Confirmação do HBsAg (Conf)
Ensaio para a Confirmação Qualitativa do Antigénio de Superfície da
Hepatite B
Indica informação revisada
Resumo do ensaio
Conteúdo
Para uma definição dos símbolos utilizados na rotulagem dos produtos, consulte Para entender os símbolos no Apêndice D.
Aplicação
O ensaio de confirmação HBsAg ADVIA Centaur® é um imunoensaio de diagnóstico in vitro para a confirmação qualitativa da presença do antigénio de superfície da hepatite B (HBsAg) no soro ou plasma humanos (plasma EDTA, plasma com heparina de lítio ou de sódio, plasma comcitrato) utilizando o sistema ADVIA Centaur®. O ensaio foi concebido para confirmar a presença de HBsAg em amostras que foram repetitivamente reactivas utilizando o ensaio HBsAg ADVIA Centaur.
Materiais necessários mas não fornecidos
Tipo de amostra Soro, plasma EDTA, plasma com heparina de lítio ou de sódio, plasma com citrato Volume da amostra 200 µl (2 x 100 µl)
Calibrador HBsAg
REF Conteúdo Número de testes
03393818 1 embalagem de reagente auxiliar ReadyPack® contendo
ADVIA Centaur® Reagente de Confirmação de HBsAg A A 100
1 embalagem de reagente auxiliar ReadyPack contendo o ADVIA Centaur Reagente de Confirmação de HBsAg B B
REF Descrição Conteúdo
03393362 Ensaio HBsAg ADVIA Centaur
(200 testes) 1 embalagem de reagente primário ReadyPack contendo HBsAg ADVIA Centaurdefase sólida e reagente auxiliar 1 embalagem auxiliar com HBsAg ADVIA Centaur, reagente fluorescente
Cartão de curva principal HBsAg ADVIA Centaur Cartão de curva principal de confirmação HBsAg ADVIA Centaur
1 frasco de calibrador baixo HBsAg 1 frasco de calibrador alto HBsAg
Cartão de valor atribuído ao calibrador HBsAg ADVIA Centaur 03394660 Material de controlo de qualidade
HBsAg ADVIA Centaur*
Controlo positivo de 2 x 10,0 ml Controlo negativo de 2 x 10,0 ml Cartão do valor previsto
07948423
(110314) Multi-diluente 2 HBsAg ADVIA Centaur 2 x 10 ml/embalagem 03395373 Líquido de lavagem de sondas
* Apenas o controlo positivo pode ser processado no ensaio de confirmação HBsAg ADVIA Centaur.
Resumo e explicação do teste
O ensaio de confirmação HBsAg baseia-se no princípio de neutralização de anticorpos
específicos. A amostra é incubada com o anticorpo (humano) policlonal humano ao HBsAg. O anticorpo liga-se ao HBsAg presente na amostra neutralizando o antigénio. A ligação do HBsAg neutralizado aos anticorpos no ensaio é bloqueada. O bloqueio do HBsAg pelos anticorpos do ensaio resulta numa redução do sinal quando comparado com uma segunda alíquota de amostras incubada com um reagente de controlo não neutralizante. O reagente de controlo não neutralizante serve como um controlo para a neutralização assim como o 0% de linha de referência para o cálculo da quantidade de redução no sinal com % de
neutralização. Uma amostra é considerada positiva para o HBsAg se a % de neutralização for 50% ou superior a seguir ao tratamento com o anticorpo (reagente neutralizante).
Princípio do ensaio
O ensaio de confirmação de HBsAg ADVIA Centaur utiliza o princípio de neutralização de anticorpos específicos para confirmar a presença de HBsAg numa amostra que é repetidamente considerada para o HBsAg.
A amostra é sujeita a um pré-tratamento e testada paralelamente; uma alíquota de amostra é distribuída e incubada com um reagente neutralizante que contém doses elevadas de anti-HBs (Reagente A); a segunda alíquota de amostra é incubada com um reagente de controlo não neutralizante (Reagente B).
