H YΠEPEKΦPAΣH TΩN m4 KAI mα KATAΣTEΛΛEI TA ΓONI∆IA E(spl)-bHLH p.53 ΓENETIKEΣ AΛΛHΛEΠI∆PAΣEIΣ ME AΛΛA ΣYΣTATIKA TOY MONOΠATIOY. The latter are direct targets of Notch signaling and their induction results in repression of proneural genes. This is due to the downregulation of Espl-bHLH, which in turn results in high proneural gene activity in more cells than in the wild type.
Their action seems very specific in the downregulation of Notch signaling during the determination of SOPs, but not in other instances of the signaling. Gro interacts with many transcription factors and is involved in many instances of gene regulation in development and in well-conserved signaling pathways across the evolutionary spectrum. Initially, gro was noted to influence hh and tangled (en) expression in the anterior wing disc.
By further examining this effect, we concluded that gro reduces hh transcription independently of the known repressive activity of cubitus interruptus (ci). On the other hand, the GCS domain, which contains the entire NLS signal, and the WD40 and Q domains are required for gro function.
TO ΓIATI KAI TO ΠΩΣ THΣ ANAΠTYΞHΣ
H ∆POΣOΦIΛA ΩΣ MONTEΛO ANAΠTYΞHΣ
NEYPOΓENEΣH- ΣHMA TOY NOTCH
Είναι υπεύθυνος για την προδιαγραφή των οσφρητικών υποδοχέων (πολλαπλοί δενδριτικοί νευρώνες) και υπάρχει η υποψία ότι μαζί με τα da, ato και AS-C μπορεί να παρέχουν τη δυνατότητα για το σχηματισμό όλων των νευρώνων (Goolding et al. 2000; Huang et al. 2000 ). ).). ε) Το γονίδιο του ελαττώματος της συμπύκνωσης του κοιλιακού νευρικού συστήματος (vnd) βρίσκεται στο Αν και το Hairless έχει αποδειχθεί ότι αλληλεπιδρά με το Su(H) και το εμποδίζει από τη δέσμευσή του στο DNA (Brou et al. 1994), νέα δεδομένα υποδηλώνουν ότι το Su(H) μαζί με το H και τον συν-κατασταλτή dCtBP μπορούν να συνδεθούν με το DNA και ενεργά καταστολή (Bray and Furriols 2001· Morel et al. 2001).
O ΣYΓKATAΣTOΛEAΣ GRO
Αυτή η ακολουθία γεγονότων είναι ένα τέχνασμα της φύσης για την επίτευξη γραμμικά εντοπισμένης έκφρασης μορφογόνων, όπως τα dpp και wg, τα οποία κατανέμονται και προς τις δύο κατευθύνσεις, ρυθμίζοντας το πρότυπο ανάπτυξης της κορυφής (Fietz et al 1994). Πρωτεΐνη Ci που εμφανίζεται σε δύο μορφές : α) ολόκληρη, η οποία είναι μια πρωτεΐνη 155 KDa και συμπεριφέρεται ως ενεργοποιητής των γονιδίων-στόχων Hh, όπως dpp και patched (ptc) και β) καρβοξυτελική περικοπή - με εξειδικευμένη πρωτεόλυση - ( 75 KDa), η οποία δρα ως καταστολέας dpp και hh (Aza-Blanc et al 1997; Methot and Basler 1999). Τα γονίδια χαραγμένα (en) και hedgehog (hh) εκφράζονται στο οπίσθιο διαμέρισμα (P), ενώ το cubitus interruptus (ci), μόνο στο πρόσθιο διαμέρισμα (A). 5) Η ΟΜΟΛΟΓΙΑ ΤΟΥ ΘΣ ΝΕΥΠΟΓΕΝΕΣΗΣ ΚΑΙ ΘΣ ΑΝΑΠΤΥΞΗΣ ΔΕΧΕΤΑΙ ΤΗΝ ΑΝΑΜΕΣΑ ΤΗΣ Θ ΔΟΣΟΦΗΛΑΣ ΚΑΙ ΤΑ.
OMOΛOΓIA THΣ NEYPOΓENEΣHΣ KAI THΣ ANAΠTYΞHΣ TΩN AKPΩN ANAMEΣA ΣTH ∆POΣOΦIΛA KAI TA
Οι λειτουργικές αλληλεπιδράσεις του gro δεν περιορίζονται σε γονίδια ομόλογα με τα μαλλιά, αλλά όπως δείχνουν οι Jimenez και οι συνεργάτες του, μπορεί να συνεργαστεί με το En και να καταστείλει αρκετά γονίδια όπως το bypassed (eve) (Jimenez et al. 1997), για να ανταγωνιστεί τη δράση του το μονοπάτι του κορμού κατά την έκφραση χωρίς ουρά και το huckebein (Paroush et al. 1997), για την καταστολή των γονιδίων-στόχων του σήματος κορμού αλληλεπιδρώντας με το γονίδιο capicua (Jimenez et al 2000) και για την αντιστροφή του Dorsal από έναν ενεργοποιητή σε έναν καταστολέα (Dubnicoff et al. 1997).
ΣTOXOI THΣ ΠAPOYΣAΣ EPΓAΣIAΣ
YΛIKA KAI MEΘO∆OI
Από αυτόν τον φορέα μεταφέρθηκε ως BamHI(5')-SalI(3') στις θέσεις BglII(5')-XhoI(3') του pUAST Όλα τα μεταλλαγμένα γονίδια gro ήταν από τον φορέα sev-CASPER ('n δώρο) υποκλωνοποιημένο από Stefano Stifani) ως θραύσμα ClaI(5')-NotI(3') στις θέσεις EcoRI(5')-NotI(3') του φορέα pUAST.
