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Alinhamento dos resultados de sequenciação

No documento Andreia Filipa Bonecas Mósca (páginas 110-112)

ATG…Spe

Anexo 5 Alinhamento dos resultados de sequenciação

Figura VII.2 – Alinhamento da sequência codificante da AQP3 de Rattus norvegicus com os resultados da sequenciação do plasmídeo extraído das colónias 3.5 (equivalente 2.2) e e 3.7 (equivalente a 3.2). O múltiplo alinhamento das sequências foi realizado com a ferramenta ClustalW do software BioEdit versão 7.2.0.

10 20 30 40 50 60 70 80 90

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 2.2 CCCCATCCATACTCTAGAACTAGTCCTATGGGTCGACAGAAGGAGTTGATGAACCGTTGCGGGGAGATGCTCCACATCCGCTACCGGCTG

3.2 CCCCATCCATACTCTAGAACTAGTCCTATGGGTCGACAGAAGGAGTTGATGAACCGTTGCGGGGAGATGCTCCACATCCGCTACCGGCTG

rAQP3 cds ---ATGGGTCGACAGAAGGAGTTGATGAACCGTTGCGGGGAGATGCTCCACATCCGCTACCGGCTG

Clustal Consensus ***************************************************************

100 110 120 130 140 150 160 170 180

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 2.2 CTTCGCCAGGCTCTGGCGGAGTGCCTGGGGACCCTCATCCTTGTGATGTTCGGCTGTGGTTCCGTGGCTCAAGTGGTGCTCAGCCGAGGG

3.2 CTTCGCCAGGCTCTGGCGGAGTGCCTGGGGACCCTCATCCTTGTGATGTTCGGCTGTGGTTCCGTGGCTCAAGTGGTGCTCAGCCGAGGG

rAQP3 cds CTTCGCCAGGCTCTGGCGGAGTGCCTGGGGACCCTCATCCTTGTGATGTTCGGCTGTGGTTCCGTGGCTCAAGTGGTGCTCAGCCGAGGG

Clustal Consensus ******************************************************************************************

190 200 210 220 230 240 250 260 270

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 2.2 ACCCATGGTGGCTTCCTCACCATCAACTTGGCTTTTGGCTTCGCTGTCACCCTTGCCATCTTGGTGGCTGGCCAAGTGTCTGGAGCCCAC

3.2 ACCCATGGTGGCTTCCTCACCATCAACTTGGCTTTTGGCTTCGCTGTCACCCTTGCCATCTTGGTGGCTGGCCAAGTGTCTGGAGCCCAC

rAQP3 cds ACCCATGGTGGCTTCCTCACCATCAACTTGGCTTTTGGCTTCGCTGTCACCCTTGCCATCTTGGTGGCTGGCCAAGTGTCTGGAGCCCAC

Clustal Consensus ******************************************************************************************

280 290 300 310 320 330 340 350 360

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 2.2 TTGAACCCTGCTGTGACCTTTGCAATGTGCTTCCTGGCACGAGAGCCCTGGATCAAGCTGCCCATCTACACACTGGCACAGACCCTCGGG

3.2 TTGAACCCTGCTGTGACCTTTGCAATGTGCTTCCTGGCACGAGAGCCCTGGATCAAGCTGCCCATCTACACACTGGCACAGACCCTCGGG

rAQP3 cds TTGAACCCTGCTGTGACCTTTGCAATGTGCTTCCTGGCACGAGAGCCCTGGATCAAGCTGCCCATCTACACACTGGCACAGACCCTCGGG

Clustal Consensus ******************************************************************************************

370 380 390 400 410 420 430 440 450

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 2.2 GCCTTCTTGGGTGCTGGGATTGTTTTTGGGCTCTACTATGATGCAATCTGGGCCTTTGCTGGCAATGAGCTTGTTGTCTCCGGCCCCAAT

3.2 GCCTTCTTGGGTGCTGGGATTGTTTTTGGGCTCTACTATGATGCAATCTGGGCCTTTGCTGGCAATGAGCTTGTTGTCTCCGGCCCCAAT

rAQP3 cds GCCTTCTTGGGTGCTGGGATTGTTTTTGGGCTCTACTATGATGCAATCTGGGCCTTTGCTGGCAATGAGCTTGTTGTCTCCGGCCCCAAT

Clustal Consensus ******************************************************************************************

