BIOCOMPATIBILIDADE E ATIVIDADE ANTIMICROBIANA

O conhecimento do efeito causado por materiais restauradores sobre as células é um dado importante para direcionar as suas indicações. Diversos estudos têm chamado a atenção para a relevância de se investigar o grau de biocompatibilidade dos materiais odontológicos, considerando este é um passo importante antes de sua aplicação clínica na cavidade bucal (Leyhausen et al.62 _1998, Six et al.63 _{2000, de Souza Costa et al.}64 _{2003, Aranha et al.}65 _{2006, de Souza Costa} et al.66 _{2006, Lessa et al.}67 _{2008, Giannelli et al.}68 _{2008, Bakopoulou et al.}69 _{2009). O} material deve ser biocompatível, isto é, ter a capacidade de causar uma resposta biológica apropriada, principalmente em relação aos tecidos moles e pulpares, não contendo substâncias tóxicas que causem lesões a esses tecidos, nem alterações de natureza sistêmica (Wataha70 _2001).

Sabendo-se da proximidade que a restauração com cimento de ionômero de vidro tem dos fibroblastos gengivais e das células de polpa dental, torna- se imperativa a avaliação da biocompatibilidade de materiais inovadores. Em geral os

cimentos de ionômeros de vidro são considerados pouco irritantes para o tecido pulpar, por possuírem em sua composição o poli(ácido acrílico), considerado um ácido fraco e macromoléculas de alta massa molecular, que tendem a unir-se com o cálcio dos dentes, limitando sua difusão para o interior dos canalículos dentinários (Baratieri et al.71 _{1995, Leyhausen et al.}62 _{1998, Six et al.}63 _{2000, de Souza Costa et al.}64 _2003, Aranha et al.65 _{2006, Lessa et al.}67 _{2008, Castilho et al.}30 _{2012, Castilho et al.}28 _2013).

Trabalhos, que avaliaram os cimentos de ionômero de vidro demonstraram que o material apresentou maior citotoxicidade nas primeiras horas após sua manipulação. Verificou-se uma redução maior que 50% da viabilidade celular, possivelmente pelo baixo pH inicialmente após a reação de presa e/ou pela liberação de produtos tóxicos resultantes da reação de presa do material (Lessa et al.67 _{2008, Castilho et al.}28 _{2013). Os estudos que avaliam a viabilidade celular utilizam} a análise colorimétrica do metiltetrazólio (MTT), pois ela representa a taxa de atividade mitocondrial/citoplasmática das células pela demonstração citoquímica da desidrogenase succínica (Leyhausen et al.62 _{1998, Aranha et al.}65 _{2006, Lessa et al.}67 2008, Castilho et al.30 _{2012, Castilho et al.}28 _2013).

A incorporação de partículas resinosas nos cimentos de ionômeros de vidro melhorou algumas propriedades mecânicas do material, e principalmente possibilitou um melhor controle do tempo de trabalho. Porém, trabalhos demonstraram que a incorporação dessas partículas aumentou o efeito citotóxico do material. Nesses casos os efeitos citotóxicos elevados podem ser decorrentes de monômeros resinosos que não reagiram (de Souza Costa et al.64 _{2003, Aranha et al.}65 _{2006, Lessa et al.}67 2008, Bakopoulou et al.69 _{2009). Sendo assim, a incorporação de antimicrobianos} pode resultar em um aumento da citotoxicidade do cimento de ionômero de vidro, igualmente devido à alteração da composição do material, levando à presença de resíduos após a reação de presa. Porém, os dados experimentais têm mantido a controvérsia em relação a esse aspecto.

Castilho et al.30 _{(2012) incorporaram 1,5, 3,0 e 4,5% de hiclato de} doxiciclina a um cimento de ionômero de vidro modificado por resina, e avaliaram a citotoxicidade por meio de extratos, obtidos de cada amostra, sobre as células odontoblastoides durante 24 h. A avaliação da morfologia, do metabolismo com o ensaio do MTT e a microscopia eletrônica de varredura (MEV) comprovaram que não houve nenhum efeito tóxico.

