Parasitologia

A parasitologia é a área que se dedica ao estudo dos parasitas.

As análises parasitológicas realizadas no laboratório Inno são a análise coprológica, para pesquisa de parasitas gastrointestinais, a pesquisa de Cryptosporidium e Giardia, a técnica de Baermann, para isolamento e identificação de larvas de parasitas pulmonares, a pesquisa de microfilárias pela técnica de Knott, a pesquisa de ectoparasitas, em raspagens cutâneas ou amostras de cerúmen e a pesquisa de hemoparasitas em esfregaço sanguíneo. Esta última foi abordada na secção de Hematologia, não estando por isso representada no gráfico 11.

Gráfico 11: Frequência relativa (em %) das diferentes análises realizadas na área da Parasitologia

457 345 9 Biópsia Exérese Tecidos de necrópsia 81,3% 8,8% 4,8% 2,9% 2,2%

Análise coprológica (1A/3A)

Pesquisa de Cryptosporidium e Giardia

Técnica de Baermann

Pesquisa de ectoparasitas

8.1. Análise coprológica

A análise coprológica – mais solicitada durante o estágio, com 221 pedidos, num total de 272 análises parasitológicas – é composta por duas partes: a avaliação do aspeto macroscópico das fezes, em termos de forma e de substâncias presentes, e a observação microscópica do resultado da flutuação fecal em solução de sulfato de zinco a 45%.

a) Avaliação macroscópica

Quanto à forma, as fezes classificam-se em moldadas, moldadas ligeiramente pastosas, pastosas, diarreia pastosa, diarreia mucosa e diarreia líquida. A presença de materiais estranhos como ossos, alimento por digerir, sangue, ervas, parasitas adultos ou proglotes de cestodes também devem ser referidos. Esta primeira parte é muito importante pois pode orientar-nos em direção ao diagnóstico de doenças parasitárias (ou não parasitárias) específicas (Zajac e Conboy, 2012).

b) Processamento

A pesquisa de parasitas gastrointestinais baseia-se na técnica de flutuação, ilustrada na figura 12 e descrita no anexo 1. O princípio subjacente a esta técnica é que o material parasitário (ovos e quistos) presente nas fezes é menos denso que a solução de flutuação, permitindo que ascenda à superfície do recipiente, sendo depois recolhido para observação microscópica, sendo que a maioria dos detritos sedimentam (Zajac e Conboy, 2012).

De acordo com Zajac e Conboy (2012), a centrifugação aumenta a sensibilidade da técnica de flutuação, sendo particularmente útil em infeções de baixa carga parasitária, como as causadas por Trichuris spp. e Giardia spp. em canídeos e felídeos.

Na figura 13 encontram-se fotografias de alguns ovos mais comummente observados, em amostras de fezes de canídeos e felídeos sujeitas à técnica de flutuação, durante o estágio.

Figura 12: Fotografia ilustrativa da técnica de flutuação com consequente preparação das lâminas para a observação microscópica.

Figura 13: Fotografias de ovos parasitários mais comumente observados, em fezes de canídeos e felídeos sujeitas à técnica de flutuação, durante o período de estágio (A – oocistos de Isospora spp. e quistos de Giardia spp. 200x; B – quistos e trofozoítos de Giardia spp. 200x; C – quistos e trofozoítos de Giardia spp. 400x; D – ovos de Toxocara spp. e raros oocistos de Isospora spp. 100x; E – ovo de Thrichuris vulpis 200x; F – ovo de Ancylostoma spp. 200x).

8.2. Pesquisa de Cryptosporidium e Giardia

A pesquisa de Cryptosporidium spp. e Giardia spp. é feita em esfregaços de fezes corados com uma coloração específica – Ziehl-Neelsen modificada – cujo protocolo está descrito no anexo 1. Os esporozoítos de Cryptosporidium spp. surgem como estruturas de pequenas dimensões de coloração rosada e a Giardia spp. como pequenas estruturas verdes.

Durante o período de estágio não houve nenhuma pesquisa positiva.

