5. RESULTADOS E DISCUSSÃO
5.10 Análise por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE)
Figura 19: Cromatograma de rutina, registrado a 254 nm.
O cromatograma apresentado na figura 19, mostra um pico principal com tempo de retenção 14,995 minutos e área 1030, com 90,6% de pureza, relativo a rutina,
usada como substância de referência, que já foi isolada anteriormente de Bauhinia monandra (Fernandes et al., 2012).
No cromatograma obtido a 254 nm pela análise do EHC, observa-se um pico com tempo de retenção a 254 nm em 14,603 minutos, com espectro de UV semelhante ao observado para a rutina, com área de 1479 correspondente a 27,8 % de pureza (figura 20). Ambos foram registrados nas mesmas condições cromatográficas.
Figura 20: Perfil cromatográfico por CLAE-DAD do EHC de B. monandra, registrado a 254 nm.
Com a co-injeção de EHC e padrão, observou-se aumento da área do pico que sugere tratar-se de rutina, registrado em 15,267 min. Esses dados reforçam o entendimento de que a rutina esteja presente no EHC. A co-injeção do EHC à rutina está representado na figura 22.
Figura 21- Cromatogramas obtidos pela análise do EHC por CLAE após adição do padrão rutina, λ 250nm. (A) rutina, (B) EHC, (C) co-injeção.
A adição de 100µg do padrão rutina ao RATPV, promoveu aumento de aproximadamente 6 % na área do pico, registrado no tempo de 15.291 min, com área de 1566. Este aumento da área do pico permite inferir que a rutina esteja presente em RATPV, visto que a quantidade adicionada de rutina foi eluída no mesmo tempo de retenção. O cromatograma resultante da co-injeção está representado na figura 21.
A
B EC FM FC F
Figura 22: Cromatogramas obtidos pela análise do RATPV por CLAE após adição do padrão rutina, λ 250 nm. (A)rutina, (B) RATPV, (C) co-injeção.
A EC FM FC
B EC FM FC
Figura 23- Sobreposição dos espectros de ultravioleta da rutina e picos correspondentes observados para EHC e RATPV no mesmo Rt.
6 CONCLUSÃO
A espécie vegetal em estudo foi identificada como: Bauhinia monandra Kurz. B. monandra apresentou teor de umidade de 8,38 %, o que indica a boa condição para armazenamento da droga vegetal, aumentando sua estabilidade.
O pó da droga vegetal de B. monandra foi classificado como pó de granulometria semifina e apresentou teor de cinzas totais de 13,1 %.
Esteroides e triterpenos, flavonoides, açúcares redutores, fenóis e taninos e catequinas foram as classes de metabólitos detectadas na prospecção fitoquímica preliminar de B. monandra e também do remédio artesanal, sendo que os flavonoides são a classe de metabólitos de interesse neste estudo.
Os testes microquímicos permitiram confirmar a ocorrência de grupos de metabólitos ativos. Os resultados obtidos são de extrema significância, já que mostram que as folhas possuem importantes grupos ativos o que pode explicar a utilização da espécie como medicinal.
O tratamento dos cortes com hipoclorito de sódio demonstrou a vulnerabilidade dos compostos fenólicos ao reagente clarificador.
A análise por CCD, indicou a presença de rutina em B. monandra.
A análise por CLAE permitiu caracterizar a presença de rutina no RATPV e no EHC.
O remédio artesanal denominado “tintura de pata-de-vaca” pode ser considerado análogo às tinturas de padrão farmacopeico, devido ser uma preparação hidroalcoólica que utiliza a maceração como método de extração e possui concentração de 20% (p/v).
As análises cromatográficas usando rutina como substância de referência, indicam a presença dessa substância em EHC e RAPTV e, de acordo com dados da literatura, a ocorrência de rutina em RAPTV pode justificar seu uso no controle do diabete melito.
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