Avaliação da Atividade Antidepressiva

5.1 Avaliação da Atividade Antidepressiva 5.1.1 Teste do Nado Forçado

A fim de verificar a melhor dose, os animais foram tratados com acetato de citronelila nas doses de 25, 50 e 100 mg/kg (v.o.). Foi observado que houve uma diminuição no tempo de imobilidade nas doses utilizadas [CIT-25: 66.38 ± 13.23 (10) p<0.01; CIT-50: 57.00 ± 5.13 (10) p<0.001; CIT-100: 43.17 ± 5.91 (10) p<0.001], assim como também houve uma diminuição no tempo de imobilidade da imipramina (10 mg/kg) [IMP: 31.38 ± 2.6 (8) p<0.001] quando comparado ao controle [102.3 ± 8.65 (10)] (figura 15).

Entre as doses analisadas, não houve diferença significantemente estatística no tempo de imobilidade quando comparado 25 e 50 mg/kg, 25 e 100 mg/kg e 50 e 100 mg/kg, entretanto, como base em outros estudos com óleos essenciais optamos por escolher as doses de 50 e 100 mg/kg para os demais experimentos deste estudo.

Figura 15. Efeito do acetato de citronelila e imipramina sobre o tempo de imobilidade no teste do nado forçado em camundongos.

Controle (veículo), acetato de citronelila (25, 50 e 100 mg/kg) e imipramina (10 mg/kg), v.o., foram administrados 60 min antes do experimento. Os valores das figuras apresentam a média ± EPM do tempo de imobilidade (s) durante 5 minutos. Para a análise estatística foi utilizado ANOVA seguido Student Newman Keuls como teste post hoc. Valores significativos: **p<0.01; ***p< 0.001 vs controle.

5.1.2 Teste da Suspensão da Cauda

Os animais tratados com acetato de citronelila (50 e 100 mg/kg, v.o.) apresentaram diminuição do tempo de imobilidade [CIT-50: 73.40 ± 11.17 (10) p<0.001; CIT-100: 67.50 ± 6.07 (10) p<0.001] do mesmo modo que os animais tratados com imipramina [IMP: 26.08 ± 2.33 (10) p<0.001] quando comparados com o controle [controle: 130.30 ± 10.49 (10)] (figura 16).

Figura 16. Efeito do acetato de citronelila e imipramina sobre o tempo de imobilidade no teste de suspensão da cauda em camundongos.

Controle (veículo), acetato de citronelila (50 e 100 mg/kg) e imipramina (30 mg/kg), v.o., foram administrados 60 min antes do experimento. Os valores das figuras apresentam a média ± EPM do tempo de imobilidade (s) durante 5 minutos. Para a análise estatística foi utilizado ANOVA seguido Student Newman Keuls como teste post hoc. Valores significativos: ***p< 0.001 vs controle.

5.1.3 Envolvimento do Sistema Noradrenérgico

Os grupos que foram pré-tratados com prazosina (1 mg/kg, i.p.) (figura 17 e 18) ou ioimbina (1 mg/kg, i.p.) (figura 17 e 18) e tratados com veículo não diminuíram o tempo de imobilidade [PRZ + veículo: 119.7 ± 8.03 (8); IOIM + veículo: 109.8 ± 4.32 (8)] em relação ao controle [controle: 120.7 ± 9.61 (10)].

As figuras 17 e 18 mostram que o pré-tratamento com prazosina, antagonista α-1 adrenérgico, reverteu o efeito antidepressivo do acetato de citronelila nas doses de 50 mg/kg [CIT-50 + PRZ-1: 97.29 ± 13.30 (8) P< 0.01] (figura 9) e 100 mg/kg [CIT-100 + PRZ-1: 71.50 ± 8.57 (8) P<0.01] (figura 10), pois apresentou diferença significativa em relação ao grupo que recebeu apenas acetato de citronelila 50 mg/kg [CIT-50: 53.50 ± 7.02 (8)] e 100 mg/kg [CIT-100: 36.50 ± 4.44 (8)]. Da mesma forma, quando os animais foram pré-tratados

com ioimbina, antagonista α-2 adrenérgico, e depois com acetato de citronelila nas doses de 50 mg/kg [CIT-50 + IOIM-1: 101.3 ± 13.52 (8) P<0.01] e 100 mg/kg [CIT-100 + IOIM-1: 130.30 ± 9.30 (8) P< 0.001] não houve diminuição do tempo de imobilidade, mostrando a reversão do efeito do acetato de citronelila 50 mg/kg [CIT-50:53.50 ± 7.02 (8)] e 100 mg/kg [CIT-100: 36.50 ± 4.44 (8)].