O HBsAg na amostra do doente é ligado pelo anti-HBs no Reagente A e é permitido entre em reacção no ensaio HBsAg ADVIA Centaur. Quando ambas as alíquotas forem processadas no ensaio HBsAg ADVIA Centaur, a inibição do sinal de RLU na alíquota com o Reagente A é comparada ao sinal de RLU na alíquota com o Reagente B. A % de neutralização relativa é calculada e é gerada uma interpretação da amostra.
O sistema efectua automaticamente os seguintes passos para o pré-tratamento da amostra: • distribui 100 µl de amostras em cada uma das 2 cuvetes
• distribui 50 µl de Reagente A na primeira cuvete • distribui 50 µl de Reagente B na segunda cuvete • incuba durante 29 minutos a 37ºC
No segundo passo do ensaio de confirmação ADVIA Centaur, as amostras pré-tratadas são testadas de acordo com o princípio do ensaio HBsAg ADVIA Centaur. Consulte o Princípio do ensaio nas instruções do HBsAg ADVIA Centaur para utilização.
Existe uma relação directa entre o volume de actividade do HBsAg presente na amostra do doente e a quantidade de unidades de luz relativa (RLUs) detectadas pelo sistema. A % de neutralização é calculada através da comparação dos valores de RLU obtidos com o Reagente A e dos valores obtidos com o reagente de controlo, o Reagente B. Se o valor de RLU com o Reagente B for inferior ao cutoff, o ensaio é considerado inválido. Consulte Interpretação dos resultados para uma descrição das interpretações do ensaio e do cálculo para a % de
neutralização.
01137199
(112351) Líquido de lavagem 1 HBsAg ADVIA Centaur 2 x 1500 ml/embalagem
Recolha e manuseamento da amostra
Os tipos de amostra recomendados para este ensaio são o soro, plasma com EDTA, plasma com heparina de lítio ou de sódio, ou plasma com citrato. Não utilize amostras com contaminação microbiana evidente. O desempenho do ensaio HBsAg ADVIA Centaur não foi determinado com sangue do cordão umbilical, amostras de sangue de recém-nascidos, amostras de sangue de cadáveres, amostras desactivadas por calor ou outros fluidos corporais para além do soro e do plasma, nomeadamente saliva, urina, líquido amniótico ou fluidos pleurais.
As recomendações gerais que se seguem referentes ao manuseamento e armazenamento de amostras de sangue são fornecidas pelo National Committee for Clinical Laboratory
Standards1,e completadascom estudos adicionais sobre o manuseamento de amostras com a
utilização do ensaio HBsAg ADVIA Centaur:
• Manuseie todas as amostras como potenciais transmissores de doenças.
• As amostras são processadas através de centrifugação, normalmente seguida por uma separação física do soro ou plasma dos eritrócitos. A etapa de centrifugação pode ocorrer até 24 horas após a recolha. Ao testar 10 amostras nas quais a etapa de centrifugação variou até 24 horas após a recolha, não foram observadas diferenças clínicas significativas. • Analise as amostras o mais rapidamente possível após a sua recolha. Armazene as amostras
entre 2 e 8°C se não forem imediatamente analisadas.
• Armazene sempre as amostras vedadas e na vertical entre 2 e 8°C e até um máximo de 7 dias.
• Armazene os tubos de amostras primários entre 2 e 8°C até 7 dias. Mantenha sempre as amostras vedadas e na vertical. As amostras do tubo primário incluem soro armazenado coagulado, plasma armazenado em glóbulos vermelhos empacotados e amostras
processadas e armazenadas em tubos de recolha de amostras com barreira de gel. Ao testar 10 amostras que permaneceram nestes tubos primários até 7 dias, não foram observadas diferenças clínicas significativas.
