Parâmetros biométricos e histometria testicular em ratos Wistar adultos

Os dados biométricos e histométricos de todos os grupos experimentais sacrificados aos 100 dias de idade estão mostrados na Tabela 1. Conforme pode ser observado nesta tabela, apesar de não diferirem entre si (p > 0,05) os animais tratados com PTU+leuprolide, antide e PTU+antide apresentaram o peso corporal significativamente menor (p < 0,05) quando comparado com o grupo controle.

Os pesos testiculares médios dos grupos experimentais tratados com leuprolide e antide apresentaram redução significativa (p < 0,05) de ~25 e ~40%, respectivamente, quando comparado ao grupo controle, não havendo, entretanto, diferença significativa (p > 0,05) entre estes dois tratamentos. Já o grupo tratado com PTU apresentou peso testicular médio ~50% superior (p < 0,05) ao grupo controle, resultado bastante semelhante ao observado para o grupo tratado com PTU+leuprolide. Por outro lado, os animais tratados com PTU+antide apresentaram peso testicular similar (p > 0,05) aos animais do grupo controle. Conforme pode ser ainda observado na Tabela 1, todos os grupos tratados com PTU apresentaram maior índice gonadossomático (p < 0,05) do que o encontrado para o grupo controle, sendo o valor observado para os animais tratados com PTU+leuprolide maior (p < 0,05) do que aquele dos demais grupos experimentais.

Apesar de não diferirem entre si, o diâmetro tubular médio observado nos animais tratados com leuprolide e antide foi significativamente menor (p < 0,05) do que o observado nos animais controle. Não houve diferença significativa (p > 0,05) entre os diversos tratamentos para o volume percentual ocupado pelos túbulos seminíferos no parênquima testicular. De maneira geral, o comprimento total de túbulos seminíferos apresentou a mesma tendência observada para o peso testicular.

2.3.2.1. Células de Leydig

Os parâmetros avaliados para as células de Leydig estão também apresentados na Tabela 1. Comparado com o grupo controle e os grupos experimentais tratados com antide, o percentual ocupado pelas células de Leydig no parênquima testicular apresentou-se reduzido (p < 0,05) nos ratos Wistar tratados com PTU+leuprolide. Em comparação com o grupo controle, o percentual

ocupado pelo núcleo da célula de Leydig apresentou-se reduzido (p < 0,05) nos grupos tratados com PTU, antide e PTU+antide, estando no entanto elevado (p < 0,05) no grupo tratado com PTU+leuprolide. Em relação ao volume nuclear, com exceção do grupo tratado com PTU, em todos os demais tratamentos os valores observados para este parâmetro estavam reduzidos (p < 0,05) quando comparados ao grupo controle. O volume citoplasmático apresentou-se bastante reduzido (p < 0,05) no grupo tratado com PTU+leuprolide, em comparação com os demais grupos experimentais. Tendência esta também observada para o volume individual das células de Leydig, que ainda se apresentou significativamente reduzido (p < 0,05) nos grupos tratados com antide, em comparação com os grupos controle e tratado com PTU, e leuprolide quando comparado com o grupo tratado somente com PTU. Em relação aos grupos tratados com PTU e PTU+leuprolide, os dois grupos tratados com antide promoveram aumentos significativos (p < 0,05) no número de células de Leydig por grama de testículo. Já os tratamentos somente com antide e PTU, promoveram respectivamente elevação (p < 0,05) e diminuição (p < 0,05) no número destas células por grama de testículo, em comparação com o grupo controle. Finalmente, com exceção do grupo tratado com PTU+antide, que foi diferente do grupo tratado com leuprolide (p < 0,05), os demais grupos experimentais investigados não apresentaram alterações significativas (p > 0,05) entre si, no número total de células de Leydig por testículo.

Tabela 1. Dados biométricos e morfométricos de ratos controles e tratados no período neonatal com PTU, em associação com leuprolide e antide, e sacrificados aos 100 dias de idade (média + erro-padrão).

Parâmetro Controle (n = 8) PTU (n = 8) Leuprolide (n = 8) PTU+Leuprolide (n = 7) Antide (n = 7) PTU+Antide (n = 8) Peso corporal (g) 384 + 10a* 326 + 8ac 335 + 14ac 266 + 17b 313 + 18bc 282 + 17bc Peso testicular (g) 1,63 + 0,05a 2,48 + 0,11b 1,23 + 0,02c 2,49 + 0,05b 0,98 + 0,04c 1,70 + 0,08a Índice gonadossomático (%) 0,85 + 0,03a 1,53 + 0,09b 0,74 + 0,04a 1,91 + 0,11c 0,63 + 1,24a 1,24 + 0,10b Diâmetro tubular ( m) 341 + 6a 354 + 6a 314 + 4bc 337 + 6ab 305 + 4c 341 + 7a Percentual de túbulos seminíferos 88,7 + 1,0a 92,1 + 0,9a 89,0 + 1,3a 92,1 + 0,3a 89,9 + 0,9a 89,5 + 1,3a Volume tubular (mL) 1,35 + 0,05a 2,17 + 0,11b 1,02 + 0,02c 2,14 + 0,04b 0,82 + 0,04c 1,38 + 0,05a Comprimento tubular total (m) 14,9 + 0,7a 21,9 + 0,7b 13,2 + 0,3ad 24,2 + 1,0c 11,3 + 0,6d 15,7 + 0,9a Célula de Leydig:

Percentual no testículo 2,84 + 0,26a 1,91 + 0,24ab 2,32 + 0,21ab 1,45 + 0,09b 2,82 + 0,29a 2,72 + 0,42a Proporção de núcleo (%) 15,6 + 0,4a 14,1 + 0,4b 15,7 + 0,3a 17,9 + 0,4c 14,0 + 0,3b 14,5 + 0,2 b Volume nuclear (µm3) 189 + 7a 175 + 7ac 169 + 3b 149 + 3c 147 + 6c 160 + 4bc Volume Citoplasmático (µm3) 1022 + 45ab 1061 + 22b 909 + 23a 684 + 19c 905 + 39a 947 + 39a Volume individual (µm3) 1210 + 51ab 1236 + 28a 1078 + 25bc 834 + 21d 1052 + 44c 1107 + 43abc Células de Leydig/g/testículo (x106) 24,2 + 2,2ad 15,6 + 2,0b 22,1 + 2,1abd 17,4 + 1,0ab 35,2 + 2,4c 28,1 + 3,5d Células de Leydig/ testículo (x106) 36,9 + 3,2ab 36,6 + 4,8ab 25,6 + 2,5a 40,3 + 2,2ab 34,3 + 2,3ab 45,6 + 6,5b Células de Sertoli/g/testículo (x106) 26,7 + 0,9a 33,4 + 1,4b 26,3 + 0,8a 31,6 + 1,4b 28,6 + 1,2ab 31,1 + 2,5ab Células de Sertoli/testículo (x106) 40,6 + 1,8a 78,7 + 5,7b 30,3 + 1,6c 73,4 + 3,4b 26,5 + 1,4c 46,8 + 3,9a Espermátides/célula de Sertoli 8,3 + 0,3ab 7,5 + 0,4b 9,4 + 0,4a 8,4 + 0,2ab 7,9 + 0,5b 7,1 + 0,2b PED/g/testículo (x106)** 17,1 + 0,7a 19,1 + 0,4ab 19,1 + 0,8ab 20,5 + 0,7b 17,3 + 0,9a 16,9 + 1,0a PED/testículo (x106) 25,9 + 1,3a 44,7 + 1,8b 21,8 + 0,7a 47,6 + 1,7b 16,1 + 1,0c 25,3 + 1,5a *Letras diferentes na mesma linha representam diferenças estatisticamente significativas (p < 0,05).

2.3.2.2. Células de Sertoli e produção espermática

Os dados referentes às células de Sertoli e à produção espermática diária encontram-se na Tabela 1. Com exceção dos grupos tratados com PTU e PTU+leuprolide, cujos valores encontrados para o número de células de Sertoli por grama de testículo foram significativamente maiores (p < 0,05) em comparação com os grupos controle e tratado somente com leuprolide, os demais grupos experimentais investigados foram semelhantes entre si (p > 0,05). Os valores obtidos para o número de células de Sertoli por testículo seguiram praticamente a mesma tendência observada para o peso testicular, volume ocupado pelos túbulos seminíferos nos testículos e comprimento total de túbulos seminíferos. Assim, os valores encontrados para este importante parâmetro foram significativamente maiores (p < 0,05) nos animais tratados com PTU e PTU+Leuprolide, quando comparados com o grupo controle. De maneira oposta, o número de células de Sertoli por testículo nos animais tratados com leuprolide e antide apresentaram-se menores (p < 0,05) do que o observado para o grupo controle. A eficiência das células de Sertoli (número de espermátides arredondadas por célula de Sertoli) apresentou-se significativamente reduzida (p < 0,05) nos ratos tratados com PTU, antide e PTU+antide, em comparação com o grupo tratado somente com leuprolide, cuja eficiência da célula de Sertoli mostrou-se relativamente elevada. Quanto a produção espermática diária por grama de testículo (eficiência espermatogênica), a mesma mostrou-se aumentada (p < 0,05) no grupo tratado com PTU+leuprolide, em comparação com os grupos controle, antide e PTU+antide. Os demais grupos foram semelhantes entre si. Já a produção espermática diária por testículo seguiu tendência próxima da observada para o número de células de Sertoli por testículo. No entanto, ao se compararem os grupos tratados com leuprolide e antide com o grupo controle, somente no último a redução observada para a produção espermática (~40%) foi significativa (p < 0,05). Vale ressaltar também que o tratamento com antide resultou em diminuição significativa (p < 0,05) da produção espermática diária por testículo, em comparação com o grupo tratado somente com leuprolide.

2.3.3. Animais tratados com PTU e leuprolide