Figura 17. Efeito do acetato de citronelila (50 mg/kg) sozinho ou associado com prazosina (1 mg/kg) ou ioimbina (1 mg/kg) sobre o tempo de imobilidade no teste do nado forçado em camundongos.

Controle (veículo), acetato de citronelila (50 mg/kg, v.o.), quando sozinhos foram administrados 60 min antes do experimento; quando associados foram administrados 30 minutos após a administração de prazosina (1 mg/kg) ou ioimbina (1 mg/kg) e após 60 minutos foram submetidos ao experimento. Os valores das figuras apresentam a média ± EPM do tempo de imobilidade (s) durante 5 minutos. Para a análise estatística foi utilizado ANOVA seguido Student Newman Keuls como teste post hoc. Valores significativos: ***p< 0.001 vs controle; ap< 0.01 vs CIT-50.

Figura 18. Efeito do acetato de citronelila (100 mg/kg) sozinho ou associado com prazosina (1 mg/kg) ou ioimbina (1 mg/kg) sobre o tempo de imobilidade no teste do nado forçado em camundongos.

Controle (veículo), acetato de citronelila (100 mg/kg, v.o.), quando sozinhos foram administrados 60 min antes do experimento; quando associados foram administrados 30 minutos após a administração de prazosina (1 mg/kg, i.p.) ou ioimbina (1 mg/kg, i.p.) e após 60 minutos foram submetidos ao experimento. Os valores das figuras apresentam a média ± EPM do tempo de imobilidade (s) durante 5 minutos. Para a análise estatística foi utilizado ANOVA seguido Student Newman Keuls como teste post hoc. Valores significativos: ***p< 0.001 vs controle; ap< 0.01 vs CIT-100; Ap< 0.001 vs CIT-100.

5.1.4 Envolvimento do Sistema Dopaminérgico

Os grupos que foram pré-tratados com SCH23390 (15µ/kg, i.p.) (figura 19 e 20) ou sulpirida (50 mg/kg, i.p.) (figura 19 e 20) e tratados com veículo não diminuíram o tempo de imobilidade [SCH-15 + veículo: 86.06 ± 12.21 (8) ; sulpirida-50 + veículo: 82.95 ± 11.86 (8)] em relação ao controle [controle: 85.24 ± 10.47 (8)].

As figuras 19 e 20 mostram que o pré-tratamento com SCH23390, antagonista dos receptores dopaminérgicos D1, reverteu o efeito antidepressivo do acetato de citronelila nas doses de 50 mg/kg [CIT-50 + SCH-15: 156.70 ± 12.57 (8) p<0.001] (figura 11) e 100 mg/kg [CIT-100 + SCH-15: 68.75 ± 8.28 (8) p< 0.05] (figura 12), pois apresentou diferença significativa em relação ao grupo que recebeu apenas acetato de citronelila 50 mg/kg [CIT-50:

51.13 ± 5.37 (8)] e 100 mg/kg [CIT-100: 31.63 ± 4.86 (8)]. Quando os animais foram pré- tratados com sulpirida, antagonista dos receptores dopaminérgicos D2, e depois com acetato de citronelila nas doses de 50 mg/kg [CIT-50 + sulpirida-50: 57.50 ± 7.19 (8)] e 100 mg/kg [CIT-100 + sulpirida-50: 120.4 ± 11.55 (8) p< 0.001] houve diminuição do tempo de imobilidade na dose de 100 mg/kg [CIT-100: 31.63 ± 4.86 (8)] do acetato de citronelila mas não da dose de 50 mg/kg [CIT-50: 51.13 ± 5.37 (8)], mostrando que a reversão do efeito do acetato de citronelila neste receptor (D2) foi dependente da dose administrada.

O SCH23390 e sulpirida reverteram o efeito antidepressivo da bupropiona [SCH-15 + BUP-30: 101.00 ± 5.22 (8) p<0.001; Sulpirida-50 + BUP-30: 102.40 ± 5.13 (8) p<0.001] quando comparados com o grupo da bupropiona [BUP-30: 41.17 ± 6.92 (8)].

Figura 19. Efeito do acetato de citronelila (50 mg/kg) e bupropiona (30 mg/kg) sozinho ou associado com SCH23390 (15 µg/kg) ou Sulpirida (50 mg/kg) sobre o tempo de imobilidade no teste do nado forçado em camundongos.