• Para um período de armazenamento mais longo, congele as amostras, isentas de eritrócitos, a uma temperatura de -20°C ou inferior. Não guarde as amostras num frigorífico com descongelamento automático. Após terem sido submetidas 10 amostras a 4 ciclos de congelamento/descongelamento, não foram observadas quaisquer diferenças clínicas significativas. Misture bem e centrifugue as amostras descongeladas antes de as utilizar. • Embale e coloque as etiquetas nas amostras para envio de acordo com os regulamentos
federais e internacionais aplicáveis respeitantes ao transporte de amostras clínicas e agentes etiológicos. As amostras mantidas à temperatura ambiente durante 2 dias ou arrefecidas durante 7 dias não demonstraram diferenças qualitativas. Armazene as amostras vedadas e na vertical entre 2 e 8°C após a sua chegada. Se o período de envio ultrapassar os 7 dias, envie as amostras congeladas.
Antes de colocar as amostras no sistema, verifique o seguinte:
• As amostras não contêm fibrina nem outras partículas. Remova as partículas através da centrifugação.
• As amostras não contêm bolhas nem espuma.
Reagentes
Armazene os reagentes na posição vertical, a uma temperatura entre 2 e 8°C.
Agite manualmente todas as embalagens de reagentes primários antes de as colocar no sistema. Inspeccione visualmente a parte inferior da embalagem do reagente, para se certificar de que todas as partículas estão dispersas e em suspensão. Para obter informações detalhadas sobre a preparação dos reagentes, consulte o Apêndice C, Manuseamento de reagentes.
Embalagem de
reagente Reagente Volume Ingredientes Armaze-namento Estabilidade
Embalagem de reagentes auxiliares ReadyPack ADVIA Centaur Conf A Reagente neutralizante 5,0 ml/embalagem de reagente
plasma humano positivo para anticorpos para o HBsAg com conservantes
2–8°C até à data de validade no rótulo da embalagem ou
41 dias consecutivos após a abertura da embalagem do reagente auxiliar Embalagem de reagentes auxiliares ReadyPack ADVIA Centaur Conf B Reagente de controlo não neutralizante 5,0 ml/ embalagem de reagente
plasma humano negativo para o HBsAg e anticorpos para o HBsAg com conservantes
2–8°C até à data de validade no rótulo da embalagem ou
41 dias consecutivos após a abertura da embalagem do reagente auxiliar Embalagem de reagentes auxiliares ReadyPack ADVIA Centaur Conf 2 * Multi-Diluente 2 10,0 ml/ embalagem de reagente
soro caprino com azida
sódica (0,1%) e conservantes2–8°C até à data de validade no rótulo da embalagem ou
28 dias consecutivos após a abertura da embalagem do reagente auxiliar Embalagem de reagentes auxiliares ReadyPack ADVIA Centaur 1* Líquido de lavagem 25,0 ml/embalagem de reagente 0,4 N de hidróxido
de sódio 2–8°C até à data de validade no rótulo da embalagem ou
14 dias consecutivos após a abertura da embalagem do reagente auxiliar Embalagem de reagentes primários ReadyPack HBsAg ADVIA Centaur* Fase sólida 21,0 ml/ embalagem de reagente partículas de látex magnéticas revestidas com estreptadivina tamponadas com albumina de sangue bovino, soro caprino, tensioactivo e azida sódica (< 0,1%) e conservantes
2–8°C até à data de validade no rótulo da embalagem. Relativamente à estabilidade de utilização, consulte Estabilidade de utilização e intervalo de calibração. Auxiliar Reagente 5,0 ml/ embalagem de reagente Reagente de colina (~69,8 mg/ml) e partículas de látex não magnéticas tamponadas com azida sódica (< 0,1%)
2–8°C até à data de validade no rótulo da embalagem. Para a estabilidade de utilização, consulte Estabilidade de utilização e intervalo de calibração. Embalagem de reagentes auxiliares ReadyPack HBsAg ADVIA Centaur * Reagente fluorescente 24,0 ml/embalagem de reagente anticorpo monoclonal de rato biotinilado anti-HBsAg (~1,0 µg/ml) e anti-HBsAg monoclonal de rato marcado com éster de acridínio (~0,1 µg/ml) tamponado com albumina de sangue bovino, gamaglobulina bovina, soro caprino, IgG de rato, tensioactivo, azida sódica (< 0,1%) e conservantes
2–8°C até à data de validade no rótulo da embalagem. Para a estabilidade de utilização, consulte Estabilidade de utilização e intervalo de calibração. Frascos do calibrador HBsAg* Calibradores 3,0 ml/
frasco calibrador alto: HBsAg humano purificado tamponado com azida sódica (< 0,1%)
calibrador baixo: plasma humano normal processado com azida sódica (< 0,1%)
2–8°C até à data de validade do frasco ou 8 horas de utilização frascos de material de controlo de qualidade do ensaio HBsAg† Controlos 10,0 ml/
frasco plasma humano processado negativo e positivo para o HBsAg com conservantes
2–8°C até à data de validade do frasco
ou
* Consulte Materiais necessários mas não fornecidos.
