Plantas parentais

O número cromossômico foi contabilizado nas células analisadas de C. arabica

cv Bourbon Vermelho (Co 667) e C. canephora cv Robusta (Co 254) como um dos parâmetros para estabelecer o grau de normalidade dos parentais. A análise dos meiócitos do parental C. arabica indicou 44 cromossomos em 58 células e apenas 2 células com 42 cromossomos (Tabela 2).

Tabela 2 - Número cromossômico para células analisadas nos parentais C. arabica cv Bourbon Vermelho (Co 667) e C. canephora cv Robusta (Co 254) e no híbrido interespecífico arabusta F1 2n _N ^P1 _{% N} ^P2 _{% N} ^F1 _% 40 0 0,00 1 1,67 4 6,90 41 0 0,00 0 0,00 2 3,45 42 2 3,33 5 8,33 6 10,34 43 0 0,00 0 0,00 4 6,90 44 58 96,67 48 80,00 41 70,69 46 0 0,00 6 10,00 1 1,72

* N = total de células registradas

Na análise da meiose desses parentais (Coffea arabica cv Bourbon Vermelho Co 667 e Coffea canephora cv Robusta Co 254), e também do híbrido arabusta F1

observou-se que na metáfase I a maioria dos cromossomos pareou-se na forma de bivalentes, indicando um alto índice de normalidade no pareamento. Entretanto, algumas anomalias também foram registradas no decorrer da meiose, como a presença de monovalentes, tetravalentes, segregação precoce dos cromossomos, tanto na metáfase I como na metáfase II, cromossomos retardatários, díades, tríades e micrócitos.

O parental C. arabica apresentou uma média de bivalentes por célula igual a 21,77±0,57 (Tabela 3), o que indicou que a grande maioria das células analisadas apresentou-se normal em relação ao pareamento dos cromossomos. Essa normalidade pode ser vista também através da porcentagem total relativa de células em divisão meiótica com anomalias, indicando que 31,10% das células analisadas apresentaram algum tipo de irregularidade meiótica (Tabela 4).

Tabela 3 - Médias e desvios padrão do número de monovalentes, bivalentes, trivalentes, tetravalentes e polivalentes na fase de metáfase I, nas plantas parentais C. arabica cv Bourbon Vermelho (P1), C. canephora cv Robusta (P2) e do híbrido arabusta F1

Geração Plantas ^Monovalente _(I) ^Bivalente _(II) ^Trivalente _(III) ^Tetravalente _(IV) ^Polivalente _(poli) P1 Co 667 0,13±0,51a 21,77±0,57a 0,00a 0,07±0,25a 0,00a

P2 Co 254 0,80±1,13a 20,03±1,69a 0,00a 0,70±0,79a 0,00a

F1 H2460 4,88±2,77b 18,97±2,31a 0,00a 0,20±0,41a 0,03±0,18a Médias seguidas por letras diferentes = diferença significativa a 5% pelo teste de Tukey

Apesar da taxa de anormalidade ter sido relativamente baixa, observou-se a presença de monovalentes, tetravalentes, segregação precoce, cromossomos retardatários, díades, tríades e presença de micrócitos nas células do parental C. arabica

(Tabela 4 e 5).

A quantidade de monovalentes foi registrada tanto na forma de média como em porcentagem. A média do número de monovalentes por célula em metáfase I no parental

C. arabica foi de 0,13±0,51 e o percentual de células analisadas com a presença de monovalentes foi de 6,67%.

Outra anomalia observada, ainda em metáfase I, foi a presença de tetravalentes. Registrou-se uma média de 0,07±0,25 de tetravalentes por célula e uma porcentagem de 6,67% das células com a presença de tetravalentes.

De acordo com os resultados da análise dos cromossomos, observou-se que 23,33% das células analisadas em metáfase I e 50% das células analisadas em metáfase II apresentaram cromossomos com segregação precoce.

Uma irregularidade encontrada com relativa freqüência em diversas fases da meiose foram os cromossomos retardatários. A presença de retardatários foi notada em 33,33% das células em anáfase I, 26,67% das células em telófase I, 36,67% das células em anáfase II e em 13,33% das células em telófase II.

