Híbrido 2B604PW (Híbrido 2)

As análises da variância dos dados obtidos com as sementes do Híbrido 2 para não revelaram diferenças significativas para os efeitos da interação lotes x épocas sobre todos os testes de germinação e vigor (primeira contagem de germinação, teste de frio, porcentagem e velocidade de emergência de plântulas, envelhecimento acelerado tradicional e com solução saturada de NaCl durante 96, 120 e 144 horas).

Em relação aos efeitos dos lotes, não foram verificadas diferenças significativas para os testes de germinação, primeira contagem de germinação, frio, porcentagem e velocidade de emergência de plântulas; esses efeitos foram significativos para os dados obtidos no teste de envelhecimento acelerado tradicional e com solução saturada de NaCl, em todos os períodos de tempo e nas épocas de avaliação. Os efeitos de épocas foram nos testes de frio, porcentagem e velocidade de emergência de plântulas. As médias obtidas nos testes de germinação e vigor e os respectivos coeficientes de variação encontram-se na Tabela 7.

Verificou-se que, embora tenha sido realizado o envelhecimento artificial para a composição dos lotes, as diferenças de vigor dos lotes foram estreitas e não variaram significativamente quando avaliadas pelos testes de germinação, primeira contagem de germinação, frio, porcentagem e velocidade de emergência de plântulas. Por outro lado, houve variações significativas entre épocas no teste de frio, com redução expressiva da viabilidade das sementes na segunda para a terceira épocas; possivelmente em consequência do envelhecimento artificial inicial que intensificou a deterioração das sementes submetidas nesse teste.

As informações proporcionadas pelos resultados dos testes de envelhecimento acelerado tradicional (96 horas a 41 ºC) permitiram identificar diferenças no vigor dos lotes, revelando o lote 8 como o mais vigoroso, nas três épocas de avaliação. No entanto, houve redução drástica na germinação (inferior a 28%) após o envelhecimento, em todas as épocas, subestimando o vigor dos lotes, o que tornou os resultados sem valor comparativo aos outros testes utilizados. Diante desses resultados, as informações referentes ao vigor foram comprometidas, pois os lotes apresentaram baixo vigor, que possivelmente implicaria na baixa probabilidade de apresentar desempenho adequado após a semeadura ou durante o armazenamento.

Em função do teste de envelhecimento acelerado tradicional expressar a sobrevivência das sementes, ou seja, a porcentagem de plântulas normais, e não eventos que

precedem a deterioração, testes relacionando a velocidade de germinação e a taxa de crescimento de plântulas podem complementar as informações obtidas a respeito do vigor dos lotes (CARNEIRO; GUEDES, 2002).

Os testes de envelhecimento acelerado com solução saturada de NaCl a 41 ºC durante 96, 120 e 144 horas, foram sensíveis para identificar diferenças significativas de vigor dos lotes, coerentes entre si, permitindo inferir os lotes mais (L8, L9, L10, L12, L13 e L14) e o menos vigoroso (L15), em todas as épocas de avaliação. Verificou-se que mesmo com a redução do teor de água das sementes após o teste, na média houve pequena redução da germinação, mas suficiente para a identificação dos níveis de vigor. Os resultados desse teste evidenciaram comportamento inferior do lote 15, de maneira semelhante à verificada no envelhecimento tradicional, embora este último teste, tenha promovido maior deterioração nas sementes.

Considerando a eficiência dos testes de envelhecimento acelerado com solução saturada de NaCl nos diferentes períodos, o período menor de tempo (96 horas), foi eficiente e sensível para avaliação do potencial fisiológico dos lotes, em relação ao envelhecimento acelerado tradicional, que promoveu acentuada deterioração nas sementes, verificada pela redução drástica da germinação, inviabilizando a utilização dos resultados.

