pouco

patogénica América Central

Loa loa Tecido _subcutâneo Sangue Picada de

Chrysops

Edemas,

alergias África Central Onchocerca

volvulus

Tecido

subcutâneo Subcutânea Picada de Simulium

Nódulo, prurido, lesões oculares África e América Central Dracunculus medinensis Tecido

subcutâneo Eliminada para exterior Ingestão de Cyclops Flictena África, Ásia

A identificação da espécie das microfilária em esfregaço sanguíneo, corado pelo Giemsa, é feita com base nas seguintes características:

• Tamanho da microfilária;

• Presença ou ausência de bainha; • Comprimento do espaço cefálico; • Aspecto dos núcleos somáticos; • Presença e aspecto do corpo interno; • Presença e posição do núcleo caudal.

Microfilária – Loa loa

Figura 4 - A microfilária de Loa loa apresenta um tamanho aproximado de 300 µm de comprimento por 7 µm de largura. Apresenta uma bainha que não é corada pelo Giemsa, tornando-se pouco visível; no entanto observa-se o espaço correspondente à microfilária entre esta e as hemácias. O espaço cefálico é curto com cerca de 4 a 6 µm; os núcleos somáticos são grandes, ovóides, encontrando-se muito juntos; o corpo interno não é visível; o núcleo caudal é alongado e terminal.

Quadro 2: Características diferenciais das microfilárias após a coloração de Giemsa.

O. volvulus Loa loa W. bancrofti B. malayi M. perstans M. ozzardi

Démica Sanguíneas

Extremidade anterior

Extremidade posterior

Periodicidade Aperiódica Diurna Nocturna Nocturna Aperiódica Aperiódica

Dimensões 150-360 x 8 µm 300 x 7 µm 300 x 7 µm 200-250 x 5-6 µm 200 x 5 µm

100 x 4 µm 200 x 5 µm

Bainha - Mal corada + + - -

Núcleos somáticos Grandes, ovóides, muito juntos Grandes, ovóides, muito juntos Pequenos, esféricos, separados Pequenos, ovóides, muito juntos Pequenos, ovóides, muito juntos Pequenos, ovóides, muito juntos Espaço cefálico 8-10 µm 6 µm 4 µm 6 µm 3 µm 3 µm Extremidade posterior Encurvada núcleo subterminal Afilada núcleo terminal Afilada núcleo subterminal 1 núcleo terminal + 1 núcleo subterminal Rectilínea, dedo de luva, núcleo terminal Afilada núcleo subterminal Corpos internos - - + +, dividido em 3 massas - -

Formação

Na observação microscópica os oocistos de Cryptosporidium assemelham-se a pequenas esferas de 4-6 µm de diâmetro, coradas entre o rosa pálido e o vermelho carmim, com grânulos negros no seu interior e normalmente com uma área central mais clara, destacando-se sobre o fundo verde. Os esporozoitos são, muitas vezes, visualizados no interior do oocisto.

Quando a infecção está em fase de regressão os oocistos podem não fixar o corante, aparecendo, então, como “fantasmas” nos esfregaços. Outros métodos podem ser usados na identificação de oocistos de Cryptosporidium, nomeadamente métodos enzimáticos e/ou de fluorescência.

Foram enviadas três lâminas para pesquisa de oocistos de Cryptosporidium sp., com os seguintes resultados:

• C110 – Lamina com oocistos de Cryptosporidium sp.

• C210 – Lamina negativa

• C310 – Lamina com oocistos de Cryptosporidium sp.

Resultados dos Laboratórios

Amostra %correctos %incorrectos Não respondeu Estadio

C110 84,8% 13,9% 1,3% 86,6%

C210 77,2% 12,7% 10,1% -

C310 68,4% 24,1% 7,6% 79,6%

Gráficos com avaliação dos resultados

0,0 20,0 40,0 60,0 80,0 100,0

c110

Não respondeu % incorrectos % correctos

Figura 4 – A - Oocistos de Cryptosporidium spp. corados com Ziehl-Neelson (ampliação 1000x). B - Oocistos de Cryptosporidium spp. corados com Ziehl-Neelson (ampliação 1000x).

A B

Figura 5 – A - Oocistos de Cryptosporidium spp. corados com Ziehl-Neelson modificado. B- Oocistos de Cryptosporidium spp. marcados com anticorpo conjugado com FICT e observados com microscópio de epifluorêscencia.

(http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/HTML/ImageLibrary/Cryptosporidiosis_il.htm)

IMPORTANTE

Agradecemos a devolução do inquérito preenchido, sobre os ensaios parasitológicos efectuados no Vosso Laboratório, para nos ser possível efectuar algumas alterações no Programa Nacional de Avaliação Externa da Qualidade em Parasitologia.

Os nossos melhores cumprimentos, PNAEQ