Em relação à atividade antioxidante baseada no método DPPH, as progênies 38 e 44 apresentaram o mesmo comportamento ao longo da maturação, com maior atividade antioxidante no estádio semimaduro e menor no verde, visto que quanto menor o EC50, maior é a atividade antioxidante. Já a progênie 17, apresentou maior atividade antioxidante no estádio maduro e menor no semimaduro. A progênie 38 foi a que apresentou menor atividade antioxidante em todos os estádios de maturação. Não houve diferença estatística significante entre as progênies 38 e 44 no estádio maduro (Figura 10).
A maior atividade antioxidante foi encontrada na progênie 17, no estádio maduro (38,95 g fruta/g DPPH) e a menor na progênie 38, no estádio verde (91,75 g fruta/g DPPH).
Figura 10 - Atividade antioxidante pelo método DPPH (g fruta/g DPPH) do epicarpo do camu-camu entre diferentes progênies em função do estádio de maturação, com desvio
padrão. (b.s).
No estudo de Villanueva-Tiburcio, Condezo-Hoyos e Asquieri (2010) o epicarpo do camu-camu no estádio semimaduro foi o que apresentou maior atividade antioxidante pelo método DPPH.
A atividade antioxidante analisada pelo método ABTS, foi estatisticamente diferente para todas as progênies e em todos os estádios de maturação (Figura 11). No estádio verde, a
42,52 48,28 38,95 91,75 53,75 54,15 65,07 41,03 53,78 30 40 50 60 70 80 90 100 A ti vi d ad e a n ti o xi d an te ( g f ru ta /g DP P H )
Verde Semimaduro Maduro
Progênie 17 Progênie 38 Progênie 44
44
maior atividade antioxidante foi apresentada pela progênie 17 (1519,89 μM trolox/g); no estádio semimaduro, a progênie 38 (1391,45 μM trolox/g), e no maduro a progênie 44 (1701,63 μM trolox/g). A maior atividade antioxidante pelo método ABTS, foi encontrada na progênie 44, no estádio maduro (1701,63 μM trolox/g) e a menor na progênie 38, no estádio verde (911,44 μM trolox/g).
Rufino et al. (2010), ao analisarem 18 frutas tropicais, demonstraram que o camu- camu apresentava maior atividade antioxidante em comparação aos outros frutos analisados, e encontraram o valor de 1237 μM trolox/g (base úmida) de atividade antioxidante no camu- camu (polpa e epicarpo).
Figura 11 - Atividade antioxidante pelo método ABTS (μM trolox/g) do epicarpo do camu- camu entre diferentes progênies em função do estádio de maturação, com desvio padrão. (b.s).
Apesar dos diferentes resultados apresentados pelos métodos de atividade antioxidante, em ambos a progênie 38 no estádio verde apresentou menor atividade antioxidante. De acordo com Prior, Wu e Schaich (2005), os métodos DPPH e ABTS detectam a capacidade do antioxidante presente na amostra transferir um elétron para reduzir qualquer composto, incluindo metais, carbonilos, e radicais, porém os radicais podem ser neutralizados tanto por redução direta, via transferência de elétrons, ou serem extintos, através da transferência do átomo de hidrogênio, sendo assim, há dificuldade em interpretar padrões e mecanismos de reatividade, principalmente quando existem agentes redutores, tais como o ácido ascórbico. 1519,89 1244,63 1346,15 911,44 1391,45 1089,42 1383,94 1124,58 1701,63 800 900 1000 1100 1200 1300 1400 1500 1600 1700 1800 A ti vi d ad e a n ti o xi d an te ( µM t ro lo x/ g)
Verde Semimaduro Maduro
Progênie 17 Progênie 38 Progênie 44
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Para avaliar a intensidade da associação linear entre os compostos bioativos e a capacidade antioxidante no epicarpo do camu-camu, durante a maturação e nas três diferentes progênies, foi utilizado o Coeficiente de Correlação de Pearson. De acordo com a tabela 13, verifica-se que na progênie 38, nenhum composto bioativo correlacionou-se positivamente de forma significativa com a atividade antioxidante, tanto pelo método do DPPH quanto o ABTS.