460 470 480 490 500 510 520 530 540

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 2.2 GGCACAGCTGGTATCTTTGCCACCTATCCCTCTGGACACTTGGATATGGTCAATGGCTTCTTTGATCAGTTCATAGGCACAGCAGCCCTT

3.2 GGCACAGCTGGTATCTTTGCCACCTATCCCTCTGGACACTTGGATATGGTCAATGGCTTCTTTGATCAGTTCATAGGCACAGCAGCCCTT

rAQP3 cds GGCACAGCTGGTATCTTTGCCACCTATCCCTCTGGACACTTGGATATGGTCAATGGCTTCTTTGATCAGTTCATAGGCACAGCAGCCCTT

Clustal Consensus ******************************************************************************************

550 560 570 580 590 600 610 620 630

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 2.2 ATTGTGTGTGTGCTGGCCATTGTTGACCCTTATAACAACCCTGTGCCCCGGGGCCTGGAGGCCTTCACTGTGGGCCTTGTGGTCCTGGTC

3.2 ATTGTGTGTGTGCTGGCCATTGTTGACCCTTATAACAACCCTGTGCCCCGGGGCCTGGAGGCCTTCACTGTGGGCCTTGTGGTCCTGGTC

rAQP3 cds ATTGTGTGTGTGCTGGCCATTGTTGACCCTTATAACAACCCTGTGCCCCGGGGCCTGGAGGCCTTCACTGTGGGCCTTGTGGTCCTGGTC

Clustal Consensus ******************************************************************************************

640 650 660 670 680 690 700 710 720

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 2.2 ATTGGGACCTCCATGGGCTTCAATTCTGGCTATGCCGTCAACCCAGCTCGTGACTTTGGACCTCGCCTTTTCACTGCCCTGGCTGGCTGG

3.2 ATTGGGACCTCCATGGGCTTCAATTCTGGCTATGCCGTCAACCCAGCTCGTGACTTTGGACCTCGCCTTTTCACTGCCCTGGCTGGCTGG

rAQP3 cds ATTGGGACCTCCATGGGCTTCAATTCTGGCTATGCCGTCAACCCAGCTCGTGACTTTGGACCTCGCCTTTTCACTGCCCTGGCTGGCTGG

Clustal Consensus ******************************************************************************************

730 740 750 760 770 780 790 800 810

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 2.2 GGTTCAGAAGTCTTTACGACTGGCCAGAACTGGTGGTGGGTACCCATCGTCTCTCCACTCCTGGGTTCCATTGGTGGTGTCTTCGTGTAC

3.2 GGTTCAGAAGTCTTTACGACTGGCCAGAACTGGTGGTGGGTACCCATCGTCTCTCCACTCCTGGGTTCCATTGGTGGTGTCTTCGTGTAC

rAQP3 cds GGTTCAGAAGTCTTTACGACTGGCCAGAACTGGTGGTGGGTACCCATCGTCTCTCCACTCCTGGGTTCCATTGGTGGTGTCTTCGTGTAC

Clustal Consensus ******************************************************************************************

820 830 840 850 860 870 880 890 900

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 2.2 CAGCTCATGATTGGCTGCCACCTGGAGCAGCCCCCGCCTTCCACTGAGGCAGAGAATGTGAAGCTGGCCCACATGAAGCACAAGGAGCAG

3.2 CAGCTCATGATTGGCTGCCACCTGGAGCAGCCCCCGCCTTCCACTGAGGCAGAGAATGTGAAGCTGGCCCACATGAAGCACAAGGAGCAG

rAQP3 cds CAGCTCATGATTGGCTGCCACCTGGAGCAGCCCCCGCCTTCCACTGAGGCAGAGAATGTGAAGCTGGCCCACATGAAGCACAAGGAGCAG

Clustal Consensus ******************************************************************************************

910 920 930

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . 2.2 ATCTCCATCGATACCGTCGACCTCGACATGTCTAAAGG

3.2 ATCTCCATCGATACCGTCGACCTCGACATGTCTAAAGG

rAQP3 cds ATCTGA---

87

Figura VII.3 - Alinhamento da sequência codificante da AQP7 de Homo sapiens com os resultados da sequenciação do plasmídeo extraído das colónias 7.7 (equivalente a 4.3) e 7.8 (equivalente a 4.4). O múltiplo alinhamento das sequências foi realizado com a ferramenta ClustalW do software BioEdit versão 7.2.0.