Especificamente para o milho, são escassas as informações sobre a utilização da solução saturada de NaCl no teste de envelhecimento acelerado, ao contrário de sementes de hortaliças, nas quais este teste é frequentemente estudado. Entretanto, as informações obtidas nesta pesquisa, que devido à presença da solução saturada de sal, os efeitos da deterioração foram menos intensos, mas suficiente para promover estresse nas sementes e fornecer informações referentes ao vigor dos lotes, concordando com o constatado em diversos trabalhos (RAMOS et al., 2004; FESSEL et al., 2005; ALVES et al., 2012). Outra vantagem da utilização do teste de envelhecimento acelerado com solução saturada de NaCl consiste em determinar o potencial fisiológico dos lotes submetidos à condições adversas mais compatíveis com as geralmente predominantes durante o armazenamento.

velocidade de emergência de plântulas (Vel. Emerg.), envelhecimento acelerado tradicional (EA Trad.) e com solução saturada de NaCl nos períodos de 96horas (EASS 96h), 120 horas (EASS 120h) e 144 horas (EASS 144h) de sete lotes de sementes de milho do Híbrido 2B604PW (Híbrido 2), em três épocas de avaliação

Híbrido 2 Lotes

Germinação 1ª Cont. Teste de Frio Porc. Emerg. Vel. Emerg.

---%---

Época 1 Época 2 Época 3 Época 1 Época 2 Época 3 Época 1 Época 2 Época 3 Época 1 Época 2 Época 3 Época 1 Época 2 Época 3 L8 100Aa 100Aa 99Aa 100Aa 97Aa 99Aa 67Ab 79Aa 20Ac 95Ab 100Aa 97Ab 9,89Ab 11,69Aa 9,96Ac

L9 100Aa 100Aa 100Aa 99Aa 99Aa 100Aa 66Ab 86Aa 17Ac 94Ab 98Aa 97Ab 9,59Ab 11,24Aa 6,95Ac

L10 98Aa 99Aa 99Aa 97Aa 99Aa 99Aa 76Ab 83Aa 19Ac 97Ab 99Aa 95Ab 10,00Ab 11,32Aa 6,82Ac

L12 100Aa 99Aa 100Aa 100Aa 99Aa 100Aa 74Ab 81Aa 21Ac 96Ab 98Aa 98Ab 10,08Ab 11,44Aa 7,24Ac

L13 100Aa 97Aa 99Aa 99Aa 96Aa 99Aa 72Ab 82Aa 17Ac 95Ab 98Aa 96Ab 9,86Ab 11,41Aa 6,89Ac

L14 99Aa 98Aa 98Aa 98Aa 98Aa 98Aa 67Ab 82Aa 19Ac 98Ab 100Aa 95Ab 10,12Ab 11,27Aa 6,99Ac

L15 98Aa 98Aa 99Aa 97Aa 97Aa 98Aa 68Ab 84Aa 22Ac 94Ab 97Aa 97Ab 9,77Ab 11,17Aa 7,02Ac

C.V.

(%) 1,55 1,95 11,69 3,16 4,99

Lotes

EA Trad. EASS 96h EASS 120h EASS 144h

---%--- Época 1 Época 2 Época 3 Época 1 Época 2 Época 3 Época 1 Época 2 Época 3 Época 1 Época 2 Época 3

L8 28Aa 21Aa 25Aa 99Aa 98Aa 98Aa 99Aa 100Aa 98Aa 100Aa 99Aa 100Aa

L9 12Ba 14Ba 14Ba 98Aa 100Aa 99Aa 99Aa 99Aa 100Aa 97Aa 99Aa 100Aa

L10 10Ba 9Ba 11Ba 99Aa 99Aa 96Aa 98Aa 100Aa 99Aa 99Aa 99Aa 100Aa

L12 10Ba 15Ba 11Ba 98Aa 99Aa 99Aa 99Aa 98Aa 98Aa 98Aa 99Aa 98Aa

L13 13Ba 9Ba 20Ba 99Aa 100Aa 99Aa 98Aa 99Aa 100Aa 99Aa 100Aa 99Aa

L14 14Ba 13Ba 9Ba 99Aa 98Aa 99Aa 99Aa 98Aa 99Aa 98Aa 100Aa 98Aa

L15 17Ba 16Ba 13Ba 93Ba 95Ba 92Ba 94Ba 96Ba 94Ba 94Ba 95Ba 91Ba

C.V.