† Consulte Materiais necessários mas não fornecidos. Apenas o controlo positivo pode ser processado no ensaio de confirmação HBsAg ADVIA Centaur.
NOTA: A azida sódica pode reagir com o cobre e o chumbo existentes nas canalizações,
formando azidas metálicas explosivas. Quando eliminar os reagentes, utilize água em abundância para evitar a acumulação de azidas. Certifique-se primeiro de que a eliminação destes materiais através da rede de esgotos cumpre a legislação em vigor.
Para utilizar no diagnóstico in vitro.
Carregar os reagentes
Certifique-se de que o sistema contém embalagens suficientes de reagentes primários e auxiliares. Para obter informações mais detalhadas sobre a preparação do sistema, consulte as instruções de funcionamento do sistema ou o sistema de ajuda online.
PRECAUÇÃO: Agite manualmente todas as embalagens de reagentes primários antes de as colocar
no sistema. Inspeccione visualmente a parte inferior da embalagem do reagente, para se certificar de que todas as partículas estão dispersas e em suspensão. Para obter informações detalhadas sobre a preparação dos reagentes, consulte o Apêndice C, Manuseamento de reagentes.
NOTA: Para efectuar o ensaio de confirmação HBsAg ADVIA Centaur, carregue as embalagens
de reagentes primários ReadyPack HBsAg ADVIA Centaur no compartimento de reagentes primários utilizando as setas das embalagens para as colocar correctamente. O sistema mistura automaticamente as embalagens dos reagentes primários para manter uma suspensão
homogénea dos reagentes. Coloque o reagente fluorescente HBsAg ADVIA Centaur, o Reagente A e o Reagente B de confirmação HBsAg ADVIA Centaur, o Multi-diluente 2 ADVIA Centaur e as embalagens de reagentes auxiliares Readypack do líquido de lavagem de sonda auxiliares 1 ADVIA Centaur na entrada de reagentes auxiliares. Para informações detalhadas sobre como colocar os reagentes, consulte as instruções de funcionamento do sistema ou o sistema de ajuda online.
PRECAUÇÃO: Os calibradores alto e baixo fornecidos no kit HBsAg ADVIA Centaur são
combinados com a embalagem de reagentes primários ReadyPack. Não misture lotes de calibradores com lotes diferentes de embalagens de reagentes.
PRECAUÇÃO: A embalagem de reagentes auxiliares Readypack do reagente fluorescente
fornecida no no kit HBsAg ADVIA Centaur é combinada com a fase sólida e o reagente auxiliar. Não misture os lotes de reagente auxiliar com lotes diferentes de fase sólida e de reagente auxiliar.
