O presente estudo foi do tipo coorte, no qual os sujeitos foram incluídos prospectivamente durante o período de Dezembro de 2008 a Março de 2013, conforme os critérios de inclusão descritos abaixo.
3.1.1 Casuística
Foram incluídos 398 sujeitos dos Serviços de TCTH e de Hematologia, Unidade de Transplante Renal (UTR), Serviço de Transplante do Fígado, Serviço de Cirurgia Torácica e Transplante de Pulmão, Serviço de Reumatologia e Enfermaria de Moléstias Infecciosas e Parasitárias.
3.1.2 Critérios de inclusão
3.1.2.1 Foram incluídos 398 sujeitos dos Serviços de TCTH e de Hematologia,
Unidade de Transplante Renal (UTR), Serviço de Transplante do Fígado, Serviço de Cirurgia Torácica e Transplante de Pulmão, Serviço de Reumatologia e Enfermaria de Moléstias Infecciosas e Parasitárias
3.1.2.2 Assinatura do termo de consentimento livre e esclarecido (TCLE).
3.1.2.3 Após inclusão no estudos os sujeitos foram acompanhados evolutivamente
e de acordo com investigação diagnóstica eles foram classificados como casos ou controles como descrito a seguir.
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3.1.2.3.1 Definição dos grupos de sujeitos estudados prospectivamente
1. Casos: 202 sujeitos foram classificados como casos de aspergilose invasiva provada, provável e possível segundo critério EORTC/MSG 2002 (Ascioglu et al, 2002);
2. Controles: 196 sujeitos foram classificados como controles em dois grupos:
a) Controle negativo: Foi composto por 167 sujeitos com as mesmas doenças de base dos casos, sem aspergilose invasiva, sem uso de antifúngico e com sobrevida de no mínimo 30 dias após inclusão no estudo;
b) Controle positivo: 29 sujeitos com outras doenças infecciosas
(Histoplasma capsulatum, Cryptococcus neoformans var
neoformans, Paracoccidioides brasiliensis, Fusarium sp,
feohifomicose, Candida sp), tuberculose, infecções bacterianas, virais comprovadas por diagnóstico microbiológico e ou molecular. Destes 21 (72,4%) tinham as mesmas doenças de base dos casos.
3.1.3 Classificação de AI segundo EORTC/MSG
Para o estudo das medidas de desempenho da GM foi utilizada a Classificação de infecção fúngica invasiva (IFI) de acordo com os critérios estabelecidos pelo EORTC/MSG 2002, ou seja sem a utilização da GM para incluir os sujeitos como aspergilose provável. Para o estudo da 1,3βD-glucana foi utilizada a definição do EORTC/MSG 2008 com a inclusão apenas da GM como prova diagnóstica. Para efeito de comparação da utilidade da GM no diagnóstico da AI foi
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utilizado a definicão do EORTC/MSG 2008 (Ascioglu et al, 2002; De Pauw et al, 2008).
As definições segundo EORTC/MSG (European Organization for Research and Treatment of Cancer / Mycoses Study Group) são:
Aspergilose provada: caracteriza-se por exame histopatológico de invasão
tecidual ou isolamento fúngico com evidências radiológicas (aspergilose pulmonar invasiva com infiltrado pulmonar, podendo evoluir para cavitações ou aspergilose disseminada com angioinvasão e disseminação por via hematogênica para outros órgãos).
Aspergilose provável: caracteriza-se pela presença de fatores do hospedeiro,
características clínicas e evidência micológica.
1. Fatores do Hospedeiro
1.1. História recente de neutropenia <500 neutrofilos/mm3 por >10 dias, temporalmente relacionada com o início da infecção fúngica;
1.2. Receptores de transplante alogênico de células tronco hematopoiéticas; 1.3. Uso prolongado de corticosteroides ≥0.3 mg/kg/dia de predinisona por > 3
semanas;
1.4. Tratamento com imunossupressores de células T, tais como: ciclosporina, bloqueador de TNF-a, anticorpo monoclonal específico (tal como alemtuzumab), ou análogos de nucleosídeos durante os últimos 90 dias;
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1.5. Imunodeficiência grave (como doenças granulomatosas ou imunodeficiência combinada grave).
2. Critério clínico:
2.1. Doença fúngica do trato respiratório inferior com a presença de 1 dos 3 seguintes sinais na tomografia de tórax: Sinal do halo, nódulos com ou sem o sinal do halo, sinal do ar crescente, cavitação;
2.1.1. Para a classificação dos aspectos radiológicos à tomografia computadorizada os achados de imagem foram agrupados em lesões sugestivas de AI, nas quais foram incluídos: nódulo (s), sinal do Halo, sinal do ar crescente e cavitação e no grupo não sugestivo de AI: vidro fosco, consolidação, atelectasia, sinusopatia e árvore em brotamento (Kuhlman et al, 1985, Greene et al, 2007, Caillot et al, 1997).
2.2. Traqueobronquite;
2.3. Ulceração traqueobrônquica, nódulo, pseudomembrana, placa ou cicatriz observada pela análise broncoscópica;
2.4. Infecção sinonasal com imagem mostrando sinusite e até 1 dos 3 seguintes sinais: dor aguda localizada (incluindo irradiação para os olhos), úlcera nasal com escara negra, extensão dos seios nasais para barreira óssea incluindo órbitas e sistema nervoso central e 1 dos 2 seguintes sinais: lesão focal com realce pós injeção de contraste à tomografia ou ressonância nuclear magnética de crânio.
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3. Critério Micológico
3.1. Segundo definição EORTC/MSG 2002, foram utilizados:
a. Testes diretos (citologia, microscopia direta ou cultura): fungo no escarro, lavado broncoalveolar, escovado brônquico ou aspirado dos seios nasais indicado por 1 dos seguintes: presença de elementos fúngicos filamentosos sugerindo Aspergillus sp e ou recuperação através de cultura;
3.2. Segundo definição EORTC/MSG 2008, foram utilizados: a. Testes indiretos:
a.1 Detecção de antígeno de Aspergillus sp, no soro ou LBA; a.2 Detecção de 1,3βD-glucana no soro ou LBA;
Aspergilose possível: presença de fatores do hospedeiro com evidência
clínica suficiente e consistente com o diagnóstico de infecção fúngica invasiva, mas sem evidência micológica.
3.1.4 Ficha clínico-epidemiológica: Foi preenchida uma ficha (Anexo 1) ,
contendo dados demográficos (idade, sexo), presença, gravidade e tempo de neutropenia, presença de rejeição, DECH (doença do enxerto contra o hospedeiro), tipo de transplante, doença de base, uso de corticoterapia e dose, presença de doença pelo citomegalovírus, exames de imagem, microbiológicos, histopatológicos, citologia, culturas, diagnóstico de entrada e diagnóstico confirmado, desfecho (óbito, sobrevida).
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