(%) 35,34 2,37 2,08 2,08

Letras maiúsculas: comparações entre médias dentro de cada coluna; letras minúsculas, comparações dentro de cada linha, separadamente para cada teste conduzido (Teste de Tukey,p≤ 0,05)

Os teores de água das sementes no início das avaliações e após os testes de envelhecimento acelerado tradicional e com solução saturada de NaCl à 41 ºC durante 96, 120 e 144 horas encontram-se na Tabela 8. Inicialmente, as sementes apresentaram valores entre 8,5 a 10,6%, 8,0 a 8,8% e 8,1 a 9,9%, respectivamente para cada época. Após o envelhecimento acelerado tradicional os teores de água situaram-se entre 23,3 a 24,3% na primeira, 22,6 a 25,0% na segunda e 21,4 a 23,4% na terceira época de avaliação. É importante ressaltar que esses valores foram superiores aos obtidos após o envelhecimento acelerado com solução saturada de NaCl, em todas as épocas nos diferentes períodos de exposição das sementes. Essas informações podem ser relacionadas ao desempenho dos lotes nos testes; quando submetidas a situações de estresses, com alto teor de água nas sementes associada à alta temperatura (41 ºC), a intensidade de deterioração foi maior. Por outro lado, em condições adversas com alta temperatura (41 ºC), mas teor de água das sementes em torno de 10,7 a 12,3%, a intensidade de deterioração foi menor e a germinação menos influenciada.

Tabela 8 – Teor de água (%) antes do início das avaliações (GU Inicial) e depois dos testes de envelhecimento acelerado tradicional (GU EATrad.) e com solução saturada de NaCl durante 96 horas (GU EASS96h), 120 horas (GU EASS120 h) e 144 horas (GU EASS144h) de sete lotes de sementes de milho do Híbrido 2B604PW (Híbrido 2)

Híbrido 2 Lotes

GU Inicial GU EATrad GU EASS96h

---%--- Época 1 Época 2 Época 3 Época 1 Época 2 Época 3 Época 1 Época 2 Época 3

L8 8,5 8,4 8,6 23,3 24,2 22,6 10,7 11,1 11,5 L9 10,6 8,8 9,9 24,0 23,9 23,4 11,1 11,3 11,3 L10 9,8 8,5 8,1 23,8 25,0 23,3 11,2 11,1 11,4 L12 9,2 8,2 8,2 23,7 23,5 23,0 11,1 11,0 11,3 L13 8,7 8,6 8,2 24,2 23,8 21,4 11,2 11,7 12,0 L14 9,3 8,2 8,3 24,3 22,6 23,3 11,2 11,2 11,6 L15 8,7 8,0 8,5 22,9 22,8 24,2 11,2 11,3 11,5 Lotes GU EASS120h GU EASS144h ---%--- Época 1 Época 2 Época 3 Época 1 Época 2 Época 3

L8 11,2 11,6 11,5 11,7 11,0 11,4 L9 11,9 11,2 12,0 12,3 11,8 11,3 L10 12,1 11,7 11,8 12,0 11,6 11,5 L12 11,3 11,6 11,9 11,5 11,8 11,6 L13 11,3 11,2 11,2 11,3 11,4 11,6 L14 11,2 11,5 11,6 11,5 11,2 11,2 L15 11,7 11,4 11,3 11,5 11,7 11,4

Em relação aos testes que avaliaram a emergência de plântulas, constatou-se que a os lotes apresentaram comportamento pouco influenciado pelas condições ambientais

durante esse teste, revelando semelhança dos resultados com os obtidos no teste de germinação; no entanto, a porcentagem e a velocidade de emergência de plântulas foram diferentes entre as épocas. As semeaduras da primeira, segunda e terceira épocas foram realizadas no dia 12 de fevereiro, 07 de abril e 09 de junho de 2014, respectivamente e as variáveis climáticas encontram-se na Figura 7 (ESALQ, 2014). Na terceira época de avaliação, a temperatura média durante a condução do teste (inferior a 21,4 ºC), atingiu níveis inferiores aos mais favoráveis à germinação e desenvolvimento inicial das plântulas de milho (25 a 30 ºC). Em consequência da redução da temperatura, a velocidade de germinação foi reduzida, mas não houve interferência na porcentagem de emergência das plântulas, visto que os resultados foram semelhantes aos do teste de germinação e o comportamento dos lotes foi semelhante.