Castilho et al.28 _{(2013) incorporaram clorexidina 0,2, 0,5, 1,25 e 2,5%} em um cimento de ionômero de vidro modificado por resina e avaliaram a citotoxicidade de igual forma (MTT e MEV). Os autores verificaram que a concentração de 2,5% causava uma diminuição significativa da viabilidade celular, quando comparado ao controle. Porém, as baixas concentrações de clorexidina apresentaram uma tendência a estimular o metabolismo celular. Este trabalho demonstrou que a incorporação da clorexidina ao cimento de ionômero de vidro pode causar um aumento da citotoxicidade do material final, estando relacionado com a citotoxicidade da própria clorexidina.

Giannelli et al.68 _{(2008) relataram em seu trabalho com fibroblastos,} células endoteliais e osteoblastos, que a clorexidina afetou a viabilidade celular de forma dose-tempo-dependente. Seu efeito citotóxico consistiu na indução de apoptose e autofagia celular, distúrbios da função mitocondrial, aumento de cálcio intracelular e estresse oxidativo.

A ação antimicrobiana do cimento de ionômero de vidro é baixa, gerando assim o interesse da incorporação de um antimicrobiano ao material. Fato que torna essencial a avaliação dessa propriedade nos estudos que realizam a incorporação de antimicrobianos (Takahashi et al.25 _{2006, Yesillyurt et al.}29 _2009, Tüzüner et al.26 _{2011, Castilho et al.}30 _{2012, Castilho et al.}28 _{2013). O teste de difusão} em ágar, com Streptococcus mutans, é o método mais comumente verificado nos artigos, por ser um teste de baixo custo e com rápida resposta na determinação dos efeitos antibacterianos (Takahashi et al.25 _{2006, Hiraishi et al.}72 _{2010, Tüzüner et al.}26 2011).

Os trabalhos têm indicado que a incorporação dos antimicrobianos em diferentes concentrações é efetiva para dar ao material ionomérico a ação antimicrobiana sobre bactérias cariogênicas, principalmente sobre Streptococcus

mutans em testes in vitro (Yesilyurt et al.29 _{2009, Tüzüner et al.}26 _{2011, Castilho et} al.30 _{2012, Castilho et al.}28 _{2013). A duração do efeito microbiológico é proporcional à} concentração de antimicrobiano incorporado ao material (Yesilyurt et al.29 _2009, Castilho et al.30 _{2012). Nos trabalhos, há controvérsias em relação à ação de inibição} bacteriana ser também proporcional à concentração do fármaco. A maior parte dos estudos verificou essa relação (Yesilyurt et al.29 _{2009, Castilho et al.}30 _{2012, Castilho} et al.28 _{2013) sendo que somente Takahashi et al.}25 _{(2006) apresentou resultados em} desacordo entre os artigos revisados.

O período de avaliação dos efeitos microbiológicos, na maioria das investigações, foi entre 24 e 48 h, demonstrando ser um período suficiente para a avaliação com Streptococcus mutans (Takahashi et al.25 _{2006, Yesilyurt et al.}29 _2009, Castilho et al.28_{2013). No entanto, Tüzüner et al.}26 _{(2011) realizaram a avaliação de} cimentos de ionômeros de vidro convencionais de alta viscosidade contendo diacetato de clorexidina/cetrimida (2,5/ 2,5%) contra Streptococcus mutans e Lactobacillus

casei, sendo as culturas examinadas com 1, 7, 15, 30, 60 e 90 dias. Foram

encontradas diferenças entre os materiais experimentais em relação aos níveis de

Streptococcus mutans nos dias 1, 7 e 60, bem como para Lactobacillus casei em todos

os períodos de tempo (p<0,05). Ambos os materiais experimentais exibiram um contínuo efeito antibacteriano até 90 dias.