8.3. Técnica de Baermann

A técnica de Baermann é usada para identificar larvas de nematodes de primeiro estádio (L1), causadores de infeções respiratórias, em amostras de fezes (Zajac e Saleh, 2013).

É importante usar fezes frescas para evitar a interferência de larvas que possam eclodir de ovos presentes nas amostras, como estrôngilos e ancilostomatídeos, e ser confundidas com larvas pulmonares (Zajac e Conboy, 2012).

Esta técnica é executada no aparelho de Baermann, representado na figura 14, de acordo com o protocolo exposto no anexo 1. As larvas presentes na amostra têm tendência a migrar distalmente ao longo do dispositivo, acumulando-se na ponta da pipeta, colocada no fundo de um tubo de plástico (Zajac e Conboy, 2012).

A B C

O quadro 1 auxilia na identificação de larvas isoladas com este procedimento

Figura 14: Fotografia ilustrativa do aparelho de Baermann, antes da recolha da primeira gota de solução fecal para pesquisa microscópica de larvas pulmonares.

Quadro 1: Infeções parasitárias de cães e gatos passíveis de diagnóstico usando o teste de Baermann. Adaptado de Zajac e Saleh, 2013.

Hospedeiro Parasita Localização das

formas adultas Características das larvas Distribuição

Gato Aelurostrongylus abstrusus

Bronquíolos terminais, canais

alveolares

360-400 um; cauda curva em forma de S com espinho

acessório

Muito difundido

Cão Strongyloides

stercoralis Intestino delgado

150-390 um; cauda lisa com

primórdio genital proeminente Muito difundido

Cão Crenosoma vulpis Bronquíolos

260-340 um; cauda com um desvio ligeiro mas sem torção

ou espinho Principalmente Canadá Atlântico Cão Angiostrongylus vasorum Artérias pulmonares, coração direito

340-399um; cauda semelhante às espécies de Aelurostrongylus Europa, Newfoundland- Labrador 8.4. Técnica de Knott

A técnica de Knott é um dos métodos de concentração de microfilárias em circulação. Este método, cujo protocolo se encontra no anexo 1, baseia-se na lise dos eritrócitos e na fixação e concentração das microfilárias existentes em circulação, facilitando a sua deteção (Zajac e Conboy, 2012). Apesar de ser altamente específico, apresenta uma baixa

sensibilidade, existindo por isso muitos resultados falsos negativos, principalmente em felídeos, pois raramente apresentam microfilaremia (Lapin, 2012).

A Sociedade Americana de Dirofilariose e o Conselho Científico Europeu de Parasitas dos Animais de Companhia (ESCCAP) recomendam a realização do teste em qualquer cão que tenha apresentado um resultado positivo na pesquisa de Ag de Dirofilaria immitis, para determinar a necessidade de tratamento microfilaricida (Zajac e Conboy, 2012).

Também pode ser usada individualmente no diagnóstico de Dirofilariose, apesar da dificuldade em distinguir a microfilária da Dirofilaria immitis de outro tipo de microfilárias menos patogénicas detetadas na Europa, como a da Dirofilaria repens, da Acanthocheilonema

reconditum e da A. Grassi, que parasitam o tecido subcutâneo e a da Acanthocheilonema dracunculoides que parasita o peritoneu (Zajac e Conboy, 2012).

8.5. Pesquisa de ectoparasitas

A pesquisa de ectoparasitas, isto é, de parasitas externos ao corpo do seu hospedeiro, é útil para a identificação de ácaros, devido às suas dimensões microscópicas, permitindo também detetar infestações por pulgas e piolhos. O material recolhido por raspagem, fita-cola e escovagem cutânea e o cerúmen deverão ser recolhidos para uma lâmina de vidro. Para observação microscópica, deve usar-se óleo mineral e uma lamela. Apesar de ter uma especificidade de 100%, apresenta uma sensibilidade relativamente baixa (cerca de 50%), falhando muitas vezes na deteção dos parasitas (Hill, 2002).

Durante o período de estágio não se observou nenhuma pesquisa positiva.