ADVIA Centaur
1* Líquido de lavagem 1 1500 ml/embalagem salina tamponada de fosfato com azida sódica (< 0,1%) e tensioactivo
2–25°C até à data de validade do frasco
ou
14 dias de utilização
PRECAUÇÃO! POTENCIAIS RISCOS BIOLÓGICOS: Alguns componentes deste produto contêm material de
origem humana. Não existe qualquer método de ensaio conhecido que ofereça a segurança total de que os derivados do sangue humano não transmitam agentes infecciosos. Todos os produtos fabricados a partir de material de origem humana devem ser manuseados como potencialmente infecciosos. Manuseie este produto de acordo com as boas práticas de laboratório e com as precauções universais.2-4
O controlo negativo e o calibrador baixo foram ensaiados através de métodos aprovados pela FDA e considerados não reactivos para o antigénio de superfície da hepatite B (HBsAg), o anticorpo para a hepatite C (VHC) e o anticorpo para VIH-1/2. O controlo positivo e o calibrador alto contêm plasma humano que é reactivo para o HBsAg. As unidades foram tratadas com um procedimento de inactivação de beta-propiolactona - raios ultra-violeta; contudo, todos os produtos fabricados com o uso de material de origem humana devem ser manuseados como potencialmente infectantes.
Embalagem de
Estabilidade de utilização e intervalo de calibração e Calibração da curva
principal
Uma vez que o ensaio de confirmação HBsAg ADVIA Centaur utiliza as embalagens de reagentes primários HBsAg ADVIA Centaur, consulte Estabilidade de utilização e intervalo de calibração e Calibração da curva principal nas instruções para a utilização do HBsAg ADVIA Centaur. O cartão de curva principal de confirmação HBsAg ADVIA Centaur está incluído no kit HBsAg ADVIA Centaur. Calibre o ensaio de confirmação do ADVIA Centaur HbsAg sempre que o ensaio ADVIA Centaur HBsAg for calibrado.
O Reagente A e o Reagente B de confirmação HBsAg ADVIA Centaur possuem uma estabilidade de utilização de 41 dias com um intervalo de calibração de 21 dias.
Calibração
Para informações detalhadas sobre a introdução dos valores de calibração, consulte as instruções de funcionamento do sistema ou o sistema de ajuda online.
Certifique-se que as calibrações para os ensaios ADVIA Centaur HBsAg e Confirmação ADVIA Centaur HBsAg estão completas antes de analisar amostras pelo ensaio de
Confirmação HBsAg. O Reagente A e o Reagente B do ensaio de Confirmação HBsAg serão calibrados com os Calibradores Alto e Baixo.
Para a calibração do ensaio de confirmação do ADVIA Centaur HBsAg, utilize os Calibradores ADVIA Centaur HBsAg fornecidos com cada kit de ADVIA Centaur HBsAg. Os calibradores fornecidos com este kit são combinados com a embalagem de reagentes primários ReadyPack.
Utilizar as etiquetas de código de barras
NOTA: As etiquetas de códigos de barras são específicas do número do lote. Não utilize etiquetas
de códigos de barras de um lote de calibradores com qualquer outro lote de calibradores. Utilize as etiquetas de código de barras do calibrador ADVIA Centaur HBsAg para identificar os copos de amostras do calibrador baixo e do calibrador alto ao executar o ensaio de
confirmação do ADVIA Centaur HBsAg. Coloque a etiqueta de código de barras no copo da amostra de forma a que os caracteres legíveis na parte lateral da etiqueta fiquem na vertical no copo da amostra.
Efectuar uma calibração
Cada lote de calibradores contém um cartão de valores atribuídos aos calibradores para facilitar a introdução dos valores de calibração no sistema. Introduza os valores utilizando um leitor de código de barras ou o teclado. Para informações detalhadas sobre a introdução dos valores do calibrador, consulte as instruções de funcionamento do sistema ou o sistema de ajuda online.
NOTA: Este procedimento utiliza suficientes volumes do calibrador para medir cada calibrador em duplicado tanto para o Reagente A como para o Reagente B.
1. Programe os calibradores na lista de trabalho para o teste de confirmação do HBsAg. 2. Coloque etiquetas de códigos de barras dos calibradores em dois copos de amostras: um
para o calibrador baixo e outro para o calibrador alto.
NOTA: Cada gota do frasco do calibrador tem aproximadamente 50 µL.