A progênie 17, no estádio maduro, foi a que apresentou a maior atividade antioxidante pelo método DPPH, e de acordo com a Correlação de Pearson, o ácido ascórbico, fenólicos totais, antocianinas e flavonóis apresentaram correlação negativa significativa com a atividade antioxidante mensurada pelo DPPH. Porém a associação negativa neste caso representa uma relação diretamente proporcional entre a presença destes compostos bioativos e a atividade antioxidante, pois o resultado da metodologia pelo DPPH é expresso em EC50, ou seja, quanto maior a atividade antioxidante, menor o seu valor em EC50 (Tabela 13).
Tabela 13. Correlação entre os compostos bioativos e atividade antioxidante determinada pelos métodos DPPH e ABTS, no epicarpo do camu-camu, em diferentes progênies, em função da maturação.
Progênies Compostos bioativos DPPH (IC50) (µM trolox/g) ABTS
r2
17
Ácido ascórbico (mg/100g) -0,99* 0,95* Fenólicos Totais (mg AGE/100g) -0,99* 0,93* Antocianinas (cianidina-3-glucosídio mg/100g) -0,99* 0,93* Flavonóis (mg QE/100g) -0,99* 0,92* Carotenoides (β-caroteno mg/100g) 0,74 -0,71
38
Ácido ascórbico (mg/100g) 0,38 -0,98* Fenólicos Totais (mg AGE/100g) 0,58 -0,41 Antocianinas (cianidina-3-glucosídio mg/100g) 0,4 -0,99*
Flavonóis (mg QE/100g) 0,38 -0,99*
Carotenoides (β-caroteno mg/100g) 0,48 -0,93*
44
Ácido ascórbico (mg/100g) 0,99* 1* Fenólicos Totais (mg AGE/100g) 0,5 0,46 Antocianinas (cianidina-3-glucosídio mg/100g) 1* 1*
Flavonóis (mg QE/100g) -1* -1*
Carotenoides (β-caroteno mg/100g) 0,95* 0,95*
Coeficiente de Correlação de Pearson. Significância: p<0,05.
r2: coeficiente de determinação
*correlação estaticamente significativa entre o composto bioativo e a atividade antioxidante (ABTS e DPPH). Valores negativos demonstram correlação negativa e valores positivos correlação positiva. Quanto mais próximo do valor 1, maior a associação entre as variáveis compostos bioativos e atividade antioxidante (ABTS e DPPH).
46
A progênie 44, no estádio maduro, apresentou a maior atividade antioxidante pelo método ABTS, nos quais o ácido ascórbico, antocianinas e carotenoides correlacionaram-se positivamente com a atividade antioxidante deste método (Tabela 13).
As antocianinas e o ácido ascórbico foram os compostos que obtiveram maior correlação com a atividade antioxidante pelo ABTS, enquanto que os flavonóis com o método DPPH. Em estudo de Rufino et al (2010), o ácido ascórbico foi o composto que mais se relacionou com o método ABTS, enquanto que os polifenóis com o DPPH.
A interação entre os compostos bioativos e a atividade antioxidante in vitro é algo complexo, pois engloba vários fatores e substâncias presentes na fruta, suas inter-relações e as diferentes metodologias empregadas para análise. Porém, ainda são poucos os estudos que avaliam a transformação dos compostos bioativos e a capacidade antioxidante durante a maturação de frutas, em especial no camu-camu (Myrciaria dubia) e em seu epicarpo.
47
6 CONCLUSÃO
De forma geral, os resultados sugerem que o fator genético indica diferenciações na síntese de diversos compostos durante a maturação de frutos de camucamuzeiro, em especial em seu epicarpo, e tal comportamento foi demonstrado pela maior parte dos caracteres físico- químicos, compostos bioativos e atividade antioxidante. As similaridades foram evidenciadas apenas nos teores de carboidratos, sólidos solúveis, fenólicos totais e antocianinas, com aumento quantitativo em todas as progênies ao longo da maturação.
Em sua maioria, os valores mais elevados de compostos bioativos e atividade antioxidante no epicarpo do camu-camu foram detectados no estádio maduro.
A elucidação da formação dos compostos bioativos em diferentes estádios de maturação, parte do fruto e progênies é importante, pois pode fornecer informações necessárias para que a industria de fármacos e/ou alimentos funcionais otimize a extração destes compostos, bem como auxiliar produtores de camu-camu na escolha de determinada variedade e estádio de maturação de acordo com o interesse comercial.
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