As análises da variância dos dados obtidos no SVIS® e no Vigor-S revelaram diferenças significativas para os efeitos da interação lotes x épocas, para a maioria dos parâmetros analisados nos dois sistemas, ou seja: no SVIS® aos dois dias de germinação, para índice de vigor, uniformidade e no comprimento de plântulas; no SVIS®, aos três dias de germinação, para índice de vigor e comprimento de plântulas e no Vigor-S, para o índice de vigor, uniformidade e comprimento de plântulas. Os efeitos de épocas foram significativos para uniformidade no SVIS® aos três dias de germinação e os efeitos de lotes não foram constatados para esses parâmetros acima avaliados.

As médias obtidas na análise computadorizada de imagens de plântulas aos dois e três dias de germinação utilizando o SVIS® e o Vigor-Ssão apresentadas na Tabela 9. As informações fornecidas pelo índice de vigor e comprimento de plântulas, no SVIS® aos dois dias de germinação, foram semelhantes em duas das três épocas de avaliação, na identificação do lote mais vigoroso (lote 14). Entretanto, para os lotes menos vigorosos, os resultados foram divergentes entre as épocas e parâmetros avaliados; o lote 12, por exemplo, pelo índice de vigor na primeira época foi o menos vigoroso, diferentemente dos resultados da segunda e terceira épocas. Os índices de uniformidade identificaram que o lote 8 foi constituído por plântulas com desenvolvimento uniformes, em três épocas de avaliação.

Em relação aos resultados obtidos no SVIS® aos três dias de germinação, verificou-se plena concordância dos índices de vigor, uniformidade e comprimento de plântulas na identificação do lote mais vigoroso (lote 8), nas três épocas de avaliação. Constatou-se que o índice de vigor e a uniformidade de desenvolvimento de plântulas em uma das épocas e o comprimento de plântulas em duas das épocas, foram compatíveis com os

resultados obtidos aos dois dias de germinação, identificando o lote 8 como mais vigoroso e maior uniformidade de plântulas em relação aos outros lotes.

A maior confiabilidade dos resultados dos testes de comprimento de plântulas foi constatada aos três dias de germinação, mediante maior desenvolvimento das plântulas, verificado pelo maior comprimento de plântulas aos três dias (acréscimo na média de 7,92 cm) e maior coerência com os resultados, para o lote mais vigoroso, com os testes de envelhecimento acelerado com solução saturada de NaCl, em relação aos dois dias de germinação. Além disso, a análise SVIS® aos dois dias de germinação forneceu resultados divergentes nas três épocas de avaliação, com informações referentes ao vigor dos lotes que, aos três dias, não prevaleceram, sendo assim, considerado um período de tempo insuficiente para obtenção de resultados seguros.

Por outro lado, Mondo, Dias e McDonald (2011) avaliaram a viabilidade de se utilizar plântulas de milho aos dois e três dias de germinação no SVIS®; os resultados aos dois dias foram semelhantes aos três dias de germinação e coerentes com os testes de envelhecimento acelerado e frio. Concluíram que a análise efetuada aos dois dias foi suficiente para fornecer informações sobre a vigor dos lotes, diferentemente do obtido nessa pesquisa.

As informações obtidas com a utilização do Vigor-S aos três dias de germinação foram compatíveis entre si em duas das três épocas de avaliação, permitindo identificar níveis de vigor dos lotes. Os índices de vigor e comprimento de plântulas identificaram os lotes 8 e 12 como os mais vigorosos, sendo estes, identificados como dois dos seis mais vigorosos no teste de envelhecimento acelerado com solução saturada de NaCl. Verificou-se também, com o Vigor-S concordância entre os resultados dos índices de vigor e comprimento de plântulas para a identificação do lote mais vigoroso (lote 8) em relação aos obtidos no SVIS® aos três dias de germinação. No entanto, os resultados obtidos com os índices de uniformidade de desenvolvimento de plântulas, foram divergentes nas três épocas de avaliação, mesmo que, calculados da mesma maneira em ambos os sistemas. Isso pode ser atribuído à característica inerente do Vigor-S, em que a aquisição das imagens é realizada com maior precisão devida a maior resolução (300 dpi), diferentemente das imagens no SVIS® (100 dpi), refletindo assim, nos resultados da avaliação.