Controle (veículo), acetato de citronelila (50 mg/kg, v.o.) e bupropiona (30 mg/kg), quando sozinhos foram administrados 60 min antes do experimento; quando associados foram administrados 30 minutos após a administração de SCH (15 µ/kg, i.p.) ou sulpirida (50 mg/kg, i.p.) e após 60 minutos foram submetidos ao experimento. Os valores das figuras apresentam a média ± EPM do tempo de imobilidade (s) durante 5 minutos. Para a análise estatística foi utilizado ANOVA seguido Student Newman Keuls como teste post hoc. Valores significativos: ***p< 0.001 vs controle; ap< 0.001 vs CIT-50; bp< 0.001 vs BUP-30.

Figura 20. Efeito do acetato de citronelila (100 mg/kg) e bupropiona (30 mg/kg) sozinho ou associado com SCH23390 (15 µg/kg) ou Sulpirida (50 mg/kg) sobre o tempo de imobilidade no teste do nado forçado em camundongos.

Controle (veículo), acetato de citronelila (100 mg/kg, v.o.) e bupropiona (30 mg/kg), quando sozinhos foram administrados 60 min antes do experimento; quando associados foram administrados 30 minutos após a administração de SCH (15 µ/kg, i.p.) ou sulpirida (50 mg/kg, i.p.) e após 60 minutos foram submetidos ao experimento. Os valores das figuras apresentam a média ± EPM do tempo de imobilidade (s) durante 5 minutos. Para a análise estatística foi utilizado ANOVA seguido Student Newman Keuls como teste post hoc. Valores significativos: ***p< 0.001 vs controle; ap< 0.001 vs CIT-100; bp< 0.001 vs BUP-30.

5.1.5 Envolvimento do Sistema Serotonérgico

Os animais pré-tratados por quatro dias com PCPA (inibidor da síntese de serotonina) e tradados com veículo não diminuíram o tempo de imobilidade [PCPA +veículo: 138.40 ± 9.72 (10)] em relação ao controle [controle: 100.80 ± 11.88 (10)]. Os animais que foram pré- tratados com PCPA e depois receberam acetato de citronelila nas doses de 50 e 100 mg/kg [PCPA + CIT-50: 105.70 ± 19.61 (8) p<0.01; PCPA + CIT-100: 100.90 ± 10.55 (8) p<0.001] apresentaram uma reversão do efeito antidepressivo do acetato de citronelila [CIT-50: 41.88 ± 6.88 (10); CIT-100: 33.00 ± 4.75 (8)] (figuras 21 e 22).

A figura 23 mostra que o pré-tratamento com NAN-190, antagonista 5-HT1A, seguido do tratamento com acetato de citronelila nas doses de 50 e 100 mg/kg [NAN-190 + CIT-50:

64,8 ± 9,1; NAN-190 + CIT-100: 42,8 ± 9,43] não reverteu o efeito antidepressivo do acetato de citronelila nestas doses, pois não apresentou diferença significativa em relação ao acetato de citronelila 50 mg/kg [CIT-50: 53,5 ± 7,0] e 100 mg/kg [CIT-100: 33,2 ± 5,4]. O grupo pré- tratado com ritanserina, antagonista 5-HT2A/2C e em seguida tratados com acetato de citronelila 50 e 100 mg/kg [RIT-4 + CIT-50: 142,7 ± 17,5; RIT-4 + CIT-100: 121,3 ±12,2] tiveram seu efeito antidepressivo revertido em ambas as doses (figura 24). De modo semelhante, quando os animais foram pré-tratados com ondansetron, antagonista 5-HT3, e tratados com acetato de citronelila 50 e 100 mg/kg [ OND-1+ CIT-50: 106,1 ± 11,4; OND-1 + CIT-100: 82,7 ± 13,1] houve reversão do efeito antidepressivo do acetato de citronelila nas doses administradas (figura 25).

O PCPA (figura 21 e 22), NAN-190 (figura 23), ritanserina (figura 24) e ondansetron (figura 25) reverteram o efeito antidepressivo da fluoxetina [PCPA + FLU-35: 111,7 ± 7,97; NAN-190 + FLU-35: 133,0 ± 14,9; RIT-4 + FLU-35: 73,4 ± 7,0; OND-1 + FLU-35: 78,0 ± 14,1] quando comparados com o grupo da fluoxetina [FLU-35: 43,0 ± 3,7].

Figura 21. Efeito do acetato de citronelila (50 mg/kg) e fluoxetina (35 mg/kg) sozinho ou associado com PCPA (100 mg/kg) sobre o tempo de imobilidade no teste do nado forçado em camundongos.

