Para realizar as observações, uma colônia de Melipona bicolor foi alojada em uma colméia de observação e colocada dentro de uma caixa de incubação, com temperatura controlada a 27±3 oC. As operárias da colônia podiam forragear livremente através de um tubo plástico conectado com o lado de fora do laboratório. Porém, para assegurar que o alimento estivesse presente em abundância, uma mistura de pólen e mel de Apis foi fornecida diariamente às abelhas. Tratava-se de uma colônia forte, com mais de 500 operárias.
Três meses antes das observações começarem, a colônia foi transformada artificialmente em poligínica, através da adição de duas rainhas fisogástricas marcadas no tórax (B e C), enquanto a própria rainha da colônia (A), permaneceu não marcada. Um estudo prévio sobre reconhecimento em M. bicolor, demonstrou que as operárias não discriminam entre rainhas de diferentes graus de parentesco, ou mesmo entre rainhas não aparentadas
C, ambas colocaram ovos regularmente. Portanto, os descendentes de cada rainha estavam presentes quando nossas observações foram iniciadas.
Foram realizadas observações do Processo de Aprovisionamento e Postura (POP, do inglês Provisioning and Oviposition Process), de 14 de outubro até 3 de novembro de 2000. Filmagens contínuas em vídeo foram feitas para coletar informação sobre todos os POP que ocorreram no favo. Estes registros foram feitos dentro de uma “câmara escura portátil”, (composta de placas de madeira coladas formando um quadrado, com um dos lados com uma cortina de feltro preto), iluminada com luz vermelha, que não perturba as abelhas notoriamente.
A rainha C desapareceu 260 h depois de começarmos a filmagem e foi encontrada viva no final das observações. Três semanas depois de encerradas estas observações, a rainha B não apareceu mais no favo. Devido ao desaparecimento da primeira rainha, o conjunto de dados foi dividido e analisado em dois períodos baseado no número de rainhas colocando ovos, ou seja, três ou duas. Estes períodos serão chamados aqui de PERÍODO I e PERÍODO II, respectivamente.
No começo das observações, as idades das rainhas eram: 176 dias para a rainha A, 165 dias para a rainha B e 222 dias para a rainha C. A diferença de idade entre as rainhas variou apenas de 11 a 55 dias (Tabela II).
Para as descrições e análise, os seguintes dados foram obtidos: o Identificação da(s) rainha(s) presente(s) em cada POP
o Duração do POP, do momento da primeira descarga de alimento até a chegada de uma operculadora. O impacto do número de rainhas também foi considerado. A fase de pré-aprovisionamento não foi considerada, porque é difícil definir objetivamente o momento em que ela começa. o Número de ovos tróficos consumidos por rainha, considerando se ela
estava sozinha ou participando do POP com outra(s) rainha(s) (Velthuis, et
o Número de ovos postos pela rainha, considerando se ela estava sozinha ou participando do POP com outra(s) rainha(s) (Velthuis, et al., em prep).
o Duração da postura efetiva ou propriamente dita pela rainha
o Intervalo de tempo entre o momento em que rainha deixa a célula após a postura e a chegada da primeira operculadora, que é o período em que o ovo ficou exposto.
Análises estatísticas incluíram o teste de Wilcoxon, o teste pareado, o teste de Cochran, o teste de χ2, a correlação de Spearman e o teste U de médias de Mann-Whitney (Sokal & Rohlf, 1997; Green, et al., 2000).
RESULTADOS
Considerações gerais
Um total de 508 POP foi registrado em 496 h de filmagens contínuas. Devido a alguns problemas durante a filmagem, algumas partes dos filmes não foram registradas, como por exemplo o começo e o final de alguns POP. Portanto, o número de dados utilizado e apresentado nas figuras e tabelas, foi diferente do número total de POP registrados, e variou dependendo do parâmetro analisado.
A rainha C parou de pôr ovos depois de 260 h de observação; por esta razão dividimos os dados em dois períodos: o desaparecimento da rainha C do favo marcou o fim do que chamamos de PERÍODO I (n=241 POP). O PERÍODO II, portanto, incluiu apenas a participação das rainhas A e B (n=237 POP). Para facilitar a leitura, a maioria dos resultados numérica está apresentada na Tabela II.
Duração dos processos de aprovisionamento e postura (POP)
Os POP foram ora realizados por uma única rainha, ou por combinações de 2 ou 3 rainhas simultaneamente. Para cada um dos períodos, a duração média dos POP (PERÍODO I, n=213; PERÍODO II, n=235) com todas as combinações de rainhas são mostrados na Tabela I.
TABELA I:DURAÇÃO MÉDIA (MIN) DO POP E SIGNIFICÂNCIA (p, TESTE DE MANN-WHITNEY)
COM A PRESENÇA DE DIFERENTES COMBINAÇÕES DE RAINHAS de M. BICOLOR (N= NÚMERO DE
POP).
PERÍODO I PERÍODO II
A-I B-I C-I AB-I AC-I BC-I ABC-I A-II B-II AB-II
13±7 (n=33) 10±5 (n=36) 10±5 (n=6) 11±6 (n=58) 12±5 (n=24) 9±4 (n=15) 12±4 (n=41) 13±5 (n=95) 13±6 (n=54) 12±6 (n=86) B-I P>0,005 P =0,005 AB-I P>0,005
O PERÍODO I, com as três rainhas, foi em média mais curto que o PERÍODO II, quando apenas duas rainhas permaneceram (PERÍODO I: 11±5 min, n=213; PERÍODO II: 13±6 min, n=235; teste Mann-Whitney, p<0,005). Dentro de
cada período, as durações das diversas combinações não foram significativamente diferentes (sete combinações dentro do PERÍODO I, p=0,2; 3 combinações dentro do PERÍODO II, p=0,2; teste de Kruskal Wallis). Entretanto,
comparando todas as combinações dentro de ambos os períodos, produziram uma diferença significativa (dez combinações dentro de ambos os PERÍODOS I e II, p<0,005, Kruskal Wallis). Os testes U, usados como Pós Hoc com um nível de significância de p<0,005, revelaram que no período II, quando a rainha A estava sozinha, a duração do POP foi significativamente mais longa, quando comparada com a rainha B, e a combinação AB do período I (Tabela I).
Também parece que quando sozinha, a rainha B aumentou a duração do POP, quando comparada a seu próprio desempenho, no período I (Tabela I).
Portanto, a duração do POP (n=448) aumentou com a saída da primeira rainha (Fig. 01); enquanto que a rainha A conservou seu ritmo, a rainha B aumentou significativamente a duração dos POP em que ela participou.
FIGURA 01:DURAÇÃO DO PROCESSO
DE POSTURA E APROVISIONAMENTO
(POP) EM M. BICOLOR, NOS DOIS
PERÍODOS DE OBSERVAÇÃO (N= 448
POP).
Participação no POP
Durante o PERÍODO I, com as três rainhas com participação ativa nos POP (n=241), o teste de χ2 provou que o número de POP em que a rainha C participou (n=94) foi significativamente menor que das rainhas A e B (n=175 e n=168 respectivamente, Fig. 02). Numa dada célula, os encontros da rainha C com qualquer uma ou ambas outras rainhas foram muito freqüentes, e a probabilidade da rainha C ficar sozinha foi somente de 3%, enquanto que para as rainhas A e B esta probabilidade foi de 15% e 18%, respectivamente. Durante o PERÍODO II (n=267), quando a rainha C parou a postura, a porcentagem de POP em que as rainhas A e B ficaram sozinhas em uma célula aumentou para 41% e 24%, respectivamente. Mas enquanto a probabilidade para a rainha A estar presente em um POP aumentou, proporcionalmente ao número de POP do PERÍODO I, a rainha B diminuiu sua participação (Fig. 02, Tabela II).
0 10 20 30 40 50 60 15 0 45 0 75 0 1050 1350 1650 1950 2250
Duração do POP (seg)
F req üê nc ia r e la ti v a ( % ) PERÍODO I PERÍODO II 0 10 20 30 40 50 60 15 0 45 0 75 0 1050 1350 1650 1950 2250
Duração do POP (seg)
F req üê nc ia r e la ti v a ( % ) PERÍODO I PERÍODO II