10 20 30 40 50 60 70 80 90

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 4.3 CCCCATCCATACTCTAGAACTAGTCCTATGGTTCAAGCATCCGGGCACAGGCGGTCCACCCGTGGCTCCAAAATGGTCTCCTGGTCCGTG

4.4 CCCCATCCATACTCTAGAACTAGTCCTATGGTTCAAGCATCCGGGCACAGGCGGTCCACCCGTGGCTCCAAAATGGTCTCCTGGTCCGTG

hAQP7 cds ---ATGGTTCAAGCATCCGGGCACAGGCGGTCCACCCGTGGCTCCAAAATGGTCTCCTGGTCCGTG

Clustal Consensus ***************************************************************

100 110 120 130 140 150 160 170 180

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 4.3 ATAGCAAAGATCCAGGAAATACTGCAGAGGAAGATGGTGCGAGAGTTCCTGGCCGAGTTCATGAGCACATATGTCATGATGGTATTCGGC

4.4 ATAGCAAAGATCCAGGAAATACTGCAGAGGAAGATGGTGCGAGAGTTCCTGGCCGAGTTCATGAGCACATATGTCATGATGGTATTCGGC

hAQP7 cds ATAGCAAAGATCCAGGAAATACTGCAGAGGAAGATGGTGCGAGAGTTCCTGGCCGAGTTCATGAGCACATATGTCATGATGGTATTCGGC

Clustal Consensus ******************************************************************************************

190 200 210 220 230 240 250 260 270

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 4.3 CTTGGTTCCGTGGCCCATATGGTTCTAAATAAAAAATATGGGAGCTACCTTGGTGTCAACTTGGGTTTTGGCTTCGGAGTCACCATGGGA

4.4 CTTGGTTCCGTGGCCCATATGGTTCTAAATAAAAAATATGGGAGCTACCTTGGTGTCAACTTGGGTTTTGGCTTCGGAGTCACCATGGGA

hAQP7 cds CTTGGTTCCGTGGCCCATATGGTTCTAAATAAAAAATATGGGAGCTACCTTGGTGTCAACTTGGGTTTTGGCTTCGGAGTCACCATGGGA

Clustal Consensus ******************************************************************************************

280 290 300 310 320 330 340 350 360

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 4.3 GTGCACGTGGCAGGCCGCATCTCTGGAGCCCACATGAACGCAGCTGTGACCTTTGCTAACTGTGCGCTGGGCCGCGTGCCCTGGAGGAAG

4.4 GTGCACGTGGCAGGCCGCATCTCTGGAGCCCACATGAACGCAGCTGTGACCTTTGCTAACTGTGCGCTGGGCCGCGTGCCCTGGAGGAAG

hAQP7 cds GTGCACGTGGCAGGCCGCATCTCTGGAGCCCACATGAACGCAGCTGTGACCTTTGCTAACTGTGCGCTGGGCCGCGTGCCCTGGAGGAAG

Clustal Consensus ******************************************************************************************

370 380 390 400 410 420 430 440 450

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 4.3 TTTCCGGTCTATGTGCTGGGGCAGTTCCTGGGCTCCTTCCTGGCGGCTGCCACCATCTACAGTCTCTTCTACACGGCCATTCTCCACTTT

4.4 TTTCCGGTCTATGTGCTGGGGCAGTTCCTGGGCTCCTTCCTGGCGGCTGCCACCATCTACAGTCTCTTCTACACGGCCATTCTCCACTTT

hAQP7 cds TTTCCGGTCTATGTGCTGGGGCAGTTCCTGGGCTCCTTCCTGGCGGCTGCCACCATCTACAGTCTCTTCTACACGGCCATTCTCCACTTT

Clustal Consensus ******************************************************************************************

460 470 480 490 500 510 520 530 540

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 4.3 TCGGGTGGACAGCTGATGGTGACCGGTCCCGTCGCTACAGCTGGCATTTTTGCCACCTACCTTCCTGATCACATGACATTGTGGCGGGGC

4.4 TCGGGTGGACAGCTGATGGTGACCGGTCCCGTCGCTACAGCTGGCATTTTTGCCACCTACCTTCCTGATCACATGACATTGTGGCGGGGC

hAQP7 cds TCGGGTGGACAGCTGATGGTGACCGGTCCCGTCGCTACAGCTGGCATTTTTGCCACCTACCTTCCTGATCACATGACATTGTGGCGGGGC

Clustal Consensus ******************************************************************************************