Controle (veículo), acetato de citronelila (50 mg/kg, v.o.) e fluoxetina (35 mg/kg), quando sozinhos foram administrados 60 min antes do experimento; quando associados foram administrados 30 minutos após a última administração de PCPA (administrado por 4 dias, 100 mg/kg, i.p.) e após 60 minutos foram submetidos ao experimento. Os valores das figuras apresentam a média ± EPM do tempo de imobilidade (s) durante 5 minutos. Para a análise estatística foi utilizado ANOVA seguido Student Newman Keuls como teste post hoc. Valores significativos: **p< 0.01 vs controle; *p<0.05 vs controle; ap< 0.01 vs CIT-50; bp< 0.001 vs FLU-35.

Figura 22. Efeito do acetato de citronelila (100 mg/kg) e fluoxetina (35 mg/kg) sozinho ou associado com PCPA (100 mg/kg) sobre o tempo de imobilidade no teste do nado forçado em camundongos.

Controle (veículo), acetato de citronelila (100 mg/kg, v.o.) e fluoxetina (35 mg/kg), quando sozinhos foram administrados 60 min antes do experimento; quando associados foram administrados 30 minutos após a última administração de PCPA (administrado por 4 dias, 100 mg/kg, i.p.) e após 60 minutos foram submetidos ao experimento. Os valores das figuras apresentam a média ± EPM do tempo de imobilidade (s) durante 5 minutos. Para a análise estatística foi utilizado ANOVA seguido Student Newman Keuls como teste post hoc. Valores significativos: ***p< 0.001 vs controle; *p<0.05 vs controle; ap< 0.001 vs CIT-100; b

Figura 23. Efeito do acetato de citronelila (50 e 100 mg/kg) e fluoxetina (35 mg/kg) sozinho ou associado com NAN-190 (0,5 mg/kg) sobre o tempo de imobilidade no teste do nado forçado em camundongos.

Controle (veículo), acetato de citronelila (50 e 100 mg/kg, v.o.) e fluoxetina (35 mg/kg), quando sozinhos foram administrados 60 min antes do experimento; quando associados foram administrados 30 minutos após a administração de NAN-190 (0,5 mg/kg, i.p.) e após 60 minutos foram submetidos ao experimento. Os valores das figuras apresentam a média ± EPM do tempo de imobilidade (s) durante 5 minutos. Para a análise estatística foi utilizado ANOVA seguido Student Newman Keuls como teste post hoc. Valores significativos: ***p<0.001 vs controle; **p<0.01 vs controle; ap<0.001 vs FLU-35.

Figura 24. Efeito do acetato de citronelila (50 e 100 mg/kg) e fluoxetina (35 mg/kg) sozinho ou associado com ritanserina (4 mg/kg) sobre o tempo de imobilidade no teste do nado forçado em camundongos.

Controle (veículo), acetato de citronelila (50 e 100 mg/kg, v.o.) e fluoxetina (35 mg/kg), quando sozinhos foram administrados 60 min antes do experimento; quando associados foram administrados 30 minutos após a administração de ritanserina (4 mg/kg, i.p.) e após 60 minutos foram submetidos ao experimento. Os valores das figuras apresentam a média ± EPM do tempo de imobilidade (s) durante 5 minutos. Para a análise estatística foi utilizado ANOVA seguido Student Newman Keuls como teste post hoc. Valores significativos: ***p<0.001 vs controle; ap<0.001 vs CIT-100; bp<0.001 vs CIT-50; cp<0.05 vs FLU-35.

Figura 25. Efeito do acetato de citronelila (50 e 100 mg/kg) e fluoxetina (35 mg/kg) sozinho ou associado com ondansetron (1 mg/kg) sobre o tempo de imobilidade no teste do nado forçado em camundongos.

Controle (veículo), acetato de citronelila (50 e 100 mg/kg, v.o.) e fluoxetina (35 mg/kg), quando sozinhos foram administrados 60 min antes do experimento; quando associados foram administrados 30 minutos após a administração de ondansetron (1 mg/kg, i.p.) e após 60 minutos foram submetidos ao experimento. Os valores das figuras apresentam a média ± EPM do tempo de imobilidade (s) durante 5 minutos. Para a análise estatística foi utilizado ANOVA seguido Student Newman Keuls como teste post hoc. Valores significativos: ***p<0.001 vs controle; ap<vs CIT-100; bp<0.05 vs CIT-50; cp<0.05 vs FLU-35.