Analisando-se os produtos meióticos verificou-se que o parental C. arabica

apresentou uma alta porcentagem de tétrades normais (92,49%). Mesmo assim, essa planta ainda apresentou 1,67% de díades, 4,17% de tríades e 1,67% de células com micrócitos. A partir desses dados, estabeleceu-se o índice meiótico, ou seja, a porcentagem de tétrades normais, que foi de 94,17% para esse parental (Tabela 5).

Na análise meiótica realizada no parental C. canephora tetraplóide foram registrados igualmente a média de bivalentes, o número de cromossomos e também observadas irregularidades: monovalentes, tetravalentes, segregação precoce dos cromossomos para os pólos, retardatários, tríades, políades e micrócitos.

O número de cromossomos apresentou uma variação entre as células, já que em 60 células analisadas, observou-se: 48 células com 44 cromossomos; 6 células com 46 cromossomos; 5 células com 42 cromossomos e 1 célula com 40 cromossomos (Tabela 2).

Uma média igual a 20,03±1,69 de bivalentes por célula foi registrada nas células em metáfase I para a espécie C. canephora, sendo que este valor não foi significativamente diferente do registrado para o parental arabica.

O valor calculado por meio da contagem de células totais analisadas do parental

C. canephora, demonstrou que 38,33% das células em divisão meiótica apresentaram algum tipo de anormalidade.

A média de monovalentes por célula em metáfase I foi de 0,80±1,13 e a porcentagem de células nesta fase apresentando monovalentes foi de 36,67%.

Do mesmo modo, a média de tetravalentes por célula em metáfase I foi de 0,70±0,79 e a porcentagem de células em metáfase I apresentando tetravalentes foi de 53,33%.

Outra anormalidade observada foi a segregação precoce dos cromossomos para os pólos em metáfase I e II. Na primeira divisão, observou-se que 6,67% das células possuíam cromossomos com segregação precoce, já na segunda divisão, 40% das células tiveram seus cromossomos fora da placa equatorial, seguindo para os pólos.

Para C. canephora também foram registrados cromossomos retardatários em 26,67% das células analisadas em anáfase I, 36,67% das células em telófase I, 36,67% das células em anáfase II e 36,67% em telófase II.

As tétrades para esse parental apresentaram-se da seguinte forma: uma porcentagem de 1,67% em forma de tríades, 2,50% de políades e 7,50% com a presença de micrócitos. A partir da porcentagem de tétrades normais calculou-se o índice meiótico, que foi igual a 88,33% (Tabela 5).

Tabela 4 - Porcentagem de anormalidades meióticas e viabilidade polínica das plantas parentais C. arabica cv Bourbon Vermelho Co 667 (P1) e C. canephora cv Robusta Co 254 (P2) e do híbrido arabusta F1

Fases da meiose e tipos de anormalidades Planta

Células meióticas Met I Ana I Telo I Met II Ana II Telo II Tétrade

Total ^Irregulares _{N %} Mono Tri Tetra Poli Prec Retard. Retard. Prec. Retard. Retard. Normais Anormais P1 360 112 31,10 6,67 0,00 6,67 0,00 23,33 33,33 26,67 50,00 36,67 13,33 92,49 7,51

P2 360 138 38,33 36,67 0,00 53,33 0,00 6,67 26,67 36,67 40,00 36,67 36,67 88,33 11,67

F1 360 293 81,39 86,67 0,00 20,00 3,33 23,33 80,00 70,00 80,00 80,00 91,67 25,84 74,16 Met I=metáfase I; Ana I=anáfase I; Telo I=telófase I; Met II=metáfase II; Ana II=anáfase II; Telo II=telófase II

Mono=monovalentes; Tri=trivalentes; Tetra=tetravalentes; Poli=polivalentes; Prec=segregação precoce; Retard.=retardatários N= número de células em divisão meiótica com irregularidades

Tabela 5 - Porcentagens de díades, tríades, políades e micrócitos encontrados nas tétrades; índice meiótico e viabilidade dos grãos de pólen medidos por coloração (VPC) e por germinação (VPG), para os parentais C. arabica cv Bourbon Vermelho Co 667 (P1) e C. canephora cv Robusta Co 254 (P2) e no híbrido arabusta (F1)

Plantas _{Díades Tríades Políades Micrócitos} ^Tétrade _meiótico ^Índice VPC VPG

P1 1,67 4,17 0,00 1,67 94,17 84,21 38,60

P2 0,00 1,67 2,50 7,50 88,33 62,86 12,27

F1 0,00 0,83 0,00 73,33 25,83 53,70 6,25