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4. Parte Experimental

4.4. Condições Experimentais

As voluntárias do estudo foram orientadas a não utilizar nenhum produto cosmético na região dos antebraços. Também lhes foi questionado, antes de iniciar cada teste, quando foi a última vez que tomaram banho, visto ambos os fatores poderem interferir com os resultados de medição. No caso das voluntárias que tomaram banho no próprio dia de realização de teste, a medição realizou-se 2 horas após o banho, garantindo assim, que a pele não se encontra deslipidada por ação da higiene habitual (1).

Os produtos foram aplicados na face interna dos dois antebraços com uma distância determinada ao pulso e ao cotovelo (1 polegar do pulso e 1 polegar do cotovelo), garantindo que os resultados obtidos resultam da mesma zona e do mesmo tipo de pele (78).

Em cada voluntária, essa região foi dividida em três círculos desenhados com um lápis verde de maquilhagem (figura 5), apresentando as mesmas dimensões dos discos desmaquilhantes, de acordo com a metodologia proposta por Mahan, Morrow et al. 2011 (78).

Figura 5: Círculos para ensaio desenhados nos antebraços das voluntárias

Os círculos foram numerados. Em cada círculo foram aplicados 10 mL de produto (controlo negativo, controlo positivo ou produto em teste), no disco de algodão.

Seguindo o sentido do pulso para o cotovelo, no círculo 1 (figura 6) foi aplicado um disco com água da torneira (controlo negativo). No círculo 2 foi aplicado o produto em teste e o círculo 3 funcionou como controlo positivo, tendo sido aplicado um disco embebido com sabão azul, exceto no caso em que o próprio sabão azul foi testado. Neste caso o controlo positivo selecionado foi o álcool a 70.

Figura 6: A aplicação de produto nos círculos desenhados nos antebraços (Círculo 1 – controlo negativo, água; Círculo 2 – produto em teste; Circulo 3 – controlo positivo, sabão azul)

4.4.1.

Procedimento Experimental

Para a avaliação dos parâmetros cutâneos, através da metodologia não invasiva referida, foram seguidos os seguintes passos:

1. Realizaram-se três desenhos em forma de discos desmaquilhantes em cada antebraço das voluntárias, mantendo a distância de um polegar a partir do pulso e do cotovelo; 2. Antes da aplicação de qualquer produto, realizou-se uma primeira medição dos

parâmetros em análise (hidratação, pH, conteúdo em lípidos), de forma a comparar as diferenças existentes, antes e após a aplicação dos produtos;

3. Após esta primeira medição, aplicou-se um disco embebido em água (10mL), para remover qualquer sujidade que a zona de medição da pele contenha, tendo-se retirado através do movimento circular (giratório);

4. Posteriormente e, como protocolado, foram aplicados três discos (um por círculo) contendo os controlos ou o produto diluído; os discos permaneceram no antebraço das voluntárias, aproximadamente, 1 minuto;

5. De seguida, voltou a aplicar-se um disco desmaquilhante humedecido com água, em cada círculo, de modo a mimetizar o normal processo de limpeza da pele

6. Aplicou-se um disco desmaquilhante seco em cada círculo, tendo sido removido através do mesmo movimento giratório, referido anteriormente;

7. Seguidamente removeram-se os discos e iniciou-se a respetiva medição do conteúdo aquoso do estrato córneo (hidratação), do pH e do conteúdo em lípidos;

8. As medições foram realizadas, em cada antebraço, ao t=0, 30 e 60 minutos, de forma a avaliar a recuperação da pele, em consequência, da aplicação dos produtos;

9. O impacto do produto nos parâmetros da pele foi avaliado por cálculo da variação de cada parâmetro, em cada tempo, tendo em conta as determinações iniciais realizadas para cada local de medição.

O procedimento aplicado no pré-teste é sobreponível ao procedimento descrito, tendo sido apenas suprimidos os pontos 4 e 5. Foram realizadas determinações apenas ao tempo 0 e tempo 60 minutos.

VHPt = (HPt – HBP) – (HCt – HBC)

4.4.1.1. Determinação do conteúdo aquoso do estrato córneo (hidratação)

por parâmetros de Biometria Cutânea

As determinações da hidratação cutânea foram efetuadas através do aparelho Corneometer CM 825® (Courage-Khazaka, Köln, Alemanha), de acordo com as instruções do aparelho que utiliza uma sonda, de forma perpendicular, sob a superfície cutânea. As medições deste parâmetro foram realizadas na parte mais à esquerda dos círculos e a sonda foi limpa com um disco desmaquilhante seco, entre cada medição. Os valores de hidratação do estrato córneo são expressos em unidades arbitrárias (UA).

Para proceder à avaliação dos resultados, o valor de hidratação obtido para cada produto, a cada tempo, foi subtraído do valor obtido no tempo zero (hidratação basal) e da variação da hidratação observada no controlo negativo (água da torneira), segundo a fórmula abaixo apresentada (79):

Em que:

 VHPt – variação da hidratação conferida por cada produto, a cada tempo (30, 60, 90, 120, 180, 240 ou 300 minutos);

 HPt – hidratação observada no local em que foi aplicado cada produto, a cada tempo;  HBP – hidratação basal no local em que foi aplicado cada produto;

 HCt – hidratação observada no controlo negativo, a cada tempo;  HBC – hidratação basal no controlo negativo.

Através da fórmula aplicada foi possível anular os efeitos das variações ambientais nos valores de hidratação cutânea obtidos ao longo do ensaio.

4.4.1.2. Determinação do pH por parâmetros de Biometria Cutânea

A avaliação do pH cutâneo foi realizada através do aparelho Skin pH Meter PH 900® (Courage- Khazaka Electronic, Alemanha). O eletródo foi lavado com água destilada entre cada medição e calibrado antes da realização de qualquer medição, com soluções tampão de pH 4,0 e pH 7,0.

4.4.1.3. Determinação do conteúdo lipídico por parâmetros de Biometria

Cutânea

A avaliação do conteúdo de lípidos foi efetuada através do aparelho Sebumeter SM 810® (Courage-Khazaka Electronic, Alemanha).

Previamente ao início dos ensaios, as voluntárias permaneceram 10-15 minutos sentadas, nas condições ambientais (temperatura e humidade ambientais) pretendidas.

Tanto a investigadora, como as voluntárias realizaram os ensaios na posição sentada. Entre os intervalos decorridos para a realização de novas medições, as voluntárias permaneceram sentadas, com o antebraço descoberto e apoiado sob uma superfície horizontal.