Na primeira época de avaliação, o índice de vigor e o comprimento de plântulas no Vigor-S proporcionaram resultados semelhantes comparativamente ao SVIS®; na segunda e terceira época, a concordância das informações foi verificada na identificação do lote mais vigoroso (lote 8). Observou-se maior distinção significativa resultante da análise de

comprimento de plântulas em ambos os sistemas na segunda e terceira época de avaliação. Estes resultados concordaram com Nakagawa (1999) em que o teste de comprimento de plântulas ou de suas partes é considerado eficiente para detectar diferentes níveis do vigor de sementes de várias espécies. Além disso, a análise de imagens permitiu a redução da subjetividade das análises baseadas na observação visual do analista, contribuindo significativamente para padronização dessa metodologia (MARCOS-FILHO; KIKUTI; LIMA, 2009).

A utilização do Vigor-S proporcionou resultados com tendências semelhantes ao SVIS®, onde ambos os sistemas com imagens aos três dias de germinação identificaram diferenças significativas no potencial fisiológico dos lotes. Ressalta-se que, o Vigor-S mesmo em fase de desenvolvimento, foi sensível para detectar diferenças no vigor dos lotes, embora apenas para os mais vigorosos, constituindo uma alternativa promissora, principalmente por permitir avaliação mais precisa, e redução da interferência do analista, que dentre outros, são argumentos para serem aceitos pela comunidade de análise de sementes (McDONALD, 1975; HAMPTON, 1993; MARCOS-FILHO, 1998).

Outro propósito, inserido no Vigor-S para maior aproveitamento dos resultados obtidos da mesma avaliação, foi proporcionar, automaticamente, a obtenção de informações referentes à parte aérea e o sistema radicular separadamente para cada plântula, sem a necessidade de interferir na análise realizada pelo sistema. Além disso, os resultados das análises das imagens com os respectivos valores dos índices de vigor, uniformidade e comprimento das plântulas, podem ser exportados em extensões de Excel e em pdf, permitindo melhor organização das informações obtidas e facilidade para posterior interpretação dos resultados pelo analista de sementes.

Diante da maior precisão, obtenção informações sobre o vigor das plântulas às partes específicas (parte aérea, sistema radicular e comprimento total de plântulas), redução do período de tempo da análise e da interferência humana, destaca-se o custo reduzido da aquisição do sistema Vigor-S; que constitui-se de um dos fatores primordiais para inserção nos laboratórios de controle de qualidade de sementes.

O Vigor-S, em desenvolvimento pela Universidade de São Paulo (USP/ESALQ) e a EMBRAPA/Instrumentação Agropecuária (CNPDIA), foi projetado com o intuito de permitir maior difusão aos analistas de sementes e possibilidade de atualizações do sistema. Isto reflete diretamente na redução do custo de aquisição, que apresenta seu valor diluído, em função dos benefícios proporcionados pelo sistema na avaliação do vigor das sementes. Ressalta-se principalmente, a maior precisão da análise, a qual implica em maior

segurança dos resultados obtidos e pela redução do tempo, mediante digitalização das plântulas diretamente sobre o papel de germinação (Germitest) de coloração azul, diferentemente do SVIS®, cujo sistema, precisa do contraste da cartolina de coloração preta para aquisição das imagens das plântulas e não permite atualização do sistema.

Diante dos resultados obtidos pelo conjunto dos testes de germinação e vigor (primeira contagem de germinação, frio, porcentagem de emergência de plântulas e procedimentos da análise computadorizada de imagens de plântulas), verificou-se que os lotes de sementes do Híbrido 2 apresentaram alto potencial fisiológico, com diferenças estreitas de vigor, ainda que, realizado também o envelhecimento artificial para composição dos lotes. A utilização do Vigor-S para análise de vigor de sementes, com base no desempenho de plântulas, seguiu a mesma tendência dos resultados proporcionados pelo SVIS® aos três dias de germinação, constituindo-se uma alternativa promissora para avaliação do vigor de sementes de milho.