3. Misture suavemente os calibradores baixo e alto e distribua pelo menos 10 a 12 gotas nos copos de amostras adequados.
4. Coloque os copos de amostras num suporte. 5. Coloque o suporte na fila de entrada das amostras.
7. Inicie a fila de entrada, se necessário.
NOTA: Elimine qualquer quantidade de calibrador que permaneça nos copos das amostras durante mais de 8 horas. Não encha novamente os copos das amostras quando o conteúdo se tiver esgotado; se necessário, distribua calibradores novos.
Controlo de qualidade
Para o controlo de qualidade do ensaio de confirmação do ADVIA Centaur HBsAg, utilize o material de controlo de qualidade positivo do ADVIA Centaur HBsAg. O controlo positivo deve ser programado da mesma forma que uma amostra repetidamente reactiva. O ADVIA Centaur processa uma alíquota de controlo positivo com Reagente A e uma alíquota de controlo positivo com Reagente B.
Para o processamento ser válido, a % de neutralização para o controlo positivo deve ser superior ou igual a 50% e deve ser obtido um resultado de confirmado. Relativamente ao ensaio de confirmação do HBsAg, o ADVIA Centaur não irá controlar a neutralização ou o resultado da interpretação do controlo positivo. Tem de ser utilizado um método alternativo para controlar o controlo.
Efectuar um controlo de qualidade
Para monitorizar o desempenho do sistema, as amostras de controlo de qualidade devem ser ensaiadas em cada turno em que as amostras foram analisadas. Trate todas as amostras de controlo da qualidade da mesma forma que as amostras dos doentes.
NOTA: Este procedimento utiliza suficientes volumes do controlo para medir o controlo positivo
em duplicado.
1. Programe a amostra de controlo de qualidade positivo como amostra de doente na lista de trabalho.
NOTA: O ADVIA Centaur não permitirá a utilização do SID do controlo positivo do HBsAg.
Tem de ser utilizado um outro SID.
2. Coloque uma etiqueta num copo de amostra PARA EFEITOS DE IDENTIFICAÇÃO. Não utilize as etiquetas de códigos de barras fornecidas com os controlos.
NOTA: Cada gota do frasco do controlo tem aproximadamente 50 µL.
3. Misture suavemente o material de controlo de qualidade e deite pelo menos 8 a 10 gotas no copo de amostra adequado.
4. Coloque o copo de amostra num suporte.
5. Coloque o suporte na fila de entrada das amostras.
6. Certifique-se de que todos os reagentes para o ensaio estão carregados. 7. Inicie a fila de entrada, se necessário.
NOTA: Elimine qualquer material de controlo da qualidade que permaneça no copo da amostra
durante mais de 8 horas. Não encha novamente o copo da amostra quando o conteúdo se tiver esgotado; se necessário, distribua material de controlo de qualidade novo.
Efectuar uma acção correctiva
Se os resultados do controlo de qualidade não produzirem ≥ 50% de neutralização faça o seguinte:
• considere os resultados da amostra inválidos e repita o teste
• reveja estas instruções para se certificar de que este ensaio foi efectuado de acordo com os procedimentos recomendados pela Bayer HealthCare
• verifique se a validade dos materiais não expirou • verifique se a manutenção necessária foi efectuada
• se necessário, contacte a Bayer HealthCare para mais assistência
Volume da amostra
Este ensaio requer 200 µl de amostra para uma única determinação. Este volume não inclui o volume não utilizável no recipiente da amostra ou o volume adicional necessário ao efectuar duplicados ou outros testes na mesma amostra. Para informações detalhadas sobre o volume mínimo necessário, consulte Requisitos do volume da amostra no Manual de referência ADVIA Centaur.
Procedimento do ensaio
Para informações detalhadas sobre os procedimentos, consulte as instruções de funcionamento do sistema ou o sistema de ajuda online.
PRECAUÇÃO: Não coloque mais do que um tamanho do recipiente da amostra em cada suporte. O
indicador do suporte deve estar colocado no posicionamento correcto para o tamanho do recipiente da amostra.
1. Prepare o recipiente da amostra para cada amostra e coloque etiquetas de códigos de barras nos recipientes das amostras, como necessário.