550 560 570 580 590 600 610 620 630

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 4.3 TTCCTGAATGAGGCGTGGCTGACCGGGATGCTCCAGCTGTGTCTCTTCGCCATCACGGACCAGGAGAACAACCCAGCACTGCCAGGAACA

4.4 TTCCTGAATGAGGCGTGGCTGACCGGGATGCTCCAGCTGTGTCTCTTCGCCATCACGGACCAGGAGAACAACCCAGCACTGCCAGGAACA

hAQP7 cds TTCCTGAATGAGGCGTGGCTGACCGGGATGCTCCAGCTGTGTCTCTTCGCCATCACGGACCAGGAGAACAACCCAGCACTGCCAGGAACA

Clustal Consensus ******************************************************************************************

640 650 660 670 680 690 700 710 720

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 4.3 GAGGCGCTGGTGATAGGCATCCTCGTGGTCATCATCGGGGTGTCCCTTGGCATGAACACAGGATATGCCATCAACCCGTCCCGGGACCTG

4.4 GAGGCGCTGGTGATAGGCATCCTCGTGGTCATCATCGGGGTGTCCCTTGGCATGAACACAGGATATGCCATCAACCCGTCCCGGGACCTG

hAQP7 cds GAGGCGCTGGTGATAGGCATCCTCGTGGTCATCATCGGGGTGTCCCTTGGCATGAACACAGGATATGCCATCAACCCGTCCCGGGACCTG

Clustal Consensus ******************************************************************************************

730 740 750 760 770 780 790 800 810

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 4.3 CCCCCCCGCATCTTCACCTTCATTGCTGGTTGGGGCAAACAGGTCTTCAGCAATGGGGAGAACTGGTGGTGGGTGCCAGTGGTGGCACCA

4.4 CCCCCCCGCATCTTCACCTTCATTGCTGGTTGGGGCAAACAGGTCTTCAGCAATGGGGAGAACTGGTGGTGGGTGCCAGTGGTGGCACCA

hAQP7 cds CCCCCCCGCATCTTCACCTTCATTGCTGGTTGGGGCAAACAGGTCTTCAGCAATGGGGAGAACTGGTGGTGGGTGCCAGTGGTGGCACCA

Clustal Consensus ******************************************************************************************

820 830 840 850 860 870 880 890 900

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 4.3 CTTCTGGGTGCCTATCTAGGTGGCATCATCTACCTGGTCTTCATTGGCTCCACCATCCCACGGGAGCCCCTGAAATTGGAGGATTCTGTG

4.4 CTTCTGGGTGCCTATCTAGGTGGCATCATCTACCTGGTCTTCATTGGCTCCACCATCCCACGGGAGCCCCTGAAATTGGAGGATTCTGTG

hAQP7 cds CTTCTGGGTGCCTATCTAGGTGGCATCATCTACCTGGTCTTCATTGGCTCCACCATCCCACGGGAGCCCCTGAAATTGGAGGATTCTGTG

Clustal Consensus ******************************************************************************************

910 920 930 940 950 960 970 980 990

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | 4.3 GCGTATGAAGACCACGGGATAACCGTATTGCCCAAGATGGGATCTCATGAACCCACGATCTCTCCCCTCACCCCCGTCTCTGTGAGCCCT

4.4 GCGTATGAAGACCACGGGATAACCGTATTGCCCAAGATGGGATCTCATGAACCCACGATCTCTCCCCTCACCCCCGTCTCTGTGAGCCCT

hAQP7 cds GCGTATGAAGACCACGGGATAACCGTATTGCCCAAGATGGGATCTCATGAACCCACGATCTCTCCCCTCACCCCCGTCTCTGTGAGCCCT

Clustal Consensus ******************************************************************************************

1000 1010 1020 1030 1040 1050 1060

. . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . | . . . . 4.3 GCCAACAGATCTTCAGTCCACCCTGCCCCACCCTTACATGAATCCATGGCCCTAGAGCACTTCCATCGTTTNNN

4.4 GCCAACAGATCTTCAGTCCACCCTGCCCCACCCTTACATGAATCCATGGCCCTAGAGCACTTCCATCGNNNNNN

hAQP7 cds GCCAACAGATCTTCAGTCCACCCTGCCCCACCCTTACATGAATCCATGGCCCTAGAGCACTTCTAA---

88

Anexo 6 – Sinais típicos da variação de fluorescência (após subtracção da linha de

No documento Andreia Filipa Bonecas Mósca (páginas 110-112)