Tabela 9 - Valores médios referentes ao índice de vigor (IV), índice de uniformidade (IU), comprimento de plântulas (Compr. - cm) analisados pelo SVIS® _{aos dois e três} dias de germinação e Vigor-S aos três dias de germinação de sete lotes de sementes de milho do Híbrido 2B604PW (Híbrido 2), em três épocas de avaliações

Lotes SVIS

® _{2 DIAS}

IV IU Comp. - cm

Época 1 Época 2 Época 3 Época 1 Época 2 Época 3 Época 1 Época 2 Época 3

L8 866Ba 642Cb 643Ab 890Aa 891Aa 862Aa 2,14Ba 1,32Ab 1,36Ab

L9 823BCa 567ABb 555ABb 891Aa 864Aa 860Aa 2,00Ba 1,08ABb 1,02BCDb

L10 782BCa 504Bb 513BCb 880Aa 854Aa 853ABa 1,88Ba 0,84Bb 0,92CDb

L12 771Ca 605Ab 626Ab 884Aa 857Aa 867Aa 1,82Ba 1,18Ab 1,28ABb

L13 961Aa 592ABb 462Cc 902Aa 865Ab 813Bc 2,50Aa 1,18Ab 0,70Dc

L14 961Aa 655Ab 585ABb 903Aa 870Aab 861Ab 2,50Aa 1,38Ab 1,16ABCb

L15 857BCa 603Ab 561ABb 863Aa 858Aab 829ABb 2,02Ba 1,22Ab 1,06ABCb

C.V.(%) 6,95 2,51 11,80

Lotes _IV SVIS_IU ® 3 DIAS _{Comp. - cm}

Época 1 Época 2 Época 3 Época 1 Época 2 Época 3 Época 1 Época 2 Época 3

L8 767Aa 823Aa 681Ab 910Aa 894Ab 894Ab 10,78Aa 11,98Aa 8,88Ab

L9 750Aa 770ABa 615ABCb 913Aa 891Ab 889Ab 10,38Aa 10,84ABa 7,52ABCb

L10 743Aa 710BCa 596BCb 902ABa 889ABb 890ABb 10,10Aa 9,64BCa 7,16BCb

L12 760Aa 681Cb 660ABb 901ABa 898ABb 893ABb 10,56Aa 8,96Cb 8,56ABb

L13 762Aa 742BCa 540Cb 899ABa 893ABb 872ABb 10,52Aa 10,14BCa 5,98Cb

L14 700Aa 726BCa 619ABCb 896ABa 888ABb 892ABb 9,30Aa 10,02BCa 7,66ABCb

L15 704Ab 775ABa 611ABCc 887Ba 878Bb 877Bb 9,18Ab 10,84ABa 7,90ABb

C.V.(%) 6,02 1,73* 9,56

Lotes _IV Vigor-S 3 DIAS _{IU Comp. - cm}

Época 1 Época 2 Época 3 Época 1 Época 2 Época 3 Época 1 Época 2 Época 3

L8 727Aab 759Aa 663Ab 740Aa 613Bb 731Aa 11,22Ab 13,22Aa 9,90Ab

L9 723Aa 656Aab 603ABb 787Aa 613Bb 733Aa 11,02Aa 10,82BCa 8,56ABb

L10 727Aa 530Bb 598ABb 743Aa 471Cb 730Aa 11,50Aa 8,94Cb 8,52ABb

L12 739Aa 659Aab 654Ab 719Aa 696ABa 754Aa 12,12Aa 10,18BCb 9,68Ab

L13 740Aa 749Aa 515Bb 766Aa 752Aa 682Aa 11,62Aa 12,12ABa 6,98Bb

L14 710Aa 718Aa 615ABb 758Aa 667ABa 735Aa 10,92Aa 11,82ABa 8,88ABb

L15 670Aa 746Aa 567ABb 717Aa 673ABa 645Aa 10,36Ab 12,34ABa 8,50ABc

C.V.(%) 8,35 8,79 10,95

Letras maiúsculas: comparações entre médias dentro de cada coluna; letras minúsculas, comparações dentro de cada linha, separadamente para cada teste conduzido (Teste de Tukey, p ≤ 0,05)