AΠOTEΛEΣMATA
Περιοχές προδρόµων του φτερού από αναπτυξιακούς δίσκους προνυµφών τρίτου σταδίου, που περιλαµβάνουν στο γονότυπό τους το γονίδιο neur A101 -lacZ και
Το gro δεν καταστέλλει άμεσα το dppZ, αλλά μόνο έμμεσα (μέσω αποκαταστολής Hh), ενώ το ci έχει αποδειχθεί ότι καταστέλλει άμεσα το dppZ. iv) Δεν εντοπίσαμε αλληλεπιδράσεις πρωτεΐνης μεταξύ των δύο μορίων, τόσο στο in vivo όσο και στο in vitro συστήματα. v) Είναι πολύ σημαντικό να σημειωθεί ότι η μορφή καταστολέα του Ci-Cicell-μπορεί να καταστείλει το hh-lacZ κοντά στο όριο AP υπό συνθήκες πλήρους απώλειας gro, δηλαδή, ο καταστολέας Cicell δεν χρειάζεται Gro για να δράσει.
ANAΦOPEΣ
Embryonic development of Drosophila melanogaster. 1992) Formation of the Drosophila nervous system: the achaete-scute gene complex. 1994) Role of the Notch gene in Drosophila wing morphogenesis. 1995) groucho and hedgehog regulate involved expression in the anterior wing region of Drosophila. Serrate signals through Notch to establish a wing-dependent organizer at the border of the dorsal/ventral compartment of the Drosophila wing.
1996 ) The Drosophila Numb protein inhibits Notch receptor signaling during cell-cell interaction in sensory organ lineage. The Notch signaling pathway is required for enhancer of split bHLH protein expression during neurogenesis in the Drosophila embryo. 1990) Defective neuroblast commitment in mutants of the achete-scute complex and adjacent genes from D. 1997). Seven genes from the Enhancer of split Complex of Drosophila melanogaster encode helix-loop-helix proteins.
Neuroectodermal transcription of the Drosophila neurogenic genes E (spl) and HLH-m5 is regulated by protenural genes. 1997) The Bearded Box, a Novel 3' UTR Sequence Motif, Mediates Negative Post-Transcriptional Regulation of Bearded and Enhancer of Spliced Complex Gene Expression. 2000b) The Drosophila split complex enhancer includes four Notch-regulated members of the bearded gene family. The neurogenic suppressor of hairless DNA-binding protein mediates the transcriptional activation of the enhancer of spliced complex genes mediated by Notch signaling.
1996) Persistent expression of genes from the Enhancer of split Complex suppresses neural development in Drosophila. A hierarchy of cross-regulation involving Notch, wingless, vestigial, and cut organizes the dorsal/ventral axis of the Drosophila wing. 2001) Lineage, cell polarity and opaque function in the peripheral nervous system of the Drosophila embryo. 1997 ) The Groucho/transducin-like enhancer of split transcriptional repressors interacts with the genetically defined amino-terminal silencing domain of histone H3.
1992) Suppressor of Hairless, the Drosophila homologue of the mouse recombination signal-binding protein gene, controls sensory organ cell fates. 1997). The intracellular deletions of Delta and Serrate define dominant negative forms of the Drosophila Notch ligands. Only a subset of the binary cell fate decisions mediated by Numb/Notch signaling in Drosophila sensory organ lineage requires Suppressor of Hairless.
HMOΣIEYΣEIΣ
Our findings provide new insights into both the mechanisms of wing AP patterning and the function of Gro. The ability of A cells to respond to Hh depends on A-exclusive expression of the cubitus interruptus ( ci ) gene ( Aza-Blanc and Kornberg, 1999 ). One result of this complex regulation of Ci is that in the wing disc, the Hh dpp target gene is actively repressed by Ci[rep] in A cells far from the AP border (Ci[rep] high, Ci[act] absent) , but is strongly activated in cells near the border (Ci[rep] low or absent, Ci[act] high) ( Méthot and Basler, 1999 ).
Because Ci mosaic clones cause equally mild derepression of hh in all cells of the A compartment (regardless of proximity to the AP border) (Méthot and Basler, 1999; Dahmann and Basler, 2000), it has been proposed that low levels of Ci [rep] is present in Hh-responsive cells and is sufficient to switch off hh transcription. Ci[rep] is generated by the standard proteolytic processing of the ci product in cells that do not receive Hh input, namely anterior cells away from the AP boundary. If Ci and Gro act independently to suppress hh, it is conceivable that the increased levels of Ci[rep] in a ciCe2/+ background would be sufficient to suppress hh and thus highlight the importance of the Gro contribution in cells nearby would reduce the cell. the AP border.
Yeast two hybrid assays showed a very weak interaction of Gro with both forms of Ci, allowing slow growth in the absence of the selectable marker (leucine), but insufficient to engage a more stringent lacZ-based reporter (not shown). Deletions removed the following domains from the protein: the N-terminal Q domain (gro∆Q), the central GP/CcN/SP domains (gro∆GCS), and the C-terminal WD40 repeats (gro∆WD40 ) – short areas of adjacent domains were also affected (see Methods). We have characterized a role of the corepressor Gro in hh repression in the leading wing compartment near the AP border.
This effect will spread to the edge of the clone, where the activation of the X-Gro. Resolving the mechanism of hh repression at the AP boundary will necessitate detailed molecular dissection of the hh regulatory regions and characterization of relevant trans -acting factors. The inactivity of the Gro∆WD40 mutant can be explained by its inability to interact with the X-factor binder.
Confocal images were generated at the confocal microscopy facility of the University of Crete. Attenuation-mediated Hedgehog signaling is required for maintenance of anterior-posterior lineage restriction in the developing Drosophila wing. This is due to the lack of repressor and activator complexes within the clones.