CONCLUSÕES e PERSPECTIVAS FUTURAS

A descoberta da propriedade antimetastática dos complexos de rutênio em 1999 representa um importante marco no desenvolvimento de uma nova droga antitumoral [176]. Baseado nisto, a escolha do complexo mer-[RuCl3(dppb)(VPy)] para objeto de estudo desta

tese deve-se ao estado redox Ru3+, a presença de ligante fosfínico e n-heterocíclico, cuja combinação proporciona significativa atuação contra inibição de células de câncer. No entanto, os ensaios de toxicidade mostram que o complexo RuVPy é altamente tóxico, tanto para células de câncer como para células controle. Esta falta de especificidade pode ser relacionado com um modo de ação baseado em interações com a membrana celular, sendo este complexo uma pró-droga, que em ambiente intracelulares pode vir a formar espécies de Ru(II). A hipótese de interação com membrana foi testada, de forma muito simplificada, usando monocamadas Langmuir como modelos de membrana celular. Três fosfolipídios com a mesma cauda foram utilizados, cada um contendo 16 átomos de carbono em sua região apolar e com três diferentes grupos polares sendo estes: colina para o DPPC, glicerol para o DPPG e serina para o DPPS. Uma forte interação foi confirmada pelas alterações significativas no empacotamento e morfologia dos fosfolipídios, tanto zwitteriónico (DPPC) quanto nas monocamadas dos aniônicos (DPPG e DPPS). Parâmetros termodinâmicos também foram uteis e mostraram melhor acomodação do RuVPy nos sistemas, de acordo com o a carga presente nos grupos cabeças sendo extremamente repulsiva a interação com o DPPS que apresenta 2 regiões de carga negativa. Além disso, usando PM-IRRAS pode-se identificar os grupos dos fosfolipídios que interagem com o RuVPy, o que era consistente com as propriedades eletrônicas obtidas por DFT para a estrutura otimizada de RuVPy. Embora o complexo RuVPy não seja capaz de penetrar nas regiões hidrofóbicas da cauda das monocamadas dos fosfolipídios nos filmes de Langmuir, as suas propriedades elásticas foram alteradas significativamente. Outro resultado que traduz o efeito do complexo no modelo de membrana é o obtido por medidas eletroquímicas em tampão PBS, que mostraram que os filmes mistos têm maior acúmulo de carga segundo medidas de capacitância dos filmes LB, e que em presença de espécies eletroativas, este filmes apresentam maior facilidade na transferência de carga. Se pensarmos em membranas reais conclui-se que estas se tornam mais fluidas numa interação com RuVPy, como fez com as monocamadas de Langmuir, além destas terem seus impulsos elétricos alterados. Tais características justificam uma provável atuação do complexo como responsável pelo mecanismo de morte celular, sem descartar o

mecanismo convencional esperado para um agente neoplásico ciclo não específico o qual não foi foco deste trabalho. A fim de obtermos mais ampla ideia em relação a resposta elétrica dos filmes LB, novos filmes LB poderão ser obtidos em todas as pressões a fim de avaliarmos a permeabilidade do filmes por medidas de VC e EIS.

Vesículas lipossomais de DPPC foram obtidas com RuVPy e via caracterizações realizadas destas verificou-se que o complexo pode ser encapsulado interagindo com regiões hidrofilicas da membrana vesicular. Este encapsulamento é ideal para o transporte deste composto em ambientes hidrofílicos, tais como os ambientes biológicos. Apesar dos resultados serem promissores, percebemos a necessidade de otimização da obtenção das mesmas, a fim de garantir maior liberação do complexo RuVPy dos lipossomos. A combinação destes resultados e dados obtidos das isotermas de pressão vs. área por molécula, nos mostra a viabilidade do emprego dos lipossomos contendo o complexo incorporado para prosseguir com os testes biológicos, com os mesmos tipos de linhagem celular, visando estudos de liberação controlada de drogas. Estes resultados serão comparados aos testes já realizados a fim de avaliar se haverá ou não redução da citoxicidade do complexo.

Apesar da alta toxidade apresentada pelo RuVPy, os resultados obtidos nesta tese serão úteis para auxiliar na projeção de novos metalofármacos que sejam altamente seletivos para as células tumorais e que apresentem baixa toxicidade.

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