2. Carregue cada recipiente da amostra num rack e certifique-se de que as etiquetas do código de barras estão visíveis.
3. Coloque os suportes na fila de entrada.
4. Certifique-se de que todos os reagentes para o ensaio estão carregados. 5. Inicie a fila de entrada, se necessário.
Notas sobre procedimentos
Eliminação
A eliminação de material perigoso ou biologicamente contaminado deve ser efectuada de acordo com as práticas da sua instituição. Elimine todos os materiais de uma forma segura e aceitável e em conformidade com todos os requisitos locais.
Interpretação dos resultados
Para obter informações detalhadas sobre a forma como o sistema calcula os resultados, consulte as instruções de funcionamento do sistema ou o sistema de ajuda online.
O sistema calcula automaticamente o cutoff e a % de neutralização com base na calibração do ensaio de confirmação HBsAg ADVIA Centaur e os valores obtidos para o processamento da amostra com o Reagente A e o Reagente B.
NOTA: O cutoff baseia-se nos valores de RLU dos calibradores e não no Valor de índice HBsAg
ADVIA Centaur (Valor de índice = 1,0). Isto é assim para que o cutoff possa ser ajustado de forma a permitir a diluição da amostra com o Reagente A e o Reagente B.
O sistema regista os valores do ensaio de confirmação HBsAg ADVIA Centaur como Inválidos, Rediluídos, Não confirmados ou Confirmados.
• As amostras são registadas como Inválidas se o processamento da amostra com o Reagente B for inferior ao valor do cutoff do ensaio de confirmação HBsAg
depois de repetir o teste, isso significa que não pode ser obtido um resultado válido com esta amostra e deve ser obtida uma nova amostra.
• As amostras registadas como Rediluídas requerem uma diluição posterior para confirmação.
• As amostras registadas como Não confirmadas são negativas para o HBsAg. • As amostras registadas como Confirmadas são positivas para o HBsAg.
Consulte o seguinte algoritmo de teste para a interpretação de amostras repetidamente reactivas:
Limitações
• O ensaio de confirmação HBsAg ADVIACentaur limita-se à confirmação do HBsAg no soro ou plasma humanos (plasma com EDTA, plasma heparinizado com lítio ou sódio ou plasma com citrato) em amostras repetidamente reactivas utilizando o ensaio HBsAg ADVIA Centaur.
• Para fins de diagnóstico e para fazer a distinção entre a infecção aguda e crónica pelo VHB, a detecção do HBsAg deve ser correlacionada com as informações clínicas do doente e outros marcadores serológicos do VHB. Reconhece-se que os métodos actualmente disponíveis para a detecção do antigénio de superfície da hepatite B podem não detectar todos os indivíduos potencialmente infectados. Um resultado de teste HBsAg não reactivo não exclui a possibilidade de exposição à hepatite B ou de infecção com hepatite B.
• As características de desempenho do ensaio ainda não foram estabelecidas para o teste de recém-nascidos.
• O desempenho do ensaio de confirmação HBsAg ADVIACentaur não foi determinado com sangue do cordão umbilical, amostras sanguíneas de recém-nascidos, amostras sanguíneas de cadáveres, amostras desactivadas por calor ou outros fluidos corporais para além do soro do plasma tais como saliva, urina, líquido amniótico ou fluidos pleurais.
• O desempenho do ensaio não foi estabelecido para populações de doentes hospedeiros imunodeprimidos ou imunodeficientes.
• Não utilize amostras com contaminação microbiana evidente.
• Os anticorpos heterofílicos no soro humano podem reagir com imunoglobinas e interferir com os imunoensaios in vitro.5 Os doentes expostos frequentemente a animais ou a
produtos de soro animal podem ter tendência para esta interferência e podem ser observados valores anómalos. Poderá ser necessária informação adicional para o diagnóstico. As amostras que contêm anticorpos heterofílicos não devem neutralizar através do ensaio de confirmação HBsAg ADVIA Centaur.
