As cascas de diferentes espécies de eucalipto, em especial a de E. grandis, têm sido estudadas por serem resíduos que são abundantemente e facilmente obtidos a um baixo custo, nas indústrias de papel e celulose. Os resultados obtidos nesse trabalho e em trabalhos da literatura indicam que cascas de espécies de eucalipto constituem uma importante fonte para a obtenção de extratos brutos e enriquecidos em compostos triterpênicos, como os ácidos betulínico, oleanólico e ursólico que reconhecidamente possuem atividades biológicas significativas para o desenvolvimento de medicamentos seguros, menos tóxicos, mais eficientes e de fácil obtenção.
Segundo literaturas, sabe-se que o ácido betulínico tem atividade anti-HIV e anti- tumoral comprovada e que os ácidos oleanólico e ursólico têm atividades anti-tumoral e anti-oxidante, entre outras. Um exemplo do uso dos ácidos triterpênicos, é o fármaco Bevirimat®, cujo o princípio ativo é um derivado do ácido betulínico usado no tratamento de HIV e câncer de pele.
Realizou-se a extração via Soxhlet de ácidos triterpênicos de cascas de E. grandis, utilizando-se cinco sistemas diferentes de solventes. Com base no rendimento de obtenção dos extratos, pode-se observar que a mistura de solvente clorofórmio: metanol na proporção 6:4, apresentou rendimento de 3,34%, sendo a extração de maior eficiência quando comparada com os demais solventes e misturas de solventes.
Os ácidos foram identificados e quantificados pelo método de adição de padrão, e observou-se que para se extrair uma maior quantidade de ácido betulínico, o melhor sistema extrator foi o diclorometano. Por outro lado, obteve a mesma quantidade de ácido oleanólico utilizando-se acetato de etila e clorofórmio e metanol na proporção 6:4. Já o melhor sistema extrator para o ácido ursólico foi o clorofórmio e metanol na proporção 6:4. É interessante observar, também, os sistemas etanol/água que foram estudados. Aquele que teve substâncias extraídas em solução de 70% etanol apresentou maior atividade antirradicalar pelos dois métodos utilizados. Deve-se lembrar que ambos são amplamente descritos na literatura.
Por outro lado, o extrato aquoso do pó de casca de eucalipto e cloreto de ferro (III) 0,1 mol/L, formou um sólido preto, que foi caracterizado por análise elementar, microscopia vibracional e eletrônica. Imagens MEV obtidas do sólido indicam que os cristais se apresentam em escala micrométrica, mas em solução temos nanopartículas como sugere a literatura (WANG, 2013).
Utilizou-se o corante cristal violeta para avaliar a capacidade adsortiva das nanopartículas de ferro-polifenol (NP Fe-P (0)). Na presença de diferentes massas de NP
Fe-P (0) (40, 80, 100 mg) foi possível perceber a adsorção do corante. O espectro eletrônico da solução de cristal violeta (CV) apresenta uma banda em 578 nm, cuja intensidade reduz quase que por completo após a ação das NP Fe-P (0), com exceção da solução contendo 10 mg de nanopartículas. A cor das soluções também comprovou o efeito da adsorção em alguns dias. Com 100 mg, a intensidade da cor diminuiu bastante, enquanto que, com 40 mg, a intensidade da cor também diminuiu, entretanto, não tanto quanto com a primeira.
Por este trabalho, foi possível ver a possibilidade de reaproveitamento do resíduo da primeira extração, aumentando o rendimento da extração, a estrutura das NP-Fe, a reatividade do corante CV com as nanopartículas através dos estudos cinéticos e adsortivos.
6. Referências bibliográficas
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São Paulo, 28 de junho de 2018
“Projeto Mackpesquisa ”Aplicações farmacológicas, ambientais e nanotecnológicas de extratos obtidos de casca de Eucalyptus grandis”
Parecerista 1
Item 1:
Agradecemos a observação do parecerista sobre a toxicidade dos solventes, e o grupo usará outros solventes de polaridade semelhante e de menor toxicidade em trabalhos futuros.
Item 3:
Os ensaios propostos no projeto foram: (1) avaliação das atividades antitumorais e antileishmaniose com os extratos enriquecidos com ácidos triterpênicos; (2) avaliação do potencial antirradicalar dos extratos enriquecidos em substâncias polifenólicas.
Item 4:
No projeto pretendia-se inicialmente determinar a composição do extrato aquoso, que foi realizada por HPLC (item 4.3 do relatório) e sintetizar as nanopartículas de ferro-polifenol, NP Fe-P, e caracterizá-las por técnicas espectroscópicas (UV-Vis) e por imagem, o que foi realizado (item 4.4 do relatório). A avaliação da capacidade adsortiva das Np Fe-P no tratamento de efluentes foi feita utilizando como modelo o corante cristal violeta (CV). Nas páginas 48 a 51 são mostrados os experimentos que comprovam a eficiência das NP Fe-P na remoção do corante após 24 h de início do experimento. Além do planejado inicialmente foi realizado um estudo cinético preliminar (p. 51) seguindo o procedimento descrito na literatura (Bioresource Technology, v. 97, n. 1, p.1986-1993, 2006), que mostrou que mais de 50% do corante foi removido após 300min (vide figura 45, p. 51). Esse trabalho foi apresentado na forma de painel no 18th International Conference on Biological Inorganic
Chemistry, e pode ser visualizado no Journal of Biological inorganic Chemistry, v.22, p. s54, 2017. Além disso, o aluno Carlos Wallace de Mendoça apresentou esse estudo como seu trabalho de conclusão de curso em 2017. Assim, acho que cumprimos todas as etapas planejadas inicialmente.
Parecerista 2
Item 1:
Sobre a coleta do material vegetal - A coleta das cascas de 10 árvores de E. grandis, com cerca de sete anos, foi realizada em 04 de abril de 2013, entre às 15h e 16h, na fazendo Ouro Branco situada no município de Salesópolis, São Paulo. Na época da coleta a fazenda era fomentada, ou seja, produzia as espécies de eucalipto conforme as normas florestais e com o apoio dos técnicos da Companhia Suzano Papel e Celulose As cascas foram secas em estufa logo após a coleta e pulverizadas em moinho, e então armazenadas.
O texto foi incluído no relatório. Item 2:
VERMA, S.C.; JAIN, C. L.; KUMARI, A.; PADHI, M. M.; DEVALLA, R. B. Microwave-assisted extraction and rapid isolation of ursolic acid from the leaves of Eucalyptus x hybrida Maiden and its quantification using HPLC-diode array technique. J. Sep. Sci. 2013, 36, 1255–1262. A referência foi citada no relatório.
O procedimento da avaliação da atividade antileisimania dos extratos foi incluído no relatório.
Item 3: