62 INTRODUÇÃO
A genitália dos machos de animais é frequentemente composta por conjuntos de estruturas que podem formar uma unidade funcional integrada (House e Simmons 2007). Em insetos, algumas características das genitálias dos machos, como posição, morfologia e movimentação sugerem que diferentes estruturas desempenham papéis distintos nas interações sexuais (Eberhard 1985). Diferentes componentes do edeago foram associados, por exemplo, às funções sexuais espermáticas ofensiva (habilidade de ganhar a precedência contra o esperma de rivais; House e Simmons 2003) e defensiva (habilidade de resistir a tentativas rivais por precedência espermática; Arnqvist e Danielsson 1999).
Em machos de abelhas, o edeago geralmente consiste em um pênis (o órgão fálico ou copulador) e clásperes penianos ligados à câmara genital no nono segmento metassomal (Snodgrass 1935; Michener 1944). Em machos de Apis (Snodgrass 1956) e da maioria dos grandes grupos de abelhas (Roig-Alsina 1993), o duto ejaculador, ao longo do qual os espermatozoides se movem dos testículos ao exterior da cápsula genital, não se encontra em posição terminal e o gonóporo é ligado ao ápice do edeago por um saco membranoso, dito endofalo (endophallus). Durante a cópula o endofalo é evertido e age funcionalmente como órgão copulador, muitas vezes chamado de pênis, que liberará o fluido espermático no duto da câmara genital da fêmea (Snodgrass 1935; 1956). No interior da fêmea, o endofalo pode assumir a forma de um saco ou de um longo tubo com diferentes partes funcionais e apêndices. Além disso, sua parede pode ser lisa ou dotada de estruturas esclerotizadas, espículas, espinhos e lobos que se tornam externos durante a expansão do órgão (Snodgrass 1935).
63 A presença de estruturas eversíveis na genitália de machos de insetos é conhecida para várias ordens, como Coleoptera, Hymenoptera, Lepidoptera, Orthoptera, Odonata e Psocoptera (Tab.S1 – Material suplementar). Em Hymenoptera, a caracterização do endofalo foi realizada, para machos de diferentes espécies de Apis (Koeniger et al. 1991) e para 112 espécies de Apoidea (Roig-Alsina 1993).
Devido à sua enorme diversidade morfológica e funcional entre os grupos, a morfologia do endofalo tem sido um valioso caractere em estudos taxonômicos (e.g. Hunting 2013; Lee e Bezdek 2014; Engel 2009) e de seleção sexual (e.g. Jałoszynski et al. 2014) em insetos. Além disso, sua eversão de modo artificial é obrigatória na prática de inseminação artificial de fêmeas de Apis (Gençer et al. 2014).
Nos machos de Apis, a eversão natural do endofalo é produzida por contração de músculos abdominais e pressão da hemolinfa (Woyke 2008) e a eversão artificial ocorre através da pressão manual do abdômen. Em abelhas de outros gêneros, é possível everter o endofalo por pressão interna no abdômen através da injeção de água (Roig- Alsina 1993). Neste caso, porém, assim que a pressão hidráulica é reduzida, o endofalo retorna parcial ou totalmente à sua forma anterior, dificultando a sua caracterização.
Neste estudo apresentamos um levantamento de técnicas já utilizadas para eversão do endofalo em abelhas e outros insetos e propomos o aprimoramento de uma técnica para eversão que possibilite a manutenção da forma do endofalo de abelhas solitárias artificialmente evertido.
Através de uma busca bibliográfica para os anos de 1945 a 2015, encontramos 73 artigos na base de dados Scopus e 107 na base de dados ISI Web of Knowledge que citaram o termo “endophallus” em pelo menos um campo de pesquisa bibliográfica. Destes foram selecionados os que que continham a descrição da técnica (47 artigos - Material Suplementar).
64 Para a ordem Hymenoptera foram encontrados doze trabalhos, cujo principal objetivo foi a análise de substâncias ejetadas pelo endofalo. A técnica de eversão de endofalo mais utilizada para abelhas de Apis consiste na estimulação manual dos machos, através de uma pressão aplicada na cabeça e tórax com os dedos, para eversão parcial do endofalo e, em seguida, na suave compressão do abdômen até a total eversão do endofalo (Laidlaw 1977). A técnica proposta por Roig-Alsina (1993) para outros gêneros de Apoidea consiste em se injetar água destilada na base do metassoma, pressionando-a através da seringa até que a eversão do endofalo ocorra. Após sua expansão, contudo, o endofalo permanece por apenas alguns segundos expandido, dificultando sua descrição e comparação entre indivíduos. Embora haja um crescente número de publicações envolvendo a descrição do endofalo, apenas o estudo de Roig- Alsina o faz para abelhas que não Apis. Esta lacuna no conhecimento pode ser devido à dificuldade de eversão e, principalmente, de fixação desta estrutura.
65 DESCRIÇÃO DA TÉCNICA
A expansão do endofalo foi realizada em espécimes recém-coletados, mortos por congelamento, em freezer, a -18°C. Em uma adaptação do método proposto por Roig- Alsina (1993), para simular a pressão da hemolinfa durante expansão do endofalo, com uso de uma seringa de insulina, injetamos uma solução 1% de agarose de baixo ponto de fusão (Fisher Scientific, USA), a ~ 65°C, através da abertura basal do primeiro tergo metassomal. Para produzir a solução, a agarose foi diluída em água destilada e aquecida ao microondas por 30s em potência máxima, até a completa homogeneização da mistura. Para que a solução ao ferver não transborde do recipiente, são necessárias pausas de 1-2s durante o aquecimento da solução. Para abastecer a seringa com a densa solução de agarose, é necessário remover a agulha da seringa, repondo-a logo que a seringa esteja repleta. A solução restante pode ser armazenada em refrigerador e reutilizada para preparações futuras.
Poucos segundos após a sua expansão, por efeito da gelificação da solução de agarose, os endofalos se mantiveram em sua forma expandida por até três dias, nos animais mantidos sob refrigeração (~ 12°C) (Figura 16). Os espécimes mantidos assim foram manipulados sem que as paredes do endofalo se colapsassem, o que permite a descrição de suas estruturas e caracterização morfométrica, bem como da textura externa de sua parede e a obtenção de microscopia eletrônica de varredura de bancada (Figura 16 A-D).
O emprego da técnica aqui apresentada deve auxiliar na obtenção de caracteres importantes no esclarecimento das relações filogenéticas em abelhas e bem como em estudos de morfologia funcional e do comportamento de acasalamento, fundamentais na elucidação do papel da seleção sexual na evolução das genitálias.
66 REFERÊNCIAS
Arnqvist, G., Danielsson, I. (1999) Copulatory behavior, genital morphology, and male fertilization success in water striders. Evolution (NY) 53, 147–156
Eberhard, W.G. (1985) Sexual selection and animal genitalia. Harvard University Press, Cambridge, MA.
Engel, M. (2009) Notes on the augochlorine bee genus Chlerogas (Hymenoptera: Halictidae). Caldasia 31, 449–457
Gençer, H. V., Kahya, Y., Woyke, J. (2014) Why the viability of spermatozoa diminishes in the honeybee (Apis mellifera) within short time during natural mating and preparation for instrumental insemination. Apidologie 45, 757–770. doi: 10.1007/s13592-014-0295-0
House, C. M., Simmons, L. W. (2003) Genital morphology and fertilization success in the dung beetle Onthophagus taurus: an example of sexually selected male genitalia. Proc. Biol. Sci. 270, 447–55. doi: 10.1098/rspb.2002.2266
House, C. M., Simmons, L. W. (2007) No evidence for condition‐dependent expression of male genitalia in the dung beetle Onthophagus taurus. J. Evol. Biol. 20, 1322–32. doi: 10.1111/j.1420-9101.2007.01346.x
Hunting, W. M. (2013) A taxonomic revision of the Cymindis (Pinacodera) limbata species group (Coleoptera, Carabidae, Lebiini), including description of a new species from Florida, U.S.A. Zookeys 73, 1–73. doi: 10.3897/zookeys.259.2970 Jałoszyński, P., Matsumura, Y., Beutel R. G. (2014) Evolution of a giant intromittent
organ in Scydmaeninae (Coleoptera: Staphylinidae): Functional morphology of the male postabdomen in Mastigini. Arthropod. Struct. Dev. 44:77–98. doi: 10.1016/j.asd.2014.09.006
67 Koeniger, G., Koeniger, N., Mardan, M., Otis, G., Wongsiri, S. (1991) Comparative
anatomy of male genital organs in the genus Apis. Apidologie 22, 539–552 Laidlaw, H. (1977) Instrumental insemination of honey bee queens. Dadant and Sons;
Hamilton, IL, USA.
Lee, C., Bezdek, J. (2014) Revision of the genus Paridea Baly, 1886 from Taiwan (Coleoptera, Chrysomelidae, Galerucinae). Zookeys 125, 83–125. doi: 10.3897/zookeys.405.7458
Michener, C. D. (1944). Comparative external morphology, phylogeny, and a classification of the bees (Hymenoptera). Bull. Am. Mus. Nat. Hist. 82 (6), 151- 326.
Roig‐Alsina, A. (1993) The evolution of the apoid endophallus, its phylogenetic implications, and functional significance of the genital capsule (Hymenoptera, Apoidea). Bolletino di Zool. 60, 169–183. doi: 10.1080/11250009309355807 Snodgrass, R. E. (1935) Principles of insect morphology. McGraw Hill, Ithaca, 667pp. Snodgrass, R. E. (1956) Anatomy of the honey bee. Cornell University Press. Ithaca,
334 pp.
Woyke, J. (2008) Why the eversion of the endophallus of honey bee drone stops at the partly everted stage and significance of this. Apidologie 39, 627–636.
68 Figura 16. Micrografia da genitália de um macho de Ptilothix fructifera (Apidae), com endofalo expandido artificialmente por injeção de agarose. (A) vista superior ; (B) vista lateral do ápice; (C) visão lateral do endofalo; (D) superfície do endofalo. Gf= Gonóstilo ou Gonofórceps (?), PV= Valvas do pênis, Gc= Gonocoxitos, End = Endofalo; G = Gonóporo.
69 MATERIAL SUPLEMENTAR
Tabela S2. Técnicas empregadas para eversão do endofalo e finalidades da eversão em insetos. Ordem
Família Técnica Finalidade do estudo Refer.
COLEOPTERA
CARABIDAE
Dissecação da genitália Taxonômico 7, 33 Eversão com injeção de
pasta de dente Taxonômico 37
CERAMBYCIDAE
Dissecação de casal Comportamental 21 Eversão pelo método de
Rubenyan, 2002 Taxonômico 18
CHIRONIDAE
Dissecação da genitália Taxonômico 19 CHRYSOMELIDAE
Dissecação da genitália Taxonômico 27, 26 Dissecação de casal Descrição morfológica 13 Dissecação de casal Comportamental 15 Dissecação de casal Descrição da técnica de eversão 28 CICINDELIDAE
Dissecação da genitália Taxonômico 38 CURCULIONOIDEA
Dissecação da genitália Taxonômico 41, 11 Dissecação de casal Comportamental 14 Eversão e fixação com o
gel viscoso K-Y. Descrição da técnica de eversão 10 RUTELIDAE
Dissecação da genitália Taxonômico 29 RABAEIDAE
Dissecação da genitália Taxonômico 34, 8 STAPHYLINIDAE
Dissecação da casal Comportamental 22 HYMENOPTERA
APIDAE
Dissecação da genitália Descrição morfológica 31 Dissecação de casal Descrição morfológica 30 Estimulação manual, através de pressão do abdômen Análise de substâncias ejetadas 43, 24 Análise do sêmen 42, 40 3, 23, Inseminação artificial 16 Taxonômico 25 Estimulação manual, através de pressão do abdômen Eversão e fixação com
Análise do sêmen Descrição da técnica de eversão 39 Este estudo
70 (1) Aldrete e Mockford 2011; (2) Aldrete et al. 2013; (3) Baer et al. 2012; (4) Bentos-Pereira & Listre 2005; (5) Bueno-Soria 2010; (6) Carbonell 2008; (7) Casale 2011; (8) Coca-Albia e Robbins 2006; (9) Cordero 2010; (10) Dam 2014; (11) Davidian e Korotyaev 2012; (12) Domenico e Bentos-Pereira 2011; (13) Dungelhoef e Schmitt 2005; (14) Dungelhoef e Schmitt 2010; (15) Flowers e Eberhard 2006; (16) Gençer et al. 2014; (17) Holt e North 1970; (18) Hubweber e Schmitt 2010; (19) Huchet 2002; (20) Hünefeld et al. 2013; (21) Hunting 2013; (22) Jałoszynski et al. 2014; (23) King et al. 2011; (24) Koeniger et al. 1990; (25) Koeniger et al. 1991; (26) Lee e Bezdek 2014; (27) Lee e Staines 2010; (28) Matsumura e Yoshizawa 2010; (29) Montreuil 2010; (30) Moors e Billen 2007; (31) Moors et al. 2012; (32) Mutanen e Kaitala 2005; (33) Ortuño e Barranco 2013; (34) Pizzo 2011; (35) Rafael et al. 2008; (36) Roig-Alsina 1993; (37) Sasakawa et al. 2013; (38) Schule 2007; (39) Stürup et al. 2013; (40) Taylor et al. 2009; (41) Wang et al. 2011; (42) Wegener et al. 2012; (43) Woyke 2010; (44) Yoshizawa e Johnson 2006.
solução 1% de agarose ANDRENIDAE, HALICTIDAE,
MELITTIDAE, MEGACHILIDAE,
APIDAE, ANTHOPHORIDAE Pressão hidráulica Taxonômico 36
Ordem
Família Metodologia Finalidade do estudo Refer.
LEPIDOPTERA
Dissecação de casal Comportamental 9 Eversão mecânica e
fixação com álcool absoluto.
Descrição da técnica de
eversão 20
NOCTUIDAE
Dissecação de casal Comportamental 17 GEOMETRIDAE
Dissecação da genitália Taxonômico 32 ORTHOPTERA
Dissecação da genitália Taxonômico 12 PROSCOPIIDAE
Dissecação da genitália Taxonômico 4 ACRIDIDAE
Dissecação da genitália Taxonômico 6 PHTHIRAPTERA
Dissecação da genitália Descrição morfológica 44 PSOCOPTERA
LACHESILLIDAE Dissecação da genitália Taxonômico 1
PSOCODEA Dissecação da genitália Taxonômico 2
TRICHOPTERA
GLOSSOSOMATIDAE Dissecação da genitália Taxonômico 5
ZORAPTERA
71 REFERÊNCIAS
Aldrete, A., Mockford, E. (2011) A new species of Waoraniella (Psocodea : “Psocoptera”: Lachesillidae : Eolachesillinae) from the reserva florestal ducke , Amazonas, Brazil. Acta Zool. Mex. 27:123–127.
Aldrete, A., Obando, R., Carrejo, N. (2013) New genera of Lachesillidae (Psocodea: ’Psocoptera': Eolachesillinae: Graphocaeciliini) from Valle del Cauca, Colombia. Zootaxa 3647:555–566.
Baer, B., Zareie, R., Paynter, E., Poland, V., Millar, H. (2012) Seminal fluid proteins differ in abundance between genetic lineages of honeybees. J. Proteomics 75:5646–53. doi: 10.1016/j.jprot.2012.08.002
Bentos-Pereira, A., Listre, A. (2005) The Proscopiidae (Orthoptera, Eumastacoidea) family in Colombia. Caldasia 27:277–286.
Bueno-Soria, J. (2010) Some New Trichoptera (Glossosomatidae, Hydroptilidae, Hydropsychidae and Polycentropodidae) from Mexico. Proc. Entomol. Soc. Washingt. 112:22–31. doi: 10.4289/0013-8797-112.1.22
Carbonell, C. (2008) The genus Aleuas (Acrididae, Copiocerinae, Aleuasini). J. Orthoptera Res. 17:1–27.
Casale, A. (2011) Calleida desenderi, new species from Ecuador (Coleoptera, Carabidae, Lebiinae). Zookeys 54:47–54. doi: 10.3897/zookeys.100.1522
Coca-Abia, M., Robbins, P. (2006) Taxonomy and phylogeny of a new Central American beetle genus (Coleoptera: Scarabaeidae). Rev. Biol. Trop. 519–529. Cordero, C. (2010) On the function of cornuti, sclerotized structures of the endophallus
of Lepidoptera. Genetica 138:27–35. doi: 10.1007/s10709-009-9363-1
Dam, M. (2014) A Simple, Rapid Technique for the Inflation of the Endophallus, with Particular Focus on the Curculionoidea (Coleoptera). Coleopt. Bull. 68:263–268.
72 Davidian, G., Korotyaev, B. (2012) New data on the systematics, distribution and ecology of weevils of the Otiorhynchus morosus Fst. group (Coleoptera, Curculionidae). Ėntomologicheskoe Obozr 93:77–94. doi: 10.1134/S0013873813010120
Domenico, F., Bentos-Pereira, A. (2011) New synonyms and combinations in the family Proscopiidae (Orthoptera, Caelifera). J. Orthoptera Res. 20:61–73.
Düngelhoef, S., Schmitt, M. (2005) Functional morphology of copulation in Chrysomelidae-Criocerinae and Bruchidae (Insecta: Coleoptera). Bonn. Zool. Beitr. 54:201–208.
Düngelhoef, S., Schmitt, M. (2010) Genital feelers: the putative role of parameres and aedeagal sensilla in Coleoptera Phytophaga (Insecta). Genetica 138:45–57. doi: 10.1007/s10709-009-9404-9
Flowers, R. W., Eberhard, W. (2006) Fitting together: copulatory linking in some Neotropical Chrysomeloidea. Rev. Biol. 54:829–842.
Gençer, H. V., Kahya, Y., Woyke, J. (2014) Why the viability of spermatozoa diminishes in the honeybee (Apis mellifera) within short time during natural mating and preparation for instrumental insemination. Apidologie 45:757–770. doi: 10.1007/s13592-014-0295-0
Holt G., North D. (1970) Effects of gamma irradiation on the mechanisms of sperm transfer in Trichoplusia ni. J. Insect Physiol. 16:2211–2222
Hubweber, L., Schmitt, M. (2010) Differences in genitalia structure and function between subfamilies of longhorn beetles (Coleoptera: Cerambycidae). Genetica 138:37–43. doi: 10.1007/s10709-009-9403-x.
Huchet, J. (2002) Révision du genre Amphiceratodon Huchet, 2000 (Coleoptera: Scarabaeoidea: Chironidae). Bull. la Société Entomol. Fr. 107:61–78.
73 Hünefeld, F., Brehm, G., Pohl, H. (2013) A simple “hands‐off” apparatus to inflate concealed soft parts of the genitalia of small insect specimens. Microsc. Res. 262:258–262. doi: 10.1002/jemt.22161.
Hunting, W. M. (2013) A taxonomic revision of the Cymindis (Pinacodera) limbata species group (Coleoptera, Carabidae, Lebiini), including description of a new species from Florida, U.S.A. Zookeys 73:1–73. doi: 10.3897/zookeys.259.2970 Jałoszyński, P., Matsumura, Y., Beutel, R. G. (2014) Evolution of a giant intromittent
organ in Scydmaeninae (Coleoptera: Staphylinidae): Functional morphology of the male postabdomen in Mastigini. Arthropod Struct. Dev. 44:77–98. doi: 10.1016/j.asd.2014.09.006
King, M., Eubel, H., Millar, H., Baer, B. (2011) Proteins within the seminal fluid are crucial to keep sperm viable in the honeybee Apis mellifera. J. Insect. Physiol. 57:409–14. doi: 10.1016/j.jinsphys.2010.12.011
Koeniger, G., Wissel, M, Herth, W. (1990) Cornual secretion on the endophallus of the honeybee drone (Apis mellifera L). Apidologie 21:185–191.
Koeniger, G., Koeniger, N., Mardan, M., Otis, G., Wongsiri, S. (1991) Comparative anatomy of male genital organs in the genus Apis. Apidologie 22:539–552. Lee, C., Bezdek, J. (2014) Revision of the genus Paridea Baly, 1886 from Taiwan
(Coleoptera, Chrysomelidae, Galerucinae). Zookeys 125:83–125. doi: 10.3897/zookeys.405.7458
Lee, C., Staines, C. (2010) Monolepta ongi, a new species from Lanyu Island , with redescription of its allied species Monolepta longitarsoides Chûjô , 1938 (Coleoptera: Chrysomelidae: Galerucinae). Proc. Entomol. Soc. 112:530–540. doi: 10.4289/0013-8797.112.4.530
74 Matsumura, Y., Yoshizawa, K. (2010) Insertion and withdrawal of extremely elongated genitalia: a simple mechanism with a highly modified morphology in the leaf beetle, Lema coronata. Biol. J. Linn. Soc. 99:512–520.
Montreuil, O. (2010) Révision du genre Paradorodocia Machatschke, 1957 (Insecta, Coleoptera, Rutelidae, Adoretinae). Zoosystema 1957:87–99.
Moors, L., Billen, J. (2007) Morphology of the cervical lobe of the endophallus in Apis mellifera drones. Apidologie 38:579–583.
Moors, L., Koeniger, G., Billen, J. (2012) Ontogeny and morphology of the bulbus, part of the male reproductive organ in Apis mellifera carnica (Hymenoptera, Apidae). Apidologie 43:201–211. doi: 10.1007/s13592-011-0094-9.
Mutanen, M., Kaitala, A. (2006) Genital variation in a dimorphic moth Selenia tetralunaria (Lepidoptera, Geometridae). Biol. J. Linn. Soc. 87:297–307.
Ortuño, V., Barranco, P. (2013) Duvalius (Duvalius) lencinai Mateu & Ortuño, 2006 (Coleoptera, Carabidae, Trechini) una especie hipogea del sur de la península ibérica. Morfología, reubicación taxonómica. Anim. Biodivers. Conserv. 2:141– 152.
Pizzo, A., Mazzone, F., Rolando, A., Palestrini, C. (2011) Combination of geometric morphometric and genetic approaches applied to a debated taxonomical issue : the status of Onthophagus massai (Coleoptera, Scarabaeidae) as an endemic species vicarious to Onthophagus fracticornis in Sicily. Zoology 114:199–212. doi: 10.1016/j.zool.2011.03.003
Rafael, J. A., Godoi, F. S. P., Engel, M. S., Rafael, J. A., Nacional, I. (2008) A new species of Zorotypus from eastern Amazonia, Brazil. Trans. Kansas. Acad. Sci. 111:193–202.
75 Roig‐Alsina, A. (1993) The evolution of the apoid endophallus, its phylogenetic implications, and functional significance of the genital capsule (Hymenoptera, Apoidea). Bolletino di Zool. 60:169–183. doi: 10.1080/11250009309355807 Sasakawa, K., Kim, J., Kim, J., Kubota, K. (2013) Journal of Asia-Paci fi c Entomology
Notes on the ground beetle Pterostichus togyusanus (Coleoptera : Carabidae): Phylogenetic evidence for species status and new distribution record. J. Asia Pac. Entomol. 16:429–431. doi: 10.1016/j.aspen.2013.05.003
Schule, P. (2007) Revision of the genus Dromica. Part IV. Species closely related to Dromica albivittis (Coleoptera: Cicindelidae). African Invertebr. 48:233–244. Stürup, M., Baer-Imhoof, B., Nash, D. R., Boomsma, J. J., Baer, B. (2013) When every
sperm counts: factors affecting male fertility in the honeybee Apis mellifera. Behav. Ecol. 24:1192–1198. doi: 10.1093/beheco/art049
Taylor, M., Guzmán-Novoa, E., Morfin, N., Buhr, M. (2009) Improving viability of cryopreserved honey bee (Apis mellifera L.) sperm with selected diluents, cryoprotectants, and semen dilution ratios. Theriogenology 72:149–159. doi: 10.1016/j.theriogenology.2009.02.012
Wang, Z., Alonso-Zarazaga, M., Ren, L., Zhang, R. (2011) New subgenus and new species of Oriental Omophorus (Coleoptera, Curculionidae, Molytinae, Metatygini). Zookeys 59:41–59. doi: 10.3897/zookeys.85.973
Wegener, J., May, T., Knollmann, U., Kamp, G. (2012) In vivo validation of in vitro quality tests for cryopreserved honey bee semen. Cryobiology 65:126–131. doi: 10.1016/j.cryobiol.2012.04.010.
Woyke, J. (2010) Three substances ejected by Apis mellifera drones from everted endophallus and during natural matings with queen bees. Apidologie 41:613– 621.
76 Yoshizawa, K, Johnson, K. P. (2006) Morphology of male genitalia in lice and their relatives and phylogenetic implications. Syst. Entomol. 31:350–361. doi: 10.1111/j.1365-3
77 CONSIDERAÇÕES FINAIS
No presente estudo analisamos o comportamento reprodutivo em duas espécies de abelhas solitárias da família Andrenidae, Arhysosage cactorum e Anthrenoides micans. Arhysosage cactorum é uma espécie poligiândrica. Os machos da espécie apresentam o comportamento de ‘Scramble competition’ na busca por parceiras e, quando em cópula, formam uma associação de pós-inseminação (API) com suas parceiras. Em A. micans não ficou claro o sistema reprodutivo, mas esta espécie também apresentou cópulas longas com associação de fêmeas e machos. Os machos desta espécie, por sua vez, apresentaram o comportamento de ‘Poliginia com defesa de recurso’. O quadro abaixo compara as duas espécies estudadas (Tabela 3):
Tabela 3. Quadro comparativo das espécies estudadas, Arhysosage cactorum e Anthrenoides micans.
Arhysosage cactorum Anthrenoides micans
Sistema reprodutivo Poligiandria ̶̶–
Sistema de acasalamento Scramble competition Poliginia com defesa de recurso
Razão sexual 2.3:1 0.3:1
Tempo de cópula (s) 89.61 (amplitude de 2 a 900) 322.3 (amplitude 46 a 720)
Fêmeas resistem aos
machos Não Sim
Fêmeas evitam flores
com macho Sim Sim
A API demonstrou-se custosa para as fêmeas de ambas as espécies, em A. cactorum elas dispendem mais tempo na coleta quando estão associadas aos machos, enquanto em A. micans muitas vezes elas deixam de coletar durante a cópula. Sugerimos então que alguns comportamentos realizados por estas fêmeas sejam responsáveis por minimizar esses custos. Em A. micans, as fêmeas esquivam-se das cópulas, diferente de A. cactorum, em que elas não apresentam resistência e acasalam
78 sempre que abordadas. Porém, em ambas as espécies, as fêmeas evitaram flores contendo machos (Tabela 3).
As cópulas com múltiplos parceiros aumentam a pressão de seleção pós-cópula. O próximo passo então será entender como esta seleção atua. Para isso, estudos posteriores podem utilizar a técnica de eversão do endofalo, apresentada neste estudo, para esclarecer questões relativas à evolução das genitálias via seleção sexual em abelhas, uma vez que este caractere tem sido usado para tais estudos em outros insetos.