Características de desempenho
Comparação do método
Foi avaliado um total de 483 amostras positivas de VHB de indivíduos naturalmente infectados através do ensaio de confirmação HBsAg ADVIA Centaur em dois locais de ensaios clínicos externos. Os teste foi efectuado de acordo as instruções de utilização. 481 das amostras testadas como reactivas através do método de referência também foram consideradas reactivas com o ensaio HBsAg ADVIA Centaur. Os resultados da confirmação mostraram 100% das amostras naturalmente infectadas pelo HBV, as amostras repetidamente reactivas do HBsAg
confirmadas através do método de confirmação HBsAg ADVIA Centaur. Para além disso, o método de confirmação HBsAg ADVIA Centaur não confirmou 5 amostras falso positivas encontradas durante a avaliação do HBsAg.
Percentagem confirmada (Locais 1 e 2 Combinados)
% Confirmada = 100,00%, 95% Intervalo de confiança (IC) = 99,24%–100,00%
Distribuição da diluição para amostras positivas (Locais 1 e 2 combinados)
Grupo de doentes Número testado Ensaio HBsAg ADVIA Centaur (200 testes)Número confirmado (%)
infectados pelo VHB 442 442/442 (100%) infectados pelo VHB (limite de "cutoff" positivo) 20 20/20 (100%) infectados pelo VHB (altamente positivo: > 50 ng) 21 21/21 (100%) Falso positivo (HBsAg não confirmado) 5 0/5 (0%)
Resultados Número testado % da população
Total de amostras infectadas pelo VHB 483
Não diluídas confirmadas 321 321/483 (66,5%) Confirmadas com 1:50 de diluição 152 152/483 (31,5%) Confirmadas com 1:2500 de diluição 10 10/483 (2,0%)
Painel de desempenho de doses baixas
O desempenho de doses baixas foi avaliado através de um painel de desempenho de doses baixas comercialmente disponível num do locais de ensaios clínicos externos. Todas as amostras positivas foram confirmadas como positivas conforme indicado na tabela que se segue:
Assistência técnica
Para serviços de atendimento ao cliente, contacte o seu distribuidor ou fornecedor de assistência técnica.
Referências
1. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Procedures for handling and processing of blood specimens; second edition; approved guideline. NCCLS Document H18-A2; Wayne (PA):NCCLS;1999 Oct. 40p.
2. Centers for Disease Control. Update: Universal precautions for prevention of transmission of human immunodeficiency virus, hepatitis B virus and other bloodborne pathogens in healthcare settings. MMWR 1988;37:377-82, 387-8.
3. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections-second edition; approved guideline. NCCLS Document M29-A2. Wayne (PA):NCCLS; 2001 Dec. 105p.
4. Federal Occupational Safety and Health Administration, Bloodborne Pathogens Standard, 29 CFR 1910.1030. 5. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988;34:27–33.
A denominação Bayer, a Cruz Bayer, ADVIA Centaur, e ReadyPack são marcas comerciais da Bayer. © 2003 Bayer HealthCare LLC. Todos os direitos reservados.
US Pats 4,745,181; 4,918,192; 5,110,932; 5,656,426; 5,609,822; 5,788,928
Membro Número de
identificação ADVIA Centaur(Índice) Interpretação de confirmação do HBsAg ADVIA Centaur
80631705 2,25 Confirmado (101,6%) 80631706 3,87 Confirmado (101,4%) 80631707 9,99 Confirmado (100,6%) 80631708 8,19 Confirmado (100,1%) 80631709 3,12 Confirmado (89,3%) 80631710 13,95 Confirmado (100,1%) 80631711 < 0,10 Inválido 80631712 11,95 Confirmado (90,2%) 80631713 9,22 Confirmado (98,9%) 80631714 9,80 Confirmado (100,3%) 80631715 6,11 Confirmado (102,3%) 80631716 3,35 Confirmado (100,9%) 80631717 10,44 Confirmado (100,8%) 80631718 14,69 Confirmado (100,7%) 80631719 13,81 Confirmado (99,4%)
