03. MATERIAL E MÉTODOS
5.1 ENSAIOS EM FRASCOS AGITADOS 65 5
• As fermentações em frascos agitados, fazendo variar as concentrações
de glicose entre 40 e 70 g. L-1 e mantendo constantes os demais
parâmetros do processo apresentaram concentrações de acetoína semelhantes entre si e ao encontrados por TEIXEIRA(1999) em torno de
(330 mg. L-1). A concentração inicial de glicose que apresentou o melhor
fator de conversão de substrato em produto( Yp/s7,97 ) foi a fermentação
5.2 Ensaios em biorreator , batelada:
Foram realizadas 2 (duas) fementações com concentrações iniciais de glicose de 40 e 64 g.L-1 mantendo constantes os demais parâmetros.
• Os resultados obtidos no processo batelada foram semelhantes aos
apresentados por MORITZ (1998), a produção de acetoína foi 334 mg.L-
1 do trabalho tomado como referência, e a produção de acetoína obtida
nestes ensaios foi de (366 mg.L-1), semelhante aos resultados
encontrados na literatura não apresentando maiores variações.
5.3
Ensaios em biorreator, batelada alimentada:
Realizaram-se fermentações em batelada alimentada variando se: solução
de alimentação ( glicose concentrada ( 200 g.L-1 com e sem nutrientes);
concentração de glicose no meio de cultura, no primeiros ensaios foram mantidos valores próximos de 30 –35 g.L-1 e posteriormente valores entre 12 –13 g.L-1.
Todos os demais parâmetros permaneceram constantes com exceção à velocidade de agitação que nos primeiros experimentos foi 50rpm e nos últimos de 750 rpm. Através destes experimentos podemos concluir que:
• O melhor processo de produção de acetoína foi a batelada alimentada, onde, com uma velocidade de agitação de 750 rpm e o controle da
concentração de glicose no meio a 12 g.L-1, obteve-se uma
• A comparação dos experimentos iniciais em batelada alimentada, onde
manteve-se a concentração de glicose no meio na faixa de 30-35 g.L-1
evidencia a necessidade de nutrientes na solução de alimentação.
• O aumento na velocidade de agitação ( 500 para 750 rpm) e a diminuição da concentração de glicose no meio levou a um aumento na conversão de substrato em acetoína, minimizando desta forma possíveis repressões no metabolismo da levedura.
SUGESTÕES
A utilização de outros meios de cultura, talvez resíduos agro-industriais ricos em açucares, objetivando a diminuição do custo de produção de acetoína;
A verificação da influência da concentração de oxigênio dissolvido na produção de acetoína e 2,3 butanodiol como não há na literatura resultados do cultivo dessas leveduras realizados em fermentador através do processo batelada alimentada, sugere-se que novos estudos sejam realizados para que os parâmetros cinéticos aqui apresentados possam ser confrontados.
• Concluindo, o objetivo geral deste trabalho foi atingido que era o aumento da produção de acetoína.
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ANEXOS
Figura AI – 1. Determinação do fator de conversão de glicose em célula (g/g) fermentação em frascos agitados; concentração inicial de glicose 40 g.L-1.
Figura AI –02 Determinação do fator de conversão de glicose em célula (g/g) para cultura de Hanseniaspora guilliermondii em processo batelada alimentada com nutrientes; velocidade de agitação 750 rpm; vazão de aeração 1vvm.
-5 0 5 10 15 20 25 30 35 40 -2 0 2 4 6 8 10 Yx/s= 0,25 g/g R2= 0,983 • • glicose (g.L-1) conc en tr aç ão c él ul as ( g. L -1 ) 0 10 20 30 40 50 60 70 10 15 20 25 30 35 40 YX/G= 0,53 g/g R2=0,9914 • • •
Massa de glicose alimentada (g)
M as sa de c él ul as no fe rm ent ador ( g)
32 36 40 44 YA/G= 0,07902 g/g
R2=0,9940
Massa de glicose alimentada (g) • • 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 M as sa de a ce to ín a no fe rm en ta dor ( g) 28 1.5
Figura AI –03 Determinação do fator de conversão de glicose em acetoína (g/g) para cultura de Hanseniaspora guilliermondii em processo batelada alimentada com nutrientes. Velocidade de agitação 750 rpm; vazão de aeração 1vvm.
0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0 0.0 0.3 0.6 0.9 1.2 Y= -1.429 + 2.934x R2=9978 • • • • • Densidade ótica P e so se co ( g )
Figura AI – 04. Curva de calibração de concentração celular utilizada no experimento em batelada alimentada ; concentração inicial de glicose 64 g.L-1; alimentação com nutrientes.
igura AI – 05. ios em 550 700 850 1000 Y= 820,05x + 12.35 R2=9953 de ac et oí na ( g /L -1 ) C onc ent ra ç ã o 0.1 0.3 0.5 0.7 0.9 1.1 100 250 400
Curva de calibração de acetoína utilizada no ensa
Área padrão - Acetoína
F