O plasma seminal ovino é um dos responsáveis pela manutenção da qualidade, pois possui substancias como proteínas (MOURA et al., 2010) e antioxidantes que protegem os espermatozóides de injúrias (HAFEZ & HAFEZ, 2004). Porém a lavagem realizada durante o processamento do sêmen reduz a capacidade protetora do plasma, assim, a adição de antioxidantes sempre é valida e necessária para manter e preservar a qualidade seminal.
A célula possui dois sistemas de defesa antioxidante para se proteger dos efeitos deletérios da formação de ROS, um sistema enzimático e outro não enzimático. O complexo enzimático é formado pelas enzimas: a) superóxido dismutase (SOD), b) catalase (CAT), c) peroxiredoxinas (Prx), d) glutationa (GSH), e) glutationa redutase (GR) e f) glutationa peroxidase (GPx). O sistema não enzimático é conhecido por substâncias sintéticas e que são suplementados através da dieta, formados por compostos de baixo peso molecular, como
vitaminas C e E, selênio, ubiquinonas, ácido úrico e ácido lipóico (NORDBERG &
ARNÉR, 2001).
Os antioxidantes endógenos podem ser insuficientes contra os efeitos nocivos de ROS durante o armazenamento prolongado do sêmen, então, a adição de antioxidantes tem sido utilizado para melhorar a motilidade espermática e a integridade da membrana em sêmen manipulados (BUCAK & TEKIN, 2007). Em estudo realizado com caprinos por BUCAK et al. (2009), os autores observaram que a adição dos antioxidantes glutamina e ácido hialurônico melhoraram a motilidade espermática e integridade de membrana plasmática após o congelamento e descongelamento do sêmen.
ÇOYAN et al. (2011) avaliaram o efeito da adição de dois antioxidantes, cisteína e ergotioneína, em diferentes concentrações (1 mM, 2 mM e 4 mM) sobre os parâmetros espermáticos após o descongelamento de sêmen de ovinos. De acordo com a Tabela 10, a adição de ergotioneína aumentou a motilidade, velocidade média de percurso (VMP) e velocidade linear (VLN), enquanto a adição de cisteína se mostrou mais eficiente na manutenção da integridade da membrana espermátcia e atividade mitocondrial (Tabela 11). De acordo com os dados, os autores concluíram que a ergotioneína e cisteína melhoraram, respectivamente, os parâmetros de motilidade e atividade mitocondrial após a criopreservação, porém, elucida que os efeitos dos antioxidantes devem ser estabelecidos tambémin vivo.
TABELA 10 - Média e desvio padrão de motilidade, motilidade progressiva, velocidade média de percurso (VMP) e velocidade linear (VLN) de sêmen ovino acrescido de diferentes antioxidantes e submetidos a criopreservação
a,b,c,dLetras diferentes na mesma coluna demonstram diferenças significativas.
Fonte: ÇOYAN et al. (2011).
TABELA 11 - Média e desvio padrão da integridade de membrana espermática, integridade acrossomal e atividade mitocondrial de sêmen ovino acrescido de diferentes antioxidantes e submetidos à criopreservação
a,b,cLetras diferentes na mesma coluna demonstram diferenças significativas.
Fonte: ÇOYAN et al. (2011).
RUIZ et al. (2007) também avaliaram o efeito de dois antioxidantes para a criopreservação de sêmen de ovino. Foi utilizado um diluidor a base de Tris, acrescido dos antioxidantes Tempo (2,2,6,6 tetrametil-1-piperidiniloxil) e Tempol (4-hidroxi 2,2,6,6 tetrametil-1-piperidiniloxil) em diferentes concentrações (0,5 mM; 1,0 mM e 2,5 mM). Conforme Tabela 12, a adição de 0,5 mM do antioxidante Tempo reduziu a perda de motilidade progressiva (78,9 ± 4,7) e integridade de acrossoma (69,9 ± 6,4) em relação ao grupo controle (66,9 ± 4,8 e 58,4 ± 5,6), contudo esse efeito não pode ser observado com o uso do antioxidante Tempol, que inclusive ocasionou redução na qualidade seminal.
TABELA 12 - Média e desvio padrão da motilidade progressiva e integridade acrossomal de sêmen ovino criopreservado com diferentes concentrações de antioxidantes
Tratamentos Motilidade Progressiva Integridade Acrossomal
Sem antioxidante 66,9 ± 4,8b 58,4 ± 5,6b
Tempo 0.5 mM 78,9 ± 4,7a 69,9 ± 6,4a
a,b,c,d,eIndicam diferenças significativas dentro da coluna (p<0,005) FONTE: RUIZ et al. (2007).
É importante salientar que o uso de antioxidantes se faz necessário devido aos procedimentos realizados durante a criopreservação, como exemplo diluição e lavagem, que reduzem a proteção dos antioxidantes naturais. Porém o uso indevido pode levar a redução do potencial de fertilização dos espermatozóides e consequente queda dos índices reprodutivos.
3 CONSIDERAÇÕES FINAIS
A eficiência reprodutiva se faz necessária para a intensificação da ovinocultura nacional e multiplicação de genótipos superiores, a fim de obter produtos em quantidade e qualidade que atenda todos os mercados.
As biotécnias reprodutivas como refrigeração e criopreservação do sêmen constituem importantes ferramentas na difusão da inseminação artificial em ovinos, que atualmente se encontra com níveis ainda insatisfatórios. As pesquisas com o sêmen, a busca por substâncias que minimizam as injúrias causadas pela queda de temperatura e a padronização nos processos de congelamento e descongelamento seminal, são necessárias para o incremento e disseminação na utilização de sêmen refrigerado e congelado para inseminação artificial.
As busca por melhores resultado deve ser maciça e crescente, pois a melhora nos resultados, principalmente in vivo, é primordial para alcançar um patamar reprodutivo com eficiência satisfatória, e, colocar carne ovina de qualidade acessível a todos.
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